用间接荧光抗体法对鸡肾型传染性支气管炎抗原定位的研究

本文建立了检测鸡肾型ＩＢ抗原的间接荧光抗体染色法，用此法对Ａｕｓｔ－Ｔ和ＴＪ＿（９３０１）肾型毒株抗原的定位进行了系统研究，结果表明于人工感染后２４小时在气管中最早出现特异性荧光，４８小时开始在肺、肾等器官中检测到特异性荧光，特异性荧光持续时间最长的器官是肾脏，为８～１１天，其他器官包括气管和肺均只持续４～５天。两毒株感染后，病死鸡肾脏特异性荧光检出率均１００％，而气管特异性荧光的检出率：Ａｕｓｔ－Ｔ为１５．６３％、ＴＪ＿（９３０１）为２５．００％，肺检出率：Ａｕｓｔ－Ｔ为１８．７５％、ＴＪ＿（９３０１）为３７．９４％。由此推测ＩＢＶ肾型毒株的主要靶器官是肾脏，主要亲嗜细胞是肾小管上皮细胞。     

单抗介导的斑点ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒的研究

用群特异性的单克隆抗体作第一抗体,用酶标兔抗体ＩＢＶＩｇＧ作第二抗体,建立夹心法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ程序检测鸡传染性支气管炎病毒抗原。试验表明,本程序检测ＩＢＶ抗原高度敏感性和特异性。最低抗原检出量为０．５μｇ,约１００个气管环半数感染量（１００ＴＯＣＩＤ５０）,阳性检出率为９６％。     

斑点免疫金银染色法检测鸡传染性支气管炎病毒抗原的研究

用建立的斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）法检测鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）抗原,确定兔抗ＩＢＶ血清工作浓度为１：４００,ＳＰＡ－胶体金探针的工作浓度为１：８０,该法对纯化ＩＢＶ抗原的最低检出量为０．４３１４ｎｇ／点,用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ与斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）同时检测１５只人工感染ＩＢＶ鸡的气管,肺,肾病科,ＩＢＶ阳性检出率均为１００％,对３２份疑似ＩＢＶ感染鸡病料检测,Ｉ     

琼脂凝胶扩散试验检测鸡传染性支气管炎抗体

本文对鸡传染性支气管炎琼脂凝胶扩散试验进行了研究。试验结果表明，感染鸡传染性支气管炎病毒的鸡胚绒毛尿囊膜和尿囊液都能用于制备琼扩抗原，而且以感染ＩＢＶ后２０－３０小时的绒毛尿囊膜和感染ＩＢＶ后４８－６０小时的尿囊液效果最佳。通过传染性支气管炎琼脂凝胶扩散试验的研究和对血清样品的测定，以及与美国ＫＰＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＥＳ的ＩＢＶ－ＥＬＩＳＡ诊断盒比较，表明所建立的琼脂凝胶扩散试验可用于鸡传染性支气     

鸡传染性支气管炎病毒肾型毒株血凝特性的研究

本文对鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）澳大利亚Ｔ株和分离的四株肾型毒株（ＢＪ＿（９３０１）、ＢＪ＿（９３０２）、ＴＪ＿（９３０１）、ＨＮ＿（９３０１）株）的血凝特性进行了系统研究。结果表明ＩＢＶ供试毒株经１～２％胰蛋白酶处理后，能凝集鸡和小鼠红细胞，同一毒株对两种红细胞的凝集价相近，且均能被ＩＢＶ澳大利亚Ｔ株血清所抑制。处理后的ＩＢＶ对鸡红细胞的血凝以缓冲液浓度０．０１～０．０５ＭｐＨ６．０～８．４为宜，对反应温度及稀释液种类无严格要求。ＩＢＶ的血凝活性能耐受３７℃２３天、５６℃１２小时、８０℃１．５小时，但在－３０℃、４℃和室温下保存２个月后，绝大部分丧失血凝活性。ＩＢＶ经０．２％甲醛、０．２％脱氧胆酸钠、２％硼氢化钠、０．０１Ｍ高碘酸钠３７℃灭活２４小时，仍能保持其血凝活性。从ＩＢＶ的血凝活性可被过量胰蛋白酶破坏和氯仿灭活，推断该血凝素可能是由脂质和蛋白质组成。     

鸡肾型传染性支气管炎的诊断

河南某鸡场和天津某鸡场发生以呼吸道及肾病变为主的疾病，经流行病学检查、病理剖检、病毒分离、电镜检查、生物学特性及理化特性试验、血清中和试验、动物回归等确诊为肾型传染性支气管炎．从病死鸡紧组织中分离到的两株病毒（ＨＮ（９３０１）、ＴＪ（９３０１）），经鸡胚传至６～７代后，均能使５０％以上鸡胚发生死亡或矮化；电镜下均见有典型的冠状病毒粒子，ＨＮ（９３０１）直径９０～１０５ｎｍ、ＴＪ（９３０１）直径８５～１１０ｎｍ，周围有长１８～１９．５ｎｍ的梨状突起；两株分离毒都符合ＩＢＶ的生物学及理化特性，与澳大利亚Ｔ株存在一定相关性；动物回归得到了与原发病鸡群相同的症状及病理变化。     

鸡传染性支气管炎卵黄和血清抗体检测方法的探讨

鸡传染性支气管炎卵黄和血清抗体检测方法的探讨王招娣，韩庆彦，杨小玲，何虎成，张艳萍（甘肃省兽医技术推广总站）目前，大部分兽医基层单位采用琼脂扩散试验（ＡＧＰ）检测传染性支气管炎（ＩＢ）。ＡＧＰ需时４８小时，敏感性较低。本试验采用ＩＢ琼扩抗原及阳性血清...     

鸡肾病变型传染性支气管炎病毒分离及免疫的研究

对自然发生的鸡肾病变型传染性支气管炎病例,进行了流行病学及病理化方面的检验。以新鲜病死鸡肾脏为材料,通过接种易感发育鸡胚尿囊腔的途径,进行病毒的分离与传代,分离到５株病毒（分别记作ＩＶＢ－ＨＱＣ９６０１、ＩＢＶ－ＨＱＣ８６０４、ＩＢＶ－ＨＱＬ９６０６、ＩＢＶ－ＨＱＣ９６１０、ＩＢＶ－ＨＴＬ９６１１）,经初步检验及对易感鸡的感染发病试验,表明为鸡肾病变型传染性气管炎病毒。用鸡肾病变型传染性气管炎Ｔ毒株分离毒株,制备灭活疫苗,初步试验表明具有良好的特异免疫保护效果。     

鸡新城疫－鸡肾型传染性支气管炎二联油乳剂灭活苗的研究

采用以南京等地发病鸡场分离的鸡肾型传染性支气管炎若干毒株和鸡新城疫Ｌａｓｏｔａ（Ｎ－７９）疫苗毒株为种毒，分别接种于非免疫的鸡胚，收取含毒的鸡胚尿液，经福尔马林灭活后，以矿物油为佐剂，研制成鸡新城疫－鸡肾型传染性支气管炎二联油乳剂灭活苗，试用后经抗体检测，结果表明免疫后第１０天ＨＩ抗体明显上升，至第３０天仍保持较高的水平，经ＩＢＶ强毒攻击，免疫组能获得全保护，区域试用３００余万头份，证实本疫苗安全可靠，能有效地预防和控制鸡新城疫、肾型传染性支气管炎的发生和流行。     

鸡新城疫－鸡肾型传染性支气管炎二联油乳剂灭活苗的研究

采用以南京等地发病鸡场分离的鸡肾型传染性支气管炎若干毒株和鸡新城疫Ｌａｓｏｔａ（Ｎ－７９）疫苗毒株为种毒，分别接种于非免疫的鸡胚，收取含毒的鸡胚尿液，经福尔马林灭活后，以矿物油为佐剂，研制成鸡新城疫－鸡肾型传染性支气管炎二联油乳剂灭活苗，试用后经抗体检测，结果表明免疫后第１０天ＨＩ抗体明显上升，至第３０天仍保持较高的水平，经ＩＢＶ强毒攻击，免疫组能获得全保护，区域试用３００余万头份，证实本疫苗安全可靠，能有效地预防和控制鸡新城疫、肾型传染性支气管炎的发生和流行。     

单抗免疫过氧化物酶技术检测鸡传染性支气管炎病毒

以抗鸡传染性支气管病毒（ＩＢＶ）核衣壳蛋白（Ｎ）的单抗株６ＤＨ８作为一抗,以辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠ＩｇＧ作为二抗,建立了检测石蜡切片中ＩＢＶ抗原的单抗免疫过氧化物酶技术（Ｍｃ－ＩＰ）,并对人工攻毒鸡及临床ＩＢＶ感染疑似鸡进行了检测。在ＩＢＶＭ４１株人工攻毒鸡,用该技术于１～１２ｄ从气管、２～７ｄ从肾脏可以检测到ＩＢＶ抗原,阳性染色集中于气管粘膜上皮细胞及肾小管上皮细胞胞浆;临床疑为ＩＢＶ感染的病鸡,以Ｍｃ－ＩＰ技术和单抗免疫荧光试验（Ｍｃ－ＩＦＡ）同时进行检测,结果阳性率分别为９０．３％及８３．９％。     

快速测定火鸡出血性肠炎病毒的单克隆抗体—免疫过氧化…

应用生物素－新和素过氧化物酶复合物和单克隆抗体（ＡＢＣ－ｍＡｂ）检测冷冻和福尔马林固定石蜡包埋的感染火鸡出血性肠炎（ＨＥ）的火鸡脾组织切片中ＨＥ病毒抗原的间接免疫过氧化物酶技术（ＩＰ），与间接免疫荧光抗体技术（ＩＨＡＴ）及琼脂沉淀试验（ＡＧＰＴ）作了比较。ＩＰ染色法从感染后４８小时至试验结束时的第１１天均能检出ＨＥ病毒抗原。ＡＧＰＴ和ＩＦＡＴ检出ＨＥ病毒抗原的时间分别为感染后３～７天和２～９天.同     

间接法DOT—ELISA检测临床病料中的鸡传染性支气管炎病毒

将间接法ＤＯＴ－ＥＬＩＳＡ用于鸡传染性支气管炎感染的诊断，以病鸡肾１：１００的悬浮上清液进行了检测可以显示出阳性反应。     

免疫器官中肾型鸡传染性支气管炎病毒的定位和动态分布

以鼠抗鸡肾型传染性支气管炎病毒（肾型IBV）的高免血清为一抗，辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗鼠IgG为二抗，建立了检测石蜡切片肾型IBV抗原的间接酶标抗体染色技术。应用该技术对人工感染肾型IBV C9001株鸡免疫器官中的病毒进行了检测，结果胸腺和法氏囊是病毒主要侵害的免疫器官，脾脏，盲肠扁桃体仅呈一过性感染，哈氏腺未检测到，法氏囊从感染后2－12天，胸腺从感染后3－8天均检测到病毒抗原，阳性染色主要集中于法氏囊淋巴滤泡髓质区和胸腺小叶髓质区淋巴细胞和网状细胞胞浆内。     

一种新的检测牛种布鲁氏菌抗体的方法—荧光极化法（FPA）

目前检测牛种布鲁氏菌（Ｂｒｕｃｅｌａａｂｏｒｔｕｓ）抗体常用的血清学方法有缓冲平板抗原试验（ＢＰＡＴ）、补体结合试验（ＣＦＴ）、间接酶联免疫试验（Ｉ－ＥＬＩＳＡ）和竞争酶联免疫试验（Ｃ－ＥＬＩＳＡ）。本文介绍的荧光极化法（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｐｏ...     

应用间接免疫荧光法检测鸡传染性贫血病病毒抗体的研究

用鸡传染性贫血病病毒（ＣＩＡＶ）ＭＳＢＩ－ＴＫ５８０３毒株感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ；细胞涂片为抗原，建立了检测ＣＩＡＶ抗体的间接免疫荧光法（ＩＩＦＡ）。应用该ＩＩＦＡ方法对人工感染的ＳＰＦ鸡进行了检测１５只１日龄ＳＰＦ鸡在接种后第７、１４天时均呈阴性反应；２１天时２只鸡呈弱阳性反应，２８天时均呈弱阳性反应，２１天时２只鸡呈弱阳性反应，２８天时均呈弱阳性反应，３５天时呈明显阳性反应；１４只４０日龄ＳＰ     

鸡肾型传染性支气管炎的诊断

河南某鸡场和天津某鸡场发生以呼吸道及肾病变为主的疾病，经流行病学检查、病理剖检、病毒分离、电镜检查、生物学特性及理化特性试验、血清中和试验、动物回归等确诊为肾型传染性支气管炎。从病死鸡肾组织中分离到的两株病毒，经鸡胚传至６－７代后，均能使５０％以上鸡胚发生死亡或矮化；电镜下均见有典型的冠状病毒粒子，ＨＮ９３０１直径９０－１０５ｎｍ、ＴＪ９３０１直径８５－１１０ｎｍ，周围有长１８－１９．５ｎｍ的梨状     

应用间接荧光抗体染色法监测鸡传染性支气管炎抗体的研究

本文对间接荧光抗体染色法监测鸡传性支气管炎抗体进行了研究。试验结果表明感染鸡性染性支气管炎病毒的鸡成纤维细胞（ＣＥＦ）不适宜做ＩＦＡ方法的抗原，而感染ＩＢＶ后３６－４８小量的鸡胚肾细胞制做ＩＦＡ抗原效果很好。应用１０％犊牛血清封闭并适当改进洗涤条件要非特异性荧光。本试验将所建立的ＩＦＡ方法与美国ＫＰＬ生产的ＩＢＶ－ＥＬＩＳＡ进行了比较。应用ＩＦＡ方法第七天查出血清抗体。通过对十二个鸡群进行流行病调     

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离与鉴定许兰菊（河南农业大学４５０００２）鸡传染性支气管炎（ＩＢ）是由传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）所引起的一种急性、高度接触性呼吸道传染病。肾型ＩＢ是由致肾病变毒株百肾型毒株）引起的，患鸡剖检病变以肾志白肿大、肾小管和输尿...     

鸡肾型传染性支气管炎的诊治

鸡肾型传染性支气管炎的诊治邢兰君卫华（河北省邢台市畜牧水产局０５４００１）高社朝（河北省邢台市兽医院０５４００１）鸡传染性支气管炎（ＩＢ），是由传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）所引起，是鸡的一种急性高度接触性传染病。ＩＢＶ不仅侵害呼吸器官，而且侵害泌尿和...