禽脑脊髓炎琼扩抗原的研制和应用

将禽脑脊髓炎病毒（AEV）陕西分离株接种于6日龄鸡胚卵黄囊，16日龄时收取活胚脑、胃肠道和胰腺，匀浆灭活后制成琼扩抗原，该抗原与AE标准阳性血清在36h内出现特异性的沉淀线，而与ND、EDS－76、AI、IB阳性血清及SPF鸡血清不出现沉淀线，用其检测60份血清，48份呈AE阳性，与用标准抗原检测的结果一致。     

禽脑脊髓炎琼脂扩散沉淀抗原制备与应用的研究

应用禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）Ｖａｎ Ｒｏｅｋｅｌ株和内蒙古禽脑脊髓炎（ＡＥ）自然病鸡分离毒株分别接种鸡胚，制出ＡＥ琼扩沉淀抗原。经经验和部分鸡场应用结果表明，该抗原具有良好的特异性。抗原效价为１：３２，可检出不同日龄、品种和不同发病期的人工感染鸡和自然发病鸡血清中的ＡＥ抗体，结果可靠，方法简便，可以推广应用。     

禽脑脊髓炎病毒琼扩抗原的制备及其在评价鸡群抗体水平中的应用

以标准的禽脑脊髓炎病毒ＶＲ毒株和分离的野毒株分别感染ＳＰＦ鸡胚，取其病料组织制成琼脂扩散抗原。在含２０％ＮａＣｌ和０．５％苯酚的０．８％琼脂凝胶中，用这种抗原以琼脂扩散试验检测ＡＥ抗体，结果稳定，特异性强，方法简使迅速。     

禽脑脊髓炎的诊断

１９９３年７月，呼和浩特地区某鸡场１４日龄雏鸡群发病，病雏表现精神沉郁，斜视，站立困难和头颈震颤等症状，发病率４５％，死亡率１１％，抽样采血琼扩试验阳性率５０％，病理组织学检查见非化浓性脑脊髓炎，雏鸡和鸡胚接种发病，诊断为禽脑脊髓炎。     

用单克隆抗体检测禽脑脊髓炎病毒抗原

建立了抗禽脊髓炎病毒（ＡＥＶ）的单克隆抗体（ＭＡｂ）ＶＲ９－１。接种ＡＥ鸡胚适应毒Ｖａｎ Ｒｏｃｋｃｌ株、２种疫苗株和２种野毒株的雏鸡脑冰冻切片、鸡胚成纤维细胞和鸡胚脑细胞，用间接免疫荧光和免疫过氧化物酶染色检查，结果，均可与ＭＡｂ ＶＲ９－１起反应。该ＭＡｂ也可用于石蜡包埋切片的抗生物素蛋白－生物素－过氧化物酶染色。试验结果表明，该ＭＡｂ可认别ＡＥＶ毒株的一个共同抗原决定簇，可用于ＡＥＶ检测和定     

禽脑脊髓炎的病理学研究

禽脑脊髓炎的病理学研究赵振华，林曦，禹旺盛，郝先谱，顾玉芳，马学恩，李润清，赵心力，王风龙，吉仁泰（内蒙古农牧学院禽脑脊髓炎课题组，呼和浩特０１００１８）禽脑脊髓炎（ＡｖｉａｎＥｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ，ＡＥ）是由禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）引起...     

河南省禽脑脊髓炎的发生初报

河南省禽脑脊髓炎的发生初报陈洪科，卢中华，刘洪涛，张红英禽脑脊髓炎（ＡｖｉａｎＥｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ．ＡＥ），１９３０年首次发现于美国，目前在世界上所有的养禽地区均有发生。我国自１９８０年以来，先后在广州、辽宁、江苏、黑龙江、河北、山东、...     

禽脑脊髓炎疑似病例诊断

就近５年来山东省部分地区２０例疑似禽脑脊髓炎病例的诊断作回顾性总结报道，结果，在送检的２０例疑似ＡＦ病鸡中，９例诊断为阳性，诊断阳性率为４５％，其中蛋鸡９例３例阳性，肉鸡有１１例有６例阳性，诊断结果表明ＡＥ的发生在山东已相当常见，已成为危害雏鸡的主要传染病之一，本文还就ＡＥ病理诊断的依据，相关诊断，类型鉴别等问题进行了深入探讨。     

禽呼肠病毒琼扩抗原和血清的制备

以禽呼肠病毒S1133毒株尿囊腔接种10日龄无特定病原体(SPF)鸡胚,无菌收集24 h～120 h的死胚尿囊液,加1 mL/L的甲醛灭活,浓缩制得琼扩抗原;用该抗原制成灭活苗两次免疫SPF鸡,无菌采血分离制备阳性血清;选用SPF鸡无菌采血分离制备阴性血清.经过效价测定制备16单位琼扩抗原,8单位阳性血清;取免后的SPF鸡血样4个20～2-5稀释分别与1单位～8单位琼扩抗原做琼扩试验,确定了应该用4单位或8单位琼扩抗原做工作抗原;并以血清中和试验为参照证明琼扩试验在血清抗体监测中的可行性.本研究成功制备了禽呼肠病毒琼扩抗原与血清,为用琼扩试验定量检测禽呼肠病毒感染禽和疫苗免疫禽的抗体奠定了基础.     

禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定

选用AEV(VR株 )CEF适应毒制备抗原 ,免疫Balb/c小鼠。应用杂交瘤技术以间接ELISA方法筛选获得一株分泌抗AEV(VR)单克隆抗体的杂交瘤细胞。制备细胞上清及腹水进行单抗特性鉴定 ,经染色体计数、免疫球蛋白类及亚类测定、特异性试验、稳定性试验、SDS PAGE电泳 ,表明该杂交瘤细胞染色体数目介于 90～ 110之间 ,该单克隆抗体亚类为IgG2a,分子量为 142KD ,ELISA测定细胞上清效价为 1∶1× 10 4 ,腹水效价为 1∶1× 10 6,与其它病原无交叉反应 ,抗体分泌稳定。     

禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗的研究

选用ＡＥＶ－ＮＨ９３７株Ｅ８－１２为制苗种毒,接种易感鸡胚制备抗原,经甲醛溶液灭活制成的禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗,物理性状检验、无菌检验、安全检验、效力检验合格,疫苗ＰＤ５０≥３２,疫苗免疫期成鸡至少一年,雏鸡至少半年,疫苗稳定性好,４℃－８℃保存期为１２个月,１０℃－２４℃保存期为６个月。田间试验、中间试制和区域试验安全、有效,反应良好,该疫苗能够预防禽脑脊髓炎的发生。     

美国七彩山鸡传染性脑脊髓炎的诊治及病理研究

山西省某场美国七彩山鸡发病,确诊为七彩山鸡的传染性脑脊髓炎。其外部症状明显表现为精神沉郁、反应迟钝、头颈震颤,共济失调。病理解剖表明,该病病变主要在脑部,具体表现为脑膜紧张、湿润,血管呈树枝状充血状态,大小脑水肿。观察其病理组织学特征,切片表现为神经细胞变性和坏死、神经小胶质细胞增生、脑和脊髓出现明显的血管周围浸润现象,即血管套现象。     

禽脑脊髓炎、鸡痘二联活疫苗安全性、最小免疫剂量及免疫效力试验

为确定禽脑脊髓炎(AE)、鸡痘(AP)二联活疫苗的安全性、最小免疫剂量及免疫效力,自制3批二联活疫苗进行研究。结果显示,鸡接种10倍剂量疫苗后精神、食欲及发育均正常,临床表现和剖检均无异常;AEV YBF02株的最小免疫剂量为100 EID50,鸡痘鹌鹑化弱毒株的最小免疫剂量为10 EID50;3批疫苗AEV YBF02株的病毒含量均≥103.2EID50/羽份,鸡痘鹌鹑化弱毒株的病毒含量均≥103.4EID50/羽份,攻毒后保护指数为89~100。试验表明,自制二联活疫苗安全、有效、质量可控,可用于预防禽脑脊髓炎和鸡痘。     

禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体的制备、鉴定与初步应用

为获得禽脑脊髓炎病毒(Avian Encephalomyelitis virus,AEV)VP1蛋白的单克隆抗体,通过原核表达AEV VP1蛋白,纯化后作为免疫原免疫BALB/c小鼠,并按常规方法制备杂交瘤细胞。经ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,经过3次亚克隆获得2株杂交瘤细胞株,命名为4#、19#,并进行了抗体亚类的鉴定、Western-blot和IFA检测。结果显示：制备的株单克隆抗体亚型分别为IgG2b、IgG2a,Western-blot和IFA试验结果表明单克隆抗体均能与AEV发生特异性反应而与其他禽病常见病毒均无交叉反应。运用建立的IFA对单抗进行了初步运用,在外源病毒检测方面与经典方法符合率高。本研究成功制备了AEV单克隆抗体,为进一步建立AEV检测方法和深入研究AEV的生物学特性奠定了基础。     

禽白血病病毒J亚群(ALV-J)基因表达与抗原定位的研究

本研究通过原位杂交(ISH)和免疫组织化学(IHC)技术检测了组织中ALV-J病毒RNA的表达及定位。原位杂交结果显示：在攻毒后3周时．所检测到的组织大部分已感染病毒；病毒对肝脏、心脏、肾脏的实质细胞、骨髓髓系细胞和卵巢基质中的间质细胞、脾脏红髓内的单核-巨噬细胞有较高的嗜性．在核膜及胞浆内显示出蓝紫色颗粒状的特异性信号，而在法氏囊、胸腺、脑和坐骨神经中检测不到病毒RNA及病毒基因的表达。免疫组化结果与原位杂交相似，在核膜及胞浆内可见蓝紫色阳性信号．瘤组织的信号较强，显示了较强的抗原性。由骨髓和其他组织的结果可推测ALV-J诱导肿瘤可能和病毒基因的插入位点有直接关系，而和病毒在组织内的数量没有直接关系。     

免疫器官中肾型鸡传染性支气管炎病毒的定位和动态分布

以鼠抗鸡肾型传染性支气管炎病毒（肾型IBV）的高免血清为一抗，辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗鼠IgG为二抗，建立了检测石蜡切片肾型IBV抗原的间接酶标抗体染色技术。应用该技术对人工感染肾型IBV C9001株鸡免疫器官中的病毒进行了检测，结果胸腺和法氏囊是病毒主要侵害的免疫器官，脾脏，盲肠扁桃体仅呈一过性感染，哈氏腺未检测到，法氏囊从感染后2－12天，胸腺从感染后3－8天均检测到病毒抗原，阳性染色主要集中于法氏囊淋巴滤泡髓质区和胸腺小叶髓质区淋巴细胞和网状细胞胞浆内。