红景天多糖对藏猪精液冻后品质及精子基因组DNA甲基化的影响

在藏猪精液的冷冻液中添加不同质量浓度的红景天多糖(0,2,4,6,8,10mg/L),制成高密度细管冻精,以冷冻解冻后精子活率、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率为精液品质的评价指标,筛选最适红景天多糖添加质量浓度;用甲基化荧光定量法检测3组(鲜精组、未添加组、最适添加组)精子基因组DNA甲基化的水平。结果显示:添加红景天多糖质量浓度为6mg/L组的精子活率显著高于其他组(P<0.05),该组精子畸形率、精子顶体完整率、精子质膜完整率也显著好于未添加组(P<0.05);这3组精子基因组的DNA甲基化水平(0.610 5±0.080 0,0.945 7±0.043 7,0.680 2±0.051 0)中,最适添加组虽显著高于鲜精组(P<0.05),但却显著低于未添加组(P<0.05)。结果表明:在藏猪精液冷冻液中添加质量浓度6mg/L的红景天多糖不仅可以明显改善藏猪精液冻后品质,而且可以明显减少冷冻对藏猪精子基因组DNA甲基化水平的影响,这将为提高藏猪精液冷冻保存效果的进一步研究提供参考。     

波尔山羊除精浆冷冻精液的试验研究

以波尔山羊精液为试验材料,通过二步稀释法在降温前以葡萄糖-卵黄液为洗涤液,应用离心洗涤法对波尔山羊精液进行1000 r/min离心处理,制作细管冻精,并进行活力、顶体完整率、存活时间以及超微结构的观察分析.结果表明,经离心处理的冻精精子活率显著优于对照组(P<0.05),精子顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),精子存活时间处理间差异不显著,除精浆可使精子所受冷冻损伤大为减轻,显著提高冻后精子品质.     

中卫山羊细管冻精制作与种质资源保存初步研究

为了中卫山羊种质资源的保护、利用,试验采用细管冷冻技术对宁夏地方品种中卫山羊进行了冻精制作和保存,比较了稀释液、冷冻保护剂类型和浓度、稀释倍数及不同稀释法等对中卫山羊精液冷冻保存品质的影响。结果表明:解冻后的精液品质,3号稀释液精子活率高于1号、2号稀释液,差异极显著(P0.01);相同浓度的甘油和二乙醇,解冻后的精子活率甘油高于二乙醇,差异极显著(P0.01),当甘油浓度为5%时,解冻后精子活率显著(P0.05)高于3%和6%;2倍稀释解冻后精子活率最高,5倍稀释解冻后精子活率最低,但不同稀释倍数解冻后精子活率差异不显著(P0.05)。     

多浪羊细管冷冻精液制作技术的研究

为保存和利用优秀地方品种多浪羊的遗传资源,试验在多浪羊原产地进行了细管冻精制作试验.用采集的多浪羊种公羊精液,比较5种冻精保存液配方的细管冻精冷冻效果,测定解冻后精子活力.结果表明:4.83%乳糖保存液解冻后精液的活率平均为36% ,优于其它4种保存液,且差异极显著(P<0.01),解冻后精子的畸形率也均低于其它4种稀释液,差异极显著(P<0.01).表明4.83%的乳糖保存液配方是理想的绵羊细管冻精稀释液.     

不同稀释液中添加十二烷基硫酸钠对吐鲁番黑羊精液冷冻保存的影响

为改善吐鲁番黑羊精液的冷冻保存效果,提高精液冻后的精子活率,本实验在3种精液冷冻稀释液中添加不同浓度(0、1%、2%)的十二烷基硫酸钠(SDS),TrⅠs-葡萄糖-柠檬酸钠为Ⅰ液,蔗糖-葡糖糖-柠檬酸钠为Ⅱ液,OptⅠdyl稀释液做对照为Ⅲ液。熏蒸冷冻后解冻,用精子分析系统(CASA)和流式细胞仪检测冷冻效果。结果表明:Ⅰ液1%SDS组精子活率最高(65.4%),与Ⅰ液2%SDS组精子活率没有差异,高于其他7组(P<0.05);Ⅲ液1%SDS组畸形率(9.4%)低于Ⅱ液0%SDS组、Ⅱ液2%SDS组和Ⅲ液2%SDS组(P<0.05);Ⅰ液1%SDS组直线运动速率(51.4μm/s)高于Ⅰ液0%SDS组、Ⅱ液2%SDS组和Ⅲ液0%SDS组(P<0.05);Ⅰ液1%SDS组和Ⅲ液1%SDS组的质膜完整率高于Ⅰ液2%SDS组和Ⅱ液1%SDS组(P<0.05),且Ⅰ液1%SDS组最高;Ⅰ液1%SDS组的顶体完整活精子比率高于Ⅱ液1%SDS组(P<0.05),各组的活精子顶体完整率无显著差异;Ⅰ液1%SDS组高线粒体膜电位比率(43.0%)高于Ⅱ液1%SDS组(P<0.05)。因此,采用添加1%SDS的Tris-葡萄糖-柠檬酸钠稀释液配方显著提高了吐鲁番黑羊精液冷冻保存效果。     

小尾寒羊精液冷冻技术研究

本试验对11只2～3岁小尾羊种公羊的精液品质、保存稀释液和冻精制作技术进行了研究。结果表明:小尾寒羊种公羊的射精量、精液品质、精液pH值、密度、色泽、活率和畸形率均属正常范围,优于无角道塞特和莎福克绵羊;4种稀释液中,A液低温保存效果优于B、C、D 3种稀释液,差异极显著(P<0.01)。B液作为小尾寒羊冷冻精液稀释效果较理想(P<0.01)。6％甘油作为小尾寒羊冷冻精液保护剂效果较理想。     

在绵羊冷冻精液解冻液中添加复合VB提高冻精解冻后品质的研究

按照L9(34)正交表进行实验设计,将复合维生素B、亚硒酸钠维生素E、谷胱甘肽及抗坏血酸在绵羊冻精解冻液中进行单独或组合添加.6号(50.70%±4.32%)和7号解冻液的解冻后活率(55.35%±2.20%)除与4号解冻液(45.29%±4.11%)差异不明显外,均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于其它解冻液.结果表明在解冻液中添加复合维生素B可明显提高冻精的解冻后活率.推荐在绵羊冷冻精液的解冻过程中使用.     

海藻糖、二甲乙酰胺对公猪精液冷冻保存效果的研究

采用5% 二甲乙酰胺(DMA)(V/V)完全替代甘油,比较乳糖、海藻糖对精液冷冻保存效果的影响。结果表明,海藻糖显著提高了冷冻——解冻后精子成活力(49.32%±1.52%)与顶体完整性 (47.33%±1.16%)(P<0.05)。然后利用海藻糖替代乳糖,评价不同浓度的DMA对公猪精液冷冻保存的影响。结果表明,当DMA添加量为4%时,解冻后精子活率、成活力、顶体完整率分别为(45.17±0.56)%、(50.33±0.67)%、(48.30±1.44)%,均显著高于3% DMA、6% DMA添加组(P<0.05),精子活率显著高于5% DMA添加组(P<0.05),但精子成活力、顶体完整性与其差异不显著(P>0.05)。因此,当利用海藻糖作为冷冻保存基础稀释液,DMA最适添加量为4%。     

鸡精液稀释液缓冲能力与4℃保存鸡精子活力和畸形率的关系

为了建立可应用于生产实践的精液稀释液缓冲容量测量方法,研究不同缓冲容量的稀释液对4℃保存的鸡精液精子活力和畸形率的影响,设计渗透压和pH值接近、缓冲指数(BI)为119.6~1 147.6的10个稀释液配方进行精液保存试验。结果表明:在4℃条件下保存鸡精液时,稀释液的缓冲容量对精子活力无显著影响(P0.05)。鸡精子畸形率与稀释液的BI密切相关,3号稀释液精子畸形率极显著低于其他9个稀释液(P0.01);8号稀释液的精子畸形率极显著低于1号和10号稀释液(P0.01),显著低于2号稀释液(P0.05);4号稀释液的精子畸形率显著低于10号稀释液(P0.05),其他各稀释液间精子畸形率差异不显著(P0.05)。BI过高或过低均不利于鸡精液的低温保存。     

谷胱甘肽对蒙贝利亚种公牛性控精液冻后效果的影响

本研究通过两个试验探讨谷胱甘肽(GSH)对蒙贝利亚种公牛性控精液冻后效果的影响。试验一,在冷冻稀释液中添加GSH,最终浓度分别为0(对照)、0.5、0.75和1.0mmol/L,观察对性控精液冷冻效果的影响。结果表明,0.75mmol/L组的性控精液冻后精子活率(42.2%)极显著高于对照组(39.2%)(P0.01);0.5mmol/L组冻后活率(40.9%)与对照组相比没有显著差异(P﹥0.05);0.75mmol/L组冻后活率优于0.5mmol/L组,但二者差异不显著;1.0mmol/L组冻后活率(34.90%)极显著低于对照组和其他试验组(P0.01),说明GSH添加量过大对性控精液冷冻效果不利。试验二,在分离前、分离后和冷冻前分别添加GSH,研究对蒙贝利亚牛性控精液冷冻效果影响。即在原精液分离前,在染色液中添加GSH,使最终浓度达0.75mmol/L,然后进行分离;在分离后平衡前精子的缓冲液中添加GSH使其最终浓度达0.75mmol/L,然后平衡;离心后冷冻前在冷冻保护液中再次添加GSH使其最终浓度达0.75mmol/L。对照组不添加GHS,然后分别观察冻精解冻效果。结果表明,试验组性控精液冻后活率(43.5%)显著高于对照组(40.5%),此外,与对照组相比,添加GSH组的精子运动状态表现更加强劲,持续力强。两个试验结果都表明,GSH对性控精液细管剂量、前进运动精子数以及性别准确率等指标没有影响。