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相似文献
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1.
蚕豆叶片气孔保卫细胞中微管的分布   总被引:1,自引:0,他引:1  
本实验用考马斯亮蓝染色及间接免疫荧光等细胞化学方法对蚕豆叶片气孔保卫细胞中微管的形态分布作了初步观察研究。考马斯亮蓝染色后光学显微镜下观察,发现蚕豆叶片下表皮气孔保卫细胞中有丝状物存在,其分布情况为:由核向细胞的背壁、腹壁呈辐射状排列,或呈一种交错网络结构。经微管解聚剂甲氨膦(APM)处理的保卫细胞,无明显丝状物存在。在间接免疫荧光定位中,经荧光显微镜及共焦激光扫描显微镜观察,其保卫细胞中微管的分  相似文献   

2.
将构建的含有衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)动蛋白(actin)和绿色荧光蛋(green fluorescent protein,GFP)融合基因的酵母表达载体引入裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe),衣藻肌动蛋白和荧光蛋白的融合基因得到了表达。表达actin-GFP融合蛋白的酵母细胞在蓝光激发下可以观察到绿色荧光。在EMM培养基上actin-gfp强烈表达,但在硫胺素(thiamine)存在时只进行微弱表达。在融合基因强烈表达时,actin-gfp表达产物在酵母细胞中以聚集形式存在,细胞破碎后发现表达产物主要分布于沉淀中。  相似文献   

3.
采用重组-PCR方法,扩增获得绿色荧光蛋白(GFP)与黄瓜花叶病毒运动蛋白(CMV MP)融合基因,将其克隆到pKEN上,构建了该融合基因的原核表达载体pKENG-M。SDS-PAGE及免疫印迹分析显示,57kD的融合蛋白基因在大肠杆菌DH5α中正确表达,激光共聚焦显微镜分析表明,在488nm光激发下,菌体呈亮绿色,表明融合蛋白保持绿色荧光特性。实验结果为进一步研究CMV MP的功能及其与胞间连丝和其他细胞成分的作用关系奠定了基础。  相似文献   

4.
构建亚非马蜂(Polisteshebraeus)溶血肽基因重组转移载体pBacHT-GFPTPhMT,转化含穿梭载体Bacmid的受体菌Escherichiacoli(DH10Bac)中,得重组穿梭载体Bacmid-GFPTPhM,再用Lipofectin介导其DNA转染粉纹夜蛾(Trichoplusiani)细胞系Tn。SDS-PAGE分析表明,感染Bacmid-GFPTPhM的Tn-5B1-4细胞的表达产物在约为34kD处出现特异性条带,表达量约占细胞总蛋白的3%。Westernblot显示表达产物具有良好的免疫活性。感染Bacmid-GFPTPhM的细胞表达时相动态分析进一步表明,与增强型绿色荧光基因融合的亚非马蜂溶血肽基因的重组病毒已在昆虫细胞中进行了成功地表达,感染后72h表达量可达最高水平。  相似文献   

5.
以多寄主可移动载体质粒pSUP1011为基础载体,构建了绿色荧光蛋白(GFP)标记的重组质粒,通过细菌接合,将重组质粒转移到嗜水气单胞菌J-1中。经紫外光检测和SDS-PAGE电泳分析,证实重组粒在该 可表达GFP。在无选择压力的培养条件下,24小时后,重组质粒的稳定率在72.2%,36小时后,稳定率在50%。显示GFP作为报告基因在嗜水气单胞菌致病机理研究的应用前景。  相似文献   

6.
红色荧光蛋白(RFP)是从海葵(Discosoma)中分离的一种新荧光蛋白基因,可以在紫外线激发下发出红色荧光,最大发射波长为583nm,在细胞中荧光转换效率高,是目前发现  相似文献   

7.
实验利用PCR技术,从拟南芥原膜水旧白RD28的cDNA中扩增了所有植物细胞质膜水通道蛋白保守区段(420bp),并将其构入pGEX-KG。酶切、测序分析表明重组质粒pGEX-RD28结构正确。0.1mmol/L的IPTG可诱导表达分子量约40kD融合蛋白GST-RD28,该蛋白主要以非包涵体的形式存在。诱导表达后的菌体超声裂解液经谷胱甘肽活化的Sepharose 4B亲和层析柱纯化得到了高纯度G  相似文献   

8.
猪圆环病毒(Porcine circovims,PCV)属于环状病毒属,该病毒无囊膜,基因组为单链环状DNA,大小约为1.7kb,编码2个主要的开放阅读框架:ORF1和ORF2,ORF2编码病毒的核衣壳蛋白(Nawagitgul et al,2000),可能在PCV2病毒致病方面具有重要的作用。PCV2可引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS).给养猪业带来了巨大的经济损失。分别用ORF2基因的亚单位疫苗免疫猪、核酸疫苗免疫小白鼠,均具有良好的效果(Blanchard et al,2003;Kamstrup et al,2004)。关于PCV2疫苗的研究在我国尚未处报道。本实验在异源启动子CMV下实现了ORF2在真核细胞中的表达。  相似文献   

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