毛霉产蛋白酶的特性及其应用研究

为探寻适合于制备大豆多肽的蛋白酶,对毛霉产蛋白酶的特性、毛霉蛋白酶的制备方法及其对大豆分离蛋白的降解进行了研究,并测定了酶解产物的相对分子质量.结果表明,毛霉蛋白酶是诱导性很强的酶类,毛霉的产酶条件除与温度、培养时间、相对湿度等有关外,还与培养方式密切相关,以麦麸培养毛霉,当长有大量孢子时翻曲1次,可大幅度提高酶活力.毛霉蛋白酶在40℃,pH7.3的条件下催化大豆分离蛋白水解5 h,所产生的酶解产物的相对分子质量分布范围在1～3 kD之间,酶解产物微咸,后味略鲜,无苦涩味.     

毛霉M263-3产蛋白酶的特性研究

为了提供毛霉在工业生产中的一些基本参考数据,在不同的培养时间段对毛霉产酸、中、碱性蛋白酶的酶活性进行了测定,研究了培养基含水量和“扣瓶”处理等培养因素对产酶活力的影响,并对所产蛋白酶的耐热性进行了研究．结果表明：毛霉所产蛋白酶以碱性蛋白酶为主,在28℃培养96h产酶活力最高,培养基含水量以54．7％合适,多次“扣瓶”对所产酶活有负面影响,蛋白酶在温度高于60℃时容易失活．     

毛霉ZG2菌株产蛋白酶条件优化

对毛霉ZG-2菌株的产蛋白酶条件进行优化,以便于生抽大曲的大规模生产。结果表明,在大豆粉40%、麸皮60%、加水100%(V/m)、温度40℃条件下,制成的大曲蛋白酶活性最高,其中酸性蛋白酶酶活2 314U/g、中性蛋白酶酶活4 602U/g、碱性蛋白酶酶活1 352U/g;加120g/L食盐水溶液进行稀醪发酵60d,原料蛋白质转化率最高,达79.3%。     

大豆多肽研究与开发：现状.问题.建议

Characteristics and application of soybean peptide are discussed. The current situation and progress of research on soybean peptide are analyzed. The proposals concerning with research and development of soybean peptide are put forward to solve the problems existing.     

腐乳毛霉高产蛋白酶菌株的分离与鉴定

从贵州各地风味较好的腐乳样品中分离到20株疑似毛霉菌株,经理化鉴定。并采用福林-酚试剂法检测产蛋白酶活力,获得1株发酵风味良好且蛋白酶活性较高的腐乳毛霉菌株MGC317。鉴定为雅致放射毛霉Actinomucor elegans（Eid）Benjam et Hesseh。将MGC317菌株接种麸皮培养基,28℃培养48h。其蛋白酶活性为57．26μL;对其16SrDNA的ITS序列进行克隆和分析,其分子长为711bp,与雅致放射毛霉比较。序列同源性为96％-97％。前发酵结果显示,MGC317菌株的菌丝高度为3．1cm。48h时蛋白酶活性为13.82μL。     

毛霉发酵制备猪血多肽的工艺条件研究

[目的]建立制备猪血多肽的新工艺方法。[方法]利用筛选出的产蛋白酶的毛霉（Mucor）菌株M-16作猪血的发酵菌株,研究该菌株发酵制备猪血多肽的性能。[结果]确定了发酵的工艺条件为温度30℃,通气量150 r/min,接种量5%,发酵时间48 h,猪血蛋白质的水解度最高可达到25.69%。[结论]采用新工艺所得到的猪血多肽滤液血腥味消失,有较明显的香味,达到了应用的基本要求。     

动力负熵场及其在短期天气预报中的应用

把纬圈气流虚拟平衡态原理具体应用到短期预报中,因时 效短的缘故,决定了虚拟平衡态应在低层大气中寻找,倘若时效达到一定天数(3～5 d),则 平 衡态应在中层大气中定义。按照涡动原理计算出动力负熵值,由动力负熵值构成动力负熵场 (图),其由正熵区、负熵区、0值线三部分组成,正熵区为无降水区,负熵区又分为负熵有 效区和负熵无效区,前者为未来的降水区域,降水强度与负熵中心值和梯度的大小成正比。     

总状毛霉丝氨酸蛋白酶基因结构和功能的生物信息学分析

利用PCR和RACE(cDNA末端快速扩增)技术从总状毛霉中克隆获得1个丝氨酸蛋白酶新基因,利用生物信息学方法对该基因序列、编码的酶序列以及酶性质和结构进行预测。结果表明:该基因编码区序列长1 421bp,由3个外显子和2个内含子组成,编码由429个氨基酸残基组成的多肽;对该多肽的组成和进化分析表明,其成熟肽属于蛋白酶K家族的胞外蛋白酶;通过同源建模结构分析表明,该酶没有二硫键,有152个氢键和29个盐键,酶的Glu190、Ala192和Asp215残基与一个Ca2+相结合,酶活性位点残基Asp44和Ser241溶剂可及表面积较大,分别达到0.211 42和3.309 32;该酶的底物结合区域中,S1和S4口袋结构明显,S2次之,S3最不明显,部分组成S1和S4口袋的氨基酸残基不保守,这可能使该酶具有独特的水解性。上述结果可为该蛋白酶基因的异源表达和结构与功能关系等方面的研究提供参考。     

腐乳毛霉菌种选育及产酶条件研究

以毛霉菌（Ｍｕｃｏｒ）Ｍ２为出发菌株，经紫外线，６０Ｃｏγ－射线复合诱变，获得一株高产蛋白酶突变株毛霉Ｍ２６３。该菌株的生长速度快，菌丝旺盛，且洁白致密。固体培养，中性蛋白酶活力为８４１μｇ／ｍｉｎ，产酶活力约为原出发菌株的２倍。产酶最适培养条件为：９８％麸皮，１％豆饼粉，１％葡萄糖，料水比１：１，起始ｐＨ７．０，２０℃培养１２０ｈ。     

野生大豆生物学特性及应用探讨

介绍了野生大豆的生物学特性,并探讨了野生大豆在饲料及药用作物上的应用价值。阐述了利用野生大豆所取得的成果,并对野生大豆资源的进一步利用作出了展望。     

氮肥施用对杂交大豆生育特性及产量的影响

[目的]为了探索杂交大豆在不同氮肥因素水平下的生育特性及其高产栽培技术。[方法]以杂交大豆杂优豆1号为试验材料,以常规高产大豆蒙91-413为对照,设置5个水平3次重复的氮肥处理,进行杂交大豆生育特性及高产栽培技术研究。[结果]终花期时杂优豆1号的分枝数在氮肥水平为90 kg/hm2的C、E处理中分别为7.0和7.4,在氮肥水平为45 kg/hm2的B、D处理中分别为6.4和6.8,在未施氮肥的A处理中仅为6.2;杂优豆1号的单株荚数、单株粒数和单株粒重在氮肥水平90 kg/hm2的C、E处理中分别为104.0个和105.4个、188.0粒和201.0粒2、9.8 g和31.3 g,在氮肥水平45 kg/hm2的B、D处理中分别为95.8和98.8个1、65.7和166.6粒2、6.6和27.0 g,未施肥的A处理中分别为83.9个、141.3粒2、4.8 g。杂优豆1号在C、E和B、D处理中的小区产量分别为4.284、.38和3.813、.82 kg,比A处理增加21.2%、24.1%和7.9%、8.2%。[结论]增施氮肥可显著提高杂交大豆单产,充分发挥其增产潜力。     

米曲霉固态发酵豆粕产蛋白酶条件的研究

通过单因素(温度、豆粕含量、发酵时间)试验和3因素3水平正交试验,以蛋白酶活为测定指标,对米曲霉固态发酵豆粕产蛋白酶条件进行研究,结果表明:米曲霉固态发酵豆粕产蛋白酶最优条件是发酵温度30℃,发酵时间66 h,豆粕含量93%,此条件下的酶活为572.85 U/g。     

植酸酶产酶条件及热稳定性的研究

对黑曲霉９７０１、米曲霉９７１２ 、根霉９７０２ 三种霉菌进行固体培养法生产植酸酶的条件研究。结果表明：在３０ ℃±１℃条件下，黑曲霉９７０１ 培养７ｄ 产酶活力达１４０５２ｐｕ／ｇ；米曲霉９７１２ 培养６ｄ，产酶活力达１５３８７ｐｕ／ｇ；根霉９７０２ 培养６ｄ，产酶活力达１４０７０ｐｕ／ｇ。对黑曲霉９７０１ 用缓冲液（ｐＨ４８） 控制ｐＨ，在３０ ℃±１℃培养７ｄ，产酶水平达２１３１０ｐｕ／ｇ 。将黑曲霉９７０１ 植酸酶液在９０ ℃条件下保温１５ｍｉｎ，仍保留７６ ％ 的原酶活性。     

新疆阿勒泰和温泉县冷水鱼肠道产低温蛋白酶菌株的筛选及其酶学性质的研究

[目的]从50株冷水鱼肠道产蛋白酶菌株中筛选优良产酶菌株,并研究其酶学性质,为高效低温蛋白酶技术的研发奠定基础。[方法]对比脱脂乳平板初筛结果确定供试菌株,对选定菌株进行表型及16S rRNA/26S rRNA序列同源性分析,确定产酶菌株的进化地位。用Folin酚显色法复筛,并研究最佳产酶菌株所产蛋白酶的酶学性质。[结果]从6株供试菌株中筛选出一株高产酶菌株P-D-10,初步鉴定隶属于Pseudomonas。酶学性质的初步研究显示,P-D-10产生的蛋白酶最适反应pH在8.5左右;在0～60℃均有催化活性;具有10和40℃2个最适酶活温度;热稳定性较差,在70℃水浴10 min后剩余酶活力仅为20.14%。除了Tween-80对该酶酶活力有促进作用外,其他金属离子、还原剂、表面活性剂和金属离子螯合剂对该酶酶活力均有不同程度的抑制作用。[结论]筛选获得的高产酶菌株P-D-10隶属于Pseudomonas,是一株具有研究与应用潜力的产低温蛋白酶菌株。     

产蛋白酶生防细菌的筛选及其对病原真菌的拮抗作用

从小麦根际土壤中分离到一株高产蛋白酶并对多种植物病原真菌具有拮抗作用的生防细菌T2.通过形态特征、生理生化及16S rDNA同源性序列分析,初步鉴定该菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).其发酵液经硫酸铵沉淀后的粗酶液可明显抑制棉花枯萎病菌菌丝生长及孢子萌发,在显微镜下观察到棉花枯萎病菌孢子萌发的芽管短、孢子膨大变形呈泡囊状,菌丝呈串珠状膨大、细胞破裂、细胞质外渗,表明该细菌菌株产生的胞外蛋白酶可能与病菌菌丝生长受抑制密切相关.     

杂交大豆昆虫传粉及制种技术研究进展

经过科学家的共同努力,吉林省农科院于2002年审定了世界上第1个大豆杂交种杂交豆1号,并于2006年审定了第2个大豆杂交种。从2000年开始,在封闭及开放条件下,利用苜蓿切叶蜂、蜜蜂、花蓟马等昆虫媒体为大豆传粉,进行不育系繁育及杂交种制种技术的探讨。已经实现在网室内利用蜜蜂及切叶蜂传粉,配制大豆杂交组合和生产小批量杂交种子,不育系结实率达到55.9%～100%;开放条件下,在干旱、有灌溉条件的地区,利用蜜蜂及苜蓿切叶蜂传粉,不育系结实率达到50%～80%,制种产量获得了较理想的结果。吉林省农科院在吉林省西部及内蒙古东部干旱地区,建立了制种基地,进行了较大面积的大豆不育系扩繁及杂交种制种试验,制种技术基本成熟。