碳酸盐在亚心扁藻培养中的实例应用分析

<正> 绿藻门中单细胞藻在微生物饵料培育中占有相当重要的位置,特别是近几年经过广大水产科技人员辛勤培育,筛选出一批具有繁殖能力强、广温、广盐型优良品种,为解决特殊水产品养殖“开口饵料”起到了至关重要的作用。然而大多数具有泳游能力的绿藻如亚心扁藻塔胞藻等,具有很强的趋光“上浮下沉性”在“大起大落”中突发导致大面积沉淀死亡,以扁藻为例,随着光照强度的变化扁藻“沉起”是正常现象,什么时间,多长时间不上浮便属不正常现象,生产中不易掌握以致于错过最佳调理     

盐生杜氏藻的培养技术与应用

盐生杜氏藻 ( Dunaliella salina)属绿藻门 ( Chlorphyta) ,团藻目 ( Volvocales) ,盐藻科 ( Dunaliellaceae)。它含有丰富的蛋白质 ,而碳水化合物和脂肪含量相对较低。在高盐度、强光照和低氮的环境条件下 ,盐生杜氏藻体内β-胡萝卜素的累积速度很快。生长在海南岛三亚盐场的盐生杜氏藻 ,其蛋白质含量高达 48.89%,必需氨基酸指数 ( EAAI)达到 85 .1。在人类的食物中 ,只有大豆、花生仁的蛋白质含量可与之相比。杜氏藻无细胞壁 ,体型变化较大 ,有梨形、卵形、椭圆形或纺锤形。大小差异很大 ,大的长约 2 0 μm,宽 14μm;小的长约 9μm,宽…     

盐度对盐生杜氏藻生长及其色素积累的影响

试验结果表明.在试验盐度范围内(30～120).较低的盐度有利于盐生杜氏藻生长和分裂,最大细胞密度为8.92×105cell/ml.对照组仅为3.81×105cell/ml;盐度为60时.β-胡萝卜素含量最高,为102 mg/g.对照组仅为36 mg/g;盐度为30时,叶绿素a含量最高,为82 mg/g.对照组最低,为17 mg/g;低盐度有利于细胞蛋白质合成.蛋白质最高含量为37.5%,对照组仅为27.9%.     

三十烷醇对亚心形扁藻生长的影响

本文报道了三十烷醇对亚心形扁藻生长的促进作用。其最佳施用浓度为0.1ppm,接种后第4天,藻细胞浓度较对照组提高了51.7%;在扩大培养时,其藻细胞在接种后第12天,较对照组可提高133.4%。     

不同品系盐生杜氏藻培养技术的研究

4种不同品系盐生杜氏藻培养结果表明：常温下,A33是最适宜培养的藻种,经4天培养,藻细胞密度可达到114×104cell／ml,细胞生长率达到0．369;其次是A23、A140、A5藻种,细胞生长率分别为0．317、0．314、0．234。控温条件下,4种品系杜氏藻细胞生长速度明显增高,是常温条件下的1．2倍。     

盐生杜氏藻粉对脊尾白虾存活和生长的影响

本文研究了饲料中添加盐生杜氏藻粉(0％、0．5％、1％、2％和4％)对脊尾白虾(平均初始湿重0．715g)存活和生长的影响。实验周期30 d。结果表明:白虾存活率以1％添加组最高,特定生长率和吸收效率以2％添加组最高,摄食量以4％添加组最高,而饲料系数以1％添加组最低;回归分析表明,脊尾白虾特定生长率达到最大值时的盐生杜氏藻粉添加量为2．76％。     

盐生杜氏藻的生物学特性及其开发利用

盐生杜氏藻(Dunaliella salina),是一种富含β-胡萝卜素的极具经济价值的单细胞藻类,目前对它的研究和利用越来越广。本文介绍了盐藻的生物学特性、开发利用和培养条件。     

柠檬酸铁对盐生杜氏藻生长和色素积累的影响

研究了柠檬酸铁对2株盐生杜氏藻OUN04和盐生杜氏藻OUN09生长和色素积累的影响。试验结果表明,盐生杜氏藻OUN04生长最适的Fe浓度为0.05 mmol/L,密度达1.115×106cell/ml,对照组为8.29×105cell/ml,0.25 mmol/L Fe组密度最低(7.0×105cell/ml);最大β-胡萝卜素含量(83.2mg/g)出现在0.25 mmol/L Fe浓度组中,对照组(63.4 mg/g)最低;Fe浓度为0.25 mmol/L时有最大的chll_a含量(98.4 mg/g),对照组为80.2 mg/g;建立了杜氏藻对Fe吸收的动力学方程。盐生杜氏藻OUN09生长最适的Fe浓度为0.05 mmol/L(密度1.31×106cell/ml),对照组为1.185×106cell/ml,最大β-胡萝卜素含量为130.2 mg/g(0.05 mmol/L Fe组),对照组为70.4 mg/g,pH值变化和Fe的吸收情况与盐生杜氏藻OUN04相似。     

扁藻培养的初步试验

扁藻(Platymonas Sp.)是一种海生团藻类,能游动的单细胞绿藻。生长在沿海石沼及静水港湾海水里,但适应范围很广,一般海水中也能生长。     

K~+浓度对杜氏盐藻(Dunaliella salina)生长的影响

为探究杜氏盐藻生长所需的适宜K+浓度,本文在实验室条件下,研究了杜氏盐藻(Dunaliella salina)在不同K+浓度(1、4、8、12 mmol/L)下生长增殖变化特征。对各K+浓度下,杜氏盐藻第11天的细胞密度进行单因素方差分析和多重比较,结果表明,只有8mmol/L和12 mmol/L之间为显著性差异(0.01P0.05),其余各组间均为极显著差异(P0.01)。杜氏盐藻生长所需的适宜K+浓度为2 mmol/L。     

不同氮、磷浓度下亚心形扁藻的生长及水体中氮、磷变化

自然条件下,采用湛水107-13营养液为基础配方,在经消毒处理的天然海水中添加不同氮、磷质量浓度的营养盐进行亚心形扁藻的培养。结果表明,当氮、磷质量比为17时,最适合亚心形扁藻的生长。不同磷质量浓度梯度对亚心形扁藻的生长和生长率K具有显著性的影响(P<0.05)。当磷质量浓度为8 mg/L时,其相对生长常数和生长率K值均高于其他质量浓度处理。不同氮质量浓度梯度对亚心形扁藻生长具有显著性影响(P<0.05),但对亚心形扁藻生长率K的影响不显著(P>0.05)。高质量浓度氮对亚心形扁藻的生长影响作用最大(P<0.05)。在培养过程中,高质量浓度氮、磷培养液中NO3--N和PO43--P的下降速率高于低质量浓度中NO3--N和PO43--P浓度的变化,并呈现出显著性的差异(P<0.05)。表明在高质量浓度营养盐条件下培养亚心形扁藻,会导致营养盐相对利用率的下降。     

两种抗生素对亚心形扁藻生长的影响

在室温下,研究了不同浓度的土霉素和氯霉素对亚心形扁藻细胞的数量、大小以及叶绿素、类胡萝卜素含量等方面的影响。结果表明:在0~5mg/L范围内,土霉素的浓度越大,细胞数量在增长期内增幅越大,在衰退期内衰退越快;土霉素对色素含量有不同程度的促进作用。氯霉素浓度>1mg/L时,浓度越大,扁藻细胞数量增幅越小,类胡萝卜素越多。土霉素,氯霉素对扁藻细胞大小的影响均不明显。     

锰对盐藻生长与物质积累的调控作用

试验结果表明,培养液中锰质量浓度过高或过低都不利于盐藻细胞的生长与物质积累。培养基中锰质量浓度为4.0 mg/L时,盐藻细胞生长、蛋白质合成与β-胡萝卜素积累最多。当培养液中锰质量浓度较高(8.0 mg/L)或较低(2.0 mg/L)时,单个盐藻细胞中的蛋白质与β-胡萝卜素含量较高。但此时,因培养液中细胞密度较低,盐藻细胞积累的物质总量仍然较少。在锰质量浓度较高或较低的逆境条件下,盐藻可能通过适应性反应形成了逆境蛋白质与胡萝卜素等。     

盐胁迫条件下盐藻的生长及特异表达蛋白的研究

采用不同NaC1浓度培养盐藻.通过分光光度法记录其生长状态.试验结果表明,在NaC1浓度为1.0～2.0 mol/L时.盐藻生长状态良好;NaCl浓度为3.0～4.0 mol/L时盐藻生长缓慢;盐藻经不同NaCI浓度培养0.5、5、23 h后抽提蛋白,所获得的粗提蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,观察不同NaCI浓度培养液中生长的盐藻可溶性蛋白质SDS-PAGE图谱.发现在低NaC1浓度(1.0～2.0 mol/L)下培养时23、51 kD蛋白略有变化但变化不大;在高NaC1浓度(3.0～4.0 mol/L)下胁迫5、23 h时23 kD蛋白显著增加;高NaC1胁迫23 h时51 KD蛋白含量下降明显.验结果证明51、23 kD蛋白可能与盐藻耐盐机制有关.     

饲料盐藻水平对卵形鲳鲹体色和生长的影响

以初始体质量为(13.88±0.28)g的卵形鲳鲹为试验对象,研究不同盐藻添加量(0.0%、0.1%、0.2%、0.4%、0.8%、1.6%)饲料对其体色和生长的影响。每组设3个平行,每个平行饲养20尾鱼,每日饱食投喂2次(8:00;17:00),试验周期为56d。结果显示,盐藻添加量为0.1%~1.6%时,随着饲料中盐藻水平的提高,卵形鲳鲹背部和腹部黄色值(b*)呈显著上升趋势(P0.05),饲料中添加盐藻可明显改善卵形鲳鲹体色;与此同时,卵形鲳鲹质量增加率和特定生长率随饲料盐藻水平的上升呈下降趋势(P0.05),未添加盐藻的对照组具有最高蛋白质效率和最低饲料系数,且与盐藻添加量为0.4%的试验组差异显著(P0.05),饲料中添加盐藻对卵形鲳鲹生长性能和饲料利用没有明显的促进作用;此外饲料盐藻水平对卵形鲳鲹体成分也没有显著影响(P0.05)。     

C、N、P比例对2株盐藻生长和生化组成的影响

采用正交设计法研究了C、N、P比例对2株盐藻OUN04和OUN05生长、β-胡萝卜素积累、叶绿素a合成、脂肪酸组成、蛋白质含量的影响。试验结果表明,适当调节C、N、P比例可以促进盐藻OUN04生长、β-胡萝卜素积累、叶绿素a合成,盐藻OUN04最大细胞密度114.2×104个/ml、β-胡萝卜素最大含量100.4 mg/g、叶绿素a最高含量144.6 mg/g分别出现在C、N、P比例为12∶1∶0.05、12∶2∶0.1、12∶1∶0.05的处理组中,且均与对照组差异显著;适当调节C、N、P比例也可以提高盐藻OUN04脂肪酸和蛋白质含量。盐藻OUN05细胞最大密度101.2×104个/ml、β-胡萝卜素最高含量109.2 mg/g、叶绿素a最高含量108.7 mg/g分别出现在C、N、P比例为6∶2∶0.05、6∶0.5∶0.1、12∶2∶0.1的处理组中,且均与对照组差异显著;最大蛋白含量34.41%出现在6∶1∶0.05的处理组中,但与对照组(33.17%)差异不显著。     

磷浓度对盐生杜氏藻和纤细角毛藻叶绿素荧光特性及生长的影响

在温度(23±1)℃,盐度31,光照度5000 lx的条件下,用含有不同磷浓度(0、2.27、18.15、36.3、72.6、290.4μmol/L)的培养基对盐生杜氏藻和纤细角毛藻进行培养,研究2种微藻在一次性培养过程中,不同磷浓度对其PSII最大光能转化效率(Fv/Fm)、叶绿素含量以及细胞密度的影响。单因子方差分析结果表明,在整个培养周期中,磷浓度对两种微藻的光合作用及生长均有显著影响(P<0.05)。盐生杜氏藻的PSII最大光能转化效率、叶绿素含量以及细胞密度均随着起始磷浓度的增加而增加,在290.4μmol/L处达到最大值;纤细角毛藻的PSII最大光能转化效率、叶绿素含量以及细胞密度在18.15μmol/L处达到最大值,而后随着磷浓度的继续升高,其上述指标反而降低。所以盐生杜氏藻和纤细角毛藻进行光合作用和生长的最适磷浓度分别为290.4μmol/L和18.15μmol/L。     

盐藻运动特性及其影响因素

为了揭示盐藻的运动特性,在不同条件下观察了玻璃U形管两端盐藻的密度变化。结果表明,盐藻运动受光照、ATP、丙二酸钠和粘度的影响。盐藻具有向光源方向聚集的运动特性;供给ATP时盐藻运动加速,加入丙二酸钠时盐藻运动减慢,盐藻的运动是一个消耗能量的过程;增加介质粘稠度会使其运动速度减慢。     

盐藻高密度培养的环境条件研究

在优化配方基础上,通过摇瓶培养考察了pH、接种密度、光照强度等环境条件对盐藻生长的影响,结果表明盐藻的最适生长pH为8.0～8.5,接种密度以(7.5～10)×10~4 cells/ml为宜,光强在3000～5000 lx范围内藻细胞生长较好,细胞密度较高。