北美红杉组培快繁体系的建立与优化

以北美红杉1年生带芽茎段为外植体,通过基本培养基筛选和不同植物生长调节剂水平对比试验得到北美红杉组织培养的不定芽诱导、增殖、生根等生长阶段的优化配比培养基,以期建立北美红杉高效的快繁体系。结果表明:确定最佳消毒方法为75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,再用0.1%氯化汞消毒处理10 min,无菌水冲洗4次;最佳不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,不定芽诱导效果最好,诱导芽率高达2 153.3%,且芽生长健壮;最佳不定芽增殖培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,增殖系数高达15.8;最佳生根培养基配方为1/2MS+KT 1.5 mg·L^-1+IBA 1.0 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,其生根率达90.0%,根多且粗长,植株高大健壮;最佳移栽基质为V_炉渣∶V_原土∶V_腐殖土=1∶1∶1,植株成活率达91.7%。     

甜瓜高效不定芽再生体系的建立

对8个基因型甜瓜再生能力进行研究,筛选出再生能力较强的基因型,并以其为材料对外植体类型,不定芽诱导、伸长和不定根诱导3个阶段植物生长调节剂的类型与质量浓度进行优化筛选,旨在建立甜瓜高效的不定芽再生体系。结果表明,不同基因型间再生能力存在差异,2个厚皮甜瓜基因型B8、P110和1个薄皮甜瓜基因型IVF05再生能力较强,其中B8再生效果最好;以B8材料为基础建立再生体系,发现不定芽诱导能力最高的外植体为子叶近胚轴端,不定芽诱导阶段最适的培养基为MS+1.0 mg·L^-16-BA+1.0 mg·L^-1ABA,不定芽诱导率96.7%;不定芽伸长和不定根诱导最适的培养基分别为MS+0.1 mg·L^-16-BA和1/2 MS+0.5 mg·L^-1IBA,获得的再生苗生根率达93.3%。     

报春石斛组培快繁技术体系的建立

以报春石斛蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,以期建立报春石斛的组培快繁技术体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+蔗糖20g·L^-1最适报春石斛种子无菌萌发和原球茎的诱导;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖20g·L^-1,继代培养45d,增殖系数达8.2;最佳生根壮苗培养基为MS+6-BA 1.0mg·L^-1+KT 0.5mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖30g·L^-1+活性碳1.0g·L^-1,培养3个月,生根率达100%,根系较长,苗壮;3—4月是桂林地区移栽报春石斛组培苗的最佳季节,生根苗在栽培基质Ⅰ(树皮∶水苔∶珍珠岩∶蛭石=10∶2∶1∶1,体积比)的长势好于栽培基质Ⅱ(树皮∶珍珠岩∶蛭石=10∶1∶1,体积比),成活率为92.3%。     

亚洲百合‘穿梭’组培快繁体系的建立

以亚洲百合‘穿梭’为试材,采用植物组织培养的方法,研究了不同浓度激素对百合鳞片诱导、不定芽增殖、小鳞茎生根培养的影响,并筛选出适宜百合组培苗生长的移栽基质,以期为亚洲百合‘穿梭’的组培快繁体系的建立提供参考依据。结果表明：百合鳞片最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,诱导率最高可达74.44%,显著高于其他处理;最佳增殖培养基为MS+0.1 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,不定芽增殖数量最多,增殖系数为3.27;适合小鳞茎生根培养基为1/2MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.3 mg·L^-1 IBA+40 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,平均生根数量为14.33,是其他...     

珍稀濒危植物珙桐离体快繁技术初步研究

 研究了我国一级珍稀濒危树种珙桐(Davidia involucrata Baill.) 带芽茎段的离体培养。筛选出最佳培养基: ( 1) 冬芽诱导培养基: WPM+BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1; (2) 丛生芽诱导培养基: WPM + BA 2.0 mg·L^-1; (3) 丛生芽增殖培养基: WPM+ BA 2.0 mg·L^-1+ ZT 0.1 mg·L^-1; (4) 生根培养基: WPM + NAA 0.5 mg·L^-1。     

‘唐半夏’无菌繁殖体系建立

以‘唐半夏’块茎为试材,采用组织培养的方法,研究了不同种类及浓度的植物生长调节剂对不定芽诱导、增殖、生根的影响以及电流刺激对不定芽增殖的影响,以期为‘唐半夏’无性快速繁殖体系的建立提供参考依据。结果表明：最适不定芽诱导培养基为MS+1.5 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA,平均每个外植体诱导的不定芽数最多(9.38个)且诱导率为93.75%;采用电流刺激不仅提高不定芽的增殖倍数,且对‘唐半夏’植株的生长产生明显的促进作用。特别是20 mA、5 min处理下,不定芽增殖倍数最大(13.31倍),组培苗生长健壮且出现生根的现象。最适生根诱导培养基为1/2 MS+0.2 mg·L^-1 NAA,生根率为100%,生根数为23.75条。     

赏食兼用百合京鹤高效组培再生体系的优化

百合是重要的高档蔬菜和观赏花卉,基于鳞片的高效组织培养再生体系是百合种球规模化生产繁育的基础。本试验首次使用草甘膦为诱导分化剂,优化赏食兼用百合品种京鹤鳞片外植体的组培再生体系。结果表明：京鹤鳞片不定芽最佳诱导培养基为MS + 1.0 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 2.5 mg · L^-1草甘膦 + 30 g · L^-1蔗糖,诱导系数为6.46,显著高于常规诱导培养;最佳继代增殖培养基为MS + 0.5 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,增殖系数为4.01;最佳鳞茎膨大培养基为MS + 90 g · L^-1蔗糖;最佳生根培养基为1/2MS + 0.3 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,生根系数为23.59。     

薄皮甜瓜离体再生体系的优化

通过器官发生途径诱导形成不定芽,建立薄皮甜瓜‘IVF05’植株再生体系,探讨不同外植体及不同的激素组合对不定芽再生的影响。结果表明,子叶近胚轴端外植体的不定芽再生率为90.00%,子叶节的再生率为85.00%,子叶远胚轴端外植体的再生率为31.43%,下胚轴的再生率为0,子叶近胚轴端是‘IVF05’不定芽分化的理想的外植体。不定芽诱导中最适宜的培养基为MS+ABA 0.5 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1,在此培养基上产生的愈伤较少,能正常分化的不定芽较多,不定芽的生长较快。在MS+6-BA 0.05 mg·L-1的不定芽伸长培养基上,分化的不定芽能够伸长长大。在MS+IAA 0.2 mg·L-1的生根培养基上无根苗容易生根。从外植体培养到获得完整再生植株需50⁶0 d。     

兔眼蓝莓‘提夫蓝’组培快繁

以兔眼蓝莓‘提夫蓝’的幼嫩枝条为试材，采用不同浓度和种类的药剂、培养基及生长素进行组培的方法，研究了杀菌剂、培养基、生长激素对外植体灭菌、丛生芽诱发、组培苗继代繁殖、组培苗生根和组培苗移植的影响，以期为构建全面、高效的蓝莓快繁系统提供参考依据。结果表明：外植体最佳灭菌方法为10%NaClO溶液消毒15 min,污染量减少至17.34%,萌芽数为9.71个；蓝莓茎段中诱发形成丛生芽的最适宜培养基为1/2WPM+1.5 mg·L^-1ZT+0.2 mg·L^-1IBA,诱发成功率为68.36%;组培苗最适宜继代生长培养基为1/2WPM+0.1 mg·L^-1 NAA+1.5 mg·L^-1ZT,增殖倍数为5.53,平均株高达5.15 cm;而组培苗最适生根培养基为1/2WPM+0.5 mg·L^-1IBA+200 mg·L^-1活性炭（AC）,其生根率、有效生根率、根长和生根数量分别为87.16%、87.16%、4.39 cm和6.32条；组培苗最适移栽基质是苔藓，移栽成...     

兔眼蓝莓‘顶峰’的离体快繁技术研究

以兔眼蓝莓‘顶峰’的带芽茎段为外植体,研究了腋芽诱导、增殖、生根和出瓶移栽的最佳培养条件,建立了‘顶峰’的离体快繁技术体系。结果表明:适宜芽诱导的培养基为WPM+ZT0.5mg/L;适宜苗增殖的培养基为WPM+ZT 1mg/L;适宜组培苗生根的培养基为WPM+ZT1.0mg/L+IBA 0.5mg/L。在生根培养基中用河沙代替琼脂粉固定植株,易于清洗出瓶苗根系上粘附的培养液,避免损伤不定根系,60d后组培苗的移栽成活率达80%。     

‘凤丹’牡丹幼胚愈伤组织诱导的优化和再生体系的建立

以‘凤丹’牡丹的幼胚为材料,从取样时期、切割接种方式、基本培养基和植物生长调节剂选择等方面进行再生体系优化。结果表明:授粉后60 d为‘凤丹’牡丹幼胚诱导愈伤的最佳取材时期;完全破碎切割成幼胚薄片比完整胚、1/2胚和1/4胚更容易获得高质量的愈伤组织,且褐化率较低;MS基本培养基添加0.162μmol·L^-1 H₂O₂可提高幼胚愈伤组织诱导率,但会增加褐化率,而在WPM基本培养基中添加不同浓度的H₂O₂,对愈伤诱导率和褐化率的影响不大;WPM基本培养基比MS更适于‘凤丹’牡丹幼胚再生;WPM+2.5 mg·L^-1 2,4-D+0.1 mg·L^-1 6-BA是诱导愈伤的最佳植物生长调节剂组合,诱导率可达93.33%;不定芽和不定根诱导的最佳组合分别为WPM+30 g·L^-1蔗糖+3 g·L^-1植物凝胶+0.5 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1     

兔眼蓝莓“灿烂”组织培养与植株再生研究

以兔眼蓝莓"灿烂"(‘Britewell’)当年生带腋芽半木质化茎段为外植体,研究了不同培养基、激素对兔眼蓝莓"灿烂"植株再生的影响。结果表明:WPM为适宜基本培养基;WPM+(0.5～1.0)mg/L ZT组合是最适的初代幼芽诱导培养基,诱导率达86%以上;WPM+0.1mg/LTDZ+0.1mg/L IBA组合是较合适的增殖培养基,增殖率可达5.48,继代培养宜以较低浓度的TDZ(0.02mg/L和0.05mg/L)交替使用为好;1/2WPM+1.0mg/L 6-BA是较理想的生根培养基组合,有效生根率达63.2%。     

濒危植物太行花的组织培养方法

以濒危植物太行花顶芽为试材,采用植物组织培养方法,研究了植物生长调节剂对太行花无菌苗丛生芽诱导和生根的影响,以期为太行花快速繁殖、资源保护和园林应用提供参考依据。结果表明:在MS+6-BA 0.6 mg·L^-1+IBA 0.15 mg·L^-1培养基中,太行花丛生芽增殖系数较高且无玻璃化现象,为优化的增殖培养基;在MS+IBA 1.5 mg·L^-1培养基中太行花无菌苗生根率为100%,生根系数也最高,可达4.96,为优化的生根培养基。     

长白山笃斯越桔优良单株组培快繁技术的研究

以长白山笃斯越桔优良单株的茎尖、茎段为外植体,对其组培快繁技术进行了研究。结果表明:笃斯越桔的幼芽分化适宜的启动培养基为WPM+ZT 2.0mg/L;增殖培养基为改良MS+ZT 0.5mg/L+IBA 0.15mg/L,继代培养30d后的增殖倍数可达5.3倍;适宜的生根培养基为1/4改良MS+IBA 0.5mg/L,培养50d后的生根率可达80%。将笃斯越桔组培苗在纯沙子中练苗20d,将苗移栽至草炭土∶腐殖土为1∶2的基质中,组培苗移栽成活率达78%。     

金莲花愈伤组织诱导与分化

以金莲花无菌种子苗为试材,采用组织培养的方法,研究了外植体种类、基本培养基和外源激素等对愈伤组织诱导和不定芽再生的影响,以期建立其快速繁殖体系。结果表明:金莲花无菌种子苗的子叶为最佳外植体;MS是诱导愈伤组织的最佳基本培养基;附加6-BA和2,4-D的浓度分别为2.0 mg·L^-1和1.0 mg·L^-1时,愈伤组织的生长量最大,达到72.00%,长势最好;30 g·L^-1芽麦糖作为碳源优于蔗糖;培养基添加75 mg·L^-1的活性炭可有效的抑制褐化现象;金莲花愈伤组织分化的最佳附加植物生长调节剂为NAA 0.5 mg·L^-1和KT 1.0 mg·L^-1。     

‘云想容’海棠茎段组织培养技术

以‘云想容’海棠当年生单芽茎段为研究对象,采用组织培养法,研究了不同消毒剂、消毒时间、不同生长素和细胞分裂素浓度对‘云想容’海棠组织培养的影响,以期建立高效快速的‘云想容’海棠组培快繁体系。结果表明:最佳的消毒方法为用75%酒精消毒30 s后,用0.1%氯化汞处理8 min,该消毒方法能明显降低外植体的污染率,对外植体造成的伤害较小,成活率高达83.3%;最佳腋芽诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,芽生长健壮且诱导率高达90%;MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+TDZ 0.02 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1为最佳增殖培养基,增殖系数为8.63;一步生根法以培养基1/2MS+IBA 1.0 mg·L^-1较好,平均根长5.26 cm,生根率为73.3%,相比较而言,两步生根法可有效促进‘云想容’海棠的生根,生根率可达91.67%。     

铁皮石斛人工繁育技术

以铁皮石斛商品瓶苗和盆栽苗茎段为试材,添加不同浓度6-BA、NAA,诱导茎段腋芽、原球茎和不定根,建立再生体系,快速繁殖铁皮石斛组培苗,以期为秦岭淮河一线以北地区人工繁殖铁皮石斛提供参考依据。结果表明:外植体宜采用70%酒精浸泡20 s,0.1%升汞浸泡8 min消毒;MS+6-BA 3.0~5.0 mg·L^-1+NAA 0.1~1.0 mg·L^-1适合腋芽分化和增殖,分化率92%~100%;1/2MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+土豆泥15%适合原球茎诱导增殖,增殖倍数7.7;1/2MS+NAA 0.3 mg·L^-1生根率为100%;以松针土移栽,成活率83%。     

应用侧芽平切刻伤方法建立牡丹植株再生体系

以牡丹品种‘乌龙捧胜'5～6年生苗中下部饱满的侧芽为外植体,探讨了平切刻伤方法对侧芽诱导不定芽的影响,并研究了侧芽消毒方法、不同植物生长调节剂对不定芽继代增殖与生根的影响。结果表明:先用75%酒精消毒30s,再用0.1%升汞消毒7min,褐化率与污染率较低;采用平切刻伤的侧芽不定芽诱导率显著提高,诱导率为对照的2.6～4.8倍,最高达96%;不定芽增殖最佳的培养基为WPM+6-BA3.0mg·L-1+IAA0.2mg·L-1,增殖率可达到787.05%;生根最佳培养基为1/2改良MS+IBA4.0mg·L-1+NAA1.0mg·L-1,生根率达81.33%,移栽成活率为90%。     

欧李离体叶片再生体系的建立

【目的】以欧李试管苗叶片为外植体进行不定芽再生研究,以期为核果类果树的品种改良、基因遗传转化和功能验证等生物技术育种奠定一定的基础,【方法】使用不同的基本培养基和激素组合促进其不定芽再生并建立再生体系。【结果】结果表明,欧李幼芽增殖对基本培养基类型较敏感,改良MS培养基优于MS、F14和WPM。在MS(改良)+NAA 0.1 mg.L-1+BA 0.2 mg.L-1培养基上,增殖系数为5.6,增殖效果较好。离体叶片不定芽再生的最适植物生长调节剂组合为MS(改良)+TDZ 4.0 mg.L-1+IBA 0.2 mg.L-1,再生率达到63.1%,平均每外植体再生芽数为4.9。暗培养10 d可以提高不定芽再生率。再生不定芽1/2 MS(改良)+IBA3.0 mg.L-1培养基上生根率最高,生根率达93.3%。【结论】在改良MS培养基上TDZ与IBA组合诱导不定芽再生的效果最好。     

茄子组织培养高效再生植株体系的优化

以三月茄为试验材料,探讨了不同浓度6-BA、ZT与IAA对茄子外植体不定芽分化的影响,比较了下胚轴不同接种方式对不定芽分化的影响和不同生根培养基对茄子不定芽的生根效果。结果表明,MS+IAA(0.2 mg/L)+6-BA(2.0 mg/L)+ZT(1.0 mg/L)能加强外植体不定芽的分化能力,带柄子叶的不定芽分化率达到60.2%,下胚轴的不定芽分化率达到98.1%,类Flamingo-bill外植体的不定芽分化率更是达到了100%;与横向平接相比,下胚轴正向扦插能提高不定芽的分化率和不定芽分化系数,还能提前分化;茄子不定芽在MS固体培养基上生根效果最好,生根率达到100%。