SPE-HPLC法同时分离测定板栗花芽中四种内源激素的研究

以板栗花芽为试材,研究了建立其花芽中吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、玉米素核苷(ZR)、赤霉素(GA3)4种内源激素含量的定性、定量分析方法。结果表明:采用80%的预冷甲醇水溶液浸提板栗枝芽中内源激素IAA、ABA、GA3、ZR,提取效果较好;采用SPE-C18小柱固相萃取技术进行纯化,采用Symmetry 300TMC18(5μm,4.6mm×250mm),以甲醇:0.075%冰醋酸(90∶5,V∶V)为流动相,在流速1.0mL/min、柱温30℃,检测波长219nm的条件下,进行梯度洗脱,分离效果理想,加标回收率达到89.92%~105.30%;该方法准确、灵敏、重现性好。     

高效液相色谱测定蓝莓叶片内源激素的方法研究

以贵州省主要栽培的兔眼蓝莓品种‘园蓝’叶片为试材,利用高效液相色谱仪(HPLC)建立一种同时测定蓝莓叶片中3种内源激素生长素(IAA)、脱落酸(ABA)和赤霉素(GA3)含量的方法。以Thermo U3000Syncronis C18(250 mm×4.6 mm)色谱柱,流速为1 m L/min,进样量10μL,柱温为35℃,波长为254 nm,流动相A相为纯甲醇,B相为p H值3.2的冰乙酸水溶液[V(A)∶V(B)=5.5∶4.5]等度洗脱。结果表明,蓝莓叶片中3种内源激素的分离效率良好,IAA、ABA和GA3平均加标回收率分别为98.91%、95.64%、90.03%,相对标准偏差(RSD)分别为4.65%、3.11%、5.22%,为蓝莓内源激素的分离和测定提供了一种有效、准确的方法。     

利用HPLC法对香蕉根中四种内源激素测定方法的优化

研究了高效液相色谱法测定香蕉根中4种内源激素:赤霉素(GA3)、3-吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)和玉米素(ZT)的最佳条件。采用Agilent ZORBAX SB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)进行分离测定。结果表明:GA3、IAA、ABA测定的最佳条件是甲醇∶乙腈∶磷酸缓冲液(pH 3.5)为15∶20∶65为流动相,检测波长为210nm。ZT测定最佳条件为:甲醇∶乙腈∶磷酸缓冲液(pH 3.5)为15∶15∶70为流动相,波长265nm。4种激素的进样量为20μL,流速为1mL/min,柱温为35℃。选用外标法进行了定量测定。试验结果表明其回收率高,是一种快速有效的测定方法。     

超高效液相色谱—串联质谱法检测水果中6种植物生长调节剂

以苹果、葡萄、猕猴桃、桃和脐橙为试材,建立了水果中6种常用植物生长调节剂(矮壮素、赤霉素、氯吡脲、多效唑、噻苯隆和2,4-D)的超高效液相色谱—串联质谱检测方法(UPLC–MS/MS)。试样采用改进的QuEChERS方法进行前处理,用1%醋酸乙腈提取,选择ODS+MgSO_4进行净化,采用电喷雾离子源(ESI)多反应监测(MRM)模式检测,外标定量法。结果表明,6种植物生长调节剂在1~100μg·kg~(-1)质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,4个添加水平下(1、20、50和100μg·kg~(-1))的加标回收率在60.77%~119.43%之间,相对标准偏差(RSD)在0.18%~32.94%之间。苹果、葡萄、猕猴桃、桃和脐橙中6种植物生长调节的检出限(S/N=3)依次为0.01~0.14、0.01~0.18、0.01~0.08、0.003~0.11和0.01~0.08μg·kg~(-1),定量限(S/N=10)依次为0.02~0.46、0.03~0.59、0.04~0.28、0.01~0.38和0.03~0.25μg·kg~(-1)。     

杧果无胚果实内源激素的分离与测定

采用高效液相色谱(HPLC)法测定了杧果无胚果实及正常果实果肉的内源激素(GA3、IAA、ABA和ZT)含量。结果显示:无胚果实果肉的GA3及ZT含量与正常果实无显著差异;无胚果实果肉的IAA含量高达19.91μg·g-1,而正常果实果肉仅为2.44μg·g-1,差异极显著;无胚果实与正常果实的ABA含量分别为3.44μg·g-1和0.023μg·g-1,差异显著。     

基于UPLC-MS/MS的枇杷不同组织萜类代谢物鉴定

【目的】了解枇杷不同组织中的萜类代谢物成分及含量,为高值化利用提供依据。【方法】利用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）广泛靶向代谢组学的方法,分析鉴定安徽大红袍枇杷叶片、花、果皮、果肉和种子等组织中的萜类代谢物成分,利用R软件进行主成分分析和聚类分析,比较不同组织中的萜类物质成分和含量差异。【结果】安徽大红袍枇杷叶片、花、果皮、果肉和种子等5个组织中,共鉴定出萜类代谢物51种,其中单萜1种、倍半萜1种、二萜3种、三萜42种、三萜皂苷4种,其中紫苏子醇、脱氢枞酸、白桦脂醇、脱氢山楂酸、23-羟基白桦脂酸等35种物质在枇杷中未见报道;各组织萜类代谢物分别为叶片50种、花49种、果皮49种、果肉45种、种子40种,所有组织共有成分38种,占51种萜类物质的74.5%。叶片、花、果皮、果肉和种子中萜类代谢物相对含量>1%的物质各有14、15、11、13、10种,各占其总萜类物质相对含量的88.46%、92.78%、92.37%、94.62%和96.28%,且以三萜类物质为主,5个组织共有的主要萜类物质有8种,分别为2α,19α-二羟基-3-氧熊果-12-烯-28-酸、科罗索...     

甜樱桃休眠花芽内源激素的高效液相色谱测定

以甜樱桃休眠花芽为试材，提取生长素(IAA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)、玉米素核苷(ZR)和脱落酸(ABA)5种内源激素，通过设定不同的溶液配比，摸索出了适宜分离这5种内源激素的流动相及检测条件，得到了满意的分离效果。     

GPC结合超高效液相色谱-串联质谱法测定韭菜中50种农药残留

利用GPC结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测韭菜中50种农药残留。样品用1%乙酸乙腈震荡提取,经凝胶色谱净化,收集9~21min的流出液,在线浓缩近干并用乙腈∶水(1∶3)溶解定容至2ml,收集于2ml样品瓶中,过0.22μm滤膜,以Waters BEHC18色谱柱分离,采用多反应检测模式进行检测,外标法定量。加标水平为0.05mg/kg和0.1mg/kg时,回收率在65.2%~102.1%之间,相对标准偏差小于20%。农药在线性范围内相关系数均大于0.99。方法具有提取效率高,净化效果好,准确度高、灵敏等优点,适用于韭菜中多农药残留检测。     

甜瓜不同性别花蕾发育中激素和多胺的变化

 以甜瓜雌雄异花同株和雄全同株近等基因系为材料，采用高效液相色谱(HPLC)技术，分析雌花、雄花和两性花4种内源激素和4种多胺含量的动态变化。结果显示，雌花和两性花发育初期和后期GA₃含量高于雄花；多数时期雄花ZT和IAA含量高于雌花和两性花；雄花发育中、后期 ABA含量较大幅度上升，且明显高于雌花，两性花ABA含量变化趋势与雌花相近，但整体明显高于雌花；ZT/GA₃比值雄花高于雌花和两性花。由此表明，较高的GA₃含量，较低的ZT和IAA含量有利于雌蕊的发育，较高的ABA含量有利于雄蕊中、后期的发育。花蕾发育初期，尸胺(Cad)含量从高到低依次为雌花、两性花和雄花，随着发育的进行，雄花和两性花中Cad含量呈现较大幅度上升，而雌花始终保持在相对较低的水平。因此，相对较高的Cad含量可能有利于早期雌蕊的发育，较低的Cad含量有利于雄蕊的发育，而后期则相反，高含量的Cad有利于雄蕊的成熟；高含量的Spd可能有利于早期雌蕊的发育。     

3个乌桕品种叶片类黄酮成分研究

以‘连桕1号’‘云台红桕’和‘云台金桕’为研究对象,利用超高效液相色谱-质谱联用技术,定性定量分析其叶片转色前和转色后类黄酮成分与含量。结果表明：3个乌桕品种中共检测到13种类黄酮物质,分别为儿茶素、二氢杨梅素、表儿茶素、芦丁、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、二氢槲皮素、槲皮苷、二氢山奈酚、木犀草素、槲皮素、柚皮苷查尔酮、柚皮素和山奈酚,其中槲皮苷、槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷和芦丁为3个乌桕品种共有的主体成分。槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷是‘云台红桕’转色后叶片呈现红色的主要色素成分;芦丁是‘云台金桕’叶片变黄的主要原因。类黄酮类型主要为槲皮甘类、槲皮素类、芦丁类和儿茶素类。‘连桕1号’叶片转色后槲皮甘类高于‘云台红桕’和‘云台金桕’,‘云台红桕’叶片转色后槲皮素类高于‘连桕1号’和‘云台金桕’,‘云台金桕’叶片转色后芦丁类高于‘连桕1号’和‘云台红桕’。     

衍生化结合分散固相萃取–UPLC–MS/MS法测定果品中EBDCs类农药残留

建立了果品中乙撑双二硫代氨基甲酸酯(盐)类(简称EBDCs)残留的液质串联确证快速检测方法。果品样品中的EBDCs经碘甲烷甲基衍生化后用分散固相萃取(QuEChERS)提取和净化,利用超高效液相色谱—串联质谱(UPLC–MS/MS)在多反应离子监测模式下进行检测,采用基质匹配标准曲线校正,外标法定量。以碎片离子对m/z 241.1/117.1、m/z 241.1/193.0进行定性分析、m/z 241.1/134.0进行定量分析。结果表明,代森锌、代森锰、代森锰锌、代森钠和代森联的甲基化衍生产物亚乙基–1,2–双二硫代氨基甲酸甲酯在不同水果中具有不同的基质效应;在0.005~1.000 mg·kg~(-1)(以二硫化碳计)之间具有良好的线性关系,相关系数为0.9948~0.9996。在苹果、桃、葡萄、柑橘和香蕉果实样品中添加不同水平乙撑双二硫代氨基甲酸酯(盐)时,回收率为82.6%~98.8%,相对标准偏差为0.7%~8.8%。本方法的检出限(以CS2计)为0.6~1.0μg·kg~(-1),定量限(以CS2计)为10μg·kg~(-1)。本方法简便、快速、准确,可用于果品中乙撑双二硫代氨基甲酸酯(盐)的残留确证检测。     

超高效液相色谱法分析丝瓜酚类物质组分及其含量

建立超高效液相色谱快速测定丝瓜中酚类物质组分及其含量的方法,为丝瓜酶促褐变的后续研究提供技术支持。液相色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为甲醇(A)/0.3%乙酸水溶液(B),柱温32℃,进样量2μL,流速为0.25 m L·min~(-1)。采用梯度洗脱,洗脱程序0~0.5 min,95%B;0.5~17.5 min,95%~67.5%B;17.5~18 min,67.5%~95%B。检测波长选取283 nm。14种酚类化合物标准品在18 min内完全分离,样品中检测出13种酚酸。线性范围在0.05~4mg·L-1,检出限(S/N=3)为0.004~0.049 mg·L~(-1),决定系数均大于0.999,精密度、重复性、稳定性相对标准偏差均小于5%。平均回收率在95.70%~106.89%,相对标准偏差在0.32%~4.71%。龙胆酸为丝瓜样品中主要酚酸,其次是绿原酸、多巴胺、L–酪氨酸,再次是焦性没食子酸、原儿茶酸、香草酸、儿茶酚、表儿茶酸、对羟基苯甲酸、丁香酸、4–甲基儿茶酚、对香豆酸。     

桃果实叶片和土壤草甘膦和氨甲基膦酸残留的HPLC-MS/MS检测方法

建立了桃果实、叶片和土壤中草甘膦(PMG)及其代谢物氨甲基膦酸(AMPA)的高效液相色谱—串联质谱(HPLC-MS/MS)的检测方法。样品经碳酸氢钠水溶液和二氯甲烷共同提取,以9–芴基甲基三氯甲烷为衍生剂室温下衍生3 h,多反应监测(MRM)模式检测。草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸在1~2 000μg·L~(-1)的质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999;在0.01~1.0 mg·kg~(-1)添加水平下平均回收率为76.7%~93.0%,相对标准偏差(RSD)为2.2%~8.7%;方法定量限(LOQ)均为0.01mg·kg~(-1);适用于桃果实和叶片及土壤中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸残留的快速检测。     

超高效液相色谱—三重四级杆质谱联用法同时定量荔枝果实组织中IAA和ABA

应用超高效液相色谱—三重四级杆质谱联用仪(UPLC-MS/MS),探索建立同时定量测定荔枝中内源激素吲哚-3-乙酸(IAA)和脱落酸(ABA)含量的方法.设定IAA和ABA标准品测定所需色谱和质谱条件参数,比较不同抗氧化剂、提取剂、除色剂、萃取剂、提取方式、pH值调节对IAA和ABA的保留行为及富集效果的影响,确认适合...     

高效液相色谱法测定花生仁中甲咪唑烟酸残留

目前花生仁中甲咪唑烟酸残留量的检测是参考国标中茶叶农残的方法,花生仁基质含有大量的油脂和蛋白质,这与茶叶基质有显著区别,且该方法只能定性。本文建立了一种高效液相色谱法定量检测花生仁中甲咪唑烟酸残留量的方法。花生仁样品采用乙腈溶液提取后再经过除脂净化处理,以乙腈:0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(加入0.1%的三乙胺,磷酸调pH3.0)体积比1:3作为流动相进行高效液相色谱紫外检测器分析。结果表明:甲咪唑烟酸标准在0~1.2mg/L范围内线性关系良好(R2=0.9999),检出限为7μg/kg;加标回收率为91.1%~98.9%;精密度、重复性、稳定性都较好。该方法操作简便、分离度好、结果准确,能很好地满足花生仁中甲咪唑烟酸残留量检测的要求。     

高效液相色谱法测定菠萝果实维生素C含量

本研究用高效液相色谱法测定菠萝果实的维生素C含量。系统采用Venusil XBP-C18柱(4.6×250 mm,5μm),柱温35℃,以0.2%偏磷酸水溶液作流动相,流速1 m l.m in-1,检测波长240 nm,维生素C浓度在0.1~1.0 mg.m l-1范围内有良好的线性关系。该方法回收率99.89%,标准偏差0.91,变异系数2.08%,操作简便、灵敏、可靠,适用于菠萝维生素C含量的测定。     

海棠果实中脱落酸的高效液相色谱测定

以‘草莓果冻’海棠为试材,采用高效液相色谱结合固相萃取法建立了一种用于海棠果实中脱落酸(ABA)含量检测的方法。通过优化前处理及色谱条件,最终确定取样量为3g,用80%预冷甲醇浸提12h,经不溶性PVPP吸附酚类等杂质,石油醚脱色,乙酸乙酯萃取,C18固相萃取小柱进一步纯化,再经甲醇∶1.0%乙酸溶液(45∶55,v/v),流速为1.0mL·min~(-1)进行洗脱,C18色谱柱分离,进样体积20μL,检测波长为254nm,柱温45℃。结果表明:该方法在0.01~0.50μg·mL~(-1)范围内线性关系良好,R~2=0.999 8,3个浓度水平下平均回收率均大于70%。采用该方法对‘草莓果冻’海棠半同胞子代中14个单株落果初期果实进行了测定,发现果实中脱落酸含量最低为0.026 9μg·g~(-1),最高含量为0.357 9μg·g~(-1),差别较大,该浓度与已有报道中的测定结果处于同一数量级水平。该方法的建立对于海棠的选育和生长发育进一步研究具有重要意义。     

利用液质联用技术分析人参叶中化学成分

以人参叶为试材,以50%乙醇溶液作为提取液,以60、180℃为提取温度提取人参叶中皂苷。选用反相C18色谱柱,流速0.5mL·min-1;柱温30℃。以二极管阵列检测器和质谱检测化学成分。结果表明:人参叶提取物中主要化学成分为人参皂苷,不同温度提取人参叶的提取物中人参皂苷的种类和含量有较大的差别。60℃提取人参叶的提取物中人参皂苷Re、Rg1、Ra1、Rf、Rc、Rb1、Rb2、Rg2和Rd含量较高,并且可以提取到20R-Rg3和20S-Rg3。180℃提取人参叶的提取物中人参皂苷Rg6、F4、Rk3、Rh4、20R-Rg3、20S-Rg3、20R-Rs3、20S-Rs3、Rk1、Rg5、Rs5和Rs4含量明显升高。高温高压可以将人参叶中常见皂苷降解成人参皂苷20R-Rg3、20S-Rg3以及人参皂苷Rk1、Rg5、Rg6、F4、Rs5和Rs4不饱和皂苷,该试验为研究与分析人参叶中的化学成分提供了系统准确的方法。