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新疆牛群中检出赤羽病中和抗体 总被引:1,自引:0,他引:1
对喀什地区县市的4个牛场和个体养牛区采取被检牛血清样32份,在伊犁6个牛场和个体牛区采取被检牛血清样33份,共计65份血样,采用细胞微量中和试验及琼扩试验,共检出3份阳性样,阳性率为3%。 相似文献
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为了比较进口胎牛血清、国产胎牛血清和国产新生牛血清的细胞培养效果,以2批进口胎牛血清、3批国产胎牛血清和2批国产新生牛血清为试验材料,采用细胞贴壁传代培养、最大增殖浓度和倍增时间以及集落形成率3种方法,比较了7批供试血清对VERO、CHO-K1、MDCK和Hela 4种细胞的培养效果。结果表明:连续传代培养时所有牛血清均有较好的促细胞生长的效果;进口胎牛血清、国产胎牛血清和国产新牛血清对4种细胞的平均最大增殖密度为67.8×104、62.1×104和64.8×104 cfu·mL-1,平均倍增时间为22.2、22.5和22.7h;对VERO、CHO-K1和Hela细胞的平均集落形成率为59.2%、57.6%和50.9%。3种牛血清对群体性细胞培养时效果差别不明显,对单细胞克隆培养时胎牛血清优于新生牛血清。 相似文献
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目的;制备抗磷酸酪氨酸抗体。方法:以EDC(碳化二亚胺)交联法合成磷酸酪氨酸牛血清白蛋白(P-Tyr-BSA);以P-Tyr-BSA免疫新西兰免,抗血清经硫酸该盐析和DEAE纤维素柱层析纯化;以琼脂糖双扩法测定抗体效价。结果:得到抗血清效价为1:32,抗血清与牛血清蛋白(BSA)交叉反应的效价为1:2。纯化的抗体与磷酸酪氨酸牛血清白蛋白、磷酸酪氨酸卵清蛋白、磷酸丝氨酸牛血清白蛋白、磷酸苏氨酸牛血清白蛋白反应效价分别为1:32、1:16、1:2、1:2,所得抗体蛋白量为120mg。纯化的抗体在醋酸纤维素薄膜上电泳为单一区带。结论:用此法制备得的抗体专一性高,交叉反应低,抗体量大。 相似文献
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不同犊牛血清配制PBS培养液培养小白鼠胚胎的效果王文英,马世援,仲跻峰,宋杰,刘云波(山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南250100)(山东省医学科学院实验动物中心)在体外培养条件下,犊牛血清对维持早期胚胎的生活力是非常重要的。因此在胚胎移植实践中,... 相似文献
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制备抗磷酸酷氨酸抗体。方法;以EDC交联法合成磷酸酷所酸牛血清白蛋白;以P-Tyr-BSA免疫新西兰兔,抗血清经硫酸铵盐析和DEAE纤维素柱层纯化;以琼脂糖双扩法测定抗体效坐。结果:得到抗血清效价为1:32,抗血清与牛血清蛋白交叉反应的效价为1:2。纯化的抗体与磷酸酷氨酸的牛血清白蛋白,磷酸酪氨酸卵清蛋白,磷酸丝氨酸牛血清白蛋白,磷酸苏氨酸牛血清白蛋白反应效价分别为1:32,1:16,1:2,1: 相似文献
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以共价交联法将葡萄糖氧化酶固定化在丝素蛋白膜上,探讨丝素酶膜在不同体系下的储存稳定性。研究结果表明:糖醇类小分子物质(乳糖、肌醇、甘露醇)和聚乙二醇、牛血清白蛋白等大分子物质组成的混合体系对酶膜存在着明显的稳定作用,聚乙二醇、牛血清白蛋白、乳糖等单一体系也能降低酶膜在储存过程中的失活作用。其中牛血清白蛋白+肌醇+赖氨酸这一体系稳定作用最为显著,78d储存后酶膜仍能保持原来活力的92.1%(4℃)、82.1%(室温) 相似文献
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牛血清乙酰胆碱脂酶的分离纯化 总被引:3,自引:0,他引:3
以牛血清为原材料,采用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G—100凝胶柱和DEAE-纤维素DE23柱层析对牛血清中的乙酰胆碱酯酶进行分离纯化。结果表明,经以上三步分离纯化后,可获得电泳纯的乙酰胆碱酯酶,最终收集的酶液经聚丙烯酰胺pAGE凝胶电泳鉴定后,仅出现一条谱带;对Sephadex G-100凝胶和Sephadex G-75凝胶分离纯化乙酰胆碱脂酶的效果进行了比较.发现两者对乙酰胆碱酯酶的分离效果相差不大。 相似文献
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诺氟沙星与牛血清白蛋白及卵清蛋白结合物的合成 总被引:7,自引:0,他引:7
采用碳二亚胺法制备诺氟沙星与牛血清白蛋白(BSA)的结合物,作为诺氟沙星酶联免疫用的免疫原。经紫外光谱法测定,每分子牛血清白蛋白连接的诺氟沙星分子数为16.1个。分别用碳二亚胺法和混合酸酐法制备诺氟沙星与卵清蛋白(OA)的结合物,作为诺氟沙星酶联免疫测定用的包被抗原。经紫外光谱法测定,每分子卵清蛋白连接的诺氟沙星分子数分别为5.8和1.9个。 相似文献
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采用碳二亚胺法制备诺氟沙星与牛血清白蛋白(BSA)的结合物,作为诺氟沙星酶联免疫用的免疫原。经紫外光谱法测定,每分子牛血清白蛋白连接的诺氟沙星分子数为16.1个。分别用碳二亚胺法和混合酸酐法制备诺氟沙星与卵清蛋白(OA)的结合物,作为诺氟沙星酶联免疫测定用的包被抗原。经紫外光谱法测定,每分子卵清蛋白连接的诺氟沙星分子数分别为5.8和1.9个。 相似文献
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【目的】探索一次性过滤截留新生牛血清中细菌、霉菌、支原体等微生物及免疫球蛋白的工艺技术,为新生牛血清规模生产提供技术支撑。【方法】采用陶瓷复合膜分离生产新生牛血清,经细菌、支原体、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体、细菌内毒素等微生物及免疫球蛋白检测,并进行新生牛血清产品细胞培养试验。【结果】陶瓷复合膜能一次性成功截留新生牛血清中的细菌、支原体、细菌内毒素、BVDV抗体,过滤后细菌内毒素含量低于0.1EU/mL,免疫球蛋白去除率在97.00%以上;以其培养SP2/0细胞的细胞倍增时间、单克隆效率等指标接近于进口Hyclone胎血牛清水平。【结论】采用陶瓷复合膜分离工艺生产新生牛血清,实现了一次性有效过滤截留牛血清中细菌、霉菌、支原体等微生物及免疫球蛋白的目标,且能够满足细胞生长的营养需求,为大批量生产优质新生牛血清产品奠定了基础。 相似文献
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鸭病毒性肝炎病毒细胞培养技术的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
采用“带毒一同步培养”新技术和特殊培养条件,延长病毒吸附时间,提高犊牛血清灭能温度,降低犊牛血清用量,在维持液中添加100mM,NaCl等,成功地将鸭病毒性肝炎标准Ⅰ型病毒ATCC株适应鸡胚成纤维细胞。连续传代至第6代时出现CPE,第9代时,CPE呈出规律性,接毒后46小时CPE达90%,其特征是细胞变圆凝固性坏死,脱落。 相似文献
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【目的】探索一次性过滤截留新生牛血清中细菌、霉菌、支原体等微生物及免疫球蛋白的工艺技术,为新生牛血清规模生产提供技术支撑。【方法】采用陶瓷复合膜分离生产新生牛血清,经细菌、支原体、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体、细菌内毒素等微生物及免疫球蛋白检测,并进行新生牛血清产品细胞培养试验。【结果】陶瓷复合膜能一次性成功截留新生牛血清中的细菌、支原体、细菌内毒素、BVDV抗体,过滤后细菌内毒素含量低于0.1 EU/mL,免疫球蛋白去除率在97.00%以上;以其培养SP2/0细胞的细胞倍增时间、单克隆效率等指标接近于进口Hyclone胎血牛清水平。【结论】采用陶瓷复合膜分离工艺生产新生牛血清,实现了一次性有效过滤截留牛血清中细菌、霉菌、支原体等微生物及免疫球蛋白的目标,且能够满足细胞生长的营养需求,为大批量生产优质新生牛血清产品奠定了基础。 相似文献
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本文对河南郏县红牛十三项血液生化指标进行了测定。其中血清电解质测定结果表明,血清钾、钠、钙、无机磷等,与国内徐州黄牛、冀南黄牛、南阳黄牛所测定的数值比较接近。本文所测郏县红牛血清氯离子数值(371.78±34.97毫克%)与Meier氏测定黄牛血清氯离子的结果(368.794毫克%)很接近。郏县红牛血清谷丙转氨酶的测定与冀南黄牛比较接近。郏县红牛血清谷草转氨酶的测定结果,成年牛为108.05±23.49金氏单位。郏县红牛血清胆红素定量与徐州黄牛及J.obara(1967)所测黄牛的数值比较一致。郏县红牛血清硫酸锌浊度测定结果表明成年牛比幼牛较高,均值达12.25±2.89孔氏单位。郏县红牛血清麝香草酚浊度测定结果,成年牛为4.102±1.738麦氏单位。郏县红牛血清蛋白质的测定结果与有关资料相比,也比较接近。 相似文献
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成功克隆到O 型口蹄疫病毒(FMDV)太保毒株3ABC 基因片段中的3A、3B、3C基因,并将它们插入pGEX-4T-1 或24B11表达载体构建了重组表达质粒,经Western blotting 分析表明,表达的3A、3B蛋白可与FMDV阳性血清发生特异性反应,但表达的3C蛋白没有反应。以纯化的3A、3B表达蛋白为抗原建立间接ELISA,对4组背景清楚的试验牛血清进行检测,结果表明3A、3B表达蛋白与非免疫对照组(C组)和灭活疫苗反复免疫组(CI组)牛血清均不发生反应,与未免疫直接攻毒组(D组)和免疫后攻毒组(I组)牛血清均发生反应;D组和I组3A、3B表达蛋白抗体持续时间最长可达90 d以上,3A和3B表达蛋白最早检出相应抗体的时间分别为攻毒后第 5天和第10天。 相似文献
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成功亚克隆了口蹄疫病毒(FMDV)太保毒株3ABC中VPg2基因,并将其插入pGEX-4T-1表达载体构建重组表达质粒,Western blotting分析表明,表达的VPg2蛋白与FMDV阳性血清发生反应。以VPg2表达蛋白为抗原建立间接ELISA方法,对背景清楚的试验牛血清进行检测,结果VPg2表达蛋白与空白对照组(C组)和灭活疫苗反复免疫组(CI组)牛血清均不发生反应,与未免疫直接攻毒组(D组)和免疫后攻毒组(I组)血清均发生反应;对D组和I组,VPg2表达蛋白抗体持续时间最长,可达90d,最早呈阳性反应时间为攻毒后第10天。VPg2表达蛋白抗体持续时间与先前测定的3ABC表达蛋白抗体几乎相同。用VPg2-ELISA方法检测2 170份进口阴性牛血清,12份出现假阳性,假阳性率为0.55%,而用3ABC-ELISA方法检测,48份出现假阳性,假阳性率为2.21%。 相似文献