双孢蘑菇A15菌株的ISSR分子标记聚类分析

对分离纯化的19个双孢蘑菇菌株进行聚类分析。本研究以分离纯化的双孢蘑菇A15菌株和国内外主栽的18个双孢蘑菇菌株为材料,采用ISSR分子标记技术,利用已筛选到的8条ISSR-PCR反应引物进行菌株间亲缘关系研究。结果表明8条引物共扩增出多态性DNA条带137条,多态比率为93.51%,供试的19个菌株两两间的相异系数范围从0.08～0.70,在不同的相异系数水平上,可分为多种不同的菌株类群,说明19个双孢蘑菇菌株具有较丰富的遗传多样性。本研究为双孢蘑菇的种性鉴别和杂交育种提供一定的参考。     

栽培三七内生真菌优势种群分离鉴定

栽培三七为五加科人参属多年生草本药用植物,旨在从药用植物栽培三七中分离出能够产生与宿主植株相同或者相似的生物活性物质的内生真菌菌株。以栽培三七为材料,开展栽培三七内生真菌的分离、纯化,依据传统形态特征并结合真菌的ITS序列进行菌株鉴定。初步从栽培三七中共分离得到内生真菌24株,鉴定为12属（种）,栽培三七不同器官组织的内生真菌种类和数量差异较大,根和叶中最多,茎中较少。其中从叶片中分离出11株,6属;茎中分离出1株,1属;根中12株,5属。统计结果表明叶片中分离出的菌株优势种为普通青霉菌(Penicillium commune)、胶孢刺盘孢菌(Colletotrichum gloeosporioides),均占叶片菌株分离的27.28%;须根中分离出的菌株优势种为球毛壳菌(Chaetomidium arxii),占须根菌株分离的72.73%。栽培三七内生真菌具有丰富的生物多样性,实验结果为进一步探讨栽培三七内生真菌与生理活性物质之间的关系提供材料基础和实验参数。     

基于稻、麦秸秆工厂化栽培双孢蘑菇的理化性质变化研究

为研究稻、麦秸秆工厂化栽培双孢蘑菇(Agaricus bisporus)的差异,以60%稻草配方和100%麦草配方的培养料为栽培基质,研究发菌料在工厂化栽培双孢蘑菇过程中的p H、电导率、含水量、灰分、碳氮含量、C/N等理化性质及木质纤维素含量的变化情况。结果表明,与100%麦草配方相比,60%稻草配方栽培双孢蘑菇的培养料电导率、灰分含量较低,而第二潮菇后的碳氮含量迅速升高。三潮菇结束后,60%稻草配方的培养料纤维素与木质素的降解率低于100%麦草配方,而半纤维素的降解率差异不大。研究初步探明了稻、麦秸秆在双孢蘑菇栽培过程中的理化性质差异,为进一步利用稻秸秆工厂化栽培双孢蘑菇提供理论依据。     

尖孢镰刀菌T-DNA插入突变体的筛选及插入基因分析

在建立T-DNA插入突变体库的基础上,为筛选出致病力明显下降的突变体并明确其插入位点信息,对突变体的培养表型和致病性差异进行测试,研究结果为进一步阐明尖孢镰刀菌致病分子机制奠定基础。在前期构建的T-DNA插入突变体库中,采用PCR检测筛选了300株T-DNA插入突变体,观察和测定菌落形态、生长速率、产孢量、遗传稳定性等生物学性状,用海棠胚根接种法比较突变体致病力差异,对筛选到的致病力明显减弱的突变体进行插入位点侧翼序列分析及Southern杂交分析。结果显示,283个供试突变体都已插入目的基因,并伴有绿色荧光。将T-DNA插入突变体连续转接培养5代后,在含潮霉素B的培养基上能稳定遗传,且菌落形态和颜色无明显改变;在对283株突变体进行致病性测定中,87.9%的突变菌株致病力减弱,在致病力减弱的突变体中,HS2-520、HS2-1016和HS2-2109几乎丧失了致病性。选取8株致病力明显减弱的突变体进行Southern杂交分析,结果显示,其中6株突变体为单拷贝插入菌株,1株为双拷贝插入菌株。对这8株突变体进行了TAIL-PCR侧翼序列扩增,经公司测序,与野生菌株HS2基因组序列比对后获...     

利用分子标记辅助育种技术选育低温高产草菇菌株

利用RAPD分子标记技术对11个草菇菌株进行了遗传背景分析,发现泰国No.1菌株与低温菌株VH3的亲缘关系较远,可作为杂交育种的另一亲本菌株。收集两亲本的孢子并进行单孢杂交配对,采用低温筛选试验淘汰掉部分不耐低温的菌株,随后利用交配型基因分子标记验证杂交子的真实性,最终共获得77个杂交子。将部分杂交菌株进行低温出菇栽培试验,结果显示:草菇杂交菌株V6T3-1的子实体农艺性状较好,且生物转化率达到28.26%,远高于亲本菌株VH3与泰国No.1。     

甘蓝型油菜隐性上位互作核不育系统不育系材料选育中常见的育性分离及基因型判断

隐性上位互作核不育授粉控制系统是甘蓝型油菜杂种优势利用安全、高效的授粉控制系统,因其育性稳定、恢复源广等优点,在油菜杂交育种中越来越受到重视.根据隐性上位互作核不育系的遗传机理,结合多年从事隐性上位互作核不育三系选育的育种实践,梳理出在甘蓝型油菜隐性上位互作核不育系材料选育中,自交或杂交下一代常见的不育株分离比例,并依...     

水稻三明显性核不育基因的初步鉴定

2001年在福建省尤溪县西城镇凤元村进行两系核不育系育性鉴定时, 在SE21S/Basmati 370组合编号为S221的800多株F₂代分离群体中发现1株与其他不育株的花粉败育形态不同的植株。经测交、回交、姐妹交的后代育性分离调查, 不育株与可育株呈1︰1分离, 以不育株为母本与普通品种配制杂交组合, 其后代育性呈1︰1分离, 可育株后代分离不出不育株, 表明S221不育性受核内1对显性不育基因控制。     

梯棱羊肚菌单孢分离、交配型基因鉴定及其菌丝融合杂交研究

选用3个梯棱羊肚菌(Morchella importuna)的栽培菌株(F0),采取显微操作法从其正常出菇的子囊果获得F1单孢群体,研究F1单孢群体交配型基因分型及菌丝生理特性,进行不同交配型的F1单孢平皿混合配对试验,筛选出杂交子。结果表明:显微操作可以有效获得单孢菌株,成功率达35.34%;相比较MAT1/MAT2引物对,利用P8/P6引物对可以较好地扩增出MAT1-1-1、MAT1-2-1基因,从而区分出单孢的交配型基因类型,检出率达87.5%;选取部分不同交配型的F1单孢进行平皿混合配对,筛选出1株杂交菌株,为羊肚菌单孢杂交育种奠定了基础。     

大豆不育细胞质资源的发掘与鉴定

利用质核互作雄性不育系NJCMS1A的4个保持系为核背景测验种（父本）从大豆资源中筛选新不育细胞质,发现与71个不同来源的栽培大豆和17个野生大豆资源杂交所获得的103个杂交组合中有8个组合的后代出现不育株,经进一步的正反交和回交试验,发现来源于山西的野生材料N23168和来源于湖北的栽培品种N21566具不育细胞质。另一方面     

杜鹃花属植物种质创新研究进展

杜鹃花是中国传统十大名花之一,栽培历史悠久,具有较高的观赏价值.相对于中国丰富的野生杜鹃花资源,国内杜鹃花种质创新进展缓慢.目前杂交育种仍是杜鹃花属植物种质创新的主要技术手段.杂交亲本的选择、正反杂交(向性)、杂交亲本的亲缘关系及系统分类地位等都会影响杂交的亲和性,因杂交亲和性的差异,受精障碍可能发生在受精前、后的各个...     

运用交配型基因分子标记辅助羊肚菌单孢杂交育种

为了建立一种分子标记辅助育种技术体系,增加羊肚菌单孢杂交育种成功机率,本研究以梯棱羊肚菌(F0)为供试亲本,通过单孢分离和交配型基因鉴定获得100个单孢子,从中筛选出20个培养性状良好的单交配型杂交亲本,其中MAT1-1交配型和MAT1-2交配型各10个。利用不同交配型单孢菌株两两杂交获得100个杂交组合并进行出菇实验。对子囊果的农艺性状、产量进行测定,并对杂交菌株交配型基因进行验证,于第二年再次进行单孢杂交及杂交菌株子代栽培试验。结果表明,F₁代羊肚菌优质高产组合为TLD32×9、TLD22×15、TLD2×9,最高产量达到了216 kg/667 m²,远高于亲本梯棱羊肚菌的180 kg/667 m²,F₂代羊肚菌高产稳产菌株为TLD22×15,最高产量达到了266 kg/667 m²,且子囊果菌盖大,菌柄小,不易碎,商品性状良好。本研究建立的以交配型基因为基础选育羊肚菌杂交新品种的高效杂交育种技术体系,有助于促进羊肚菌优良品种选育并为其杂交育种提供理论依据。     

双孢蘑菇贮运保鲜技术

双孢蘑菇是世界性栽培的重要食用真菌之一,其保鲜期短是双孢蘑菇产业发展和市场开拓的瓶颈。从适时采收、修整分级、及时预冷、包装、适温贮藏、保鲜剂处理、运输等方面总结了双孢蘑菇的贮运保鲜技术。     

萍乡核不育水稻的新恢复系及遗传分析

在构建萍乡核不育水稻显性核不育基因定位群体时,我们意外发现一些前人报道的保持系表现出恢复性,为此本试验对这几个品系与萍乡核不育水稻杂交后代育性分离做了系统的分析。结果表明,萍乡核不育水稻不育单株与可育单株杂交F₁代的不育株与可育株按1∶1分离,高温自交后代不育株与可育株按3∶1分离。萍乡核不育水稻不育单株分别与桂99、特青和9311BB23杂交,它们的F₁代均可育,表现恢复性。由F₁代产生的F_1:2家系中出现全可育群体和育性分离群体的比例为1∶1。其中育性分离群体中不育株与可育株按3∶13进行分离。从育性分离的F_1:2家系中的可育株自交产生的F_2:3家系出现全可育群体和育性分离群体的比例为7∶6。这些分离规律表明,桂99、特青和9311BB23具有恢复基因,并对萍乡核不育水稻的显性核不育基因表现出显性上位作用,能抑制显性不育基因的表达,从而使不育性转变为可育。     

小麦核不育材料在育种实践中的应用

应用单显性核不育材料遗传特性,对不育株进行人工杂交、自然授粉及诱变处理,创建一个逐年更新的拥有各种变异类型的种质群体,即可变异种质基因库,在种质库内选择可育株,其中F1、F2、F3用集团选育法混合选择,以后各代用系谱法选育具有目标性状的小麦新品种。已选育出优良核不育材料200多个类型及可育株优良材料570个类型,取得了较显著的效果。(河南省南阳市     

常规栽培条件下双孢蘑菇两个品种比较

在常规栽培条件下,以本地区目前主栽的双孢蘑菇品种As2796为对照,与工厂化生产主要品种A15的3个菌株进行比较,一个是采用组织分离法从A15子实体上分离得到的A15;一个是用进口的A15栽培种扩繁出来的A15;一个是工厂化生产料包时直接播种的A15。结果表明,产量更高、品质更优的品种是A15,并且自行分离的A15菌株产量与进口A15栽培种的产量仅相差4.9%。     

棉属野生种质的利用研究

试验研究了克服棉属种间杂交困难的方法与技术，利用野生棉与栽培棉种间杂交，将野生棉的一些有益遗传性状转育到栽培棉中，经鉴定筛选出一批可供棉花育种利用的具有抗病虫、抗旱和纤维品质优良等性状的新种质材料。     

甘蓝型油菜隐性核不育遗传标记的初步研究——Ⅰ.形态标记与隐性核不育的连锁关系

为了将核不育更有效地应用于杂种优势利用,必须解决有效地除去母本行中约50%的可育株的问题.本试验通过隐性核不育材料与具有苗期形态标记材料杂交及其F_2、BC_1F_1分离群体和F_2后代家系的跟踪调查分析证明:P6-9紫茎性状与可育紧密连锁.利用极大似然法计算其交换值在1.9%～8.5%之间.     

双孢蘑菇液氮保藏菌株的遗传稳定性分析

双孢蘑菇As2796、As3003、As4607、As4580等4个菌株经4年的液氮保藏,菌种解冻后进行成活率的测定,恢复生长的菌种在粪草培养基上进行不同温度、不同含水量及不同酸碱度的走菌试验,同时进行纤维素酶活力的测定、同工酶谱检测、RAPD检测及出菇栽培等试验。试验结果表明：双孢蘑菇菌种在液氮中经过4年的保藏,液氮保藏菌种的菌丝生长速度、纤维素酶活力与对照菌株相同,同工酶电泳酶谱和RAPD扩增条带保持不变,栽培出菇仍保持着原有的生长特性与产质量性状,液氮保藏方法可以长期保持双孢蘑菇菌种的稳定性。     

草菇菇渣栽培双孢蘑菇过程中的理化性状和木质纤维素分解利用研究

;[目的]本研究以废棉种植草菇的菇渣为主要原料,设计双孢蘑菇的堆肥配方并在工厂化条件下种植。[方法]通过在堆肥期和栽培期样品采集,从培养料理化性质、木质纤维素含量及相关降解酶酶活、蘑菇生物学效率等方面,探究该菇渣培养料栽培双孢蘑菇的可行性。[结果]结果表明：以废棉基质为主的草菇菇渣含氮量1.8%以上,本试验配方二次发酵结束后含氮量达2.37%;在堆肥阶段,有62.03%的纤维素被利用,39.2%的木质素被利用;在发菌阶段,有29.32%的半纤维素被利用,木聚糖酶活性呈上升趋势,有21.38%木质素被利用,漆酶活性在发菌阶段达到最高,半纤维素和木质素与其相关降解酶变化呈正相关;在出菇阶段,各组分利用率均有所下降,有15.38%的纤维素被利用,有19.60%的半纤维素被利用,9.54%木质素被利用,相关降解酶活性变化与纤维素、半纤维素、木质素变化呈正相关。双孢蘑菇产量为22.48 kg/m2,生物学转化率达51.38%,表明以草菇菇渣为主要原料,添加豆粕、石膏、黍杆的配方生产双孢蘑菇效果良好。[结论]本试验获得了高效高产的以草菇菇渣为主要原料生产双孢蘑菇的配方,达到了资源循环利用的目的。(图4 表5 参31)     

甘蓝型油菜双隐性基因细胞核+广恢型细胞质双重雄性不育系ZCL 801A的选育

以RM 5637B作母本与隐性核不育两型系5824AB中的可育株作父本杂交,采用自交、回交和测交等方法经过4年8代的选育育成了RRGCMS保持系ZCL 801B,又以RM 5637 A作母本与ZCL 801B选育过程中的BC3代开始及以后世代中核不育与可育为1:1育性分离比的株系中的可育株为父本杂交并逐代回交,经过4年6代的回交转育育成了RRGCMS不育系ZCL 801A.其不育系ZCL 801A群体中质不育与核不育呈1:1分离,群体不育株率100%,不育度达97.8%～98.3%,比原质不育系RM 5637 A提高了1.5%～1.6%,无粉花朵增加了4.6%～5.5%,预计在贵州生态条件下制种更有希望达到规定的杂种纯度指标,其质量风险也将更小.