大豆异黄酮对奶牛脾脏与肠系淋巴结中淋巴细胞增殖的影响

为了研究大豆异黄酮对奶牛脾脏与肠系淋巴结中淋巴细胞增殖与活化的影响,并揭示大豆异黄酮提高奶牛免疫性能的作用机理。试验采用6×2（浓度×时间）实验设计,各浓度梯度的大豆异黄酮 (100.00、25.00、5.00、1.00、0.25、0.05 μg/mL)与淋巴细胞共育培养48 h和60 h后,用酶标仪在570 nm处测得各孔的OD值。结果表明：（1）添加0.05~25 μg/mL大豆异黄酮能够促进奶牛肠系淋巴结中淋巴细胞的增殖,在添加量为5 μg/mL时达到极显著的促进作用,但大豆异黄酮添加剂量达100 μg/mL时显著抑制肠系淋巴结淋巴细胞的增殖;（2）100 μg/mL和25 μg/mL大豆异黄酮添加组极显著抑制奶牛脾脏淋巴细胞的增殖(P<0.01),而1 μg/mL浓度组则显著促进奶牛脾脏淋巴细胞的增殖(P<0.05),其余各浓度组对奶牛脾脏淋巴细胞有抑制作用,但差异不显著。     

葡萄籽原花青素的提取工艺优化及其抗氧化活性研究

以新疆地产赤霞珠葡萄籽为原料,采用响应面法对微波辅助提取葡萄籽原花青素的工艺进行优化,并对其体外抗氧化活性进行评价。结果表明,最优提取工艺条件为：液料比25∶1（mL/g）,乙醇浓度60%,微波功率427 W,微波时间3 min,在该条件下葡萄籽原花青素得率为8.66%±0.25%;抗氧化试验结果表明：葡萄籽原花青素具有较强的清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、羟基及2,2-联氮-双(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐（ABTS）自由基的能力,其在三种体系中的IC50值分别为3.71、4.05和3.78 μg/mL,是一种极具开发潜力的天然抗氧化剂。     

犬淋巴细胞转化增殖试验最佳条件的确定

本试验选择杂种牧羊犬作为实验犬,用MTT法检探讨了不同浓度犊牛血清（FCS）、淋巴细胞、植物血凝素P（PHA-P）和刀豆蛋白A（ConA）对犬淋巴细胞增殖的影响。确定了犊牛血清含量为10%,淋巴细胞浓度为5×106个/mL,用丝裂原PHA-P 刺激的最佳浓度为12.5ug/mL时,MTT法测定能够刺激犬淋巴细胞转化增殖,但t检验分析表明其促进淋巴细胞增殖的效果并不显著;当其它条件不变,所用的丝裂原为Con A时,它在浓度为0.5～2.5μg/mL范围内均可以显著刺激T细胞的增殖（P<0.05）,且在浓度为2.5μg/mL时刺激效果最佳     

5种植物精油抗菌性能研究及特征成分分析

精油富含多种抗菌成分,在天然抗菌剂的开发方面具有较好潜力。采用二倍稀释法研究丁香、薰衣草、桉叶、香茅、肉豆蔻5种精油的体外抑菌活性,通过悬浮培养定量测定各精油对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌的最小抑菌浓度（MIC）,并应用气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）分析了5种植物精油的组成成分及相对含量。结果显示：丁香精油、薰衣草精油、桉叶精油、香茅精油、肉豆蔻精油对大肠杆菌的MIC分别为1.25、5.00、10.00、10.00、5.00μg/mL,对枯草芽孢杆菌的MIC分别为0.63、1.25、2.50、1.25、0.31μg/mL。GC-MS结果显示：丁香精油主要组分为丁香酚（84.90%）和石竹烯（13.27%）;薰衣草精油主要组分为乙酸芳樟酯（34.05%）和芳樟醇（28.40%）;桉叶精油主要组分为桉树醇（34.29%）和柠檬烯（18.29%）;香茅精油主要为香茅醛（16.22%）和花侧柏烯（16.04%）;肉豆蔻精油主要为柠檬烯（32.68%）和蒎烯（23.96%）。5种精油具有良好的抑菌活性,可为更好地开发抗生素替代品提供理论依据。     

硫酸铜对大麦根尖细胞有丝分裂的影响及其致畸效应

为了研究硫酸铜对大麦根尖细胞的畸变效应,采用不同浓度的硫酸铜(0.05g/L、0.10gL、0.25g/L、0.50g/L和1.00g/L)分别处理大麦根尖,统计分析了大麦根尖细胞的有丝分裂指数、微核千分率和染色体畸变率。结果表明,不同浓度的硫酸铜均能使大麦根尖细胞有丝分裂指数明显增加0.10g/L硫酸铜处理有丝分裂指数最大,为9.64%而前期、中期和末期分裂指数均高于对照,后期分裂指数与对照之间差异不显著。在浓度低于0.10g/L时,细胞微核千分率随硫酸铜处理浓度的升高而增加,但随着硫酸铜浓度的进一步升高反而呈下降趋势。硫酸铜还能诱导染色体产生多种类型的畸变在浓度低于0.25g/L时,染色体畸变率随硫酸铜处理浓度的升高而增加,然而随着硫酸铜浓度的进一步升高染色体畸变率呈下降趋势,但均明显高于对照。     

绿原酸对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响

为分析绿原酸(CHA)对小鼠脾脏淋巴细胞增殖、分泌功能的影响。无菌操作分离小鼠脾脏,制备脾脏淋巴细胞并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入诱导剂刀豆蛋白(ConA)和脂多糖(LPS)以及0、40、80、160 μg/mL不同浓度的CHA,经过不同时间培养后,采用MTT法检测T和B淋巴细胞的增殖,ELISA和Griess法分别检测淋巴细胞分泌TNF-α和NO的水平。结果表明：低浓度和中浓度CHA提高ConA/LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖和存活,而高浓度CHA明显抑制其细胞增殖转化;CHA促进小鼠脾脏T、B淋巴细胞分泌NO;CHA对T淋巴细胞分泌TNF-α影响不大,中浓度CHA可显著促进脾脏B淋巴细胞分泌TNF-α,高浓度反而抑制其分泌;CHA促进环磷酰胺处理的小鼠脾脏T和B淋巴细胞体外增殖,但对其NO分泌量影响不明显。结果提示CHA可能通过影响淋巴细胞增殖和细胞因子分泌而表现免疫调节作用。     

超微粉碎处理对葡萄籽中原花青素和脂肪酸成分的影响

旨在通过超微粉碎处理对葡萄籽主要营养成分的影响研究,确定该技术在葡萄皮渣精深加工中的适用性。试验以酿酒后皮渣中分离获得的葡萄籽为材料,采用超微粉碎技术对葡萄籽进行超微粉碎处理,重点研究超微粉碎工艺对葡萄籽粒径、原花青素的含量、脂肪酸成分的影响。结果表明,与普通粉碎葡萄籽粉对比,经超微粉碎处理后葡萄籽粉中的原花青素含量达到8.74mg/g以上,其增加了28.5%,而超微粉碎处理对葡萄籽粉中不饱和脂肪酸的影响较小,保留率较高。实验证明,不同超微粉碎时间（5~25 min）处理对超微葡萄籽粉中的原花青素和脂肪酸含量无显著影响。结果证明超微粉碎处理有利于葡萄籽中原花青素的释放和不饱和脂肪酸的保留,适宜在葡萄皮渣精深加工中推广应用。     

不同剂量黄曲霉毒素B1对奶牛瘤胃混合微生物发酵的抑制作用

(目的)本文通过体外发酵培养, 测定发酵液中pH、总挥发性脂肪酸、氨态氮、气体成分及各种纤维素酶活等指标,探讨黄曲霉毒素B1（AFB1）对瘤胃微生物代谢的影响。（方法）试验通过瘤胃微生物在体外静态培养中添加不同浓度的AFB1(0 μg/mL,0.1 μg/mL,1 μg/mL,10 μg/mL)后,检测培养体系中微生物的活性变化情况。（结果）试验结果表明AFB1对苜蓿发酵的抑制作用强于对玉米发酵的作用。添加AFB1会降低瘤胃中氨态氮浓度（p<0.05）; 总挥发性脂肪酸的产量也会随AFB1添加量的增加而减少,并且在玉米底物组中总挥发性脂肪酸产量高于苜蓿底物组32.1%%（p<0.05）;随着AFB1添加量的增多,乙酸、丙酸、丁酸和戊酸产量逐渐下降（p<0.05）,且高剂量二甲基亚砜（DMSO）的添加可导致苜蓿和玉米发酵生成的异戊酸摩尔比例分别升高30%和20%; 同时AFB1会减少甲烷的产量并且对羧甲基纤维素酶活和微晶纤维素酶酶活也有抑制作用（p<0.05）。（结论）说明随着黄曲霉毒素量的增大,瘤胃液中微生物的活性会受抑制,尤其是纤维性饲料的发酵。     

沉积物中生物活性磷赋存形态对耗氧有机物的响应

[目的] 本研究为验证耗氧有机物影响沉积物中生物活性磷的赋存形态的假说。[方法]以葡萄糖代替耗氧有机物,将沉积物暴露于耗氧有机物30天。[结果表明] 不充气时,葡萄糖浓度0、2、4、8 mg/L下的表层沉积物Ex-P含量为0.02±0.01、0.02±0.01、0.03±0.01、0.02±0.01 μmol/g;充气时,相应葡萄糖浓度下的表层沉积物Ex-P含量为0.03±0.00、0.03±0.01、0.03±0.01和0.06±0.02μmol/g,葡萄糖浓度8mg/L下的Ex-P含量高于葡萄糖浓度0mg/L下的（P< 5%）。不充气时,葡萄糖浓度0、2、4和8mg/L 下的表层沉积物IP含量为0.96±0.42、0.74±0.29、0.97±0.78和0.88±0.22μmol/g;充气时,相应葡萄糖浓度下的表层沉积物IP含量为0.37±0.10、0.46±0.16、0.41±0.06和0.69±0.05μmol/g,葡萄糖浓度8mg/L下的IP含量高于葡萄糖浓度0mg/L下的（P< 5%）。[结论]耗氧有机物对沉积物中生物活性磷有双重阈值作用。     

一种同时测定鱼腥草中百草枯和乙草胺残留方法探讨

采用高速匀浆提取,固相萃取(SPE)净化,三重四级杆气相色谱质谱联用仪(GC-MS/MS)检测,建立了鱼腥草中两种除草剂农药残留的分析方法。在0.02~0.50 mg/L范围内,目标物的峰面积与其质量浓度的线性关系良好(R20.99);在0.02、0.10、0.50 mg/kg的添加水平,样品添加回收率为73.5%~81.2%,相对标准偏差(RSD)为3.43%~4.49%;乙草胺方法检出限为0.2μg/kg,定量限为0.80μg/kg,百草枯方法检出限为1.40μg/kg,定量限为5.00μg/kg。该方法具有高灵敏度、快速、准确度高、线性范围宽等优点,可满足鱼腥草中农药残留检测的要求。     

牦牛转移因子对藏绵羊外周血淋巴细胞转化功能的影响

为研究牦牛转移因子(transfer factor,TF)对藏绵羊外周血淋巴细胞增殖的作用,试验采用MTT法探索不同浓度淋巴细胞、犊牛血清(FCS)、刀豆蛋白A(Concanavalin A,ConA)对淋巴细胞增殖的影响。在最佳条件下,探讨牦牛TF对藏绵羊外周血淋巴细胞增殖的影响。结果表明,当藏绵羊淋巴细胞浓度为5.4×10⁶个/mL,犊牛血清含量为8%,ConA为1 μg/mL时,刺激效果最佳,且TF单独或协同丝裂原时,对淋巴细胞都有促进增殖的效果,且最佳浓度为1.5 mg/mL。体内注射TF后,各剂量组在注射第3天时,淋巴细胞再次受到TF单独或协同ConA刺激时,其增殖效果与细胞组单独增殖效果比较,差异不显著(P>0.05),至第5~7天时,其增殖效果明显高于细胞组,差异显著(P<0.05)。注射2 mL剂量组转化增殖效果优于1 mL和3 mL剂量组,差异显著(P<0.05)。说明牦牛TF能够有效增强机体免疫力,是一种很好的免疫增强剂。     

复合型甘薯茎尖饮料的研制

以甘薯茎尖和山楂为原料,进行复合型饮料的研制。结果表明,绵白糖、蛋白糖、山楂的添加量依次为2.20%,0.03%,5.00%时,产品的风味最佳。其主要营养成分是:可溶性固形物含量2.30%,可溶性蛋白含量6.53μg/g,可溶性总糖含量1.44%,可滴定总酸0.024 g/100 mL,黄酮甙总量0.80 mg/g。     

分子印迹技术在线富集测定玉米中嗪草酮残留

为了对玉米中的嗪草酮残留进行高效的分离、富集和测定,以嗪草酮为模板分子,采用原位聚合法制备了分子印迹聚合物,并将印迹聚合物作为固相萃取柱用于玉米样品的前处理过程,建立了在线富集液相色谱法测定玉米中嗪草酮残留的分析方法。研究结果表明,嗪草酮印迹聚合物具有良好的亲和性和特异选择性,在0.01~0.50 μg/mL质量浓度范围内有良好的线性关系(r=9991),最低检出浓度(S/N=3)为1.8×10-3 μg/mL,在0.01,0.05,0.10 mg/kg 3个浓度的添加水平下,方法的平均回收率在80.9%~94.5%之间,相对标准偏差低于5.98%。方法简化了样品前处理步骤,提高了检测灵敏度度,分析时间短,无基质干扰,精密度和准确度高,可应用于玉米中嗪草酮残留的分析检测。     

外源性钙对沉积物中生物活性磷赋存形态的影响

为了验证外源性Ca2+影响沉积物中制约初级生产的生物活性磷的赋存形态的科学假说,在充气的条件下,将沉积物暴露于不同浓度的外源性Ca2+ 30天,测定并分析其生物活性磷的赋存形态的差异。浓度0、50、200、500 mg/L的外源性Ca2+暴露下的表层沉积物Ex-P含量为0.08±0.02、0.05±0.00、0.05±0.01、0.06±0.01 μmol/g,50 mg/L的外源性Ca2+暴露下的表层沉积物Ex-P含量低于0 mg/L的外源性Ca2+暴露下的(P<0.05);相同浓度外源性Ca2+暴露下的表层沉积物IP含量为0.37±0.10、0.46±0.16、0.41±0.06和0.69±0.05 μmol/g,0 mg/L的外源性Ca2+暴露下的表层沉积物的IP含量低于500 mg/L的外源性Ca2+暴露下的(P<0.05);底层沉积物Ex-P和IP含量不受外源性Ca2+的影响。故外源性Ca2+影响表层沉积物中生物活性磷含量,对沉积物Ex-P含量有双重阈值作用,并可将水体中的磷转化为可以缓释的沉积物磷。     

猪转移因子对犬淋巴细胞转化增殖的影响

无菌采取犬抗凝血，分离淋巴细胞并制备成不同浓度。应用正交试验，探讨不同浓度淋巴细胞、植物血凝素（PHA-P）、犊牛血清（FCS）对淋巴细胞增殖的影响。在此基础上，研究不同浓度猪转移因子（transfer factor, TF）对犬淋巴细胞增殖的影响，增殖的结果用MTT法测定。试验结果表明，当犬淋巴细胞浓度为5×106个/ml，PHA-P为12.5μg/ml，FCS为10%时，淋巴细胞增殖效果最佳。在最佳培养条件下，猪TF浓度在0.195~25mg/ml时，对淋巴细胞转化增殖均有明显促进作用，猪TF单独或与PHA-P共同作用时对淋巴细胞增殖的最佳刺激浓度均为1.56mg/ml，且猪TF单独作用于淋巴细胞的效果优于与PHA-P的协同作用。试验结果证实，异源TF对犬淋巴细胞增殖有良好的刺激效果，同时本研究结果为异源TF在临床上应用于犬病毒性疾病的防治提供了试验依据。     

Reduction in soil loss from erosion-susceptible soils amended with humic substances from oxidized coal

Soils that pose high risk of erosion require amendment with either natural or synthetic soil conditioners to reduce soil loss hazards. The objective of this study was to evaluate the potential of using coal-derived humic substances (as soil conditioners) to reduce runoff erosion on erosion-susceptible soils. Surface (0–20 cm) samples of severely degraded soils from Principina in Tuscany (Orthic Xerofluvent) and Bovolone in Venice (Udic Ustochrept) in Italy were used to assess the effects of five rates (0, 0.05, 0.10, 0.50 and 1.00 g/kg) of humic acids (HA) on soil loss and other hydrological parameters. A rainfall simulator was used to apply approximately 40 mm/h intensity rain for 1 h on soil beds of dimensions 2 m × 0.5 m × 0.01 m, packed at a bulk density of 1.20 Mg/m³ and inclined at a slope of 15%. The amount of soil eroded (E) and the time to initiate runoff (Rt) and drainage (Dt) were related to changes in the water-holding capacity and aggregate stability of the soils following the HA treatments. In the control treatments, the values of E, Rt and Dt were higher in the Principina than Bovolone soil. Increasing HA rates generally delayed Rt, accelerated Dt and reduced E substantially on both soils. On the Principina soil a reduction of about 36% in soil loss was obtained by adding only 0.05 g/kg of HA (equivalent to 100 kg/ha). On the sandier Bovolone soil, the same magnitude of reduction was achieved with 0.10 g/kg (200 kg/ha) of HA. Improvements in Rt and Dt from the HA amendments explained between 58 and 81% of the variation in E from both soils. Furthermore, improvements in the water retention capacity more than in the aggregate stability of these soils accounted for the reduced runoff erosion. These results show that amending erosion-susceptible soils with low rates of coal-derived humic substances is a potentially effective soil management practice for reducing erosion rates.