鸡蛋中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留的检测技术研究

用高效液相色谱法检测鸡蛋中氟苯尼考和氟苯尼考胺的残留,鸡蛋样品经乙酸乙酯提取、正己烷脱脂、氧化铝柱净化、提取物蒸发浓缩至于、流动相溶解、微孔过滤,进行HPLC分析.结果表明:用该方法测得氟苯尼考和氟苯尼考胺的最低检测限值皆为5 ng/g,氟苯尼考回收率为81.0％ ～92.3％,氟苯尼考胺回收率为78.0％～ 85.3％,能够满足鸡蛋中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留量检测技术要求.     

养殖场牛肉样品中氟苯尼考以及氟苯尼考胺的残留检测分析

氟苯尼考在养殖企业中的使用非常广泛,但是在过量使用的情况下容易残留而给人民的健康带来隐患。本文在参考国内相关人员研究的基础上,对潍坊市5个肉牛养殖厂屠宰产品进行了氟苯尼考以及氟苯尼考胺的残留调查检测,发现在奎文区养殖户用药规范而坊子区养殖户用药相对不规范,希望可以为相关单位提供一点参考。     

鸡肉中氟苯尼考ELISA检测方法的建立及应用

 【目的】制备抗氟苯尼考（FFC）的高亲和力特异性抗体,建立检测氟苯尼考的间接竞争ELISA新方法。【方法】氟苯尼考分别与牛血清白蛋白（BSA）和人血清白蛋白（HSA）经混合酸酐法偶联,得到免疫抗原和包被抗原,其偶联比分别为14.4和14.7。用免疫原FFC-HS-BSA免疫新西兰大白兔获得了效价较高的特异性抗体。建立并优化了间接竞争ELISA检测方法。【结果】抗血清效价为1﹕102 400。最佳包被抗原浓度为0.5 μg?ml-1,最佳抗体工作浓度为1﹕6 400,酶标二抗的工作浓度为1﹕20 000。回归方程Y = -0.1516X + 0.788（R2 = 0.9859）,检测范围为0.18～500 ng?ml-1,检出限为0.18 ng?ml-1,批内和批间平均变异系数分别为4.86%和7.77%。交叉反应试验中,抗血清与FFC结构相似的氯霉素和甲砜霉素交叉反应率分别为0.094%和0.098%,与其它药物交叉反应率均小于0.01%,表明该方法具有很强的特异性。FFC以浓度0.18～500 ng?g-1在鸡肉中添加,回收率为84.14%～106.1%,变异系数为2.1%～5.6%。【结论】成功获得了高效价、高特异性的抗FFC抗体,建立了鸡肉中氟苯尼考残留检测的ELISA方法。结果表明,所建立的检测方法具有灵敏、准确、简便、快速的特点。     

氟苯尼考制剂在兽医临床上的研究与应用

氟苯尼考以其独特的分子结构用于兽医临床,不易产生耐药性,能有效抵抗细菌酶对药物的破坏作用;作用强大,吸收迅速,口服或注射给药1h后均能达到最高血药浓度;穿透力强,组织药物浓度高,可透过血脑屏障.肺组织药物浓度为血浆的90％,气管腔药物浓度高于血浆药物浓度,特别适用于控制脑部与呼吸道感染;吸收好、安全,在规定休药期停药无残留能保证人、畜安全;药物的安全范围大,用推荐剂量的十倍,不会产生不良反应和中毒;作为动物专用药,不与人类形成交叉耐药性,对环境无危害.     

水温和药物剂量对德国镜鲤体内氟苯尼考和氟苯尼考胺残留的影响

在实验室条件下,研究了不同水温(16、26℃)和不同药物剂量[15、45 mg/kg(鱼体质量)]下,氟苯尼考(FF)及其代谢物氟苯尼考胺(FFa)在德国镜鲤Cyprinus carpio mirror体内的残留消除规律.试验采用混饲口灌给药,在16、26℃水温条件下,以15 mg/kg(鱼体质量)剂量给药;在26℃水温条件下,以15、45 mg/kg(鱼体质量)剂量给药,于给药后0.5、1、2、4、6、8、12、24、72、120、168、216、264 h分别取鱼体肌肉、肝胰脏和肾脏组织,采用高效液相色谱荧光检测法测定鱼体各组织中FF和FFa的含量.结果表明:鱼体各组织中的FF和FFa,高温组较低温组消除快,高剂量组较低剂量组消除慢;高水温(26℃)下,用药后168 h时鱼体肌肉中的FF检测不出,而FFa浓度为36.3 μg/kg,低水温(16℃)下,用药后264 h时鱼体肌肉中的FF浓度为23 μg/kg,而FFa浓度为49μg/kg;低剂量组在用药后168 h时,鱼体肌肉中的FF和FFa的浓度之和为36μg/kg,而高剂量组在用药后264 h时,鱼体肌肉中的FF和FFa的浓度之和为59μg/kg;药物在德国镜鲤各组织中的消除顺序依次为肌肉＞肝胰脏＞肾脏.     

水温和药物剂量对德国镜鲤体内氟苯尼考和氟苯尼考胺残留的影响

在实验室条件下,研究了不同水温(16、26℃)和不同药物剂量[15、45 mg/kg(鱼体质量)]下,氟苯尼考(FF)及其代谢物氟苯尼考胺(FFa)在德国镜鲤Cyprinus carpio mirror体内的残留消除规律。试验采用混饲口灌给药,在16、26℃水温条件下,以15 mg/kg(鱼体质量)剂量给药;在26℃水温条件下,以15、45 mg/kg(鱼体质量)剂量给药,于给药后0.5、1、2、4、6、8、12、24、72、120、168、216、264 h分别取鱼体肌肉、肝胰脏和肾脏组织,采用高效液相色谱荧光检测法测定鱼体各组织中FF和FFa的含量。结果表明:鱼体各组织中的FF和FFa,高温组较低温组消除快,高剂量组较低剂量组消除慢;高水温(26℃)下,用药后168 h时鱼体肌肉中的FF检测不出,而FFa浓度为36.3μg/kg,低水温(16℃)下,用药后264 h时鱼体肌肉中的FF浓度为23μg/kg,而FFa浓度为49μg/kg;低剂量组在用药后168 h时,鱼体肌肉中的FF和FFa的浓度之和为36μg/kg,而高剂量组在用药后264 h时,鱼体肌肉中的FF和FFa的浓度之和为59μg/kg;药物在德国镜鲤各组织中的消除顺序依次为肌肉>肝胰脏>肾脏。     

禽蛋中氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺同时检测的 超高效液相色谱-荧光检测法的建立

建立超高效液相色谱-荧光检测法(UPLC-FLD)同时检测禽蛋中氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺残留。样品经过加速溶剂萃取提取、净化,乙腈饱和的正己烷去脂,设定激发波长和发射波长分别为233 nm和284 nm,经UPLC-FLD检测分析。FF和FFA添加浓度为定量限(LOQs)、0.5、1.0和2.0倍的最高残留限量(MRL)时,FF的平均回收率为83.1%～96.1%,相对标准偏差(RSD)均低于3.9%;FFA的平均回收率为84.6%～97.4%,RSD均低于3.4%。FF在禽蛋中检测限(LODs)为4.7～4.9μg·kg~(-1)(S/N≥3),LOQs为10.5～11.7μg·kg~(-1)(S/N≥10);FFA在禽蛋中LODs为1.8～1.9μg·kg~(-1),LOQs为4.3～4.7μg·kg~(-1)。此方法快速、准确、灵敏度高,适用于批量检测禽蛋中氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺残留。     

磺胺二甲嘧啶在黄河鲤体内的代谢动力学研究

为探究磺胺二甲嘧啶在黄河鲤体内的药物代谢动力学特征,在(23±2)℃水温条件下,以20 mg/kg剂量给黄河鲤进行单次静脉注射和口灌磺胺二甲嘧啶,分别于给药后0.25、0.5、1、2、4、6、12、24、48、72 h采集血液和各组织,利用高效液相色谱测定血液和各组织中磺胺二甲嘧啶及其代谢物N4-乙酰化磺胺二甲嘧啶质量...     

动物性食品中磺胺二甲嘧啶残留量的HPLC测定

目的:采用高效液相色谱法(带紫外检测器)测定动物性食品中磺胺二甲嘧啶残留量。方法:采用C18柱,以甲醇:水=20:80为流动相,检测波长263nm,用保留时间定性,峰面积定量。结果:磺胺二甲嘧啶回收率为91.0%～96.5%,相对标准偏差为0.84%～2.56%。结论:该方法准确、快捷,适用于普通实验室测定动物性食品中磺胺二甲嘧啶残留量。     

磺胺间甲氧嘧啶全抗原的制备研究

采用重氮化法，将半抗原磺胺间甲氧嘧啶（SMM）与载体牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）偶联，制得磺胺间甲氧嘧啶全抗原SMM—BSA和SMM—OVA。通过其紫外扫描光谱、SDS—PAGE凝胶电泳试验，表明半抗原和载体成功偶联，免疫动物以后可以产生满意效价。这另进一步制备抗SMM抗体提供了良好的免疫原。     

动物性食品中磺胺二甲嘧啶残留酶联免疫吸附测定法复核实验研究

为确保公司出栏前鸡肉中磺胺二甲嘧啶残留不超标,同时减少实验室的劳动强度,提高工作效率,节约检验费用,特进行动物性食品中磺胺残二甲嘧啶残留酶联免疫吸附测定法复核试验,以确认公司是否可以用北京望尔生物技术有限公司研制的磺胺二甲嘧啶试剂盒做为出栏前的筛选试验.试验分别用酶联免疫吸附试验及液相色谱法对试剂盒的灵敏度、准确度和精密度以及与仪器方法 的对比实验进行了测试.结果 表明:试剂盒IC50平均值为2.78 μg/L,波动范围在2.09~3.45 μg/L之间.鸡肉最低检测限为1.07 μg/kg.经测定磺胺二甲基嘧啶添加的回收率范围为73.2%~112.8%,批内变异系数在5.2%~13.4%之间.与仪器方法 相比较,望尔试剂盒的准确度与仪器检测结果 相同,阴阳性符合率为100%,且前处理方法 简单.经验证,该方法 可用于磺胺二甲嘧啶残留的筛选检测.     

盐酸林可霉素制剂中对乙酰氨基酚检测方法的研究

采用Waters AtlantisT3(4.6 mm×250 mm,5μm)C18色谱柱,以磷酸盐缓冲液-甲醇(70∶30)作为流动相进行等度洗脱(流速1.0 m L/min);采用二极管阵列检测器,检测波长244 nm;进样量20μL,建立盐酸林可霉素制剂中非法添加对乙酰氨基酚检测的高效液相色谱方法。结果表明:对乙酰氨基酚在进样浓度0.02014~0.4028 mg/m L范围内均呈良好线性关系(R2=1.0000),平均回收率分别为100.15%(盐酸林可霉素注射液)和99.90%(盐酸林可霉素可溶性粉),检出限为0.01 mg/m L。该方法简便、准确、可行,适用于盐酸林可霉素制剂中非法添加对乙酰氨基酚的检测。     

磺胺二甲嘧啶在猪体内的代谢动力学研究

7头猪(65.14±9.65kg)单剂量静注100mg/kg磺胺二甲嘧啶。给药后分别在不同时间间隔采集血样,用分光光度计测定血中游离磺胺浓度。血药浓度随时间变化符合开放二室模型,所得主要动力学参数为。分布半衰期(t1/2a)0.22±0.88(h);消除半衰期(t1/2)15.32±1.44(h);表观分布容积(V_d)4.8840±0.7821(100ml/kg);清除率(Cl_B)0.2221±0.0372(h×100ml/kg);药时曲线下面积(AUC)461.27±79.21(h×mg/100ml)有效血药浓度维持时间(Tcp(ther))31.14±4.39(h)。本文还根据单剂量给药参数推算了多剂量给药方案,供兽医临床参考应用。     

磺胺二甲嘧啶残留检测免疫传感器的感受器部件研制

试验研究了用于检测磺胺二甲基嘧啶(SM2)残留的免疫生物传感器的最关键组成,即感受器部件的制备方法、最佳检测条件,并对所制备感受器部件的性能进行了测试。利用二醋酸纤维素作为载体支架结构,戊二醛为交联剂,己二胺为制孔剂,制备了最佳条件符合标准的载体膜。采用双盲评分法测定其性能,选取性能良好的载体膜包被SM2抗体制成抗体膜。将酶标抗原和SM2标准品联到抗体膜上,应用溶解氧分析仪测定体系中过氧化氢减少量。结果表明,质控膜和测定膜的电流变化值差异显著(P<0.05),感受器部件反应灵敏,最低检测限达5μg·L-1。     

鸡蛋磺胺间甲氧嘧啶残留研究

随机选择32周龄、体质量1.6 kg的蛋鸡80羽进行试验,在饮水中分别添加159 mg·L^-1(标签推荐最高剂量)和79.5 mg·L^-1的磺胺间甲氧嘧啶,连续用药5 d,分别作为高剂量组和低剂量组,停药后收集鸡蛋样品。鸡蛋样品采用QuEChERS方法进行前处理,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)对鸡蛋样品中磺胺间甲氧嘧啶的残留量进行定量测定。结果发现,高剂量组在休药后第1、3、5、10、16、20、24天鸡蛋磺胺间甲氧嘧啶残留量分别为2 497.3、220.1、38.9、6.0、1.3、0.5、0.1 μg·kg^-1,低剂量组在休药后第1、3、5、10、16天鸡蛋磺胺间甲氧嘧啶残留量分别为694.3、45.2、15.5、1.5、0.1 μg·kg^-1。磺胺间甲氧嘧啶在鸡蛋中的消除速率为0.4~0.6 μg·kg^-1·d^-1。高、低剂量组分别在停药后第5天和第3天鸡蛋中磺胺间甲氧嘧啶残留量低于国家限量标准。从食品安全角度考虑,如采用标签推荐最高剂量,建议休药期控制在5 d以上。     

磺胺间甲氧嘧啶在黄羽肉鸡组织中残留消解规律

饲料中分别添加50,100和200 mg·kg-1磺胺间甲氧嘧啶,喂饲40日龄黄羽肉鸡,连续用药7 d,分别在停药后0,3,10,15,20,25,28,30,32和35 d时间点对肌肉、肝和肾等组织采样,用UPLC-MS/MS方法测定磺胺间甲氧嘧啶残留浓度。100 mg·kg-1试验组(临床用药量)动物肌肉、肝、肾在分别停药30,15和10 d后,药物残留量降到0.084,0.088和0.090 mg·kg-1。结果表明,临床用药量磺胺间甲氧嘧啶对于黄羽肉鸡的休药期应在30 d以上。     

新型水溶性氟苯尼考制备研究

[目的]为兽药市场提供低成本良好水溶性的氟苯尼考水针剂原料药。[方法]由适当浓度的酸与氟苯尼考在搅拌下制成了具有良好水溶性复合物A。[结果]制得的复合物A为白色粉末,溶解度为1.7,比旋光度为+15.7,水溶液紫外最大吸收波长为266nm,干燥失重为1.4%,pH值为4.1,温、湿度加速和光加速稳定性试验合格,以外标法计算测得复合物A中氟苯尼考含量为91.8%。[结论]复合物A经检测符合药典要求,可用作水针剂的原料,与同类产品相比,成本大幅度降低,水溶性更好。     

磺胺二甲嘧啶在兔体内动力学的非线性现象研究

磺胺二甲嘧啶（ＳＭ２）７个剂量（３０－４００ｍｇ／ｋｇ），新西兰白兔２５只，共６３次快速静注，测定ＳＭ２在兔体内的动力学是否存在着非线性的特征。血中ＳＭ２及其Ｎ４－乙酰估代谢物（Ｎ４ＳＭ２）用重氮化－偶合比色法测定，药－时数据用药物动力学和统计学微机程序处理。结果表明：ＳＭ２在兔体内的分布和乙酰化代谢、Ｎ４ＳＭ２从兔体内的消除均存在着某种非线性；用线性动力学模型处理具有非性线动力学因素的药－时数据     

氟苯尼考及其代谢物在淡水小龙虾中残留消除规律的研究

本试验建立了小龙虾组织中氟苯尼考(FF)和氟苯尼考胺(FFA)残留的高效液相色谱检测方法,并采用连续6 d药浴(水温25℃)的方式,研究淡水小龙虾肌肉和肝胰脏中FF及其主要代谢物FFA代谢动力学和消除规律。检测方法是以PBS(pH 6.0)和乙酸乙酯-氨水(体积比为98∶2)作为提取溶剂,采用XTerra@RP18(5μm,4.6 mm×250 mm)反向色谱柱,利用乙腈-磷酸二氢钠缓冲液(体积比为3∶7)为流动相,流速0.8 mL.min-1,紫外检测波长224 nm。在添加20～500μg.kg-1标样时,该方法的回收率大于70%,变异系数低于7.92%。FF和FFA的检出限分别为20μg.kg-1和10μg.kg-1。残留消除试验结果表明:在药浴FF 6 d后,在组织中两种药物均检出,说明其代谢物也有出现。停药后168 h,肌肉中检测不到FFA;停药后336 h,肝胰脏中检测不到FFA残留,肌肉和肝胰脏中均检测不到FF残留。两种药物在肝胰脏的消除速率都慢于肌肉,FF的消除速率均略慢于FF和FFA总量在组织中的消除速率,肝胰脏中的FFA浓度远高于肌肉中的。FF和FFA两种药物残留总量在淡水小龙虾肌肉和肝胰脏的消除曲线方程分别是y=505.06e-0.012 9x和y=775.71e-0.010 0x、y=690.78e-0.013 5x和y=1 778.7e-0.011 1x,消除半衰期(t1/2)分别为51.33 h和62.43 h,在肌肉和肝胰脏中降至100μg.kg-1的理论时间分别为5.94 d和10.8 d。考虑到温度为影响药物代谢和残留的最主要环境因素,建议FF在小龙虾体内的休药期为270℃.d。