微流控芯片技术在微生物检测中的应用

微流控芯片是一项以芯片为基础,结合化学、物理学、生物学等多学科形成的技术平台,能够在一个芯片上实现样品制备、反应、分离、检测等流程,具有高通量、高效率和易操作的特点。随着材料科学和纳米技术的发展,该项技术得到迅速发展并应用于化学分析、微生物检测等,尤其是在微生物检测和分析方面发挥着重要作用,并逐步产生了商品化的微流控芯片。微流控芯片因具有小型化、节约试剂、速度快、集成化程度高等优点,适用于处理突发公共卫生事件,但目前在动物疫病检测中的应用还很少见。本文对微流控芯片的技术原理、结构及其在微生物检测中的应用进行综述,以期为动物疫病的高通量检测提供借鉴。     

微流控芯片技术在家畜致病菌快速检测中的应用

家畜致病菌的快速检测对疾病防控十分重要。基于形态学、免疫学、细菌毒力、分子生物学等传统致病菌检测方法因操作繁琐、耗时长等技术壁垒问题,限制了家畜致病菌快速检测。近年来,微流控技术与多种检测技术相结合,实现了样品到结果的一键快速检测,解决了对仪器和人员的要求问题,且具备高通量、微型化、集成化、高灵敏性等优点,适合多种环境下的家畜致病菌快速检测。论文概述了家畜致病菌检测的传统检测方法以及微流控芯片技术在该领域的应用,并对其应用前景和发展趋势进行了展望。     

早期胚胎体外培养微流控芯片的制备及初步应用

利用微流控芯片模拟输卵管微环境,探讨物理性刺激对早期胚胎发育的影响,为解决早期胚胎体外囊胚发育率较低、胚胎质量差的问题提供帮助。本实验采用一次铸造成型制备微流控芯片培养装置,并应用培养装置对小鼠1-细胞期胚胎进行培养,观察胚胎体外发育率。结果表明,利用微流控芯片培养组与对照组2相比,2-细胞胚胎发育率差异不显著(P0.05),但是,在8-细胞胚胎发育率、桑葚胚发育率和囊胚发育率都差异显著(P0.05)。此外,囊胚内总细胞数显著提高(P0.05)。结论:一次铸造成型微流控芯片制作方法简便易行且培养液不易外漏,这种培养装置能显著提高小鼠早期胚胎体外囊胚发育率和胚胎的质量。     

微流控芯片检测方法及其在畜牧兽医上的应用

微流控芯片是以微米尺度对被检测流体样品进行操作为特点的技术,与传统的检测方法相比,具有样品消耗少、速度快、效率高等优势。近年来,基于该技术已开发出很多方便快捷的检测方法,例如毛细管电泳、质谱检测、免疫检测、电化学检测、光学检测等。随着畜牧养殖业的规模化和集约化发展,动物疾病对畜牧业的影响日益加大。因此,早期快速检测动物疫病病原具有重要的社会效益和经济价值。论文就几种常用微流控芯片检测方法及其在畜牧兽医领域的应用进行综述,以期为动物疾病诊断提供参考。     

基于环介导等温扩增技术的微流控芯片在宠物疫病检测中的应用展望

环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术与微流控芯片技术相结合,可实现对宠物疫病病原体的快速检测,具有高通量、特异性强、灵敏度高、操作简单、即时检测等优点.基于LAM P的微流控芯片应用于宠物疫病检测,可显著提高宠物疫病的病原学诊断能力和效率,成为宠物...     

生殖免疫技术在动物繁殖中的应用

根据近年来在生殖免疫方面取得的研究进展,介绍了激素免疫技术的应用,H-Y精子免疫法性别化精液技术、早期胚胎性别控制免疫技术等在提高动物繁殖力方面的重要作用。     

饲料中动物源性成分微流控检测芯片的研究

试验以“LAMP+微流控”技术为基础,开发饲料动物源性成分检测芯片.针对牛、羊、猪、鸡的16srRNA靶序列,根据LAMP引物设计软件进行4种肉类LAMP引物设计.在LAMP优化试验、芯片优化测试、特异性验证试验和芯片应用测试中,进行最佳引物筛选测试和特异性测试.结果 显示,筛选出的4种肉类最佳引物特异性强,最佳反应温...     

野生动物资源保护相关的若干人工辅助生殖技术

利用低温生物学与人工辅助生殖技术（ART）保护生物资源,被证明是保护野生动物遗传资源的有效手段之一。野生动物的种质（卵母细胞、精子）或胚胎,相关的组织（卵巢、睾丸或附睾等）和体细胞均可以在-196℃超低温的环境下长期保持。人工辅助生殖技术除低温生物学技术外,还包括：人工授精技术;卵母细胞的体外成熟技术;体外受精技术以及胚胎移植;产前诊断等众多复杂的技术。但是,应用于野生动物的低温生物学和ART与应用与经济动物和实验动物时有很大差异,特别是某些需保种的珍稀或濒危野生动物数量有限,野生动物冷冻保种时有许多技术困难急待克服。例如：野生动物种质冷冻样品的采集问题;各种野生动物冷冻胚胎和冷冻精子时可能采取的最佳冷冻保护程序及不同的冷冻保护剂。特别是如何选取适当的野生动物受体成为制约其发展的一个瓶颈。     

关于影响性控精子体外受精的因素及应用前景展望

本文对牛分离精子体外受精研究进展、影响分离精子体外受精的因素及其体外受精可行性问题进行了综述，并对分离精子体外受精技术的应用前景提出了展望。     

性控精液在牛体外性控胚胎生产中的应用

利用性控精液结合体外胚胎生产技术是获得预知性别后代的一种有潜在效率的方法.自20世纪90年代,利用流式细胞仪将X精子和Y精子分离开来,使畜牧生产性别选择的梦想变为现实,性控精液得到了极大的推广应用.本文重点阐述利用性控精液进行胚胎体外生产的研究和生产状况.     

犬卵母细胞体外成熟及其体外受精研究进展

犬科动物胚胎对于改进犬科珍贵物种及保护濒危犬种十分重要,因此对犬科动物体外受精(IVF)以及辅助生殖(ART)的研究逐渐变得必要.通过体外受精和核移植已经成功获得能够发育的犬科动物胚胎,克隆的犬胚胎移植到受体母犬能成功产仔,但是这一技术的效率仍然很低.主要原因是犬科动物胚胎在体外发育能力很低.犬卵母细胞早期发育和其他动物不同,犬卵巢排出的卵母细胞处于生发泡(GV)期,在输卵管中恢复减数分裂.犬卵母细胞核难以观测并且不容易确定排卵时间,所以很难确定精子入卵的确切时间,并且多精受精的情况时常发生.回顾犬卵母细胞体外成熟(IVM)和体外受精取得的进展,对于提高其胚胎生产效率很有必要.     

牛体外受精胚胎衍生干细胞能力影响因素的研究

以牛卵巢卵母细胞体外受精获取囊胚期胚胎，比较体外受精牛胚胎不同获取内细胞团的方法和不同培养液对体外培养胚胎干细胞能力的影响。结果表明，囊胚期胚胎不除去透明带而直接培养产生胚胎干细胞，初次克隆率为55％；胰酶法去透明带分离的内细胞团（ICM）培养产生胚胎干细胞，初次克隆率为90％。免疫外科法去透明带分离的ICM在4种不同的培养液中，初次克隆率分别为16．4％、11．5％、21．8％、18．2％，但是其分离的ICM经传代后形成的衍生细胞不易发生分化，经过4～6代的传代，仍然保持其完整的形态，说明免疫外科法是一种理想的牛ICM分离法，培养液为D20＋LIF（40ng／mL）可用于牛胚胎干细胞培养。     

奶牛性别控制的研究现状与展望

家畜的性别控制是提高畜牧业经济效益的重要途径。本文介绍了奶牛性别控制的途径、方法、研究现状及其应用前景。     

猪体外受精技术研究进展

猪体外受精是动物胚胎工程中的关键辅助生殖技术,利用屠宰场卵巢卵子资源,可实现优质胚胎规模化体外生产.结合胚胎移植和基因编辑技术,可生产出试管猪和基因编辑猪,科研和产业前景巨大.然而,与其他物种相比,猪体外受精技术方案还不完善,胚胎发育效率和质量仍旧低下,尤其是卵子多精子受精问题仍然没有得到解决.本文总结了卵母细胞成熟、...     

抑制素的研究进展及其在动物繁殖中的应用

抑制素(IB)是一种糖蛋白类激素，对动物的生殖机能有重要的调节作用。主动和被动免疫抑制素，可提高动物体内FSH水平，使动物的排卵率升高。本文综述了抑制素的研究进展、免疫机理及其在家畜繁殖中的应用。     

影响梅山猪繁殖性能的生理结构及遗传因素研究进展

梅山猪是太湖猪的一个类群,以繁殖力高闻名于世.本文通过对梅山猪高产仔数性状的生理结构、遗传因素等加以综述,主要阐述了梅山猪的子宫、胎盘对高产的作用、影响多产仔性能QTL的精细定位、主效基因的多态性与高产仔数之间的关系及早期胚胎特有的发育机能对高产的影响.探讨了如何从基因组水平研究梅山猪高产的成因,以期为深入地解析梅山猪高产的分子遗传机制提供一些参考.     

由牛体外受精胚胎分离胚胎干细胞

以DMEM＋15％NBS＋0．1mmol/Lβ－巯基乙醇＋0．01μmol/L亚硒酸钠＋10μg/L LIF＋10μg/L IGF－1作为培养液，以原代小鼠胎儿成纤维细胞为饲养层，利用8日龄牛体外受精胚胎获得了传3代的牛类胚胎干细胞（类ES细胞）。通过体外分析试验，对所得类ES细胞的多能性进行了鉴定。结果在培养2d后，牛类ES细胞分化形成了类似于扩张囊胚的结构，悬浮于培养液中。     

哺乳动物性别控制的研究进展

目前哺乳动物的性别控制主要是通过XY精子分离和早期胚胎性别鉴定来实现的。其他常用的性别控制的方法主要有：受精时间控制法、阴道pH值调节法和营养调节法等。本文就性别决定的机理、XY精子分离以及早期胚胎性别鉴定的几种方法进行综述，并对性别控制存在的问题及发展前景进行讨论。     

促性腺激素释放激素及其类似物在母猪繁殖中应用的研究进展

促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH))是下丘脑分泌的生殖激素,主要通过下丘脑-垂体-性腺轴参与调控动物的生殖活动,也可直接作用于性腺或其他器官发挥重要功能。哺乳动物的GnRH具有相同的十肽结构,通过改变十肽结构中第六、九、十位氨基酸可合成不同的GnRH类似物。GnRH及其类似物可通过刺激促黄体素(LH)分泌、抑制雌激素受体二聚化及调节胚胎附植期相关蛋白质的合成来影响动物的繁殖性能。GnRH及其类似物已被证明可提高猪的繁殖力。在母猪生产中,GnRH类似物的应用仍存在受胎次影响、促进排卵但不能增加产仔数等问题。文章主要从GnRH的来源与功能、GnRH及其类似物的结构、GnRH受体(GnRHR)的结构与功能、GnRH及其类似物对母猪繁殖性能的影响,以及存在的问题与展望五方面介绍了GnRH及其类似物在母猪繁殖中的应用研究进展。