东北刺人参愈伤组织诱导和继代的研究

[目的]研究东北刺人参愈伤组织的诱导和继代方法。[方法]以取自长白山的刺人参植株为材料,研究不同外植体、培养基、激素对刺人参愈伤组织诱导的影响。[结果]叶片为刺人参组织培养的最适宜外植体;5月为外植体的最佳取材时期;以MS为基本培养基,并添加1.0 mg/L 2,4-D和1.0 mg/L 6-BA的培养基中愈伤组织诱导率最高;最佳继代培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L。[结论]东北刺人参的最适愈伤诱导培养基和继代培养基分别是:MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L。     

玉米再生体系建立及其影响因素的研究

以玉米骨干自交系K12、137、87-1和综3的幼胚为外植体,研究基因型、胚龄、继代次数、诱导（分化）培养基中激素浓度对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导、保持和植株分化的影响。结果表明,基因型是玉米幼胚培养能力的主要影响因子。中等大小（1.0～2.0 mm）的幼胚都具有较高的愈伤组织诱导率。2,4-D浓度对玉米幼胚的胚性愈伤组织诱导率有很大的影响,而且不同基因型的最大诱导率所需的2,4-D浓度也不相同。为防止2,4-D浓度过高引起无性系的变异,本试验确定的诱导培养基的2,4-D浓度为2.0 mg/L。继代培养基中1 mg/L的2,4-D对胚性愈伤组织诱导和保持起关键作用。最佳分化培养基为N6盐＋B5有机＋2.0 mg/L甘氨酸＋1 g/L CH＋1.0 mg/L 6-BA＋30 g/L蔗糖。     

不同激素组合对草麻黄愈伤组织诱导的影响

［目的］研究不同激素组合对草麻黄愈伤组织诱导的影响。［方法］以草麻黄子叶为外植体,在附加不同浓度和比例2,4-D、NAA、6-BA、KT的MS培养基中,比较不同激素组合对愈伤组织诱导的影响,并绘制出草麻黄愈伤组织的生长曲线。［结果］结果表明,最适合草麻黄愈伤组织诱导的培养基为MS＋2,4-D 2.0 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L,诱导率最高为77.5%。草麻黄愈伤组织生长曲线呈S形,在第8天左右进入快速增长期,最佳继代时间在24 d左右。［结论］2,4-D与6-BA配合使用更有利于草麻黄愈伤组织的诱导。     

杜鹃红山茶愈伤组织诱导的初步研究

以杜鹃红山茶嫩茎、叶柄以及叶片为外植体,研究不同激素组合及不同外植体对愈伤组织诱导效应的影响,研究结果表明:MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA是杜鹃红山茶愈伤诱导的最佳培养基,MS+1.0 mg/L 2,4-D+3.0 mg/L6-BA+1.5 mg/L IAA是最佳的继代培养基。叶柄在愈伤诱导率及生长状况上优于其他外植体。     

红掌工厂化育苗关键技术研究

[目的]研究红掌工厂化育苗的关键技术。[方法]以红掌盆花和切花品种的叶片、叶柄、花苞片和花苞柱头为外植体,进行组培快速繁殖技术研究,探讨外植体的选择和消毒条件以及不同培养基对红掌愈伤组织的诱导、增殖和生根影响。[结果]叶柄为最佳外植体,愈伤诱导率最高,达78.3%;外植体采用0.1%HgCl2消毒8min的效果最好;粉冠军和MIDORI的最佳愈伤组织诱导培养基为1/2MS＋6-BA1.50mg/L＋KT1.00mg/L＋2,4-D0.10mg/L;最佳愈伤组织继代培养基为MS＋6-BA0.50mg/L＋KT0.50mg/L＋NAA0.10mg/L,添加10%的椰子汁或香蕉浆有利于增殖和丛芽生长,增殖率最高达2.83倍;最佳生根培养基为1/2MS＋NAA0.10mg/L＋IAA0.10mg/L,生根率达100%。[结论]该结果为红掌工厂化育苗体系的建立奠定了基础,对确保红掌产业的发展具有重要意义。     

杜仲愈伤组织诱导与继代培养研究

[目的]对杜仲进行愈伤组织诱导及继代培养,建立愈伤组织的培养系统。[方法]以杜仲子叶、幼叶、下胚轴为外植体,接种于不同培养基中诱导和继代。[结果]不同外植体愈伤组织的诱导率高低顺序为：下胚轴〉子叶〉幼叶。子叶和幼叶在MS＋NAA 1.00 mg/L、MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中诱导出的愈伤组织在MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 2.00 mg/L、MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中继代培养为佳;胚轴在MS＋NAA 3.00 mg/L、MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 1.00 mg/L和MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中诱导出的愈伤组织在MS＋6-BA1.00 mg/L＋NAA 2.00 mg/L、MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 1.00 mg/L和MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中继代培养为佳。[结论]杜仲的子叶、幼叶和胚轴可采用多条途径实现愈伤组织的诱导和继代增殖培养,为进一步筛选高产细胞系打下基础。     

玉米自交系幼胚高效再生系统的建立

以22份玉米自交系为试验材料,以幼胚为外植体,研究基因型、诱导（分化）培养基、继代次数、Ag-NO3浓度对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导、保持和植株分化的影响。结果表明,玉米幼胚培养能力受基因型、培养基及二者互作效应的影响,基因型是主要的影响因子。3 mg/L的2,4-D对胚性愈伤组织诱导和保持起关键作用;0.5 mg/L 6-BA抑制胚性愈伤组织的发生;8-12 mg/L AgNO3明显改善部分基因型愈伤组织质量,提高胚性愈伤组织诱导率。分化培养基中添加1 mg/L的KT和0.5 mg/L的IBA促进绿苗的分化和根系的生长。胚性愈伤组织继代3-5次后调整到最佳状态。确定了玉米幼胚培养胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为N6＋3 mg/L 2,4-D＋8-12 mg/L AgNO3＋0.2 mg/L IAA,最佳分化培养基为N6＋1 mg/L KT＋0.5 mg/L IBA。     

不同激素配比对大豆子叶愈伤组织诱导的影响

[目的]研究不同激素配比对大豆子叶形成愈伤组织的影响。[方法]以高蛋白大豆东农42号子叶为供试外植体,以6-BA2.0mg/L＋NAA0.2 mg/L和2,4-D2.0 mg/L＋KT1.0 mg/L的激素对其进行诱导,研究不同激素对大豆子叶愈伤组织的诱导效果。[结果]以添加6-BA2.0 mg/L＋NAA0.2 mg/L培养基培养的材料诱导率为71.4%;以添加2,4-D2.0 mg/L＋KT1.0 mg/L培养基培养的材料诱导率为78.6%,诱导产生的愈伤组织大部分呈绿色、质密;未添加激素组诱导率为85.7%,但无生长迹象。所加激素均能诱导大豆子叶形成愈伤组织,但不同激素种类诱导愈伤组织能力有差异,以添加2,4-D2.0 mg/L＋KT1.0 mg/L的效果最好。[结论]不同种类的外源激素对外植体的诱导作用不同,大豆子叶愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋2,4-D2.0 mg/L＋KT1.0 mg/L。     

高羊茅成熟胚愈伤组织诱导及植株再生

[目的]优化高羊茅成熟胚的组织培养条件。[方法]以高羊茅成熟胚为外植体,MS为基本培养基,探讨不同浓度激素和激素组合对愈伤组织诱导、继代培养及植株分化的影响。[结果]添加2,4-D2.0mg/L的MS培养基中愈伤组织的诱导率最高,达63.5%;在1.0～4.0mg/L范围内,随着培养基中2,4-D浓度的降低,愈伤组织的颗粒性增强,致密性增加,含水量下降,其中MS＋2,4-D2.0mg/L为愈伤组织继代的最佳培养基;愈伤组织在含2.0mg/L6-BA和0.10mg/LNAA的MS培养基上植株分化率最高,达80.2%;将再生苗转移至不含植物生长调节剂的1/2MS培养基上进行增殖、壮苗,然后将其移栽入沙质壤土中,移栽成活率可达90%。[结论]该研究建立了高羊茅的高效再生体系。     

培养基和植物激素对青钱柳茎段和叶片愈伤组织诱导的研究

为建立青钱柳组培快繁体系以解决青钱柳资源贫乏问题,以青钱柳茎段和叶片为外植体,对影响青钱柳愈伤组织诱导的基本培养基、激素种类及浓度等关键因素进行了研究。结果表明,基本培养基以改良MS诱导茎段愈伤组织效果最好,诱导率可达89.09%;MS诱导叶片愈伤组织效果最好,诱导率可达81.82%;2,4-D比NAA能够较快地诱导外植体产生愈伤组织,其中2.0 mg/L 2,4-D诱导率最高,可达88.57%,且形成愈伤组织多。2,4-D2.0 mg/L 6-BA1.0 mg/L的组合对青钱柳茎、叶诱导愈伤组织效果最佳,茎、叶诱导率分别可达91.57%和86.14%,且诱导出的愈伤组织生长快。     

中国李Nubiana离体叶片愈伤组织诱导的研究

以Nubiana叶片为试材,对其愈伤组织的诱导、继代培养及褐变调控进行了研究。结果表明:Nubiana叶片愈伤的诱导及继代培养以WPM附加BA 0.5 mg/L和2.4-D 2.0 mg/L的培养基上效果最好;0.1%的柠檬酸(CA)具有明显地促进愈伤组织生长、抑制褐变的作用,而聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的效果最差;3%的葡萄糖(Glu)最适于愈伤组织的诱导及继代。综合以上研究结果,获得较好的愈伤组织的适宜培养条件是:WPM BA 0.5 mg/L 2,4-D 2.0 mg/L Glu 3% CA 0.075%~0.1%,暗培养28~30 d。     

白羊草成熟种子组织培养影响因素的研究

以白羊草成熟种子为外植体,研究不同表面消毒方法、外界条件及继代对愈伤组织诱导的差异。结果表明:外植体选用酒精浸泡30 s、0.1%升汞处理15 min为理想消毒方法;MSB+2.0 mg/L 2,4-D结合完全黑暗培养,愈伤诱导率达到86.7%;经继代培养基MSB+1.0mg/L 2,4-D继代后,分化率明显提高。     

紫苏愈伤组织诱导及继代培养条件优化

对紫苏愈伤组织诱导培养基、外植体、激素、光照条件以及基因型进行筛选,对愈伤组织继代培养中接种量和培养时间对增长量的影响进行探讨。结果表明,MS+6 BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L诱导紫苏下胚轴愈伤组织效果最好,而MS+6 BA 2.0 mg/L+2,4 D 1.0 mg/L诱导子叶愈伤组织效果最好,光照条件为12 h/d时有利于愈伤组织的诱导。供试10个不同基因型紫苏中,ZB 1愈伤诱导率最高。接种密度1.2 g/皿（直径10 cm 培养皿）,培养时间24 d紫苏愈伤组织继代培养增长量高,愈伤品质好。     

凹叶厚朴用于细胞悬浮培养的愈伤组织的制备研究

目的 研究凹叶厚朴适用于细胞悬浮培养的愈伤组织。方法 通过对基本培养基（B₅、MS和1/2MS）、外植体（茎段、顶芽和叶片）、激素浓度及组合进行筛选的方法进行厚朴愈伤组织诱导和继代研究。结果 B₅ 为最适合厚朴愈伤组织诱导的基本培养基;顶芽是最佳诱导愈伤组织的材料;最适合厚朴愈伤组织诱导的培养基为B₅+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA;最佳继代培养基为B₅+2.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,愈伤组织生长倍数达到2.87倍。结论 初步筛选出凹叶厚朴用于细胞悬浮培养的愈伤组织,为凹叶厚朴细胞培养奠定基础。     

彩色马蹄莲‘高原’组培快繁技术的研究

以彩色马蹄莲‘高原’块茎为材料研究其组培快繁技术,筛选适合彩色马蹄莲快繁的培养基。结果表明：在初代试验中对块茎的消毒以0.1%升汞处理15 min为宜;MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1~0.2 mg/L NAA为适宜的愈伤组织诱导培养基;MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA能使愈伤组织分化出状态良好的丛生芽并继续增殖;在生根培养基1/2MS+0.2 mg/L NAA+10%香蕉上生根率100%,试管苗生长健壮,根系粗壮发达。试验为彩色马蹄莲的快繁体系及规模化生产提供参考依据。     

喜树细胞悬浮培养体系的建立

以喜树的幼嫩叶片为材料,探讨了MS、SH、B5基本培养基和不同激素(2,4-D、NAA、6-BA)配比对愈伤组织诱导及继代培养的影响,并筛选喜树细胞悬浮培养体系的最优培养基配方.结果表明,喜树幼嫩叶片外植体诱导愈伤培养以SH+2.0mg/LNAA+0.5mg/L6-BA为最优,愈伤组织诱导率为92%.继代培养以MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA为最适,在此条件下诱导的愈伤组织质地疏松,适于进行悬浮培养.     

苦菜的组织培养与快速繁殖

通过对苦菜的组织培养 ,研究了外植体不同取材部位及不同激素种类、浓度对愈伤组织及芽诱导和增殖的影响。结果表明 :苦菜根的繁殖能力很强 ,但分化时间稍长 ;2 ,4 -D对愈伤组织的诱导能力较强 ,NAA对芽的诱导能力较强。同时 ,试验还筛选出了诱导愈伤组织的适宜培养基 :MS + 6 BA 2 .0mg/L + 2 ,4 -D 0 .2mg/L ;芽分化培养基 :MS + 6 BA 2 .0mg/L +NAA 0 .0 5mg/L ;继代培养基 :MS + 6 BA2 .0mg/L +NAA 0 .2mg/L。     

新疆白鲜愈伤组织生长动态研究

[目的]研究了新疆白鲜愈伤组织诱导及其生长动态,为从中提取药物活性成分奠定基础,同时是解决资源贫乏的一条新途径。[方法]以幼叶、真叶、下胚轴为外植体,研究不同培养基、激素配比、碳源对新疆白鲜出愈率的影响以及愈伤组织生长动态变化。[结果]幼叶在激素浓度为6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L的MS和B5培养基出愈率分别为83.0%和93.3%,且在低盐B5培养基上诱导率较高;不同外植体幼导率为子叶>下胚轴>真叶,子叶的诱导较快,诱导率较高;蔗糖作为碳源时效果较好,诱导率为100%;愈伤组织生长的倍增曲线揭示继代培养时,第5~17天为快速增长期,且在暗处生长较好,继代周期20 d较为合适;不同激素浓度对愈伤组织的质量亦有较大的影响。[结论]y1y、2激素组合诱导出的愈伤组织虽较致密,但在体胚发生中均未达到理想效果,也未能进一步分化。将其转入含有激动素KT 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L的MS培养基中,发现愈伤组织在光下变黄绿色,生长也较紧凑,可诱导出胚状体。     

烟草K326叶片愈伤组织诱导及继代的初步研究

以烟草K326叶片为外植体,采用MS基本培养基,研究了不同激素组合对愈伤组织的诱导效果,以及继代培养过程中不同浓度的NAA和6-BA对愈伤组织生长的影响。研究结果表明:2.4-D2.0 mg/L,6!BA0.5 mg/L组合诱导效果最好,7d后叶块边缘长出愈伤组织,诱导率为100%。不同浓度NAA和6-BA组合的愈伤组织生长速度、结构、质地和颜色有显著差异。以NAA0.1 mg/L+6-BA3.0mg/L、NAA2.0mg/L+6-BA0.5 mg/L和NAA1.5 mg/L+6-BA0.5mg/L3种培养基组合的愈伤组织生长较快。其中前一组合愈伤组织为绿黄色,结构致密,质地硬;后两种组合愈伤组织为黄白色,结构疏松,质地脆。