不同培养条件和外植体处理对红掌品种组培效果的影响

天南星科花烛属 (AnthuriumSchott)为深受人们喜爱的高档花卉 ,包括 10多种和较多的品种。红掌 (Anthuriumandraeaum ,又名花烛 )为花烛属重要种类 ,其商业生产种苗主要靠组培快繁手段。但红掌组织培养难度较大 ,特别是表面灭菌困难、初代接种诱导慢、增殖效率低 ,直接影响在实际生产中的应用。而这些问题与红掌品种、外植体处理、培养基配方和培养条件关系极大。本试验探讨不同培养条件和外植体处理对红掌品种组培效果的影响。1　材料与方法1 1　母本材料　包括粉冠军 (PinkChampion)、亚历桑娜 (Arizona)、情人 (Valentino)、卫城(Ac…     

红掌组织培养过程中外植体褐变的研究

在红掌组织培养过程中,外植体易发生褐变,严重阻碍了红掌组织培养的正常进行。现以红掌‘红粉佳人’(Anthuriumandraeanum cv.Sonate)品种为试材,取健康植株幼嫩叶片为外植体,对其愈伤组织培养过程中褐变现象进行研究。研究不同抗氧化剂、吸附剂(柠檬酸、抗坏血酸VC、叶酸、聚乙烯吡咯烷酮PVP、活性碳AC)以及不同培养基硬度的防褐化效果。结果表明:使用硬度为5 g/L琼脂的MS培养基,并添加6-BA1.0 mg/L+2,4-D0.2 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.2%可有效控制褐变并获得较高的愈伤诱导率。     

红掌组织培养技术研究

对影响红掌愈伤组织诱导及芽分化的几个因素进行了研究.结果表明:同一成熟度的外植体,其叶柄愈伤组织诱导率明显优于叶片和花柄.诱导愈伤组织形成的培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D;芽分化和增殖培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;生根与增殖同步.     

克服植物组织培养中内生菌污染的研究

组织培养中内生菌污染普遍,严重影响组织培养和工厂化育苗。文章在查阅大量文献基础上,探讨内生菌污染产生的原因,分析控制内生菌污染的有效措施。     

红掌组培快繁技术研究概况

红掌作为一种室内观花观叶皆宜的花卉,颇受消费者青睐,其供不应求的问题愈发明显,利用组织培养技术快速繁殖红掌苗已成为红掌生产应用中的重要课题。本文围绕红掌的腋芽培养、继代培养、生根条件3个方面作了详细叙述,明确了红掌组培快繁技术研究的相关内容,发展前景。     

红掌组培快繁技术研究

以红掌的顶芽、茎段、叶片、叶柄等为外植体,通过以芽繁芽方式或愈伤组织诱导芽途径诱导无菌芽,并获得再生植株,以期建立一套完善的红掌组培快繁技术体系.结果表明:改良MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基组合最适合红掌以芽繁芽的增殖芽,繁殖系数达4.5以上;而改良MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L培养基组合更适合愈伤组织分化芽和增殖芽,芽繁殖系数达5.8以上;最好的生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L.     

不同红掌品种在组培生产上的差异表现

以"亚利桑那"、"阿拉巴马"、"粉冠军"3个红掌品种根茎、叶柄、叶片为外植体,研究比较了3个品种的外植体诱导、继代增殖、生根培养的差异表现。结果表明:根茎诱导无菌芽成功率为86.9～90.0%,叶片诱导愈伤组织成功率为80%～84%,叶柄诱导愈伤组织成功率为64%～68%,根茎一般较难诱导出愈伤组织;不同品种的红掌增殖继代的增殖倍率不同,"粉冠军"最高为6.8,其次为"亚利桑那"5.8,"阿拉巴马"为3.8。红掌的生根较易,不同品种的红掌生根率均可达到95%以上。     

红掌组培再生植株中表型突变体的ISSR分析

以红掌组培再生植株中发生表型突变的植株为试材,采用PCR多态性分析的方法,研究组织培养再生植株中产生的表型变异株的基因变化。结果表明:利用筛选的8条ISSR引物进行PCR多态性分析,共获得73条扩增产物,其中多态性条带22条,多态性程度为30.2%。聚类树状图表明,"亚利桑娜"品种及其组织培养再生植株的遗传距离在0.0274~0.3636之间,它们之间具有非常相似的遗传背景。其中变异株V1与亲本相比,在基因型上的变化不显著,而变异株V2、V3、V4的基因型与亲本显著不同,有些条带消失,并产生了一些新的条带;在组织培养再生植株中产生的表型变异株可能是组织培养过程中通过遗传重组产生的新基因型,它们将为花卉育种提供一种新的种质资源来源。     

红掌组培变异株的特异DNA片段分析

利用ISSR引物对红掌亲本及其组织培养后代的形态变异株进行2次PCR扩增分析,回收特异DNA片段,测定其扩增产物的基因序列,并用BLAST方法进行同源性分析。结果表明:变异株的基因组特异DNA片段为680 bp,在核酸和蛋白质水平均没有发现同源性较高的基因或蛋白质,说明红掌在组织培养过程中可能产生新的遗传重组,出现新的基因型。     

菊花不同外植体组培快繁及其再生体系的研究

以菊花不同外植体为试材,采用离体培养快速繁殖的方法,研究菊花不同外植体在不同的培养基中诱导不定芽再生的频率。结果表明:菊花不同基因型外植体在含适宜6-BA、NAA等激素的培养基中形成愈伤组织的难易程度不同,愈伤组织诱导形成不定芽的能力强弱也不一样;不同基因型菊花外植体的不定芽诱导率高低排序是花蕾花瓣茎段叶片;对菊花的花蕾、花瓣、茎段和叶片来说最适合的培养基配方是MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L,不同培养基诱导不定芽的能力为花蕾花瓣茎段叶片,其中,菊花花蕾和花瓣的再生能力较强。最合适的生根培养基是1/2MS+NAA 0.2mg/L。该研究成功的建立了菊花不同外植体离体培养再生途径,并获得了再生植株。     

红掌新品种‘丹韵’

‘丹韵’是以‘快乐’为母本、以‘紫旗’为父本杂交选育而成的红掌新品种。株形中等,平均株高33.8 cm。叶片卵形,平均长20.3 cm,宽10.7 cm。佛焰苞明显高于叶,卵形,亮红色,光泽度极强,平均长8.5 cm、宽7.0 cm。肉穗花序直立,紫红色,平均长4.9 cm。从6 ~ 10 cm高的商品小苗到成品花约15个月。     

红掌新品种‘白马王子’

‘白马王子’是‘阿拉巴马’（Alabama）组培变异单株经无性繁殖选育而成的白色盆花红掌新品种。从组培苗出瓶至形成成品约18个月,株形中等偏大,平均株高66.0 cm,冠幅56.8 cm。佛焰苞心形,白色富有光泽,高于叶,平均长12.1 cm,宽10.4 cm。肉穗花序内弯,平均长3.2 cm,基部颜色初始为淡黄,随着成熟逐渐转为白色。     

红掌根腐病病原鉴定及其PCR 检测方法

 利用真菌通用引物ITS1 和ITS4 扩增红掌根腐病菌转录间隔区并进行序列测定,通过序列 比较,设计了1 对红掌根腐病菌的特异引物SF1/SR2,对30 个红掌根腐病病原菌、8 种其它真菌和2 种 细菌基因组DNA 进行PCR 扩增。结果表明,只有红掌根腐病菌获得572 bp 的特异带。使用引物SF1/SR2 对华丽腐霉进行PCR 扩增,其检测灵敏度在DNA 水平上可达1 pg。运用设计的引物从红掌根腐病菌基 因组DNA 以及人工接种和自然发病的红掌植株中扩增到572 bp 的特异片段,实现了对红掌根腐病菌的快 速可靠的检测。     

红掌苗期施肥试验研究

试验初步探索了5种不同类型的肥料施用对红掌苗期生长的影响,旨在为红掌苗期的科学施肥提供理论依据。结果表明:处理D对红掌苗期生长的叶片数、株高、最大叶片叶长及最大叶片叶宽4个指标综合效果最佳,处理E、C次之,处理B和A表现最差。     

红掌炭疽病病原的分离鉴定及其核糖体DNA2ITS序列分析

 在广州、南京和扬州等地红掌病株上分离的炭疽菌中存在形态差异明显的两个群体。各选取两个代表菌株进行形态特征、致病性、寄主范围鉴定及核糖体DNA ITS序列分析。结果表明,红掌炭疽病病株上有两种致病菌：胶孢炭疽和毁灭炭疽,后者导致红掌炭疽病为首次报道。     

红掌愈伤组织和再生团块发育过程中糖和蛋白质的组织化学研究

以红掌叶片诱导出的4类愈伤组织和气生根根段诱导的再生团块为试材,研究糖和蛋白质在愈伤组织衰老与再生团块发生发育过程中的变化。经石蜡切片PAS和汞溴酚兰组织化学染色观察发现,糖主要以颗粒状存在于愈伤组织细胞中,并有明显的围绕核的现象,蛋白质主要集中于细胞核及其周围。糖和蛋白质的含量在黄绿愈伤组织中有明显的从外向内减少的梯度变化;深绿愈伤组织中梯度不太明显。糖在金黄色愈伤组织中含量很低,没有梯度;在褐色愈伤组织中散乱分布。蛋白质含量变化在金黄色愈伤组织中由外层细胞向内层细胞有一定的梯度但不明显;在褐色愈伤组织中没有梯度。刚形成的再生团块的糖和蛋白质含量在由外向内的细胞中有明显的梯度变化,在再生团块膨大生长过程中两者含量少,没有梯度变化。分化期再生团块中的糖主要集中在分裂旺盛的分生细胞团和维管组织周围,蛋白质则集中于分生细胞团的细胞中。在各类愈伤组织和再生团块中均出现各种特化细胞。糖的含量及其梯度变化是愈伤组织和再生团块分化的重要内在条件,蛋白质含量以及核形态是否完整是愈伤组织和再生团块分化的关键。     

花烛体细胞胚胎发生及植株再生研究

 以花烛(Anthurium andraeanum Lind. ) 盆花品种无菌苗叶片、叶柄、根段为外植体, 对花烛体细胞胚胎发生及植株再生进行了研究, 建立了花烛体细胞胚胎发生体系。结果表明, 花烛叶片较其他外植体更适宜体细胞胚的诱导; 胚性愈伤组织及胚性结构诱导最适培养基为改良MS + 2, 4-D 2.0～3.0 mg·L ^{- 1} + KT 0.5 mg·L ^{- 1} +蔗糖2% +葡萄糖1% , pH 5.5, 暗培养40 d, 诱导率可达90.3%; 体胚发育适宜培养基为改良MS + 6-BA 0.5 mg·L ^{- 1} +蔗糖3% , 光强20 μmol·m ^-2 · s^-1 , 培养20 d后体胚萌发率达6219%; 萌发的体胚在发育培养基上继续培养30 d后均能发育成完整植株。对不同阶段培养材料的组织结构及超微结构的观察证明了花烛体胚发生过程。