在鸡胚中培养柔嫩艾美耳球虫的最适条件

观察了在不同条件下柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)在鸡胚中的发育。用10~3子孢子经尿囊腔、蛋黄囊或绒毛尿囊膜(CAM)接种10日龄鸡胚,置41℃培养。仅从接种鸡胚的尿囊腔中发现了卵囊,接种后48小时在那里发现了第一代裂殖体,72小时发现了第二代裂殖体,144小时发现了配子和卵囊。许多卵囊在CAM和尿酸盐沉淀中,少数在尿囊液中。接种后7和8天观察鸡胚,卵囊的数量相似,这两天鸡胚中孢子发生率无明显差异。在接种的8和12日龄的鸡胚中,死亡率差异不显著,而在8日龄接种鸡胚得到的卵囊数最低。死亡率随接种量(在100和100,000之间)的增加而增加,卵囊数的增加与剂量(从63到10,000)的对数成比例。从试验结果可以明显看出,将1×10~3个子孢子经尿囊腔接种于9到12日龄鸡胚,然后在41℃孵育7—8天,可从CAM和尿酸盐中有效地获得卵囊。     

北京鸭毁灭泰泽球虫Tyzzeria perniciosa内生发育的研究

作者对北京鸭毁灭泰泽球虫的内生发育进行了研究,所得结果如下: 1.感染后48小时发现第一代裂殖体,寄生在肠绒毛远端部上皮细胞核的上方。肠绒毛的基部、肠腺和固有层中未发现虫体。在第一代裂殖体出现的最早时间上,我们的结果和Allen(1936)的报道不同,该作者于感染后24小时见到第一代裂殖体。而和Versenyi(1967)的报道相一致,该作者亦于感染后48小时发现第一代裂殖体。但Versenyi所报道的裂殖体偏大,寄生于粘膜间质细胞中。 2.感染后96小时发现第二代裂殖体,比Allen(1936)和Versenyi(1967)所报道的偏小。 3.Allen(1936)认为毁灭泰泽球虫内生发育的无性世代,至少有三代,Versenyi(1967)认为不大可能多于两代。我们认为最大可能是两代:第一代裂殖体最早出现于感染后48小时,延续到84小时,寄生于肠绒毛上皮细胞核的上方,个别的在核下方,靠近固有层;第二代裂殖体最早发现于感染后96小时,延续至120小时,寄生于肠绒毛上皮细胞核的下方和固有层以及肠腺腺细胞核的内侧。 4.感染后96小时发现大小配子体,延续到120小时以后,直至143小时仍能在12指肠和卵黄蒂前后肠段绒毛固有层中见到大配子。Allen报道感染后48小时出现大小配子体;Versenyi(1967)报道最早于感染后96小时出现配子细胞。 5.感染后104—120小时发现卵囊;到感染后144—216小时,即不再发现裂殖体和大、小配子体,亦未见卵囊。感染后第五天(118小时),随粪便排出卵囊。 6.内生阶段的虫体寄生于12指肠、空肠和回肠(整个小肠),尤以卵黄蒂前后段受侵害最为严重。感染严重时,盲肠和直肠也见有虫体。     

柔嫩艾美耳球与鸡体的相互作用

鸡吞食柔嫩艾美耳球虫卵囊后感染，子孢子穿过绒毛上皮和固有层，进入隐窝上皮细胞，经数次无性生殖和有性生殖，形成裂殖子和配子体。大配子被小配子受精后发育成卵囊并脱落到粪便中，鸡感染球虫后，鸡体免疫系统抑制球虫的发育有三个时期：子孢子寻找穿透位点时；子孢在子绒毛上皮时；子孢子穿过固有层时。     

柔嫩艾美耳球虫与鸡体的相互作用

鸡吞食柔嫩艾美耳球虫卵囊后感染,子孢子穿过绒毛上皮和固有层,进入隐窝上皮细胞,经数次无性生殖和有性生殖,形成裂殖子和配子体。大配子被小配子受精后发育成卵囊,并脱落到粪便中,鸡感染球虫后,鸡体免疫系统抑制球虫的发育有三个时期：子孢子寻找穿透位点时;子孢子在绒毛上皮时;子孢子穿过固有层时。据此,我们研究了抗球虫免疫中诱导和效应阶段的决定因素。结果表明,子孢子在固有层中的穿透诱导了免疫;子孢子是免疫有关的最重要的发育阶段;细胞毒性Ｔ细胞对抑制球虫发育是必需的。     

北京鸭菲莱氏温扬球虫内生发育的研究

作者对北京鸭菲莱氏温扬球虫 Wenyonella philiplevinei 的内生发育进行了研究,所得结果如下:1.雏鸭感染后36～48小时发现第一代裂殖体,寄生于卵黄蒂前后和回肠肠绒毛顶端上皮细胞内,位于核的上方或下方。裂殖体和殖裂子都比 Leibovitz(1968)所报告的偏小,出现的时间偏后,该作者在雏鸭感染后24小时观察到第一代裂殖体。2.在雏鸭感染后54～72小时发现第二代裂殖体,寄生于卵黄蒂前后肠段、回肠和盲肠的肠绒毛上皮细胞和固有层中,比 Laibovitz(1968)所报道的偏小,出现的时间偏后,该作者报道出现于感染后49小时。3.感染后78～108小时发现第三代裂殖体,寄生于卵黄肇前后、回肠和盲肠肠绒毛上段上皮细胞内和固有层中,亦较 Leibovitz(1968)所报道的偏小,出现的时间偏后,该作者说出现于感染后74小时。4.感染后84小时见到配子体,91～120小时在卵黄蒂前后肠段、回肠和盲肠见到成熟的大小配子体,比 Leibovitz(1968)所见到的偏小,出现的时间略偏前,该作者在感染后93小时见到大小配子体。5.感染后91小时在回肠肠绒毛上皮细胞内发现卵囊,延续至120小时;到132小时仍能在回肠绒毛固有层中见到极个别的囊。到144小时即未再见到卵囊。人工感染的潜在期为95小时,Leibovitz(1968)报道为93小时。6.内生发育阶段寄生于卵黄蒂前后、回肠、盲肠和直肠肠绒毛上段的上皮细胞内和固有层中,曾在极个别患者的12指肠和空肠发现虫体,与 Leibovitz(1968)的观察基本相似,但他报道在盲肠12指肠和空肠未见到虫体。7.感染78至98小时之间,在卵黄蒂前后段、回肠和盲肠,见有不同程度的肠绒毛上皮脱落,水肿,固有层充血,和成纤维细胞增多等变化。肉眼病变不显著。所见病变比 Leibovitz(1968)所描述的偏轻。     

斯氏艾美耳球虫细胞化学的研究

本文用组织化学技术对斯氏艾美耳球虫内生阶段和子孢子的细胞化学进行了研究。结果发现,多糖存在于第二代裂殖体、大配子体、大配子、合子、未孢子化卵囊和子孢子内。脂肪存在于第二代A型裂殖体、大配子、合子、未孢子化卵囊及子孢子内。整个内生发育阶段的虫体和子孢子均含有蛋白质。两型裂殖体、大、小配子体、合子和子孢子内均有Feugan反应阳性的DNA存在,而RNA存在于整个内生阶段和子孢子中。内生阶段虫体和子孢子均有ACP和SDH,然而ALP只存在于内生阶段,子孢子缺乏。     

兔的隐孢子虫在鸡胚上培养成功

本试验采用硫酸锌漂浮法收集兔粪中的隐孢子虫卵囊,并用蔗糖梯度离心法进行纯化,卵囊经胰酶和兔胆汁消化脱囊产生子孢子后,由尿囊腔途径接种10日龄鸡胚,8 d后收获检查。结果发现尿囊绒毛膜(CAM)上有大量不同发育阶段的隐孢子虫虫体,并     

大量制备毒害艾美耳球虫配子体方法的研究

鸡经嗉囊接种毒害艾美耳球虫孢子化卵囊148 h后,从鸡小肠中段分离成熟的第二代裂殖子;经外科手术方法,将第二代裂殖子直接注入鸡盲肠内,使第二代裂殖子同步发育至配子体;手术后30 h剖检鸡,刮取盲肠黏膜,随后依次通过透明质酸酶消化、滤膜过滤、红细胞裂解、Percoll密度梯度离心等步骤,分离、纯化毒害艾美耳球虫配子体。结果显示,通过本方法分离、纯化的配子体纯度高、数量多,可用于基因转录组学、蛋白质组学、免疫学和疫苗等方面的研究。     

鸡传染性喉气管炎活疫苗生产工艺的改进——鸡胚绒毛尿囊膜渗透法接种应用实验

采用鸡胚绒毛尿囊膜渗透法给鸡胚接种病毒,收获感染的鸡胚绒毛尿囊膜制备鸡传染性喉气管炎活疫苗,相比于传统的人工气室绒毛尿囊膜接种法和尿囊腔接种法可降低鸡胚的早死亡率,提高鸡胚利用率,降低生产成本,提高单产量。     

肠艾美耳球虫配子生殖与病理变化

用单个肠艾美耳球虫Eimeria intestimalis Cheissin 1984卵囊感染无球虫兔,获得纯种进行研究。1.肠艾美耳球虫的配子生殖阶段寄生于空肠和回肠,此时宿主组织有较严重病变。12指肠、结肠和盲肠未见虫体,但在感染后264小时见盲肠的个别绒毛内有1～3个配子体,可能属偶然现象。2.感染后180小时发现极少数早期配子体,感染后192小时出现少量配子体寄生在空肠和回肠的绒毛和腺上皮细胞内,感染后216至264小时,绒毛上皮和腺上皮细胞内多为配子体、合子和卵囊所取代。感染后216小时出现极少量卵囊,264小时则见有大量卵囊。3.感染开始时(感染后61～73小时),回肠、空肠绒毛上皮正常;腺上皮细胞出现少量滋养体和裂殖体。96至192小时后,肠绒毛上皮和腺上皮受侵害程度渐趋严重,肠绒毛变矮,绒毛上皮及腺上皮细胞肿大变空,细胞核消失。许多腺泡塌陷。感染后216～264小时,肠绒毛受侵害最为严重,空肠和回肠绒毛萎缩或消失,变为一层矮柱或立方形上皮细胞或全无上皮细胞覆盖的绒毛。固有层均质红染,或颗粒状。肠腺塌陷,数量减少,大小不一。腺腔内见有配子体、合子或卵囊残留,部分腺泡上皮细胞再生,细胞核增生成堆。12指肠、盲肠和结肠正常。     

鸡传染性法氏囊炎活疫苗(B87株)生产工艺的改进--鸡胚绒毛尿囊膜渗透接种法应用试验

采用绒毛尿囊膜渗透法给鸡胚接种病毒,收获感染的胎儿及绒毛尿囊膜,制备鸡传染性法氏囊炎（B87株）活疫苗,相比于传统的人工气室绒毛尿囊膜接种法和尿囊腔接种法,可降低鸡胚早死率且无存活鸡胚,提高了鸡胚利用率,降低了生产成本.     

鸡卡氏住白细胞虫病研究进展

卡氏住白细胞虫的发育包括裂殖生殖,配子生殖和孢子生殖三个阶段,裂殖生殖和配子生殖的鸡体内完成,配子生殖的一部分及孢子生殖在库蠓体内完成,不同阶段的虫体具有不同的抗原成份,自然感染或人工接种子孢子于鸡均能诱导强烈的体液免疫应答,并对再次感染表现坚强而持久的抵抗力。据此建立的免疫扩散诊断方法具有方便,快速,准确等优点。卡氏住白细胞虫的子孢子能成功感染鸡胚。体外培养裂殖子可以发育到配子体阶段。此外,抗病     

堆型艾美耳球虫早熟减毒株裂殖子的细胞培养

以收集于雏鸡十二指肠的堆型艾美耳球虫早熟减毒株裂殖子接种于鸡胚成纤维细胞、鸡胚肝细胞、鸡胚小肠上皮细胞和雏鸡肾细胞,４１℃培养１２０小时,其在鸡胚成纤维细胞和鸡胚肝细胞中不能继续发育,在鸡胚小肠上皮细胞和雏鸡肾细胞中可发育到卵囊阶段。     

鸡新城疫与鸡痘二联活疫苗的研究

目前,我国各兽药生物制品厂所生产的鸡痘活疫苗一般分为两种,一种是鸡痘组织苗,即在鸡胚绒毛尿囊膜上接种鸡痘种毒,接种后120小时收获其增厚、水肿和有痘斑的全部绒毛尿囊膜制备的鸡痘苗,另一种则是鸡痘细胞苗,在免疫原性上前者要好于后者.鸡胚在接种鸡痘种毒后,不但绒毛尿囊膜产毒,而且其尿囊液和出现充血的胎儿中也会有很高浓度的鸡痘病毒.而制造鸡新城疫疫苗主要是收取尿囊液.     

鸡胚和雏鸡接种ALV-J相关急性纤维肉瘤浸出液的致病性比较

为了比较鸡胚接种ALV-J相关急性纤维肉瘤浸出液对胚体及雏鸡的致病性,将含ALV-J相关病毒的肉瘤浸出液分别经5日龄胚卵黄囊、11日龄胚绒毛尿囊膜、1日龄雏鸡腹腔接种,比较不同接种方式对SPF鸡胚及雏鸡的致病性.结果表明,5日龄卵黄囊接种的鸡胚在18～22日龄死胚率为14/30,肿瘤发生率为8/14; 11日龄绒毛尿囊膜接种的鸡胚在18～22日龄引起鸡胚死亡率为17/30,肿瘤发生率为6/17.对雏鸡的致病性比较表明,绒毛尿囊膜接种的13只出壳雏鸡全部死亡,有11只出现肿瘤.结果提示,绒毛尿囊膜接种的致病性不仅高于卵黄囊接种,也高于1日龄雏鸡接种.绒毛尿囊膜接种不仅肿瘤发生率高,且发生得更早、更快,可作为这种急性纤维肉瘤进一步作人工造病的实验模型.     

鹅球虫Eimeria Kotlani生活史的研究

作者研究了鹅球虫Eimeria,Kotlani的生活史。内生发育阶段的研究方法是用1～40万纯种孢子化卵囊人工接种44只10天龄幼鹅,每隔6—12小时定期剖杀,取回肠后段用3％戊二醛和1％锇酸双固定,逐级酒精脱水,环氧树脂包埋,用LKB修块机切片,甲苯胺蓝染色,镜检观察。外生发育的研究是,把收集的纯种卵囊,置2.5％的重铬酸钾液中,在28℃左右的温度培养,每隔2—3小时显微镜下观察一次。研究结果表明E.Kotlani的内生发育有四个裂殖阶段及一个配子生殖阶段,它们分别为:第一代无性裂殖阶段的发生时间是0～48小时,第二代是48～96小时,第三代是84～144小时,第四代是132～192小时。配子生殖阶段发生的时间是180～252小时。外生发育阶段,卵囊在培养至33小时后开始形成孢子囊,52小时完成卵囊孢子化。     

柔嫩艾美耳球虫大配子发育和卵囊的超微结构

利用透射电镜对柔嫩艾美耳球虫大配子发育和卵囊的超微结构进行了观察。结果表明，大配子体和小配子体寄生于相邻的宿主细胞内，相伴产生。大配子体的发育、大配子的形成、受精及卵囊形成均于带虫空泡内完成。大配子体系由末代裂殖子侵入肠上皮细胞后，缩短、长大、变圆而形成，大配子体和大配子外被单位膜，细胞核位于大配子体中央，早期大配子体的细胞核有1个明显的核仁，细胞质内逐渐形成大量成囊体1、成囊体2、大量支链淀粉和脂肪体，成囊体1比成囊体2形成的早。卵囊壁有5'层，内有大量支链淀粉和指肪体。含有大配子体、大配子和合子的带虫空泡内有丰富的泡内小管，它们是大配子体、大配子和合子获得营养物质和排出代谢废物的途径。     

鹅球虫Eimeria fulva的生活史及其感染引起的组织病理变化观察

12只10日龄雏鹅分别接种7.0×105~1.5×106个孢子化E im eria fu lva卵囊,在接种后24~264 h分期扑杀,对E.fu lva的生活史及其感染引起的组织病理变化进行了动态性观察。在内生性发育过程中,E.fu lva至少有2个世代的裂殖生殖阶段,每个成熟的裂殖体含15个左右的裂殖子。接种后168 h左右,虫体进入配子生殖阶段。感染后7.5 d始有卵囊排出,显露期为2.5 d。25℃下卵囊孢子化时间为60~84 h。E.fu lva可寄生于整个肠道和泄殖腔的绒毛上皮、肠腺和固有膜中,引起上皮坏死、脱落以及肠壁水肿、出血和炎性细胞浸润等。病变以空肠和回肠较为严重。感染鹅严重腹泻,但不会发生死亡。研究结果表明,E.fu lva对雏鹅具有中等程度的致病性。     

鸡传染性法氏囊病毒鸡胚适应株的培育

将鸡传染性法氏囊病毒（IBDV）野毒株分别经绒毛膜和尿囊腔途径接种于鸡胚进行传代培养，应用AGP法和Dot－ELISA法分别对每代收取的不同培养物（绒毛膜和尿囊液）进行检测。结果显示，经绒毛膜途径传至第3代，尿囊腔途径传至第4—5代，即成为鸡胚完全适应株，可作为鸡胚培养病毒用毒种，方法应选择操作简便、且收获物质量高。数量多的尿囊腔接种途径。     

鸭球虫人工感染病例的病理形态学观察

作者观察了毁灭泰泽球虫和菲莱温扬球虫人工感染病例的不同肠段切片,认为: 一、泰泽球虫 病变的显现时间主要集中在96～120小时之间。病变部位限于十二指肠至空肠中段(特别是空肠前环至卵黄蒂前后)。病变性质为出血性脱屑性卡他性肠炎。感染后36～84小时在绒毛顶端上皮中发育第一代裂殖体,96小时在固有层发育第二代裂殖体。其发育形式很象E.tenella。有趣的是,96～107小时间,有性繁殖与无性繁殖同现,不同时期和不同大小的裂殖体共存于绒毛上皮和固有层的不同部位。这种世代混杂的现象,文献中无记载。究竟是1～2个世代的延续,还是更多世代的表现,值得进一步研究。104～107小时,在肠壁的血管中见吞噬细胞中含有裂殖体。它可通过门脉系统转移到肝。这是机体的防御表现。 二、温扬球虫: 病变的出现时间为36～98小时;病变部位是从卵黄蒂段至回肠,且限于绒毛顶端;病变性质为卡他性肠炎。无性繁殖有三代,1、2代在绒毛顶端的上皮中发育,第3代和配子生殖是在上皮的基膜下发育、成熟。