松茸的生活史及栽培法

一、生活史松茸(Tricholoma matsutake Ito et Imai.)为菌根菌,子实体单生或群生,在林下一般形成园形蘑菇圈或环形菌环。成熟子实体菌盖下面菌褶的两侧是子实层,子实层由栅状排列的担子构成,其顶端产生与其他担子菌相同的4个担孢子,但有单核担孢子和双核担孢子两种类型。单核孢子萌发成为单核菌丝(一次菌丝),与其他异性单核菌丝进行胞质融合而成为双核菌丝(二次菌丝)。另一种则是双核担孢子萌发后直接形成双核菌     

茯苓多糖提取方法研究

利用正交实验优选茯苓中茯苓多糖的提取方法。以茯苓多糖为评价指标,采用正交实验法对茯苓多糖提取过程中的提取工艺进行优选。结果表明:提取方法、稀碱浓度、稀碱用量、茯苓粉碎的粒度、提取时间、提取次数对茯苓多糖的提取均有影响。最佳提取方法为超声法;最佳提取工艺条件为:氢氧化钠浓度为1 mol/L,氢氧化钠的用量为100倍,茯苓的粉碎粒度为40目,提取3次,每次1 h。     

羧甲基茯苓多糖的化学研究

茯苓Ｐｏｒｉａｃｏｃｏｓ（Ｓｃｈｗ）的菌核经稀碱提取，酸适度水解，羧甲基化，透析，Ｓｅｖａｇｅ法除蛋白，醇析，Ｓｅｐ－ｈａｄｅｘＧ－２００柱层析纯化，得羧甲基茯苓多糖（Ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔ－ｈｙｌｐａｃｈｙｍａｒａｎ），简称ＣＭＰ。纸层析与柱层析表明，ＣＭＰ仅由羧甲基葡萄糖组成。高碘酸盐氧化法测定表明，ＣＭＰ的（１－６）与（１－３）之比为１：３。ＩＲ分析表明，ＣＭＰ有多糖（１５９５－１６１０ｃｍ￣（－１），１４２０－１４３０ｃｍ￣（－１）特征吸收峰。ＵＶ分析表明，ＣＭＰ无核酸（２６０ｎｍ）和蛋白（２８０ｎｍ）特征吸收峰。１３ＣＮＭＲ分析表明，ＣＭＰ为β－吡喃糖甙键结合的多糖。     

茯苓菌丝体富集钙的研究

通过茯苓菌丝体耐钙研究表明：当CaCl_2质量浓度小于或等于2．00 g/L时,菌丝生长不受抑制,而大于2．00 g/L时,则抑制菌丝生长。以CaCl_2质量浓度2．00 g/L进行液体富钙培养。结果表明,采用浓度梯度法加入CaCl_2,钙的富集率较高,为97．91％,菌丝体钙质量分数为89．11mg/g,且24．57％的总钙为有机态钙。     

茯苓木腐特点的研究

测定了茯苓在松木屑-麦麸基物上生长期间,基物失重及木质纤维素的降解和有关酶活性的变化规律。实验结果表明: 1.茯苓菌分解木屑的能力较强。培养100天时,呼吸作用消耗掉的有机质达38～39％,基物中纤维素降解了46.32％,半纤维素降解了58.41％,但木素降解量极低。由此可见,茯苓菌主要是利用植物体中的纤维素和半纤维素,是一种褐腐型木材腐朽菌。 2.茯苓降解松木屑具有一定的阶段性。0—45天期间呼吸消耗的基物有机质和纤维素,半纤维素的降解量较多,在基物中茯苓菌核类物质开始产生时(45天左右),纤维素和半纤维素降解速率明显下降,呼吸强度也明显降低。 3.茯苓在生长发育过程中能向基物中释放胞外CMC酶、FP酶、木聚糖酶和淀粉酶。初期酶活性较低,在菌丝体向胞外释放菌核类物质时,4种酶活性明显上升,直到培养100天酶活性仍处于高峰水平。     

茯苓液体发酵条件的研究

本文采用液体摇瓶培养方法,对茯苓液体发酵的适用温度,摇瓶装置,摇瓶转速,培养基初始ｐＨ进行了探讨,结果表明,茯苓液体发酵的适用为２６℃,摇瓶装量为１５０ｍｌ／５００ｍｌ三角瓶,摇瓶转速为１００￣１５０ｒｐｍ,培养基初始ｐＨ为５．０￣５．５。     

茯苓栽培技术研究

分别以段木、树桩、残料、袋料、锯末、松针为栽培材料,以段木为栽培材料考虑露天栽培、温室栽培、灯台树与茯苓套种3种栽培环境,分别对茯苓的栽培材料和栽培环境进行研究。结果表明,单产量:树桩栽培>段木栽培>袋料栽培>残料栽培>锯末栽培(栽培材料),温室>露天>树荫下(栽培环境);生物学效率:段木栽培>树桩栽培>袋料栽培>锯末栽培>残料栽培(栽培材料),温室>露天>树荫下(栽培环境)。     

茯苓菌株生物学特性的研究

通过对茯苓菌株在不同碳源、氮源、pH、温度、含水量等环境条件下菌丝生长状况的研究,结果表明在所试的8种碳源、6种氮源中,最适碳源是蔗糖,最适氮源是蛋白胨,菌丝生长的适宜温度是24℃～30℃,最适温度为28℃;培养基的适宜初始pH为3～6,最适pH为3;培养基的适宜含水量为55%～60%,最适含水量为55%。     

羧甲基茯苓多糖诱导物的药用

茯苓 Poria cocos(Schw.) Wolf 具有利水渗湿、健脾宁心的功效。但是,β-茯苓聚糖占茯苓菌核的93％,却无抗肿瘤作用,如果把茯苓中的聚糖提取出来,使之转化成为羧甲基茯苓多糖(Carboxyme-thylpachymaran,CMP),就具有抗肿瘤作用。笔者1979年采用液相不振荡半合成工艺成功地制取了CMP,药理试验证明,CMP具有抗肿瘤、免疫调节、保肝降谷-丙转氨酶、减轻化放疗副反应的作用,毒理试验证明,CMP无不良毒副反应和无致畸无致突变结果。苏州医学院基因工程研究室的试验证明,CMP能诱导人白细胞产生α-干扰素(*~α-Interferon, α-IFN)、γ-干扰素(γ-Interferon, γ-IFN)、白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(Tumor mecrosis factor, TNF)和粒-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF)等分子免疫物质。本文报道苏州医学院基因工程研究室应用笔者提供的CMP所诱导的细胞因子(分子免疫物质)的药用。     

茯苓有性繁殖的初探

茯苓是由菌丝体、菌核、子实体三部分组成,其菌核是用途很广的中药.在推广茯苓人工接种栽培过程中,发现用"肉引"和菌核分离(无性繁殖)制的菌种,有迅速退化现象,严重影响茯苓产量和质量.为了克服茯苓菌种退化,笔者曾深入产区对茯苓进行了有性繁殖的研究,现将结果报道如下:     

茯苓松蔸栽培优良菌株的筛选研究

本研究目的利用RAPD分子标记技术,通过对收集来自国内的14个茯苓当家栽培菌株进行DNA指纹分析,然后选择其中亲缘关系较远的8个茯苓菌株进行了结苓对比试验,以期筛选出适宜松蔸标准化栽培的茯苓优良菌株。栽培结果表明,与其它菌株相比"川杰1号-A5"茯苓品种结苓早,产量高,平均单蔸产量可达16.47 kg(一蔸直径25cm~30 cm),且结苓范围均在1 m内,极大地降低了松蔸种苓的劳动强度,适宜茯苓的松蔸栽培,是一个茯苓松蔸标准化栽培的优良品种。     

培育茯苓菌种技术

茯苓菌种的选育过程,是按选种、组织分离(或孢子分离、杂交育种)、菌丝培养,结苓试验、比较鉴定的程序进行.一般的食用菌只要再通过示范实验,它的优良种性被确认后,该菌株的菌丝体可经低温保存,供多年使用其种性可相对稳定,这与茯苓菌种具有显著的差别.茯苓产量的高低,主要取决于菌种的结苓性能,为了保证这一性能稳定性可靠,茯苓菌种必须当年从异地有明显地域和生态环境差异的高产苓场选种、分离获得的菌株供当年使用,并要求分离后菌株提纯复