北京辣椒和番茄上番茄斑萎病毒的鉴定

北京大兴区某蔬菜种植基地的辣椒和番茄发现疑似病毒感染,造成较大经济损失.经症状分析和RT-PCR检测,证实其感染番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus,TSWV).基于TSWV序列特征对该地区TSWV进化及来源进行分析,结果显示其与北京顺义区已经报道TSWV毒株进化关系较近,但较国内其他地区株...     

云南辣椒正番茄斑萎病毒属病毒的分子鉴定

辣椒是云南省主要经济作物之一,近年来病毒病尤其是正番茄斑萎病毒属病毒发病严重,影响了辣椒产量和品质。利用RT-PCR技术对从云南辣椒主产区采集的疑似感染正番茄斑萎病毒属病毒的25份辣椒样品进行分子鉴定,结果显示,12份样品检测出正番茄斑萎病毒属病毒,检出率为48.0%,其中6份是番茄斑萎病毒tomato spotted wilt orthotospovirus (TSWV),检出率为24.0%;5份是番茄环纹斑点病毒tomato zonate spot orthotospovirus (TZSV),检出率为20.0%;有1份是TSWV和TZSV复合侵染,检出率为4.0%,这是在云南辣椒生产上首次发现TSWV和TZSV的复合侵染。通过鉴定,初步了解正番茄斑萎病毒属病毒在云南辣椒生产中的发生情况和种类,为制定云南地区该属病毒的防治策略提供理论依据。     

从云南蝴蝶兰上检测到番茄斑萎病毒属病毒

 应用电镜观察、DAS-ELISA以及RT-PCR检测,从症状表现黄化、环斑的云南蝴蝶兰(Phalaenopsis amabilis)病样中分离得到的一个病毒分离物Tospo-Pha。该分离物粒子近球形、具包膜、直径约90nm,与番茄斑萎病毒属(Tospovirus)的西瓜银色斑驳病毒(Watermelon silver mosaic virus,WSMoV)/花生芽坏死病毒(Groundnut bud necrosis virus,GBNV)复合抗血清呈强阳性反应,分子检测发现该分离物SRNA5'末端序列与CaCV大岩桐分离物(CaCV-Gloxinia)同源性最高(91.0%),在系统进化树中与CaCV聚于同一分支。上述结果表明,从云南蝴蝶兰中分离到的Tospo-Pha属于Tospovirus病毒。     

番茄斑萎病毒属6种病毒的多重RT-PCR检测

根据番茄斑萎病毒属(Tospovirus)中6种病毒S RNA上的N基因序列设计特异性引物,建立可同时检测这6种Tospovirus病毒的多重PCR体系。多重PCR扩增结果显示,番茄环纹斑点病毒(776 bp)、甜瓜黄斑病毒(505 bp)、鸢尾黄斑病毒(296 bp)、凤仙花坏死斑病毒(221 bp)、番茄斑萎病毒(175 bp)和番茄褪绿斑病毒(110 bp)均出现清晰的目标条带,各病毒的特异性引物不会对其他病毒产生非特异性扩增。本研究建立的6种Tospovirus病毒的多重PCR检测方法,有助于提高目标病毒的检测效率。     

40个辣椒栽培品种抗番茄斑萎病毒的评价

用摩擦接毒的方法,以具有Tsw抗性基因的灯笼椒PI-152225品种为抗性对照,采用ELISA检测法对购自市场的40个辣椒栽培品种抗番茄斑萎病毒(TSWV)的水平进行了评价。结果表明,40个辣椒品种中,白米辣2号对TSWV表现为中抗,12个品种表现为感病,27个品种表现为高感。     

北京地区发现番茄斑萎病毒

通过采用特异快速试纸条以及进一步的RT-PCR和序列测定证实,在北京局部地区的辣椒和茄子上已发生番茄斑萎病毒,这两种作物上同时发生的蓟马种类主要为西花蓟马,并且携带该病毒。番茄斑萎病毒病是极其危险的一种病害,可对作物造成毁灭性灾害。建议有关部门立即采取相应的预防与管理措施,防止其扩散蔓延。     

由美国进境生菜种子上番茄斑萎病毒的检测鉴定

采用DAS-ELISA检测方法,从美国进境的生菜种子中筛选出携带有番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)的疑似阳性样品,通过建立的RT-PCR方法对酶联免疫吸附测定阳性样品进行复核鉴定,并进一步测序。测序结果与GenBank中已有的番茄斑萎病毒分离物KT160282、AY744474、GU369726、KP330470的序列同源性达到96%。结果表明,TSWV可通过种子携带入境。     

昆明蜘蛛兰和喜林芋上发现番茄斑萎病毒属病毒

番茄斑萎病毒属Tospovirus病毒可引起烟草、蔬菜和花卉等多种作物发生严重病害,导致世界范围内重大农业经济损失~([1]).近年来,云南省昆明市园林花卉发生一种新的病毒病,症状表现为系统坏死、褪绿、黄斑和叶片畸形,与Tospovirus属病毒引起的症状非常类似.本研究针对该病害进行了调查和鉴定.     

侵染四川辣椒的番茄斑萎病毒和辣椒轻斑驳病毒的小RNA测序检测及鉴定

 调查发现四川省汶川县当地辣椒的病毒病严重且症状多样,病样粗提液摩擦接种辣椒、矮牵牛和三生烟,出现辣椒系统性花叶焦枯和茎尖坏死,指示植物表现局部枯斑。对3个不同症状的病果进行sRNA深度测序鉴定,发现均含有番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)和辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)。通过RT-PCR技术进行验证,结果显示所有病样的果皮和部分新鲜种子以及回接寄主的病叶均检测到TSWV和PMMoV,表明该地辣椒病毒病是由TSWV和PMMoV复合侵染引起。这是TSWV侵染四川辣椒的首次报道。分别基于TSWV N基因序列和PMMoV CP基因序列构建系统发育树,汶川分离物TSWV-WC(MK468469)与贵州分离物(KP684518)亲缘关系最近,PMMoV-WC(MK408614)与北京分离物(AY859497)亲缘关系最近。推测该地辣椒病毒病可能与品种引进有关。     

海南岛胡椒病原根结线虫种类鉴定

对海南岛12个县市胡椒产区的27个胡椒病原根结线虫种群进行了纯化培养,运用形态学、同工酶技术及mtDNA扩增技术进行了种类鉴定,结果发现27个纯培养种群中有26个是南方根结线虫,1个是花生根结线虫,南方根结线虫占了96.3％。     

广东番茄上检测到Tospovirus病毒

 Some tomato samples possibly infected by tospovirus in Guangdong were detected with indirect ELISA and RT-PCR. The results showed that the virus infected tomato did not react with the antiserum of Tomato spotted wilt virus (TSWV), but about 500 bp fragment of RT-PCR shared 83%-84% nucleotide identities with N gene of those reported tospoviruses. The phylogenetic tree of the N gene fragment compared with those of other tospoviruses indicated that the virus infected tomato was belonged to Tospovirus.     

High temperature effects on hypersensitive resistance to Tomato Spotted Wilt Tospovirus (TSWV) in pepper (Capsicum chinense Jacq.)

The tomato spotted wilt virus resistance in pepper conferred by the Tsw gene is less stable at 32 °C continuous temperature. Continuous high temperatures for at least nine days lead to systemic spread and necrotic symptoms in plants that are totally resistant at a lower temperature (22 °C). We show that continuous high temperatures destabilize this resistance in young plants, but older inoculated plants rarely develop systemic symptoms. Populations segregating for the Tsw gene showed that heterozygosity at the Tsw locus increased the chance of inoculated seedlings to develop systemic necrotic symptoms. Genetic background was less significantly involved in the thermosensitivity of the resistant response. As a consequence, it would be preferable to grow cultivars homozygous at the Tsw locus in high temperature conditions.     

加工型辣椒品种对细菌性叶斑病的抗性鉴定

由黄褐假单胞Pseudomonas fulva侵染引起的辣椒细菌性叶斑病是近期在新疆北疆加工辣椒生产区发现的一种新病害。为评估辣椒品种对细菌性叶斑病的抗性水平,采用苗期人工接种结合田间调查,鉴定了生产中13个主栽辣椒品种对细菌性叶斑病的抗性。结果表明,供试材料对细菌性叶斑病均无免疫性,但不同辣椒品种对辣椒叶斑病抗性差异较大,‘改良佳线1号’和‘丰力红冠’为抗病品种;‘佳线4号’、‘新丰6号’、‘秦椒王’、‘陕早红’、‘宝丰2号’为耐病品种;‘红安6号’、‘朝天椒’为感病品种,高感品种为‘金塔’、‘铁皮椒’、‘红龙13’和‘超级韩国甜椒’。研究结果为辣椒的抗病育种和病害防治提供了基础。     

广州野生加拿大一枝黄花的鉴定

本文对2008年10月在广州发现的野生一枝黄花属植物进行了形态鉴定和分子鉴定,结果表明该植物形态特征与加拿大一枝黄花(Solidago canadensis L.)完全吻合,分子鉴定结果表明ITS区段序列同源性也达到100%,因此确定该一枝黄花属植物为外来危险性杂草加拿大一枝黄花。并对加拿大一枝黄花与广州本地种一枝黄花(S.decurrens Lour.)在形态上进行了比较。     

四川省茂县花椒根结线虫病病原鉴定

为明确四川省茂县花椒根结线虫的种类,通过根结线虫雌虫和2龄幼虫的形态特征及雌成虫的会阴花纹、雌虫酯酶同工酶及分子生物学检测（rDNA-ITS区和rRNA-IGS区）,对花椒根结线虫进行了种类鉴定。三种方法的结果均表明在茂县地区花椒上发现的根结线虫为北方根结线虫（Meloidogynehapla）,这是我国首次报道在花椒上发现北方根结线虫病,四川省是北方根结线虫新的分布区。     

辣椒上烟草轻型绿花叶病毒的鉴定

 辣椒源自南美洲，属于茄科辣椒属（Capsicum L.），为重要经济作物。病毒病是影响辣椒生产的主要病害，侵染辣椒的病毒有40余种［1］，烟草轻型绿花叶病毒（Tobacco mild green mosaic virus, TMGMV）是近年来在辣椒上发生和危害报道较多的病毒之一。TMGMV是McKinney［2］于1935年在烟草属植物（Nicotiana gluanca）上首次发现的，为烟草花叶病毒属（Tobamovirus）成员。除辣椒外，番茄［3］、凤仙花、蓝眼菊和矮牵牛也是TMGMV的自然寄主。     

新疆辣椒中BPEV和PCV2的鉴定与分析

 为明确新疆石河子辣椒感染病毒的种类,对表现明显皱缩、褪绿和卷叶等症状的辣椒样本进行长链非编码RNA(Long noncoding RNA, LncRNA)测序。根据LncRNA测序和RT-PCR检测,发现甜椒内源RNA病毒(Bell pepper endornavirus, BPEV)、辣椒隐症病毒2(Pepper cryptic virus 2, PCV2)和辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus, PMMoV)3种病毒。RT-PCR检测数据显示,新疆石河子的辣椒普遍感染BPEV和PMMoV。将BPEV的RdRp基因序列和PCV2-RNA1包含RdRp基因的序列分别进行核苷酸序列相似性和系统进化分析。结果表明本研究中BPEV-XJ和PCV2-XJ与其它分离物的相似性分别为89.1%~97.3%和96.9%~99.7%。BPEV-XJ与BPEV-TW分离物亲缘关系最近;PCV2-XJ与PCV2-DR分离物亲缘关系最近。辣椒中检测到BPEV和PCV2为新疆首次报道。