虾夷马粪海胆体腔液中调理素样分子的研究

为研究虾夷马粪海胆体液免疫机理,测定其体腔液吞噬细胞在不同介质中对不同处理的酵母细胞的吞噬作用。对其无细胞体腔液、从调理及非调理酵母细胞分离出的成分进行SDS-PAGE分析,同时对无细胞体腔液进行透析、SephadexG-200凝胶层析和SDS-PAGE分析,在等渗缓冲液和酵母细胞吸附的无细胞体腔液中,测定不同调理素样分子浓度和不同反应时间时吞噬率的变化。结果显示,吞噬细胞在3种介质:等渗缓冲液、酵母细胞吸附的无细胞体腔液和无细胞体腔液中对非调理酵母细胞吞噬率之比为1.00∶1.11∶1.94,在等渗溶液中对调理酵母细胞的吞噬率是非调理酵母细胞的1.61倍;从调理酵母细胞分离出的成分在SDSPAGE中显示一条调理素样分子带,分子量为250.62 ku。经透析和SephadexG-200凝胶层析后,测得纯化的调理素样分子的分子量为250.62 ku;在所测试的浓度范围内,调理素样分子浓度越大,吞噬活性越高,且5.0和10.0μg/mL组在各个测试时间均比对照组高。在等渗缓冲液中,反应30 min时,10.0和5.0μg/mL组与对照组均有极显著差异(P0.01),在酵母细胞吸附的无细胞体腔液中,反应30 min时,10.0μg/mL组与对照组有显著差异(P0.05)。结果表明,在虾夷马粪海胆体腔液中发现一种调理素样分子,分子量约为250.62 ku,一定浓度的调理素样分子能显著提高虾夷马粪海胆体腔液吞噬细胞的吞噬活性。     

光棘球海胆体腔液调理素样分子的研究

为研究光棘球海胆的体液免疫机理,首先测定在不同反应基质中等量光棘球海胆吞噬细胞对不同处理的酵母细胞的吞噬率,其次比较分析从受调理酵母细胞和非调理酵母细胞以及光棘球海胆无细胞体腔液分离出成分的样品的电泳结果,随后将光棘球海胆无细胞体腔液进行提取分离后得到调理素样分子,最后于等渗缓冲溶液中测定等量光棘球海胆吞噬细胞在不同浓...     

海胆壳中具有抑菌活性物质的分离鉴定

观察海胆壳中化学成分对金黄色葡萄球菌的抑制活性,对其进行分离纯化,并根据理化性质、波谱分析和文献对照的方法对所分离的化合物进行结构鉴定。用75%EtOH对粉碎的海胆壳进行热浸提,减压浓缩后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,得到各层提取物,对其进行抑制金黄色葡萄球菌生物活性测定。进而,粗提物利用薄层层析、反复硅胶柱层析、半制备薄层色谱层析以及重结晶等手段进行分离纯化得到化合物。通过抑制金黄色葡萄球菌生物活性测定可知石油醚提取物、正丁醇提取物均有较显著的抑制金黄色葡萄球菌的活性。石油醚提取物经过反复硅胶柱层析和重结晶手段得到化合物HDB,结构鉴定为棕榈酸。正丁醇提取物经过反复硅胶柱层析、半制备薄层色谱以及重结晶等手段分离得到化合物HDA,结构鉴定其为(3β)-胆甾-5-烯-3-醇。     

抗“腐皮综合症”刺参体腔液指标变化的初步研究

对用“腐皮综合症”致病菌灿烂弧菌（Vibrio splendidus）感染刺参的7个体腔液指标进行了测定。结果显示：1）抗病刺参和易感刺参体腔液吸光值和颗粒细胞浓度在第10天差异显著（P〈0．05）。2）抗病刺参和易感刺参总细胞浓度和透明细胞一淋巴样细胞浓度在第5天差异显著（P〈0．05）。3）抗病刺参体腔液碱性磷酸酶活力在试验各天均保持较高水平,且在第10天与易感刺参有显著差异（P〈0．05）;易感刺参体腔液酸性磷酸酶活力在第5天明显高于抗病刺参（P〈0．05）,之后各天迅速降低,并显著低于抗病刺参（P〈0．05）。4）抗病刺参和对照组刺参超氧化物歧化酶活力各天始终无显著蒡异（P〉0．05）．抗病刺参和易感刺参在第10天蒡异昂著（P〈0．05）．     

饲料中添加壳寡糖和霉菌毒素吸附剂对凡纳滨对虾肠道黏膜形态及菌群结构的影响

实验旨在研究在饲料中分别或联合添加壳寡糖(chitosan oligosaccharide,COS)和霉菌毒素吸附剂(mycotoxins adsorbent)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肠道黏膜形态及菌群结构的影响。在基础饲料(对照组)中分别添加250 mg/kg COS、2500 mg/kg霉菌毒素吸附剂、250 mg COS+2500 mg/kg霉菌毒素吸附剂(组号为C0、C0.25、M2.5、C0.25+M2.5),制成4组等氮等能饲料,投喂初重(0.23±0.02)g的凡纳滨对虾8周。结果显示:COS与霉菌毒素吸附剂联合使用有助于改善肠道形态学指标,C0.25+M2.5组绒毛高显著大于C0、C0.25组(P0.05),绒毛宽显著大于M2.5组(P0.05),肌层厚度显著大于其他各组(P0.05)。高通量测序结果表明各组有效操作分类单元(Operational Taxonomic Unit,OTUs)数目无显著性差异(P0.05);C0.25+M2.5组Observed species指数、Shannon指数、PD值显著低于M2.5组(P0.05),但显著高于C0.25组(P0.05),与C0组无显著性差异(P0.05);肠道菌群主要为变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes),C0.25+M2.5组变形菌门细菌含量最低且厚壁菌门细菌含量最高,各组拟杆菌门细菌均升高,C0组含量最低。在属水平上,弧菌属(Vibrio)、假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas)、Spongiimonas、发光杆菌属(Photobacterium)以及Candidatus Bacilloplasma占主要优势,C0.25+M2.5组弧菌属、发光杆菌属细菌含量均有效减少;C0.25+M2.5组发光杆菌属细菌含量最低,假交替单胞菌属细菌含量最高。250 mg/kg COS和2500 mg/kg霉菌毒素吸附剂联合添加对菌群丰富度无显著影响,但优化了肠道形态学指标及肠道菌群结构,提升了肠道健康,效果优于单一添加组。     

观赏鱼水族箱中白色“蛋白虫”的初步探究

对观赏鱼养殖水族箱里出现的一种所谓白色"蛋白虫"的分类地位、繁殖方式和防治效果等进行了初步研究。结果表明,该白色小虫属一种水生寡毛类——红斑顠体虫(Aeolosoma hemprichii)。它可能因投喂外源生物饵料而带入的,当养殖水体富营养化的时候能进行快速的横裂无性繁殖,数量较多时对养殖的观赏鱼有一定的骚扰,但对养殖鱼类并无大的危害。通过五种药物的防治试验比较,证明2~3mg/L的高锰酸钾和五水硫酸铜等对其杀灭效果较好;但通过断饵和饥饿,迫使观赏鱼捕食该虫是最科学的防治手段。     

凡纳滨对虾白便综合征发生与环境因子、机体免疫酶活性和微生物的相关性

为系统解析凡纳滨对虾白便综合征 (white feces syndrome,WFS)的发生与环境因子、微生物因子、宿主免疫力和水体微生物群落组成的关系。实验利用水体理化因子、可培养细菌、对虾机体免疫酶活性以及高通量测序等检测技术对健康与患WFS的池塘养殖凡纳滨对虾进行比较分析。结果显示,与健康组相比,患病池塘的水温、溶解氧 (DO)、pH、盐度等水质理化因子波动趋势相似,波动范围分别为26.1~29.0 °C、4.26~6.08 mg/L、8.39~8.73和40~49,患病组DO和盐度比健康组高;健康组对虾肝胰腺内可培养细菌和弧菌含量为1.19×10⁵~7.70×10⁵和8.8×10³~1.96×10⁴ CFU/g,弧菌占比为2%~16%,患病组对虾肝胰腺内可培养细菌和弧菌含量在3.80×10⁵~2.51×10⁶和2.02×10⁵~1.49×10⁶ CFU/g范围内,比健康组高15~113倍,弧菌占比在55%~70%。碱性磷酸酶 (AKP)、酸性磷酸酶 (ACP)、溶菌酶 (LZM)、超氧化物歧化酶 (SOD)和酚氧化酶 (PO)活性在健康组内为1.21~5.64、9.17~15.25、3.56~7.43、4.83~6.70及3.10~4.55 U/mg,在患病组内为2.12~5.39、19.22~26.96、19.73~26.85、3.00~4.14及7.76~9.21 U/mg。比较分析表明,WFS的发生与可培养细菌含量、弧菌占比、ACP、LZM、PO的相关性较强。高通量测序分析表明,患病组水体菌群结构的Ace和Chao指数呈一定程度下降趋势,PCoA指数偏离度较高,放线菌门、变形菌门相对丰度降低,拟杆菌门、蓝藻门相对丰度显著升高;RDA关联分析表明,盐度、溶解氧、虾体细菌、虾体弧菌、水体细菌是影响患病对虾水体菌群结构组成的重要因子。相关研究结果为解析养殖生产中对虾WFS发生机制提供数据支撑,并为WFS的临床防控奠定理论基础。     

猪“高热病”综合征的防治措施

<正>"猪高热病"发病快,死亡率高,传播迅速,给养猪生产造成很大的经济损失,同时也引起养猪业者的巨大恐慌。笔者结合工作实践,对本病的临床特征进行初步分析,并提出相应预防对策,供同行参考。     

一株引起刺参“腐皮综合征”的蜡样芽孢杆菌

对实验室暂养发病的刺参(Apostichopus japonicus)进行了微生物学分析,从所有患病个体的病灶组织分离得到了1株具绝对优势的细菌,经回接感染试验证实它对刺参具有较强的致病性.通过形态学、生理生化指标测定和16SrDNA序列分析,该菌被初步鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus).蜡样芽孢杆菌通常被视为益生菌,广泛应用于畜禽养殖,水产养殖上也有使用.鉴于蜡样芽孢杆菌能导致刺参"腐皮综合征"的发生,建议在刺参养殖环境中应慎用该菌制剂.     

“生猪高热病综合征”的防制技术

<正>"猪高热病综合征"早于2000年在江苏省暴发流行,尔后在我国南方流行扩散,2006年以湖南、广西、广东、江西、浙江等省尤为严重,该病不是单一病原感染引起的,而是多种病原混合感染在不良饲养管理条件、气候和应激因素刺激下而发生的,上世纪90年代我国一些猪场已检测到与该病混合     

饲料中添加水飞蓟素对低盐度下凡纳滨对虾生长、免疫、肝胰腺组织结构及肠道菌群的影响

为探究低盐度下水飞蓟素作为凡纳滨对虾饲料添加剂的作用效果,实验配制了水飞蓟素添加量分别为0(对照组)、0.1、0.2和0.4 g/kg的4种实验饲料,在低盐度(盐度为3)下养殖虾苗[(0.080±0.002)g]8周后,分析了水飞蓟素对对虾生长、免疫、肝胰腺组织结构及肠道菌群的影响.结果显示:①低盐度下,水飞蓟素能显著...     

一起“猪无名高热综合征”的诊断与防治

<正>"猪无名高热"即猪高热综合征,是一种发病率和死亡率均较高的疾病,主要发生在育成期猪和部分母猪,病猪临床主要表现为体温升高、精神沉郁、食欲不振或废绝,呼吸困难、喘气,部分猪伴有皮肤发红变紫等症状,少数毛孔有出血点。     

患“裂头病”黄颡鱼内脏组织中LDH的变化

使用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,分析了健康黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)与患病个体的肝脏、脾脏、心脏、肾脏、脑组织中的乳酸脱氢酶同工酶的变化。结果显示,患病个体组织中的LDH谱带与健康个体有明显差异,主要表现为谱带染色变浅、谱带缺失;但在心脏中,除了缺失谱带外,还增加了1条LDH0带。     

养殖刺参“腐皮综合征”致病菌——灿烂弧菌的原位杂交检测方法的建立与应用

以养殖刺参“腐皮综合征”的重要致病菌——灿烂弧菌Vibrio splendidus的16S~23S间隔区序列,设计特异性引物,用PCR方法制备地高辛(DIG)标记探针,建立了原位杂交技术检测感染刺参体内灿烂弧菌的技术方法,并利用该方法对人工感染刺参和健康刺参各组织进行检测。结果显示,感染刺参的体壁结缔组织、肌肉组织、肠粘膜上皮、辐水管等组织的原位杂交检测呈阳性,而与健康刺参组织无交叉反应。在感染组织中,阳性信号（显色）强弱清晰,能准确反映出灿烂弧菌的侵染部位及感染程度,这为探明灿烂弧菌的感染途径、感染病程等致病机理研究奠定了基础,也为养殖刺参疾病预防和健康管理提供了技术支撑。     

患“裂头病”黄颡鱼内脏组织中LDH的变化

使用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,分析了健康黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)与患病个体的肝脏、脾脏、心脏、肾脏、脑组织中的乳酸脱氢酶同工酶的变化.结果显示,患病个体组织中的LDH谱带与健康个体有明显差异,主要表现为谱带染色变浅、谱带缺失;但在心脏中,除了缺失谱带外,还增加了1条LDH0带.