赤羽病简介

赤羽病又称阿卡斑病(Akabane disease)，是由赤羽病病毒(Akabane disease virus，AKV)引起的牛、绵羊及山羊的一种多型性传染病。该病以流产、早产、死胎、畸形、新生胎儿发生关节弯曲、积水性无脑症和流行性暂时热为特征。     

赤羽病研究进展

赤羽病（Akabane disease）又名阿卡斑病，是由赤羽病病毒（Akabane disease virus，简称ADV）引起牛羊的一种多型性传染病，以流产、早产、死胎、胎儿畸形、木乃伊胎、新生胎儿发生关节弯曲和积水性无脑综合症（简称AH综合症）为特征。 本病在热带、温带，特别是在近东和南亚地区分布较广。此外，非洲、南美洲和澳大利亚等地区也有发生。该病于1949年首次在日本群马县（现为馆林市）发生。后来，从该地畜舍内采集的金色库蚊和三带喙库蚊体内分离1株病毒，并将之命名为赤羽病病毒。松本等（1980）对本病病原进行研究，确定是由布尼病毒属…     

赤羽病病原学研究进展

赤羽病是由阿卡斑病毒（Akabane virus，AKAV）引起的牛、羊等动物流产、早产、胎儿畸形、死胎以及先天性关节弯曲一积水性无脑综合征（AH综合征）的一种虫媒性传染病，也称为阿卡斑病。该病毒具有抗原多样性的特点。上世纪30年代，该病在澳大利亚羊群中首次暴发，而后1949年在日本也曾暴发，但到1961年才在日本的群马县赤羽村的畜舍内采集的金色库蚊和三带喙库蚊中首次分离到病毒。     

赤羽病病毒间接荧光抗体快速检测方法的初步研究

以兔抗赤羽病毒重组核蛋白血清作一抗,利用间接荧光抗体法在AKAV感染的BHK-21培养细胞和攻毒的乳鼠脑组织中特异性地检测到了AKAV抗原,为赤羽病的病原学诊断提供了简便的检测方法。     

应用阻断酶联免疫吸附试验检测赤羽病血清抗体

赤羽病(Akabane disease，AKD)又名阿卡斑病，是由布尼病毒科布尼病毒属的阿卡斑病毒引起的牛、绵羊和山羊等动物的一种多型性传染病，主要以流产、早产、死胎及新生儿关节弯曲综合征和积水性综合征为特征。该病首次于1949年在日本群马县赤羽村发生因而得名。世界上很多国家，如澳大利     

赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达

为获得赤羽病病毒(Akabane virus，AKAV)的核蛋白重组抗原，根据其基因序列(S mRNA)设计合成了1对特异性引物，对AKAV N基因进行RT-PCR扩增，产物大小约为696bp，回收纯化后，将其克隆至pMDl8-T质粒栽体中，经核苷酸序列分析，与已报道的多株AKAV编码核衣壳蛋白N的S mRNA基因比较后发现，所测定毒株的核苷酸序列与TIN毒株的同源性高达98．3％，推测的氨基酸同源性为97．6％，证实为AKAV的N基因。将该基因片段亚克隆插入pBAD／Thio TOPO表达栽体，转化TOPl0细胞，成功地构建了AKAV N基因重组表达栽体。经L-araboinose诱导表达，可稳定、高效地表达AKAV核蛋白抗原。表达蛋白为融合蛋白，分子质量约42．5ku，其表达产量约占茵体总蛋白的28％，融合蛋白中含有AKAV特异性核蛋白抗原，可作为ELISA包被抗原。     

牛羊赤羽病

赤羽病是由吸血昆虫进行传播的一种虫媒性病毒病 ,常导致牛羊繁殖障碍及新生胎儿发生关节弯曲和积水性无脑症 ,因而对牛羊危害较大。该病毒于 1 959年在日本群马县赤羽村首次被分离到。我国 1 998年首次分离并鉴定了该病毒 ,目前已证实我国至少有 1 3个省市地区有本病的流行。本文从病原、流行病学、致病机理、诊断与防治等方面对该病进行了综述 ,以期为该病的防制和研究提供可参考资料。     

赤羽病的流行及防制对策

台票赤羽病(akabane disease，AKA)又名阿卡斑病，是由赤羽病病毒(Akabane disease virus，AKV)引起的牛、绵羊和山羊的一种多型性传染病。AKA以流产、早产、死胎、畸形产为特征，能引起先天性关节弯曲和积水性无脑症。     

赤羽病研究进展

赤羽病是由阿卡斑病毒引起的一种牛羊繁殖障碍和新生幼畜畸形传染病。该病在非洲大陆、中东、东南亚、亚洲和南美洲等温带和热带地区的许多国家流行,在我国部分区域流行。阿卡斑病毒通过蚊、蠓等媒介昆虫进入宿主体内,引发母畜出现流产、早产、死胎、畸形胎等现象,给牛羊养殖业造成较大的经济损失。为全面了解赤羽病,该文通过病毒特征、流行病学、致病机理、诊断方法和防控等方面展开论述,旨在为我国有效防控该病提供参考。     

一种基于重组截短Gc_(aa407～614)蛋白的赤羽病病毒抗体间接ELISA方法的建立

为建立一种检测赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)抗体的ELISA方法,对Gc蛋白从407位至614位氨基酸的编码序列,经密码子优化后进行基因合成,然后克隆至重组表达载体PET-32a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用1 mmol/L IPTG在37℃进行诱导表达。用Ni~(+2)-NTA树脂亲和层析方法纯化重组蛋白(trGc_(aa407~614)),以Western blotting检测其抗原性;用纯化trGc_(aa407~614)建立间接ELISA方法(trGc_(aa407~614)-ELISA),并评价该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示:重组蛋白trGc_(aa407~614)以包涵体形式在大肠杆菌中高效表达,经Ni~(+2)-NTA树脂亲和层析纯化后的浓度2.4 mg/mL,纯度为94%,对山羊抗AKAV阳性血清呈现较好的抗原反应性;所建立的trGc_(aa407~614)-ELISA方法的最佳抗原包被浓度为4.0μg/mL,血清稀释度为1:80,血清阴阳性的OD450临界值为0.318;该方法对AKAV阳性血清呈特异性反应,组内试验和组间试验的变异系数均小于10%。用该方法对273份进口牛血清进行AKAV抗体检测,发现10份血清为阳性。总之,本研究建立的trGc_(aa407~614)-ELISA方法为血清样品中赤羽病病毒抗体的检测提供了有效手段。     

赤羽病病毒套式RT-PCR检测方法的建立与初步应用

根据GenBank中已发表的赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了3条特异性引物,建立了检测AKAV的套式RT-PCR方法。特异性试验表明,该方法可以特异扩增出AKAV的S基因片段,但从牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、传染性牛鼻气管炎病毒(IBRV)等13种对照病毒中均不能扩增出目的条带。敏感性试验表明,套式RT-PCR能够扩增10-5稀释度的病毒RNA(核酸含量约1.18 ng/μL),比普通RT-PCR高出1 000倍。用此方法检测130份奶牛血清样品与1份流产胎儿病料,均未检测到阳性样本,但AKAV在血清模拟样品中可被有效检出。研究结果表明,该方法灵敏、特异,为AKAV的检测提供了一个快速、有效的手段。     

赤羽病胶体金免疫层析试纸条的研制

采用双抗体夹心免疫层析技术,研制了适合田间快速试验的赤羽病胶体金免疫层析试纸条。纯化赤羽病毒单克隆抗体3A和2C,用柠檬酸钠还原法制备胶体金标记纯化后的单抗作为标记抗体。分别将羊抗鼠IgG和纯化后的单抗包被于NC膜上作为质控带和检测带,以检测被检样品中的赤羽病毒（akabane virus,AKAV）。试验结果表明,所研制的试纸条敏感性较高（为10 TCID50）,特异性较强,还具有快速、稳定、简便等特点,适合基层动物防疫检疫部门尤其是进出境动物检疫机构进行赤羽病大批量、田间快速初筛,对赤羽病快速诊断具有重要的意义。     

赤羽病毒单克隆抗体的研制及鉴定

用纯化的赤羽病毒（akabane virus,AKAV）免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA筛选和3次有限稀释法克隆,得到2株能稳定分泌抗赤羽病毒单克隆抗体（McAb）的杂交瘤细胞株,分别命名为AKAV McAb 3A株和2C株。ELISA试验和中和试验结果表明,本研究制备的2株McAb均具有良好的特异性,为AKAV阳性,杂交瘤细胞培养上清液抗体的效价分别为1∶640和1∶320,腹水的效价分别为1∶256000和1∶128000,亲和常数（Ka）分别为1.16×10^-9和6.31×10^-8 mol/L,3A株的相对亲和力大于2 C株,具有病毒中和活性,中和效价分别为1∶64和1∶32,其IgG亚类为IgG1,轻链的亚型均为kappa型,2株细胞冻存3次复苏后仍能稳定分泌抗体,表明AKAV McAb制备成功,为赤羽病快速诊断方法的研究奠定了基础。     

赤羽病的流行与防控研究进展

赤羽病是由赤羽病病毒感染牛、羊引起的一种以流产、早产、死胎和胎儿先天性畸形为典型病理特征的虫媒传染病，蚊虫和库蠓是其主要传播媒介。赤羽病传播和流行具有明显地域性、周期性和季节性特征，可对流行地区的畜牧业造成较大经济损失。牛赤羽病被我国列为三类动物疫病，也被列入《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》,属于我国口岸检疫需重点防范的二类传染病。通过对赤羽病病原学、检测诊断技术、传播与流行病学特点、传播媒介、综合防控措施等流行和防控的研究进展进行综述，为探索建立赤羽病新型快速诊断方法，从而实现赤羽病的综合防控建立基础。     

赤羽病的诊断与防治

文章介绍了赤羽病的危害、流行病学、临床症状及诊断。该病多发生于热带和温带地区，可引起多种动物感染，怀孕的牛、绵羊和山羊对本病最易感。根据流行特点、临床表现和病理变化可做出初步诊断。但确诊必须进行实验室检查(包括病原学鉴定和血清学试验)，其中，以中和试验结果较为可靠。     

赤羽病病毒Gcaa465～704的杆状病毒表达和单克隆抗体制备

为制备针对赤羽病病毒(AKAV)糖蛋白Gc的单克隆抗体(mAb),本试验选取AKAV Gc蛋白第465～704位氨基酸的基因序列进行密码子优化并合成至pFastBac HTB载体;通过蓝白斑筛选和昆虫细胞杆状病毒表达系统制备重组AKAV Gc_aa465～704蛋白,纯化后免疫小鼠;通过细胞融合和亚克隆筛选阳性杂交瘤细胞,利用Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)对mAb特性进行鉴定。结果显示,本试验成功筛选出1株可稳定分泌抗AKAV Gc_aa465～704蛋白mAb的杂交瘤细胞株4D1,Western blot结果显示,mAb 4D1可特异性识别AKAV Gc_aa465～704蛋白;IFA结果显示,mAb 4D1能够与AKAV感染的BHK21细胞发生反应。结果表明,本试验成功制备抗AKAV Gc_aa465～704蛋白mAb,为进一步研究AKAV Gc蛋白生物学功能和建立AKAV检测方法提供技术支持。     

赤羽病诊断技术研究进展

赤羽病是由赤羽病病毒感染牛羊引起的一种以流产、早产、产死胎、胎儿先天性畸形为典型病理特征的虫媒传染病,蚊虫和库蠓是其主要传播媒介,其中牛赤羽病被我国列为三类动物疫病。对赤羽病进行及时和准确的诊断是控制赤羽病传播和流行的关键。赤羽病诊断技术可分为临床诊断以及依据实验室检测技术的病原学诊断和血清学诊断。通过对赤羽病诊断技术研究进展进行综述,以期为建立赤羽病速诊断方法和制定诊断技术标准奠定基础。     

赤羽病病毒Real-time RT-PCR检测方法的建立与初步应用

为了研究赤羽病病毒的检测方法,试验根据GenBank中已发表的赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)的S基因序列建立了检测AKAV的Real-timeRT-PCR方法。结果表明:该方法对AKAV的检测有高度的特异性,与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、传染性牛鼻气管炎病毒(IBRV)等13种病毒均无交叉反应;Real-timeRT-PCR能够扩增稀释度为1×10-5的病毒RNA(核酸含量约1.18ng/μL),比普通RT-PCR高出1000倍;用此方法检测130份奶牛血清样品与1份流产胎儿病料,均未检测到阳性样本;AKAV在血清模拟样品中可被有效检出。     

关于赤羽病的流行现状与防控举措的探讨

赤羽病可以引起牛羊流产、早产、产死胎、新生胎儿畸形等特征病变,严重危害我国牛羊养殖业。本文以我国部分地区发生赤羽病局部流行为切题,对赤羽病病原学、流行病学、发病机制与病理变化、诊断及防控措施等方面的进展进行综述,以期为预防控制赤羽病的发生和流行提供参考。     

赤羽病病毒检测方法研究进展

赤羽病是目前对我国养牛业和养羊业危害较为严重的疫病,该病在我国广泛存在,一旦暴发将对我国畜牧业造成严重的经济损失。为了防制和消灭该病,必须迅速、准确地作出诊断。经过几十年的努力,赤羽病诊断技术从最早的病毒分离鉴定到血清学试验,再到分子生物学技术,已逐渐向着更敏感、更特异、更方便、更经济的方向发展。文章就赤羽病病毒的实验室检测技术研究进展作一综述。