鸡传染性支气管炎病毒与新城疫病毒增殖作用及免疫干扰的研究

试验旨在观察鸡传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus,IBV）和鸡新城疫病毒（newcastle disease virus,NDV）之间的增殖干扰现象,分析在免疫过程中两种疫苗存在的免疫干扰,为确定疫苗的免疫程序提供依据。采用完全随机试验设计,选取10日龄鸡胚尿囊腔接种不同浓度的IBV、NDV以及不同浓度混合的IBV和NDV,收集尿囊液测定其血凝效价（HA）;用不同浓度的IBV、NDV以及不同浓度混合的IBV和NDV分别免疫BALB/c小鼠及SPF雏鸡,收集血清,间接酶联免疫吸附法（ELISA）和血凝抑制（HI）试验测定IBV和NDV的抗体效价及抑制效价。结果表明,同胚培养时,无论先接种IBV后接种NDV还是先接种NDV后接种IBV或IBV和NDV同时接种,IBV对NDV均有干扰作用,而NDV对IBV没有干扰作用;接种IBV和NDV的小鼠,其产生IBV和NDV的抗体效价均低于单独免疫组,免疫的次序及免疫间隔时间对IBV和NDV的抗体效价均有影响,IBV对NDV的免疫效果具有较大的干扰作用。不同针混合免疫方式能提高IBV和NDV的抗体效价;接种IBV和NDV的雏鸡,免疫次序及免疫相隔时间对IBV和NDV的抗体效价均有影响,IBV对NDV的免疫效果具有较大的干扰作用;雏鸡和小鼠免疫血清HI试验数据表明,免疫次序及免疫间隔时间对IBV和NDV抗体的产生均有影响,但对NDV抗体的产生影响更明显,随着免疫间隔时间的增加,IBV和NDV的抗体水平呈增加趋势,雏鸡比小鼠更能敏感地反映出IBV对NDV的免疫干扰作用。混合注射时IBV和NDV的抗体水平均降低,IBV对NDV的免疫效果有干扰作用。因此,在同胚培养、小鼠及雏鸡的免疫中,IBV对NDV有干扰作用,而NDV对IBV无干扰作用。混合接种时IBV和NDV抗体效价均下降,IBV对NDV的免疫效果有干扰作用。免疫次序及免疫间隔时间对IBV和NDV抗体的产生均有影响,但随着免疫间隔的增加,IBV和NDV的抗体水平呈增加趋势。     

不同免疫增效剂对鸡新城疫免疫效果的影响

为研究鸡转移因子、黄芪、左旋咪唑、灵芝4种免疫增效剂的功效,以鸡新城疫（Newcastle disease,ND）血凝抑制抗体效价作为指标,比较其免疫效果。试验鸡先采血测定ND抗体效价,接种注射ND-IB-EDS灭活油乳剂疫苗,再将试验鸡随机分成5组,1～4组为试验组,给予不同的免疫增效剂,5组为空白对照组。在给药后第4、6、8、10、12、14、16、18、20、22和24天分别采血,采用微量血凝抑制试验检测ND抗体效价,统计后比较其抗体效价的变化。结果表明：灵芝组抗体效价在12 d开始显著高于对照组和其他试验组（P＜0.05）,且保持较高的水平;转移因子组和黄芪组抗体效价从14 d开始均显著高于对照组和左旋咪唑组（P＜0.05）,并分别从第22和20天开始持续在较高水平;左旋咪唑组的抗体效价高于对照组,但未出现显著性差异。由此可见,不同的免疫增效剂对鸡ND疫苗的免疫增强作用各异。综合考虑,临床应用时首选鸡转移因子,其次黄芪,灵芝和左旋咪唑需酌情使用。     

应用犬五联弱毒冻干苗预防犬副流感的免疫程序的研究

本试验应用目前国内研制的含犬副流感弱毒疫苗的五联苗,采用微量血凝与血凝抑制试验,通过对96条军犬和民犬进行定期采血检测,研究了本疫苗预防犬副流感的免疫程序,以犬副流感抗体效价达到1:64为标准,该苗的免疫程序为第一次注苗后14天再注射1次,以后每隔6个月注射1次。在将血凝与血凝抑制试验用于犬的血清副流感抗体检测中,采用了绵羊红细胞,结果清晰准确,方法有所创新。     

用无针注射器接种犬细小病毒疫苗免疫效果研究

为了研究无针注射器接种犬细小病毒疫苗的免疫效果,试验将15只42～45日龄健康拉布拉多寻回犬和15只金毛寻回猎犬随机分成3组,每组10只(每个品种5只),分别为有针注射1头份组(含犬细小病毒抗原NL-35-D株)、无针注射1头份组和无针注射1/2头份组。有针注射1头份组采用有针注射器接种1头份卫佳伍疫苗,无针注射1头份组和无针注射1/2头份组采用无针注射器分别接种1头份、1/2头份。首免后第14,28天采用同样的方法进行二免和三免。免疫后观察犬的临床反应;分别于首免、二免和三免后第14天采血、分离血清,用犬细小病毒(CPV Ab)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒检测抗体浓度,根据产生的抗体浓度判断免疫效果。结果表明：无针注射1头份和1/2头份组犬没有出现炎症反应和其他不良反应,疼痛明显降低;各组试验犬二免后第14天抗体水平均能达到保护作用;首免、二免和三免后第14天三组比较,无针注射1头份组和无针注射1/2头份组抗体水平均略高于有针注射1头份组,但差异不显著(P>0.05)。说明采用无针注射器接种犬细小病毒疫苗免疫效果确实、安全。     

猪血凝性脑脊髓炎病毒不同佐剂灭活疫苗免疫BALB/c小鼠的比较试验

用血凝/血凝抑制试验（HA/HI）检测自制的猪血凝性脑脊髓炎病毒（HEV）氢氧化铝胶灭活苗和蜂胶佐剂灭活苗免疫BALB/c小鼠后的抗体效价,依据小鼠抗体效价比较不同免疫佐剂的效果。结果表明,用氢氧化铝胶佐剂配制的疫苗可刺激接种动物产生快速免疫应答反应,抗体产生效价高、维持时间长,其效果优于其它佐剂,有望成为HEV灭活疫苗的候选佐剂。     

几种免疫增效剂对鸡白细胞血象变化及疫苗免疫效果的影响

为了研究不同免疫增效剂对鸡白细胞血象变化及新城疫(ND)疫苗免疫效果的影响,试验采用分组对照和比较的方法,经白细胞分类计数和微量血凝抑制试验检测ND抗体效价。结果表明:不同免疫增效剂对不同时期鸡白细胞血象均有明显影响;对ND抗体效价有显著的促进作用。说明不同免疫增效剂对鸡的免疫功能均有积极作用。     

黄芪注射液对兔病毒性出血症疫苗免疫效果的影响

将不同剂量的黄芪注射液与兔病毒性出血症(RHD)疫苗混合注射或分开同时注射,从接种到第180天,每隔15d采血1次,检测血凝抑制(HI)抗体;在180,240,300d时,试验组与对照组兔做攻毒保护试验。结果表明:试验组兔HI抗体明显高于对照组,差异极显著(P<0.01);不同剂量黄芪注射液和不同给药方法对免疫后的HI效价影响较小,差异不显著(P>0.05)。试验组疫苗保护期可延长60d,说明黄芪注射液可增强家兔接种RHD疫苗后的特异性免疫功能,增强RHD疫苗的免疫效果。     

鸡转移因子脂质体对新城疫免疫效果影响的研究

为了研究鸡转移因子脂质体(CTFL)对疫苗免疫的影响,试验采用微量血凝抑制方法测定新城疫(ND)抗体效价,并以生理盐水、空白脂质体和鸡转移因子(CTF)为对照,首先对试验鸡进行ND抗体效价的测定,然后接种新减支(ND-EDS-IB)灭活油乳剂三联苗,用药后隔日采血测定ND抗体效价。结果表明:CTEL组的抗体效价与生理盐水组、空白脂质体组和CTF组相比均差异显著,并且从第22天开始CTFL组抗体水平一直高于其他各组。说明CTFL对新城疫免疫具有显著的增强效果。     

犬细小病毒血凝抑制抗体效价胶体金免疫层析检测方法的建立及应用

试验旨在利用胶体金免疫层析技术建立快速检测犬血清中犬细小病毒（canine parvo virus, CPV）血凝抑制（haemagglutination inhibition, HI）抗体效价的方法,用于CPV疫苗免疫效果评价。采用双抗体夹心法,以抗CPV血凝相关抗原的单克隆抗体制备CPV抗原检测试纸条;将犬血清进行不同比例系列稀释后,分别与定量CPV抗原充分反应,滴入CPV胶体金试纸条,根据试纸条检测线（test line,T线）消失时的血清最高稀释倍数判断血清中CPV抗体的HI效价;用此方法检测86份犬血清样品,并与传统血凝抑制试验方法进行分析比较。结果显示,成功制备CPV抗原检测试纸条,确定了试纸条检测犬血清CPV-HI效价的反应条件和结果判定标准。结果表明,在检测不同稀释倍数犬血清反应后的CPV抗原时,能使试纸条T线消失时的血清最高稀释倍数与HI效价具有正相关性,犬血清最高稀释倍数乘以4即为HI效价;两种方法的符合率达90.7%。本试验初步建立了胶体金试纸条检测CPV血凝抑制效价的方法,为检测CPV-HI效价提供了一种操作简单、快速的试验方法,可用于CPV疫苗免疫效果评价。     

一株H9亚型禽流感病毒的分离鉴定及免疫试验

为了解养禽业禽病流行病毒株的基本情况,本研究对2014年从山东某鸡场采集的疑似流感的病料样品采用鸡胚尿囊腔接种进行病毒的分离,并经血凝试验(HA试验)、血凝抑制试验(HI试验)及分子生物学试验对其病原学进行鉴定。结果显示,分离鉴定到一株病毒分离株。HA试验结果表明该分离株具有血凝活性,经病毒亚型鉴定为一株H9亚型禽流感病毒(AIV),该病毒株为欧亚分支的BJ亚分支,将该病毒株筛选纯化后作为毒种,制备了禽流感油乳剂灭活疫苗,将该疫苗免疫SPF鸡,21 d后对其HI抗体效价进行检测,结果显示其平均效价达到9.1 log2,免疫后第35 d HI抗体平均效价达到峰值10.3 log2,至免疫后第10周,HI抗体平均效价仍达8.5 log2。本研究分离的病毒制备成疫苗后具有较好的免疫效果,可以作为疫苗候选株。     

商品肉鸡新城疫不同免疫程序效果比较研究

鸡新城疫是禽类的常发病,最理想的防治方法是疫苗免疫。肉用雏鸡母源NDV抗体可干扰疫苗的免疫效果,雏鸡在不同日龄接种疫苗后,血清抗体也会发生一定规律的变化。为获得良好的免疫效果,通过血凝抑制试验（HI）检测母源抗体效价消长规律为：在1～3日龄抗体维持在1：64～128的较高水平,后随时间的延长而逐渐降低,至24日龄抗体降至1：4以下,半衰期为4～5d。针对HI检测抗体效价〈1：40的3日龄雏鸡,对常用的3种有效的免疫程序进行对比试验研究,结果发现第2组免疫效果更为理想。     

无针注射器接种猪用疫苗临床效果评价

在生猪养殖场使用无针注射器械进行猪常用疫苗的免疫接种。为了评价无针注射的安全性、有效性，选择油包水剂型(W/O型)、水包油包水剂型(W/O/W型)、水包油剂型(O/W型)和水剂型疫苗，采用无针注射方式进行免疫，同时设置有针注射对照。免疫后持续监测猪群的体温、精神状态以及注射部位炎症反应等表观指标，定期采集血样，测定抗体水平。结果：2种方式注射接种疫苗后，试验猪体温波动差异不显著，精神状态良好无应激反应，注射部位未见红肿等不良反应；免疫后抗体水平持续升高，无针注射组与有针注射组抗体水平没有显著差异。研究表明，采用无针注射方式接种疫苗安全性良好，其激发的免疫水平不低于有针注射，能够达到免疫同效，该技术可以在猪场推广使用。     

不同口蹄疫疫苗免疫效果及检测方法评估

为更好地了解猪口蹄疫O型合成肽疫苗与猪口蹄疫O型灭活疫苗的免疫效果与合理的检测方法,广西农垦永新畜牧集团有限公司良圻原种猪场在某肥育场进行了此次试验。试验猪分3组,分别注射不同厂家生产的猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪口蹄疫O型OS／99株灭活疫苗,并采用猪O型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒和正向间接血凝试验（HI）分别对使用上述口蹄疫疫苗免疫效果进行检测。结果表明,猪注射口蹄疫O型合成肽疫苗后,用猪0型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒检测,抗体阳性率达到100％;用正向间接血凝试验方法检测不到注射合成肽疫苗后产生的抗体效价。免疫猪口蹄疫O型OS／99株灭活疫苗后,用VP1抗体检测试剂盒检测,抗体阳性率只有30％;用HI方法进行检测,抗体阳性率为60％。     

鸡新城疫群体免疫方法研究Ⅱ—肉用仔鸡免疫程序的实验观察

实验观察了有母源抗体的雏鸡首次接种鸡新城疫疫苗的适宜日龄和不同免疫程序组合的效果。从实验鸡只的血凝抑制抗体的测定,表明雏鸡在1日龄接种疫苗与不接种对照没有明显差别。只有在15日龄时接种,才可看到血凝抑制抗体的明显增长,对强毒攻击有免疫力。实验表明肉用仔鸡全期饲养(80天)时,一次免疫所产生的抗体不能为鸡只提供足够的保护。经过再次接种的鸡只,不论饮水或气溶胶方法,才能有较好的免疫力。在再次接种时,气溶胶方法比饮水法效果更好。实验认为肉用鸡新城疫免疫程序两周龄时宜用饮水法作首次免疫,隔30天以气溶胶或饮水法再次接种。     

肉仔鸡新城疫疫苗免疫效果观察

为了解宝鸡某鸡场对内仔鸡新城疫的免疫情况,对免疫接种后鸡群随机采血分离血清,通过血凝抑制试验测定血清抗体效价,评价疫苗免疫对鸡群的保护作用.结果显示,用Clone-30株、La Sota株做4单位毒测得血清抗体效价均在25以上,而用当地分离株测得同样血清的抗体效价在21～22之间,并且试验后期鸡群发病.结果表明此次免疫...     

免疫复合物疫苗用于鸡新城疫病毒感染的研究

以鸡新城疫病毒上海株sh09作为抗原,与鸡新城疫卵黄抗体IgY按照一定的比例配置免疫复合物疫苗。用无特定病原鸡进行免疫分组试验,实验分为对照组、灭活苗组、免疫复合物疫苗组3组,每隔1周取鸡测定血凝抑制(Hemagglutination Inhibition,HI)抗体效价。攻毒实验在免疫实验的基础上增加1组常规弱毒苗组。结果表明,制备的复合物疫苗在鸡体内HI抗体效价上升较显著,其免疫效果比常规疫苗好,能很好地应对强毒株的攻击。     

兔病毒性出血症抗血清的制备及效价测定

本试验采用兔病毒性出血症灭活疫苗、兔病毒性出血症灭活疫苗和兔病毒性出血症病毒强毒两种不同的免疫程序来免疫家兔．采用血凝及血凝抑制试验检测血清的抗体效价。结果表明：经3次免疫后,疫苗免疫程序组免疫家兔的抗血清平均效价为9log2,未免疫家兔的抗体平均效价为2log2。     

猪瘟和伪狂犬活疫苗几种免疫方式的免疫效果评价

为了评价猪瘟和伪狂犬活疫苗的免疫效果,采用猪瘟活疫苗（传代细胞源）和伪狂犬活疫苗（Bartha—K61株）对35—40日龄猪瘟和伪狂犬母源抗体阴性的健康仔猪分为4组,分别进行单独注射、分点同时注射与混合注射,观察各组注射后的副反应,并对不同时期的抗体用ELISA试验检测血清抗体效价来评价其免疫效果。试验结果表明,两种疫苗同时分点注射和混合注射,相互间的干扰很小,两种疫苗同时注射不影响各自免疫抗体的产生,原因可能是两疫苗共同刺激动物的免疫器官后有提高动物产生免疫抗体的作用．     

新城疫病毒感染绵羊诱导免疫应答反应的实验研究

为探索新城疫病毒(NDV)作为羊病毒病疫苗载体的可行性,验证NDV感染绵羊的可能性,本研究采用NDV Clone-30株分别通过滴鼻和气管灌注两种途径接种绵羊,接种后观察临床症状,检测接种动物排毒情况,通过血凝抑制试验检测接种绵羊特异性血凝抑制抗体,ELISA试验检测接种绵羊血清特异性IgG抗体,微量中和试验检测接种绵羊血清中和抗体.研究结果表明,NDV在绵羊体内是非致病性的,并且通过两种接种途径在绵羊体内均可以产生血凝抑制抗体、NDV特异性IgG抗体和中和抗体反应.本研究结果表明NDV有可能作为宿主限制性疫苗载体用于预防无特效疫苗的羊类疾病,且与气管灌注接种途径比,滴鼻接种途径相对安全.     

猪瘟免疫失败原因分析

<正>我国应用兔化弱毒疫苗预防猪瘟,在免疫猪群中,免疫水平不是相等的,对抗原的免疫反应呈正态分布,大多数呈中等水平,小部分较差。虽说免疫不可能提供100%的保护,然而群体免疫率达到60%以上就足以有效地控制流行,免疫效果就十分显著。所以我国对猪瘟免疫效果评价,均采用群体免疫21d后抗体监测,猪瘟抗体阻断ELISA检测试验阳性,判定为合格,猪瘟抗体正向间接血凝试验抗体效价≥25判定为合格,存栏猪群体的抗体合格率达到≥70%判定为合