牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测

本研究旨在了解甘肃地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的耐药性和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的感染情况,为奶牛乳房炎的防制提供理论依据。采用KB纸片扩散法,检测17株金黄色葡萄球菌对8种不同抗菌药物的敏感性;再用琼脂稀释法检测了苯唑西林、万古霉素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MICs);头孢西丁纸片扩散法和PCR扩增特异性mecA耐药基因对所有受试菌株进行全面的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测。结果表明,菌株对青霉素、磺胺异恶唑具有较强抗性,而对环丙沙星、头孢唑啉、万古霉素和苯唑西林全敏感;头孢西丁纸片扩散法未能检测出表型为MRSA的阳性菌株,而PCR方法却检测出8株mecA基因阳性菌株,且这些菌株的苯唑西林MIC均小于2 μg/mL。菌株的耐药情况较严重,对甲氧西林敏感而携带mecA基因的菌株高频存在于被调查地区的奶牛场中。     

牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分离鉴定

从奶牛分离得到耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methieillin—resistant Staphylococcus aureus,MRSA）。按常规方法复苏菌株,用血浆凝固酶试验鉴定SA。用KB法、琼脂筛选法、生化鉴定法（VITEK32）、聚合酶链反应等鉴定MRSA。常规分离鏊定的葡萄球菌468株,其中凝固酶阴性葡萄球菌（coagulase negative Staphylococcus,CNS）361株,检出率为77．149,6,金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）105株,检出率为22．44％,MRSA36株检出率为34．29％,2株未定型,占0．42％。而MRSA在乳房炎奶样中检出率高达34．29％,表明新疆兵团部分垦区牛场MRSA已经呈蔓延趋势。     

牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行特征和耐药性研究进展

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是WHO公布的重要的人医临床病原菌,同时也是重要的人畜共患病原菌,对其感染的治疗是临床上难题之一。目前,世界范围内牛源MRSA呈现多重耐药现象,部分相同分子分型的MRSA克隆株已在牛和猪等不同家畜中检出,提示存在通过携带者向社区人群和医院患者传播的风险。目前的报道显示我国牛源MRSA分离株已表现出多重耐药性和分子多样性,应引起我国公共卫生领域的重视。本文综述了欧美和亚洲国家牛源MRSA耐药性和分子流行特征相关的研究成果,以期为评估我国MRSA的流行传播风险提供参考依据。     

牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌研究进展

金黄色葡萄球菌是引起奶牛乳房炎的最主要病原菌之一。然而,在治疗奶牛乳房炎的过程中由于抗生素滥用,造成乳汁中药物残留及耐药菌株增多。近年来,尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率逐年呈上升趋势,成为危害人畜健康的重要致病菌之一。同时也给奶牛乳房炎的治疗带来巨大的挑战。论文对牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法、流行病学、致病性及致病因子、耐药机制、预防与治疗措施及未来发展前景及展望进行了综述,希望为深入研究MRSA,减少其耐药性,研制有效的药物和疫苗起到参考作用。     

牛源金黄色葡萄球菌耐药性及甲氧西林敏感和耐甲氧西林菌株演化相关性研究

为研究牛源金黄色葡萄球菌耐药性以及甲氧西林敏感(MSSA)和耐甲氧西林(MRSA)菌携带的耐药基因、MRSA的SCCmec基因型,揭示牛源MSSA与MRSA之间的演化相关性和MRSA起源和扩散途径,对2009年以来中国五省区不同牛场分离的54株金黄色葡萄球菌进行了药敏试验.对确定的12株MSSA和MRSA进行了耐药基因检测、SCCmec基因型分型和多位点测序分型(MLST)研究.54株菌的药敏结果显示,对红霉素、克林霉素、青霉素、复方新诺明、多西环素、四环素、氯霉素、环丙沙星、庆大霉素的耐药菌株分别为88.8％、81.5％、88.9％、90.7％、92.6％、94.4％、79.6％、63.0％和70.4％.其中,对所测10种抗生素完全耐药的占5.6％,对5种以上耐药的占85.2％,6株(11.1％)对头孢西丁耐药.12株MSSA和MRSA菌株的药敏和耐药基因检测结果显示,3株MRSA对10种抗生素耐药;6株MSSA菌中,新疆分离株对2～4种抗生素耐药,其它省区分离株对7种以上抗菌素耐药.12株MSSA和MRSA菌均检出ermC和tetK基因;6株MRSA中均检出aac(6′)/aph(2")基因,5株检出tetM基因,4株检出aph(3′)-Ⅲ基因;6株MSSA均未检出aac(6′)/aph(2")和aph(3′)-Ⅲ,4株检出tetM基因.用多重PCR对MRSA进行SCCmec基因分型显示,5株为SCCmec Ⅳ,1株未能分型;12株菌的MLST分型发现,所有菌株分为ST50、ST965、ST6、ST97和ST9序列型.经eBURST v3分析,MRSA分布在CC7、CC4、CC21和CC9四个克隆复合群(CCs)中,MSSA分布在CC7和CC32克隆复合群中.以上研究表明,我国牛源金黄色葡萄球菌不仅耐药严重,且表现多重耐药;MRSA基因型以SCCmec Ⅳ为主.对牛源SCCmec Ⅳ型MRSA与同型人源MRSA的耐药谱分析发现有较大差异,推测位于质粒或转座子上的耐药基因可能插入到金黄色葡萄球菌基因组中,导致耐药基因在不同菌株间传播.根据ST97中有MSSA和MRSA以及牛源MRSA与人源MRSA的MLST比较,确认我国牛源MRSA是在抗生素的选择压力下由来源于不同克隆复合群的MSSA获得SCCmec Ⅳ而产生,推测同一克隆株MRSA的扩散并不是MRSA大范围出现的主要原因.     

南京地区4株猪源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌多位点序列分型

应用多位点序列分型技术,研究4株猪源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)临床株的来源和遗传背景,了解其耐药状况、分子分型及遗传学特点。受检菌株31株,用PCR扩增mecA基因鉴定猪源MRSA;用K-B法对4株猪源MRSA进行抗生素耐药性检测;应用多位点测序分型(Multilocus Sequencing Typing,MLST)方法进行ST分型比较。结果:PCR法检出率为12.9%(4/31),检出的4株猪源MRSA均表现为多重耐药,同时对氨苄西林、头孢噻肟、庆大霉素、氯霉素、克林霉素和环丙沙星完全耐药。MLST分型显示4株猪源MRSA以ST9型为主(3/4),等位基因谱为3-3-1-1-1-1-10,1株等位基因谱为10-35-129-2-7-50,属新ST型。研究表明4株猪源MRSA呈多重耐药模式,这初步反映了抗生素在临床上广泛且不合理的应用。MLST作为一种可靠的分型方法为猪源MRSA的分型研究提供信息,对研究猪源MRSA的遗传背景和防治具有重要意义。     

苯唑西林敏感耐甲氧西林金黄色葡萄球菌研究进展

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）是革兰氏阳性菌,是目前临床感染常见的一种病原菌,能引起局部化脓性感染、关节炎、心内膜炎、蜂窝织炎、败血症、脓毒血症等全身感染。近些年来,由于抗生素不合理的使用,金黄色葡萄球菌的耐药性日益严重,特别是苯唑西林敏感耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（oxacillin-susceptible methicillin-resistant Staphylococcus aureus,OS-MRSA）的出现给临床治疗增加了巨大的难度。了解OS-MRSA的流行病学特点和耐药机制可帮助临床医师更好地选择治疗药物,鉴于此,作者针对OS-MRSA的流行病学及耐药机制研究进展进行综述。     

不同中草药提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抑菌效果研究

为了检测不同中草药提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑菌效果,选取了7种不同粉碎粒度的中草药进行试验。用水提取法制备提取液,通过微量肉汤稀释法测定各提取液的抑菌效果。结果表明,厚朴、白术、茵陈提取液对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌活性;细粒度的厚朴提取液对MRSA的抑菌效果比粗粒度的厚朴提取液好。由此可见,厚朴提取物对MRSA具有潜在的抗菌优势。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离鉴定及耐药基因检测

为了解动物源性金黄色葡萄球菌对市售常见的各种兽用抗生素药物的耐药情况,掌握并分析其耐药性,指导临床合理使用抗菌药物。本研究通过常规细菌分离鉴定患病动物炎性分泌物,对分离菌株进行生化试验、耐药性试验、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant S.aureus,MRSA)鉴定和耐药基因鉴定,获得4株耐药金黄色葡萄球菌,2株为MRSA,2株为甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(Methicillinsusceptible S.aureus,MSSA);4株金黄色葡萄球菌均检测出tetA、aac(6')/aph(2')、sul1耐药基因,其中2株MRSA检测出mecA。MRSA与MSSA均表现出了多重耐药现象,其中MRSA比MSSA的耐药现象更为广泛。因此,要更加关注MRSA的流行情况,制定规范的用药行为,严控抗生素药物的滥用。     

黄芩和蜂毒肽配合物抑耐甲氧西林金黄色葡萄球菌试验研究

蜂毒肽与黄芩醇提物体外抑菌试验显示,二者配伍对MRS的抑菌圈直径最大为38mm,最小抑菌圈直径为25mm,而万古霉素对MRS的抑菌圈直径仅为23mm,因此可看到二者配伍所产生的抑菌效果均高于万古霉素;体内抑菌试验中,通过急性攻毒实验测出106个/mL浓度的菌液为正式感染攻毒标准,小鼠腹腔注射各种浓度配伍的蜂毒肽与黄芩提取物测定小鼠存活率,以及小鼠肝脏、脾脏和胸腺免疫器官重量。结果显示D组（中等剂量的蜂毒肽和高剂量黄芩提取物）小鼠肝脏均重为65．24±6．58mg／g,万古霉素组59．11±6．12mg／g,二者差异显著。D组对小鼠脾脏和胸腺重量的均数8．29±1．25mg／g、2．87±0．61mg／g,万古霉素组为6．30±1．36mg／g和2．03±0．59mg／g,二者差异极显著。D组提高小鼠的存活数量,可以达到13只,存活率为86．7％,万古霉素组小鼠的存活率仅有66．7％。说明蜂毒肽与黄芩提取物配伍对MRS引起的感染具有很好的治疗效果。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药机制分析

葡萄球菌病是当前威胁畜牧业发展最常见的疾病之一,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的产生,使葡萄球菌病更难于治疗和控制。因此,深入了解MRSA的耐药机制,寻找新的药物作用靶位,是有效控制葡萄球菌病发展与蔓延的重要措施。     

家禽及其制品中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株的分子生物学和耐药性研究

近期,德国研究者开展了2项研究以期深入了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的流行情况及耐药特性.22个源自患病火鸡和鸡MRSA菌株以及32个源自火鸡和鸡肉/肉制品的MRSA菌株研究显示,分离菌株中,CC398为优势菌株,同时CC5和CC9的MRSA菌株也被检出;除了2个MRSA菌株外,其他所有菌株均具有多重耐药性,且至少对3类抗菌剂具有耐药性.采用DNA微阵列分析和分子分型来获得MRSA的分子生物学特征有助于追溯其在家禽及食物链中的传播.     

耐甲氧西林葡萄球菌的检测方法

本文对耐甲氧西林葡萄球菌的检测方法进行介绍,以期选择快速准确的检测方法,对防控该病起到一定作用。     

动物源耐甲氧西林金色葡萄球菌的耐药性分析

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)是一种人类共生菌,并引起全球感染。SA感染的高发率主要是由细菌很容易对抗生素产生耐药性导致的,而耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)产生特别是多药耐药SA的出现使得动物临床治疗变得异常困难。本文针对MRSA的耐药机制和其多药耐药机制以及耐药基因的传播作简要概述,旨在为兽医临床合理指导抗生素用药和控制细菌耐药性的发展提供理论依据。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌微量凝集试验方法的建立及初步应用

为建立一种快速检测动物源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法,本研究以MRSA耐药性决定蛋白PBP2a的抗血清为检测抗体,通过对抗原浓度及反应温度等进行优化,确定最佳的反应条件后,建立了快速检测MRSA的微量凝集试验方法,并进行了敏感性、特异性、重复性试验以及药敏纸片法比较试验。其中,微量凝集试验最低检出MRSA的浓度为40亿/mL,该方法对MRSA的凝集反应具有良好的特异性,试验结果具有较好的重复性。采用该检测方法对分离自鸡、猪、家兔及小鼠的75株金黄色葡萄球菌进行检测,检出MRSA株占57.3%,经过与药敏纸片法检测进行比较,符合率为92%。该方法快速、准确、简单易行,适于临床或基层应用。     

不同中药提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用和逆转机制

采用(K-B)药敏纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的药物敏感性,并用二倍稀释法分别测定10种中药提取物对MRSA的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),选取抑菌效果最好的中药提取物(黄芩)通过棋盘法测定其与5种常用抗生素的联合抑菌效果。观察黄芩不同亚抑菌浓度作用下对MRSA耐药性的逆转效果,并通过荧光实时定量PCR法检测耐药基因mec A在mRNA表达水平上的变化。结果表明,MRSA具有多重耐药性,10种中药提取物里黄芩的抑菌和杀菌效果最为显著,MIC和MBC均为156 mg/L,但其与5种抗生素没有显著的联合抗菌作用,在黄芩亚抑菌浓度130 mg/L作用20 h后,MRSA主要耐药基因mec A的表达量下调并恢复了对药物的相对敏感性。     

宁夏地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌耐药性分析

为了解宁夏地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的耐药情况,采用药敏纸片扩散法,测定了50株奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌对常用的17种抗茵药物的耐药性.同时采用产色头孢菌素法进行β-内酰胺酶的检测,并采用苯唑西林纸片法进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检测.结果表明,所有菌株除了对利福平、万古霉素100％敏感以外,对其他15...     

茶树精油的提取及抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的活性研究

为了用便捷高效的提取分离方法,获得高纯度的茶树精油,进行抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)活性的研究.采用水蒸气蒸馏法提取茶树精油,应用96孔板法测得茶树精油对MRSA的最小抑菌浓度(MIC),对金黄色葡萄球菌进行抑菌试验.结果表明:通过水蒸气蒸馏法提取得到茶树精油1.6g,收率1.6％,松油烯-4-醇含量35.4...     

奶牛乳房炎致病型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分离鉴定

为探究引起奶牛乳房炎的耐药性致病菌,本研究针对西安地区显性乳房炎奶样中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）进行系统研究。采用常规细菌学鉴定法对34头（次）荷斯坦牛76个乳区152份奶样的金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus）进行了分离培养,共检出92株阳性菌株,检出率为60.5%;对其进行S.aureus致病基因nuc的特异性PCR检测,共检出28株含nuc基因的阳性菌株,检出率为30.4%;进一步针对MRSA耐药基因mecA进行特异性PCR扩增,共检出5株MRSA,检出率为17.9%。研究结果为MRSA耐药菌的有效检测及奶牛乳房炎的治疗提供了指导。     

柠檬提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及新城疫病毒抑制作用的初步研究

目的:初探柠檬提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑制作用及其机制,温度、酸碱度对提取物作用的影响;观察柠檬提取物对新城疫病毒的抑制作用。方法:利用滤纸片扩散法测定不同提取物浓度的相对抑菌活性,不同温度、酸碱度环境提取物相对抑菌活性。利用Vero细胞为载体观察提取物对新城疫病毒的抑制作用。结果:柠檬提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有显著的抑菌活性,其活性不受酸碱度影响,但受温度影响;提取物对新城疫病毒具有直接抑制作用,对该病的预防及治疗作用则不明显。结论:柠檬提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及新城疫病毒均具抑制作用。