郁金香鳞片愈伤组织诱导研究

以郁金香品种“粉色印记”的鳞片为外植体,研究鳞片部位以及不同激素组合对愈伤组织诱导的影响.结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基是MS+NAA2.0mg/L+6-BA1.5mg/L,诱导率为45%,鳞片上段是诱导愈伤组织的最佳鳞片部位,诱导率为65%.     

洋水仙Dutch Master愈伤组织的诱导、分化及植株再生

以洋水仙品种Dutch Master的鳞茎、叶、花葶及无菌苗叶片作为外植体,选用MS为基本培养基,分别添加不同质量浓度的NAA(0.5,1.0,1.5mg·L~(-1))、IBA(0,0.5,1.0mg·L~(-1))、2,4-D(0,0.1,0.2,0.5,1.0,2.0mg·L~(-1))、6-BA(0.5,1.0,1.5,2.0,3.0mg·L~(-1))和KT(0.1,0.3,0.5mg·L~(-1)),研究不同外植体和不同外源激素配比对小鳞茎的诱导,愈伤组织的诱导、继代及植株再生的影响。结果表明:在Dutch Master初代培养阶段,6-BA的影响效应最大,随着6-BA质量浓度的升高,诱导率呈上升趋势,最适宜的初代培养基配比为:MS+6-BA 3.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+2,4-D 0.2mg·L~(-1);以带鳞茎盘的双鳞片作为外植体诱导小鳞茎效果最好,诱导率达76.7%;鳞片部位以鳞茎外层鳞片的培养效果最好,分化率达97.5%;在Dutch Master愈伤组织诱导阶段,2,4-D的影响效应最大,当2,4-D浓度为1mg·L~(-1)时,愈伤组织诱导率的均值(K2)为峰值,最适宜的愈伤组织诱导培养基配比为:MS+2,4-D 1mg·L~(-1)+6-BA 1.5mg·L~(-1)+KT 0.1mg·L~(-1),Dutch Master无菌苗叶片愈伤组织诱导率可以达到81.3%;在Dutch Master愈伤组织继代培养阶段,最适宜的继代培养基配比为:MS+2,4-D 0.5mg·L~(-1)+6-BA 1mg·L~(-1),可以增殖分化得到没有玻璃化的小植株。     

山西野生卷丹百合鳞茎组织培养

以卷丹百合(Lilium lancifolium)鳞茎鳞片为外植体,探讨影响其分化的主要因素。正交试验结果表明,诱导卷丹百合鳞茎鳞片不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导鳞茎鳞片愈伤组织最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;继代培养中发现,小鳞茎在添加50 g/L蔗糖MS培养基中生长量最大,添加40 g/L蔗糖有利于愈伤组织生长,且小鳞茎生根率高,生根数量多。     

浙贝母鳞茎愈伤组织诱导分化及植株再生研究

以狭叶、宽叶和多籽浙贝母品种鳞茎为材料,研究了不同消毒方法、不同激素配比培养基对浙贝母愈伤组织诱导和分化及植株再生的影响。结果表明,0.1%升汞处理20 min为最佳的消毒方法;在诱导培养基MS+NAA 1.5 mg ·L-1+KT 0.5 mg ·L-1中诱导率最高,达到36.7%;在分化培养基MS+NAA 4.0 mg ·L-1+KT 1.0 mg ·L-1中分化率最高,达到80.7%。研究结果还发现,不同基因型浙贝母对鳞茎愈伤组织诱导与分化及植株再生有较大影响。     

平陆百合脱毒试管苗鳞片的分化研究

以平陆食用百合脱毒试管苗的鳞片为外植体,研究了不同接种部位和方式,不同植物激素种类和浓度对鳞片分化的影响。结果表明:平陆百合鳞片的分化能力为外层中层内层,同一鳞片的不同部位分化能力为下段中段上段。接种方式以鳞片竖直插入培养基中为好,鳞片分化快,分化率高。试验中设置的培养基均可诱导鳞片分化,但附加不同种类和浓度的激素对鳞片分化出的小鳞茎的数量和生长状况影响不同,差异很大。其中以培养基MS+6-BA 0.8mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1上诱导出的小鳞茎数量多,生长壮,适宜作为快繁时获取大量鳞茎的培养基;在培养基MS+ZT 1.0mg·L-1+NAA 0.2mg·L-1和MS+ZT 1.5mg·L-1+IBA 0.1mg·L-1上诱导出的小鳞茎数量不多,但生长健壮,可直接成苗,适宜作为诱导鳞片分化较大鳞茎的培养基;诱导鳞片分化愈伤组织的最适宜培养基为MS+2,4-D 1.0mg·L-1+6-BA 0.5mg·L-1,愈伤组织不经转换培养基可直接分化鳞茎。     

红花石蒜的组织培养

选用双鳞片法切割红花石蒜鳞茎为外植体,采用MS基本培养基,以两种植物生长调节剂NAA和6-BA不同浓度配伍,研究了不同消毒时间和不同激素浓度对小植株诱导和不定芽诱导的影响。结果表明:利用0.1%升汞溶液浸泡石蒜鳞茎10~15min消毒效果最好;MS+2mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA是小植株诱导的最佳培养基;MS+NAA 2mg/L+6-BA2mg/L是不定芽诱导的最佳培养基;MS+2mg/L NAA对于小鳞茎的生根效果最好。     

朱顶红花孔雀和黑天鹅离体快繁技术体系的建立

为了促进朱顶红种球工厂化生产,以朱顶红花孔雀和黑天鹅鳞片为外植体,研究诱导、继代、生根、移栽的最适宜培养条件。结果表明:小鳞茎诱导的最适培养基为MS+0.5mg·L~(-1)NAA+3mg·L~(-1)TDZ,其中花孔雀诱导率可达78.13%,黑天鹅诱导率为70.00%,花孔雀诱导小鳞茎形成完整植株所需时间较黑天鹅短。愈伤组织诱导的最适培养基为MS+2mg·L~(-1)6-BA+1mg·L~(-1)NAA+2mg·L~(-1)TDZ,花孔雀朱顶红在诱导出愈伤组织后经继代100%形成胚性愈伤组织,继续培养能够经过体细胞胚发育形成小植株,诱导率达80.00%;但黑天鹅诱导出愈伤组织后,继代培养通过不定芽途径形成小植株,诱导率达64.29%。花孔雀和黑天鹅均为鳞片基部诱导速率快、效果最好,诱导率分别为81.81%和68.75%。在MS+1.5mg·L~(-1)NAA的培养基中进行生根培养,20d后2个品种的生根率均达到100%。将生根培养20d的小植株直接移栽至经高温消毒的草炭∶珍珠岩∶蛭石(v/v/v)=1∶1∶1的基质中,成活率达100%。     

郁金香组织培养技术

以郁金香品种红色印象(Red Impression)叶、花茎、鳞片及腋芽等器官为外植体,在8种培养基上进行离体培养.结果表明:鳞片外植体直接诱导小鳞茎或不定芽的频率最高,培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L不定芽诱导率最高,诱导率为8.7%.培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L能诱导出小鳞茎,诱导率为4.3%.腋芽诱导的鳞茎、叶和花茎则未能诱导出小鳞茎或不定芽.     

激素和光照条件对百合“普瑞头”鳞片和叶片的诱导培养

以亚洲百合“普瑞头”(Prato)鳞片为外植体,研究了百合鳞片的消毒方式、不同光照条件对百合鳞茎及再生植株的叶片诱导的影响.结果表明,0.1％HgCI2消毒处理8min是最适合百合鳞片的消毒方式,成活率最高;鳞片诱导过程中发现,暗处理有利于不定芽的形成,最佳诱导培养基为MS+1mg/L6-BA+0.1mg/LNAA;暗培养有利于促进再生植株叶片愈伤组织的形成,最佳诱导培养基为0.1mg/LMS+2,4-D.     

郁金香鳞片组织培养研究

为探索郁金香的快繁方法,并为转基因分子水平研究奠定基础,对4个郁金香品种‘Parade’,‘Merry Widow’,‘Golden Parade’,‘Pink Diamond’的鳞片组织培养进行系统的研究。结果表明:0.1%HgCl2 10min 5%NaClO 20min是最佳的消毒方法。‘Parade’适宜诱导愈伤组织的培养基为MS NAA1.0mg·L-1 BA1.0mg·L-1,诱导率可达100%。‘Parade’和‘Merry Widow’适宜诱导芽的培养基分别为MS NAA2.0mg·L-1 BA0.5mg·L-1和MS NAA0.5mg·L-1 BA1.0mg·L-1,芽的直接再生率均为15.4%。中层鳞片易诱导成愈伤组织,诱导率为8.0%,内层鳞片较易直接诱导生芽,再生率可达26.7%。培养基中添加50～200mg·L-1的维生素C有利于直接再生芽,而不利于愈伤组织的诱导。鳞片接种后暗处理5d和15d可以使芽的直接再生率分别达到12.5%和10.3%。     

山西野生卷丹珠芽诱导研究

以卷丹百合(Lilium lancifolum)珠芽鳞片为试材,探讨了不同消毒处理、不同部位珠芽鳞片外植体、激素配组对卷丹百合鳞茎不定芽及愈伤组织诱导的影响。试验结果表明:80%次氯酸钠处理20min对珠芽鳞片污染率及成活率综合作用效果最佳;诱导卷丹珠芽鳞片不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1;诱导珠芽鳞片愈伤组织最佳培养基为MS+6-BA 1.5mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1。     

水晶布兰卡百合花器官的组织培养

以水晶布兰卡百合的花器官子房、花瓣、花丝为外植体,研究不同培养基配方对水晶布兰卡百合不同花器官对小鳞茎诱导、愈伤组织分化及小鳞茎增殖的影响。试验结果表明,培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L较适合于初代培养,此时子房小鳞茎的诱导率达58.3%;MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L适合于不同花器官愈伤组织的分化;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L有利于小鳞茎的增殖。     

双色茉莉叶片初代培养物的建立及愈伤组织诱导

以双色茉莉的叶片为外植体,探讨外植体取材时期、消毒时间、不同植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导的影响,结果表明:取材时期对双色茉莉叶片诱导愈伤组织的影响较为显著,4月份和10月份是双色茉莉叶片取材的最佳时期;不同消毒时间对双色茉莉叶片愈伤组织诱导影响不同,其中在0.1%的氯化汞中消毒5~6 min污染率较低,且诱导产生的愈伤组织生长状况最优;培养基中6-苄氨基嘌呤(6-BA)质量浓度/萘乙酸(NAA)质量浓度影响了双色茉莉叶片愈伤组织的诱导,当6-BA质量浓度/NAA质量浓度为1/4~1时有利于愈伤组织的诱导,形成的愈伤组织质量较好;添加激动素(KT)则不利于双色茉莉叶片愈伤组织的诱导。该研究以双色茉莉叶片为外植体,培养获得了愈伤组织,其中愈伤组织诱导的适宜培养基有MS+1.0 mg·L^-16-BA+1.0 mg·L^-1 NAA、MS+1.0 mg·L^-16-BA+2.0 mg·L^-1 NAA、MS+1.0 mg·L^-16-BA+4.0 mg·L^-1 NAA和MS+2.0 mg·L^-16-BA+2.0 mg·L^-1 NAA,这为双色茉莉离体繁殖再生体系的建立奠定了基础。     

丽江百合组织培养及再生体系建立

为我国特有易危种丽江百合(Lilium lijiangense)的种质资源保护、快速繁殖及园林应用奠定基础,以野生丽江百合鳞片为外植体,探究其最佳灭菌方法,鳞茎不同部位诱导不定芽的能力,以及不同植物生长调节剂对丽江百合愈伤组织及不定芽诱导、不定芽增殖、生根结鳞茎的影响。结果表明,丽江百合鳞片最佳灭菌方案为5%NaClO 8 min+75%乙醇30 s;鳞片分化能力为基部>中部>上部;愈伤组织和不定芽诱导最佳培养基配方为MS+2.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L NAA;不定芽增殖最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;最佳生根结鳞茎培养基为1/2MS+0.1 mg/LNAA+0.01 mg/L IBA。该研究成功建立了一套适宜丽江百合的组织培养和再生体系。     

铁炮百合离体再生体系的建立

以铁炮百合无菌苗的叶片、鳞片为外植体,进行铁炮百合再生体系的研究。结果表明:鳞片的诱导分化能力高于叶片,鳞片分化培养基(MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA、MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA)的分化率高达90.98%。用叶片为外植体,不同部位对不定芽的诱导影响较大,以叶片中部分化能力最强,上部次之,下部最差。叶片分化培养基为MS+1.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA,分化率为85.36%。2,4-D浓度对愈伤组织的诱导影响显著,愈伤诱导培养基以MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D为佳,愈伤率达80%以上。     

芦笋优系T2-32-6组培快繁技术

本试验以芦笋优系T2-32-6嫩茎为外植体,通过不同茎段部位外植体灭菌效果比较、诱导增殖与生根培养基的筛选,优化了T2-32-6的组培快繁技术。结果表明,嫩茎的绿色部分是适宜的外植体材料;适宜芦笋茎段诱导、增殖丛芽的培养基为MS+0.2 mg·L ^-1 NAA+0.3 mg·L ^-1 6-BA,易形成鳞茎盘,利于诱导生根;1/2MS+0.05 mg·L ^-1 NAA+0.05 mg·L ^-1 KT+0.5mg·L ^-1嘧啶醇的激素组合培养基生根率较佳,可达80.6%。本研究为芦笋优系T2-32-6的种苗组培扩繁和生产试验提供了较好的技术基础。     

头花蓼愈伤组织诱导及分化

研究了2种外植体(叶片、茎段)、消毒方法、培养基种类、活性炭、植物生长调节剂等因素对头花蓼愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明,最佳消毒方法为以0.15%HgCl2消毒叶片6min和10%NaClO消毒茎段9min;不同培养基诱导愈伤组织发生率依次为MS1/2MSB5;MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L有利于愈伤组织形成;MS+6-BA 4mg/L+NAA 0.2mg/L有利于愈伤组织增殖;MS+6-BA 8mg/L+IBA 0.1mg/L有利分化,分化率为83.33%,产生不定芽平均数为5.1个。培养基中附加100mg/L活性炭,褐化率仅为6.80%,愈伤组织生长和分化效果较好。     

郁金香鳞片离体培养再生小鳞茎研究

以两个郁金香品种小天使和圣诞节的种球鳞片为外植体,研究不同接种方式、不同部位鳞片、不同基因型和激素浓度对郁金香鳞片离体培养再生小鳞茎的影响。结果表明,以鳞片凸面朝上进行培养,其成活率较高,达76.67%;以内层鳞片进行培养,其成活率达85.00%;小天使鳞片在添加1.0 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA的MS培养基上的成活率和分化率均最高,而圣诞节在含2.0 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA的MS培养基上的分化率较高;两个品种的小鳞茎在含3.0 mg/L 6-BA、0.2 mg/L NAA的MS培养基上增殖效果最好。     

NAA和2，4ˉD对东方百合组织培养的影响

借助正交回归多项式建立数学模型的方法,研究了NAA对东方百合“蒂伯”（Ti ber）鳞片 诱导小鳞茎及2,4ˉD对小叶片诱导愈伤组织的影响,以探讨东方百合组织培养中NAA及 2,4ˉD 的用量范围及最佳用量。结果表明, NAA诱导离体鳞片外植体产生小鳞茎的用量范围为 0.15～ 0.9 mg·L -1 ,最佳用量为0.69 mg·L -1 ; 2,4ˉD诱导叶片形成愈伤组织的最佳用量为3.2 mg· L -1 。     

白花油茶胚性愈伤诱导及植株再生

本研究以白花油茶未成熟胚为外植体，对其消毒方式及胚性愈伤组织培养进行研究。结果表明，未剥果皮的外植体先用75%乙醇浸泡60 s后转入0.1%HgCl₂浸泡8 min,再转入2%NaClO中浸泡8 min,成活率最高，达86.67%。未成熟胚切块接种于MS+0.5 mg·L^-1 2,4-D+2.0 mg·L^-1 6-BA中，胚性愈伤组织诱导最好，诱导率最高，达89.63%;将绿色愈伤组织转接至MS+0.2 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA时，愈伤组织表面及其周围产生大量体细胞胚，呈球形、心形、鱼雷状和子叶状等多种形状，且多种相互重叠生长，胚状体诱导率最高，达68.89%;不同配比的6-BA和NAA诱导体细胞胚产生不定芽的效率差异明显，其中2.25 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA和3.0 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-1 IBA不定芽分化效果...