TCM199对陇东绒山羊细管精液的冷冻效果

目的研究陇东绒山羊细管精液冷冻时,通过在葡萄糖一柠檬酸盐稀释液中添加TCM199,观察其对陇东绒山羊细管冷冻精冷冻效果的影响。方法选用4个试验组和对照组进行对比试验,试验组是在稀释液基础上分别添加TCM199标准液,含量为0．5％、1％、3％、5％（V／V）。结果表明：添加19／6的TCM199标准液的试验组（B）效果较好,其冷冻解冻后精子活力高于对照组和其它试验组,但差异不显著（P〉0．05）,质膜完整率试验组和对照组相比差异不显著（P〉0．05）,在精子穿卵活力试验中（SPA）,试验组和对照组相比差异不显著（P〉0．05）。但在细管解冻后不同时间段活力测定试验中,解冻后5h、8h、12h,试验组（B）和对照组活力差异显著（P〈0．05）,且随着时间延长呈下降趋势。因此制作陇东绒山羊精液细管冷冻时,添加1％TCM199标准液具有比较好的效果。     

不同稀释液对波尔山羊冷冻精液保存效果的研究

通过比较三种冷冻精液保存稀释液对冻后精子活力的影响,采用设定的工艺流程制作细管冻精.结果表明,其精子的解冻活力稀释液Ⅲ保存效果极显著优于稀释液Ⅰ的保存效果（P＜0.01）,稀释液Ⅱ保存效果极显著优于稀释液Ⅰ的保存效果（P＜0.01）,稀释液Ⅲ与稀释液Ⅱ的保存效果差异不显著（P〉0.05）.总存活时间稀释液Ⅱ保存时间明显长于稀释液Ⅲ的保存时间.     

“靓精”对山羊精液液态低温保存效果的影响

为探究山羊精液液态低温保存过程中添加不同稀释倍数“靓精”对保存效果的影响。实验以稀释液中未添加靓精为对照组,在稀释液中分别添加稀释50倍、100倍、200倍、400倍的靓精为实验组,经37℃孵育后持续检测精子活力、活率。结果表明,精液孵育后,与未添加靓精对照组相比,稀释液中添加靓精的实验组精子保存时间、活率及活力均得到提高,其中添加稀释200倍靓精组,精子保存时间最长,精子活率和活力均优于其他实验组。表明稀释液中添加靓精有助于延长山羊精子保存时间,提高精子质量。     

Tris-柠檬酸添加不同植物蛋白粉冷冻奶牛精子实验研究

本文研究了Tris-柠檬酸缓冲液中添加大豆蛋白粉、花生蛋白粉、大豆和花生蛋白粉混合物,替代卵黄稀释液冷冻奶牛精子的效果。做了两方面的实验研究:(1)用3种Tris-柠檬酸蛋白粉和对照Tris-柠檬酸卵黄稀释液超低温细管冷冻奶牛精子,观察超低温冷冻奶牛精子活力的冷冻试验;(2)超低温冷冻奶牛细管冻精解冻后在4℃环境中保存的存活实验。研究结果表明,4种不同稀释液超低温冷冻奶牛精子后精子活力差异不显著(P0.05);4种不同稀释液冷冻细管冻精解冻后于4℃冷藏并连续观察,每天的精子活力变化差异显著(P0.05),第5天Tris-柠檬酸大豆和花生混合蛋白粉稀释液的活力最好,并且在显微镜下观察视野要比对照Tris柠檬酸卵黄稀释液清晰,不易滋长细菌。因此,混合大豆蛋白粉和花生蛋白粉的植物源稀释液可以替代动物源稀释液。     

多浪羊细管冷冻精液制作技术的研究

为保存和利用优秀地方品种多浪羊的遗传资源,试验在多浪羊原产地进行了细管冻精制作试验.用采集的多浪羊种公羊精液,比较5种冻精保存液配方的细管冻精冷冻效果,测定解冻后精子活力.结果表明:4.83%乳糖保存液解冻后精液的活率平均为36% ,优于其它4种保存液,且差异极显著(P<0.01),解冻后精子的畸形率也均低于其它4种稀释液,差异极显著(P<0.01).表明4.83%的乳糖保存液配方是理想的绵羊细管冻精稀释液.     

不同稀释方法对小型宠物犬精液冷冻效果影响

为了研究Tris-果糖稀释液在不同稀释方法下对小型宠物犬精液冷冻的效果,选取常见的3个小型宠物犬品种共计6只犬进行试验,精液稀释过程分别采用一步稀释法和两步稀释法。结果表明:冷冻精液解冻后各组犬精液的同一剂型间的精子活力差异均不显著(P0.05);一步稀释法中的颗粒冻精与0.25 mL细管冻精和0.50 mL细管冻精相比,解冻后精子活力差异均显著(P0.05),而0.25 mL细管冻精与0.50 mL细管冻精的解冻后精子活力差异极显著(P0.01);采用两步稀释法的颗粒冻精、0.25mL细管冻精及0.50 mL细管冻精的解冻后精子活力组间差异均不显著(P0.05)。用Tris-果糖稀释液稀释精液时,使用两步稀释法对不同冻精剂型的精子活力影响不明显。     

提高牛细管冻精精子活力的试验研究

本文从细管冻精的3个关键技术环节研究了稀释液的种类对精子活力与存活的影响,确定了细管冻精精子在液氮冷冻度过冰晶期对其损伤最小的最佳熏蒸高度（最佳冷冻温度）和最佳熏蒸时间,并且对成品冷冻的细管冻精不同解冻温度及时间进行研究。由柠檬酸钠和果糖组成的稀释液精子存活时间长,Tris稀释液冷冻后精子活力高于其他配方;牛细管冻精最佳熏蒸距离为2cm,时间影响不显著,7~9min均可;用50℃温水15s解冻精子的活力最高。     

绵羊精液4℃液态保存的稀释液配方优化研究

本试验旨在通过改变绵羊精液低温保存稀释液组成成分,探讨添加脱脂奶粉替代牛奶和大豆卵磷脂替代卵黄在精液低温保存的可行性。试验一在绵羊精液稀释中,添加不同浓度的(4%、7%、10%、13%)脱脂奶粉替代鲜牛奶作为试验组,对照组添加牛奶。结果表明:10%的脱脂奶粉替代牛奶,随着绵羊精液4℃液态保存时间的延长,其精子活力、存活率、顶体完整率与牛奶组差异均不显著(P0.05),添加4%、7%和13%脱脂奶粉组的上述指标则随着精液保存时间的延长呈现显著下降趋势(P0.05)。在试验一的基础上,试验二用不同浓度(0.375%、0.75%、1.5%、3%)的大豆卵磷脂取代稀释液中的卵黄,进行绵羊精液低温保存试验。结果表明以0.375%的大豆卵磷脂取代绵羊精液低温保存稀释液中的卵黄时,对精子保存效果最好,随着保存时间的延长精子活力、存活率、顶体完整率与对照组差异均不显著(P0.05)。     

提高奶牛细管冻精精子活力的试验研究

为了提高奶牛细管冻精精子的活力,试验探索了稀释液种类、最佳熏蒸距离、最佳冷冻温度、最佳熏蒸时间、不同解冻温度及时间对精子活力的影响。结果表明:精子在由柠檬酸钠和果糖组成的稀释液中存活时间长,在三羟甲基氨基甲烷稀释液中冷冻后精子活力高于其他稀释液;牛细管冻精最佳熏蒸距离为2.5 cm,时间影响不显著(5～10 min均可);用50℃温水解冻15 s的精子活力比其他解冻温度和时间时的精子活力要好。     

精浆浓度对4℃保存犬精液品质的影响

为了解精浆对犬精子低温保存的影响,试验通过离心分离鲜精的精浆和精子,将商业化稀释液与精浆混合,制备不含精浆和含25%、50%、75%、100%精浆的稀释液,并用该稀释液于4℃保存犬精子,定期对精子活力、活率、精子运动性、精子质膜完整性进行检测。结果表明:含25%精浆的稀释液保存效果最佳,保存120 h后,精子活力、活率仍超过40%;不含精浆和含50%精浆的稀释液保存效果次之。说明在低温保存犬精液时存在一定浓度的精浆有利于精子存活,在实际生产中,稀释液中含有25%的精浆,即鲜精与稀释液进行1∶3稀释,对维持精子在低温条件下的存活可能有较好的效果。     

日粮中添加胡萝卜对荷斯坦种公牛精液品质的影响

本试验选择16头荷斯坦种公牛随机分为2组，对照组饲喂基础日粮，试验组在基础日粮中添加胡萝卜，试验期为75d，观察对荷斯坦种公牛原精产量、精子密度、精子活力和制冻精数量的影响。结果表明：在荷斯坦种公牛日粮中添加胡萝卜后，试验组牛的原精产量、鲜精精子活力和制冻精数量都极显著高于对照组（P〈0．01）；精子密度与对照组间差异不显著（P〉0．05）。本试验结果验证了在荷斯坦种公牛日粮中添加胡萝卜可显著提高精液产量、精子活力和制冻精数量，提高精液品质。     

离心去除精浆对绒山羊细管冻精品质的影响

为了研究离心除去精浆对陇东绒山羊细管精液冷冻保存的效果,本试验将鲜精以1 250r/min,离心6min后,经过稀释-平衡-冷冻。结果表明:试验组1冻精的活率为33.34%,与对照组和试验组2差异极显著(P0.01);对照组和试验组2冻精活率分别为30.83%和30.61%,但组间差异不显著(P0.05)。通过人工授精,在自然发情状态下,对照组、试验组1和试验组2的受胎率分别是46.15%,49.73%和46.00%,三组之间差异不显著(P0.05)。通过离心陇东绒山羊鲜精,去除部分精浆可以提高其细管冷冻精液的活力,可以提高受胎率。     

添加维生素B_（12）对西门塔尔牛冷冻精液品质影响的初步观察

为观察稀释液中添加VB12对西门塔尔牛精液品质的影响,进行了对比试验。结果表明：添加VB12的试验组冻精解冻后精子活力、顶体完整率比对照组有极显著提高（P〈0.01）,精子畸形率与GOT活性均明显下降,精子存活时间延长。说明VB12在牛精液冷冻中对牛精子形态结构具有一定保护作用。     

不同缓冲液添加大豆蛋白冷冻奶牛精子试验效果研究

本文为解决奶牛冻精稀释液添加卵黄易污染、易将异源动物体内微生物传染给输精母畜等弊端,进行了两个方面的试验研究:(1)选择含蛋白量高的大豆粉溶液添加Tris缓冲液制成蛋白Tris稀释液,添加磷酸盐缓冲液制成蛋白PBS稀释液,及传统使用的卵黄Tris稀释液,分别冷冻奶牛鲜精,观察解冻后活力;(2)观察蛋白Tris稀释液、蛋白PBS稀释液与卵黄Tris稀释液超低温冷冻奶牛精子解冻后在4℃环境中存活时间。结果表明,蛋白Tris稀释液、蛋白PBS稀释液与卵黄Tris稀释液超低温冷冻的奶牛,细管冻精质量都能符合国家标准,但冷冻效果最佳的是蛋白Tris稀释液。在冷藏4℃下,蛋白Tris稀释液、卵黄Tris稀释液第5天精子活力仍能达到国家标准,蛋白Tris稀释液显微镜下的观察视野要比卵黄Tris稀释液清晰,不易滋长细菌。因此,添加大豆粉溶液制成的蛋白Tris稀释液冷冻奶牛精子的效果最佳,试验证明,植物源稀释液可以替代动物源稀释液。     

白藜芦醇对山羊冷冻精子质膜、DNA完整性和温度耐受性的影响

试验旨在研究白藜芦醇对山羊冷冻精子质膜、DNA完整性和温度耐受性的影响。采用假阴道法采集8只云上黑山羊精液,用含不同浓度(0、0.1、1、10和20μmol//L)白藜芦醇的Optidyl稀释液稀释后进行细管分装,对照组不添加白藜芦醇。在5℃平衡4 h后,将细管于液氮蒸气中预冻10 min,最后在液氮中保存30 d。37℃水浴解冻后,采用低渗耐受性试验检测质膜完整性和温度耐受性,精子染色质扩散法检测DNA碎片率等指标。结果显示,10μmol/L白藜芦醇冷冻组精子弯尾率显著高于其他各处理组(P0.05),而其他各冷冻组之间无显著性差异(P0.05);10μmol/L白藜芦醇冷冻组精子DNA碎片率极显著高于鲜精组(P0.01),极显著低于未添加白藜芦醇冷冻组(P0.01)。温度耐受性试验结果表明,不同浓度白藜芦醇冷冻组精子37℃水浴1 h后的精子弯尾率以10μmol/L冷冻组最高,与其他各冷冻组间差异极显著(P0.01);精子弯尾率随着孵育时间的延长而呈逐步下降的趋势,当孵育4 h时,10μmol/L白藜芦醇冷冻组精子弯尾率与对照组无显著差异(P0.05)。透射电镜结果表明,10μmol/L白藜芦醇组精子质膜完整率显著高于不添加白藜芦醇对照组(P0.05)。上述结果表明,在冷冻稀释液中添加白藜芦醇可显著改善山羊冻精质膜状态、DNA完整率和温度耐受性,其最佳作用浓度为10μmol/L,但白藜芦醇是否能改善山羊冻精的人工授精效果还有待进一步研究。     

添加BAM15对英纯血马精液低温及冷冻保存的影响

为研究在马精液稀释液中添加BAM15(一种新型线粒体解耦联剂)对英纯血马精液低温及冷冻保存效果的影响,并探讨低温及冷冻保存马精液时添加BAM15的最适浓度,选取6匹英纯血种公马作为试验动物,以新疆畜牧科学院研发的FZS马鲜精稀释液及冷冻保护液作为基础稀释液(对照组),添加不同浓度BAM15(0、0.05、0.15、0.45、1.50μmol/L)配制低温保存及冷冻保存稀释液,将浓缩处理后的马精液分别置于上述稀释液中进行低温保存及冷冻保存。检测低温保存0、24、48及72 h四个时间段和冻融后的精子运动参数,评价不同浓度的BAM15对马精液低温及冷冻保存效果的影响。结果表明:随着保存时间的延长,在马精液稀释液中添加1.50μmol/L的BAM15对英纯血马的精液低温保存具有最好的效果,可以显著增加精子活力;但在冷冻保存中,添加BAM15与对照组之间相比无明显差异。     

饲料中添加Penergetic-T对种公牛精液品质的影响

试验旨在研究 Penergetic-T 对种公牛精液品质的影响,选择 120 头健康无疾病的西门塔尔种公牛随机分为试验组和对照组,每组 60头,每头牛为 1个重复。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加 0.25 g(/ d 头)Penergetic-T,共饲喂 90 d,检测射精量、精子密度、冻精产量及精子活力、精子畸形率。结果表明:饲料中添加 Penergetic-T 种公牛鲜精的射精量、精子密度、冻后产量、精子活力及畸形率均优于对照组,且差异显著。说明,饲料中添加 Penergetic-T 可显著提高种公牛的精液品质与冻精产量,给种公牛站带来更多的经济价值。     

维生素P对低温保存猪精液的影响

在猪精液稀释液(Zorlesco)中分别添加0,40,80,120,160,200μg/mL的维生素P,研究其对猪精子低温保存的影响。结果表明,维生素P的添加显著延长了猪精子低温保存时间,在各试验组中,维生素P的最适添加浓度为160μg/mL。在该浓度下,维生素P并对第3天时精子的活力、活率、顶体完整率、低渗肿胀率及线粒体活性作用效果不明显(P0.05)。在第6天时,维生素P显著地提高了精子的活力、活率、顶体完整率和质膜完整率(P0.05),但对精子线粒体活性没有显著影响(P0.05)。在保存第9天时,猪精子的活力、活率、顶体完整率、低渗肿胀率及线粒体活性与对照组相比具有显著的提高(P0.05)。     

白藜芦醇对山羊冷冻精液质量的影响

本实验旨在研究白藜芦醇对山羊冻精质量的改善效果。用假阴道法采集8只云上黑山羊精液,用添加不同浓度(0、0.1、1、10、20μmol/L)白藜芦醇的Optidyl稀释液稀释后进行细管分装,其中不添加白藜芦醇组为对照组。在5℃平衡4 h后,将细管于液氮蒸气中预冻,最后在液氮中保存1周。37℃水浴解冻后测定精子活力、顶体完整性、膜完整性和磷脂酰丝氨酸分布等指标。结果表明:与对照组相比,10μmol/L白藜芦醇冷冻组精子直线运动百分率和质膜完整性均提高(P<0.05);10μmol/L白藜芦醇抑制了冷冻解冻后精子ROS的产生(P<0.05);而20μmol/L白藜芦醇冷冻组精子解冻后直线运动百分率低于其他各处理组(P<0.05);白藜芦醇不能缓解冷冻解冻过程对精子总活力、顶体完整性和磷脂酰丝氨酸分布的不利影响。总之,冷冻稀释液中添加10μmol/L白藜芦醇可以改善山羊冻精质量,这可能与白藜芦醇的抗氧化特性有关;但过高浓度的白藜芦醇加重精子的冷冻损伤程度。白藜芦醇是否能提高山羊冻精的人工授精效果还有待进一步研究。     

含N-乙酰半胱氨酸稀释液对鸡精液低温保存效果的影响

采集安卡红种公鸡鲜精,分别用含不同浓度N-乙酰半胱氨酸的A、B 2种稀释液稀释后低温保存,之后测定保存时间、生存指数和精子畸形率,比较不同浓度的N-乙酰半胱氨酸对鸡精液在低温保存下的效果。结果表明：A液中,0.013 0 mol/L添加量和0.002 6 mol/L添加量相比保存时间和生存指数均无显著差异（P〉0.05）,且均极显著（P〈0.01）高于A液无添加组;B液中,0.013 0 mol/L添加量在保存时间和生存指数方面均极显著（P〈0.01）优于0.002 6 mol/L添加量和无添加组,0.002 6 mol/L添加量与B液无添加组相比,保存时间和生存指数差异均不显著（P〉0.05）。而2种稀释液中是否添加N-乙酰半胱氨酸及添加量的多少对精子畸形率影响均不大（P〉0.05）。