1,25(OH)_2D_3对体外诱导培养鸡胚破骨细胞的影响

为了研究1,25(OH)2D3对体外诱导培养鸡胚破骨细胞的作用,从18日龄鸡胚长骨(股骨和胫骨)分离骨髓细胞进行培养,在培养过程中分别添加10-7,10-8和10-9mol/L的1,25(OH)2D3。通过倒置显微镜观察其活体形态,对培养1,3,5,7 d的破骨细胞进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)鉴定,培养7 d后进行骨吸收陷窝和功能分析。结果显示,10-8mol/L组除第1天和其他各组差异不显著以外,第3,5,7天诱导所生成的破骨细胞的数量都显著高于10-7和10-9mol/L这2组(P0.05),极显著高于对照组(P0.01)。经扫描电镜观察,无论是吸收陷窝面积还是陷窝吸收程度,10-8mol/L组均显著高于其2组;对照组无明显陷窝。由此可知,1,25(OH)2D3能诱导鸡胚骨髓细胞形成破骨细胞,且浓度为10-8mol/L时效果最好,所诱导的破骨细胞活性较高。     

25-OH-D3及1,25-（OH）2-D3的研究进展

25-OH-D3及1,25-（OH）2-D3是维生素D的真正活性形式,本文对25-OH-D3及1,25-（OH）2-D3的生物学功能、吸收代谢特点和影响因素进行了综述,为为其应用提供理论参考。     

天然维生素D3代谢物有益于蛋鸡骨骼健康

钙储备充足是保证蛋鸡骨骼质量和蛋壳质量的关键。1,25(OH)_2D_3(生物活性维生素D_3代谢物)在钙稳态中起重要作用。琉球柳叶中的1,25(OH)_2D_3-糖苷是生物活性形式维生素D_3的独特来源,在肠道中分解后可被逐渐吸收并发挥作用。     

1α，25-二羟维生素D3对大鼠成骨细胞增殖分化及周期的影响

在SD大鼠成骨细胞（Osteoblast,OB）体外培养体系中添加不同浓度1α,25-二羟维生素D3（0、10^-9、10^-8、10^-7mol／L）,作用24、48、72h,测定OB增殖率、碱性磷酸酶（ALP）活性,作用48h流式细胞仪测定0B周期。结果显示,10^-9mol／L 1α,25-二羟维生素D3作用24、48、72h均促进oB增殖（P〈0.05或P〈0.01）,抑制ALP活性（P〈0.01）;10^-8、10^-7mol／L作用24、48h,OB增殖率与对照组差异不显著（P〉0.05）,但24h时ALP活性均明显升高（P〈0.05或P〈0.01）,48h则抑制了ALP活性并使OB滞留在G2／M期（P〈0.05或P〈0.01）;72h时10^-7mol／L组OB增殖率极显著低于其余各组（P〈0.01）,并使ALP活性升高（P〈0.01）。表明低浓度1α,25-二羟维生素D3能促进OB增殖,抑制其分化;高浓度1α,25-二羟维生素D3能抑制OB增殖,促进其分化,并使细胞滞留在G2／M期。     

1α，25-（OH）2D3影响体外培养OB增殖分化的钙离子通道机制

为研究1α,25-（OH）2D3影响体外培养成骨细胞（Osteoblasts,OB）增殖分化是否存在L-型钙离子通道机制。在体外培养SD大鼠0B基础上,添加不同浓度的1α,,25-（OH）2D。（0、10^-9、10、10^-7mol／I。）或和10mol／OB硝苯地平（NIF）作用24、48、72h。采用MTT法测定0B增殖率,PNPP法测定碱性磷酸酶（AI。P）活性。结果显示,1α,25-（OH）2D。卉13量依赖性地抑制oB增殖、促进ALP活性;10^-8mol／LNIF单独作用亦能抑制OB增殖、促进ALP活性;并且在培养早期（24、48h）能消除10mol／L 1α,25-（OH）2D3对OB增殖的抑制效应及对ALP活性的促进效应。结果表明,1α,,25-（0H）2D3能够抑制0B增殖、促进其分化;并且此过程涉及L-型钙离子通道机制。     

TNF-α/IL-1α机制对破骨细胞形成和活化的影响

为了探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)/鼠重组白介素-1α(IL-1α)是否能独立于RANKL/RANK/ OPG机制之外直接刺激破骨细胞(OC)的形成和活化.提取4周龄C57雌性小鼠脾细胞,加入鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)TNF-α(±IL-1α)进行体外培养,同时加入骨保护素(OPG)和可溶性NF-κB受体活化子配体(sRANKL)以区别RANKL/RANK/OPG机制.通过OC形态学观察、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、骨吸收陷窝方法鉴定OC的形成和活化水平.结果显示:TNF-α(±IL-1α)能诱导睥细胞融合产生TRAP阳性的多核细胞并在象牙片上产生吸收陷窝,加入OPG不能阻断其诱导破骨细胞形成和产生骨吸收陷窝.结果表明:在MCSF存在的情况下,TNF-α以一种独立于RANKL/RANK/OPG之外的机制诱导破骨细胞的形成和活化,而且IL-1α能显著促进TNF-α的诱导作用(P＜0.05).     

奶牛产乳热的发生与预防

产乳热又称产后瘫痪,是奶牛围产期极易发生的疾病。主要症状为四肢肌肉震颤无力、卧地不起、昏迷,严重者在几小时内死亡。据1996年美国国家动物健康监察署(USDA)的资料介绍,美国每年大约有6％～7％的奶牛遭受产乳热的危害,66％的围产期奶牛患亚急性低血钙症。患产乳热的奶牛平均寿命缩短3．4岁,每例治疗费高达334美元,患产乳热的奶牛感染其他代谢性疾病的比例高出正常奶牛的3～9倍。     

1α,25-二羟维生素D_3对大鼠成骨细胞增殖分化及周期的影响

在SD大鼠成骨细胞(Osteoblast,OB)体外培养体系中添加不同浓度1α,25-二羟维生素D_3(0、10~(-9)、10~(-8)、10~(-7) mol/L),作用24、48、72 h,测定OB增殖率、碱性磷酸酶(ALP)活性,作用48 h流式细胞仪测定OB周期.结果显示,10~(-9)mol/L 1α,25-二羟维生素D_3作用24、48、72 h均促进OB增殖(P<0.05或P<0.01),抑制ALP活性(P<0.01);10~(-8)、10~(-7)mol/L作用24、48 h,OB增殖率与对照组差异不显著(P>0.05),但24 h时ALP活性均明显升高(P<0.05或P<0.01),48 h则抑制了ALP活性并使OB滞留在G_2/M期(P<0.05或P<0.01);72 h时10~(-7) mol/L组OB增殖率极显著低于其余各组(P<0.01),并使ALP活性升高(P<0.01).表明低浓度1α,25-二羟维生素D_3能促进OB增殖,抑制其分化;高浓度1α,25-二羟维生素D_3能抑制OB增殖,促进其分化,并使细胞滞留在G_2/M期.     

1,25(OH)2D3以双向方式影响猪前体脂肪细胞增殖分化的研究

1,25（OH）₂D₃是维生素D的主要活性形式,影响人和动物脂肪形成,为探究其在猪脂肪细胞增殖分化中的作用,试验从3~5日龄仔猪皮下脂肪组织分离培养前体脂肪细胞,并以浓度为0、0.1、1、10、100和1 000 nmol/L的1,25（OH）₂D₃分别处理,在培养的0、1、2、4、6、8和10 d采用MTT比色法检测细胞增殖活性;在诱导分化后0、1、2、4、6、8和10 d,以油红O染色提取法和实时荧光定量PCR检测细胞成脂分化及分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）和脂肪酸合成酶（FAS）表达。结果显示,0.1和1 nmol/L 1,25（OH）₂D₃显著促进猪前体脂肪细胞增殖（P<0.05）,而浓度为10~100 nmol/L时则抑制细胞增殖（P<0.05）;0.1和1 nmol/L 1,25（OH）₂D₃显著抑制猪前体脂肪细胞分化（P<0.05）,降低PPARγ和FAS mRNA表达水平（P<0.05）,但在浓度为10和100 nmol/L时,显著促进猪前体脂肪细胞分化（P<0.05）,上调PPARγ和FAS mRNA表达（P<0.05）;浓度达1 000 nmol/L时,可能对细胞有毒性作用。综合以上结果,低浓度1,25（OH）₂D₃促进猪前体脂肪细胞增殖,而通过下调PPARγ表达抑制分化;高浓度1,25（OH）₂D₃抑制猪前体脂肪细胞增殖,通过上调PPARγ表达促进分化。1,25（OH）₂D₃对猪前体脂肪细胞增殖和分化具有双向作用。     

维生素D在猪日粮中的应用研究进展

维生素D(VD)是维持动物机体健康稳定的一种脂溶性营养素,可以通过调节钙、磷稳态以及骨骼肌发育和免疫系统等改善动物机体的健康。VD₃及其代谢产物25-羟基维生素D₃(25(OH)D₃)在猪日粮中的应用也格外受到重视。VD可以通过调节仔猪免疫反应,抑制病原微生物感染,缓解生长受阻;可以通过其较强的抗氧化能力,改善肌肉品质;在妊娠和哺乳日粮中补充VD,可以改善母猪繁殖性能和泌乳性能,增加后代仔猪血液中25(OH)D₃的水平。文章就VD在仔猪、生长育肥猪和种猪生产中的应用效果进行综述,为VD在生猪实际生产中的应用提供参考。     

奶牛产后瘫痪的诊疗体会

奶牛的产后瘫痪,是奶牛分娩后突然发生的急性低血钙症。以知觉消失、四肢瘫痪为主要特征,多产、产奶量高、青壮年的奶牛易发,如果治疗不及时,常导致死亡。近几年笔者对22例发病牛进行了诊断治疗,并对奶牛日常饲养管理状况进行调查分析,现将诊治体会报告如下。     

Expert opinions of strategies for milk fever control

Dairy cows have several risk factors for milk fever. The most-suitable strategy to control milk fever in a specific herd will depend on herd-specific circumstances such as the attitude and skills of the farmer, the opportunities available in the production system and the economic consequences of a certain strategy. To develop feasible strategies in a modern loose-housing dairy herd, we carried out an expert opinion study. Animal husbandry advisors and veterinary practitioners were used as experts. The experts quantified the effect on milk fever and time needed by the farmer for two preselected options: Ca-gel fed orally peripartum and a low dietary cation-anion-difference in the dry-cow ration. The estimated mean relative risk (compared to no strategy) was 0.45 and 0.42, respectively, and the median time needed by the farmer was 7 and 33 min, respectively, per cow year. The experts also suggested 12 control strategies. The two control strategies, which were predicted to be the most, relevant were Ca-gel fed orally peripartum used alone and used in combination with a low Ca dry-cow diet.     

比较蛋白质组学技术及其在奶牛乳热研究方面的展望

人类基因组计划被誉为20世纪的三大科技工程之一,其划时代的研究成果——人类基因组序列草图的完成,宣告了一个新的纪元——“后基因时代”的到来。人们认识到基因仅仅是遗传信息的载体,基因的功能主要通过其编码的蛋白质来实现,蛋白质是生命活动的真正执行者。蛋白质组学被认为是后基因组研究中的最主要部分,与基因组相比,蛋白质组的组成更为复杂,功能更为活跃,更直接切近生命活动的本质,其研究的应用前景也更广泛和直接。     

A novel nutritional strategy to prevent milk fever and stimulate milk production in dairy cows

AIMS: To assess the efficacy of a feed supplement designed to reduce the dietary availability of calcium when fed during the last 2-3 weeks of pregnancy, on the incidence of postparturient hypocalcaemia (milk fever) and on milksolids (MS) production in pasture-fed dairy cows in early lactation. METHODS: In Experiment 1, late-pregnant Holstein/Friesian cows, 4-10 years old, grazing pasture, were either fed the supplement (1 kg/cow/day) for 2-4 weeks prior to calving (n=11) or no supplement (n=10). Plasma calcium concentrations were measured immediately before and after a 20 h fast intended to induce hypocalcaemia at the end of this period, 1-7 days before the cows calved. In Experiment 2, mixed-breed dairy cows, 3-10 years old in 7 commercial dairy herds were fed the same supplement (1 kg/cow/day) for 1-3 weeks immediately prior to calving (n=565) or no supplement (n=614), and incidences of clinical milk fever and MS production at 6-9 weeks post calving were compared between groups. RESULTS: In Experiment 1, plasma calcium concentrations were higher (p=0.01) in supplemented than in non-supplemented cows after fasting, indicating reduced susceptibility to fasting-induced hypocalcaemia. In Experiment 2, the incidence of milk fever was lower (6.4% vs 17.1%, p=0.001) and MS production was higher (p=0.01) in supplemented than in non-supplemented cows. CONCLUSIONS: These preliminary results demonstrate that feeding a supplement designed to reduce dietary calcium availability for 2-4 weeks immediately prior to calving reduced the susceptibility of cows to fasting-induced hypocalcaemia, reduced the incidence of clinical milk fever and increased MS production in early lactation. CLINICAL RELEVANCE: The concept and product reported here have potential to provide dairy farmers with a practical means to prevent hypocalcaemia and improve milk production during early lactation.     

奶牛产乳热的预防

文章介绍了产乳热和亚临床低血钙的发病机理,强调调整奶牛产犊前后钙磷代谢是降低代谢紊乱的关键环节.在几种传统的解决方案基础上着重介绍了阴离子盐在预防产乳热方面的作用和在生产上的应用.