南江黄羊不同组织FSHR和GnRHR mRNA表达水平研究

为进一步了解FSHR和GnRHR基因的功能,揭示其对山羊繁殖性状的影响。本研究采用荧光定量PCR技术分析了南江黄羊不同组织FSHR和GnRHR基因的表达差异。结果表明:FSHR和GnRHR在下丘脑、垂体、卵巢、输卵管、子宫、睾丸组织中均有表达,其中,FSHR和GnRHR在母羊子宫组织中表达水平较高,而在其他组织中表达水平相差不大;FSHR基因和GnRHR基因在子宫中的表达量均极显著高于其他组织(P0.01);GnRHR基因在卵巢组织中的表达量显著高于垂体、下丘脑、输卵管(P0.05);公羊睾丸组织FSHR和GnRHR基因的表达量显著高于下丘脑和垂体(P0.05)。本研究结果将会为进一步研究该基因对山羊繁殖相关功能影响的研究奠定基础。     

黄体期和卵泡期小尾寒羊DIO2与DIO3组织表达

为分析DIO2和DIO3基因在小尾寒羊不同繁殖时期(黄体期和卵泡期)下丘脑-垂体-性腺轴各组织中的表达差异,阐明这2个基因在绵羊发情转换中的表达模式,实验采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术对比分析DIO2和DIO3基因在黄体期和卵泡期小尾寒羊下丘脑-垂体-性腺轴各组织中的表达差异。结果表明:DIO2和DIO3基因在下丘脑、垂体、松果体、大脑、小脑、卵巢、子宫、输卵管、肾脏、肾上腺10种组织中均表达;DIO2基因在黄体期和卵泡期的垂体组织中表达量显著高于其他组织(P<0.05),其中黄体期垂体、子宫、下丘脑、松果体、输卵管和卵巢DIO2的表达量显著高于卵泡期(P<0.05);DIO3在卵泡期松果体、下丘脑、子宫、垂体和输卵管的表达量显著高于黄体期(P<0.05)。综上,DIO2能抑制绵羊发情,而DIO3促进发情。     

PRL基因在小尾寒羊母羊不同组织中的表达分析

本实验旨在研究催乳素(PRL)基因在小尾寒羊母羊不同组织中的表达规律。选择42月龄、体重(73.2±2.0)kg、体况良好的小尾寒羊空怀母羊5只,屠宰后采集垂体、下丘脑、肾、子宫、卵巢、淋巴和乳腺组织,用实时荧光定量PCR方法检测各组织中PRL mRNA的相对表达量。结果表明:PRL mRNA在小尾寒羊母羊不同组织中的表达量由高到低依次为:垂体、下丘脑、淋巴、肾、乳腺、卵巢、子宫,其中,PRL mRNA在垂体和下丘脑中的表达量极显著高于淋巴、肾、乳腺、卵巢和子宫,垂体中PRL mRNA的表达量极显著高于下丘脑,而淋巴、肾、乳腺、卵巢、子宫中PRL mRNA表达量差异不显著。     

Ghrelin基因在藏母猪生殖轴中mRNA的表达

采用RT-PCR及荧光定量PCR方法,检测并分析藏猪与长白猪在卵泡期及黄体期下丘脑-垂体-卵巢轴中ghrelin基因mRNA的相对表达量。结果显示:在卵泡期,下丘脑、卵巢中ghrelin基因的mRNA表达量均藏猪显著高于长白猪(P<0.05),而垂体中藏猪虽高于长白猪,但两者之间差异不显著(P>0.05);在黄体期,垂体、卵巢中ghrelin基因的mRNA表达量藏猪分别显著高于长白猪(P<0.05),而下丘脑中藏猪虽高于长白猪,但两者之间差异不显著(P>0.05);无论在卵泡期还是黄体期,也无论是藏猪还是长白猪,自身相比,其ghrelin基因在下丘脑-垂体-卵巢轴的mRNA表达都有一致的变化规律,即卵巢显著高于下丘脑(P<0.05),下丘脑显著高于垂体(P<0.05)。结果表明:藏猪ghrelin基因在生殖轴中的mRNA表达量普遍高于长白猪,这将为从分子水平上分析藏猪产仔率低的原因及提高其产仔率的进一步研究奠定基础。     

妊娠期小鼠下丘N-垂体-卵巢轴中PrRP和PrRP-R mRNA表达规律的研究

为探讨妊娠期小鼠下丘脑一垂体一卵巢轴中催乳素释放肽(PrRP)及其受体(PrRP-R)mRNA的表达规律,选用妊娠6、12、18 d小鼠(n=6),取下丘脑、垂体、卵巢组织,利用半定量PCR方法测定下丘脑-垂体-卵巢轴中PrRP和PrRP-R mRNA表达水平,另外利用放射免疫法(RIA)测定血浆孕酮(P)、雌二醇(E2)和催乳素(PRL)水平,探究下丘脑-垂体-卵巢轴PrRP和PrRP-R mRNA与血浆P、E2、PRL的相关关系.结果表明:妊娠期小鼠下丘脑、垂体、卵巢中都有PrRP、PrRP-R mRNA的表达,其中卵巢PrRP mRNA表达量较高,而下丘脑PrRP-R mRMA的表达量较高.妊娠期小鼠血浆P水平与垂体PrRP mRNA表达量呈显著负相关,而垂体PrRP mRNA与下丘脑PrRP-R mRNA表达量呈显著正相关,结果提示妊娠期m浆高水平的P可能通过抑制垂体PrRP mRNA的表达,进而作用于下丘脑参与妊娠相关调控.妊娠期小鼠血浆PRL水平与下丘腩、垂体、卵巢PrRP和PrRP-R mRNA的表达晕均无显著相关关系,提示血浆PRL水平可能小受上述组织PrRP的影响.     

NCG对山羊性腺轴组织中ITGB8、IGFBP3基因相对表达量的影响

为了探究妊娠早期饲喂N-氨甲酰谷氨酸(N-Carbamylglutamate, NCG)提高山羊产羔数的繁殖机制,试验采用实时荧光定量PCR方法检测了ITGB8、IGFBP3基因在空白组和NCG组(0.15%NCG)卵巢、子宫、输卵管、垂体、下丘脑等性腺轴组织中的相对表达量。结果表明：ITGB8和IGFBP3基因在贵州白山羊5个组织中均有不同程度表达。相同组别不同组织比较,ITGB8基因在空白组的相对表达量为下丘脑>垂体>输卵管>子宫>卵巢,在NCG组的相对表达量为垂体>子宫>下丘脑>输卵管>卵巢;IGFBP3基因在空白组和NCG组中的表达趋势均为子宫>卵巢>输卵管>下丘脑>垂体。相同组织不同组间比较,ITGB8基因在NCG组垂体、卵巢、输卵管、子宫组织中的相对表达量极显著低于空白组(P<0.01),在下丘脑中两组间差异不显著(P>0.05);IGFBP3基因在NCG组垂体、卵巢、输卵管、子宫组织中的相对表达量均极显著低于空白组(P<0.01),在下丘脑中两组间差异不显著(P>0.05)。说...     

CD81、CCL26基因在黔北麻羊不同性腺组织中的表达研究

CD81和CCL26基因是影响哺乳动物性腺细胞融合的重要因子,但其在黔北麻羊性腺组织中的表达情况尚不清楚。为研究CD81和CCL26基因在黔北麻羊不同组织中的表达量,本实验以单、多羔黔北麻羊为研究对象,提取下丘脑、垂体、子宫、输卵管、卵巢组织的RNA,并将5种性腺组织RNA逆转录合成第一链cDNA,随后采用q-PCR技术检测CD81、CCL26基因的mRNA在单、多羔黔北麻羊不同性腺组织中的表达水平。结果表明:黔北麻羊性腺组织中CD81、CCL26基因的mRNA均有表达,2种基因均在单、多羔卵巢中的表达量最高;CD81基因在单羔组子宫中的表达量最低;CD81基因在多羔组、CCL26基因在单多羔组下丘脑中的表达量均最低;组间差异表达量分析可知,CD81基因在多羔组子宫的表达量显著高于单羔组;CCL26基因在单羔组卵巢和输卵管的表达量显著高于多羔组,在单羔组子宫的表达量极显著高于多羔组。本实验结果提示,CD81和CCL26基因可能与山羊繁殖能力相关,也为初步揭示山羊繁殖的分子调控机制提供了参考依据。     

N-乙酰半胱氨酸对努比亚山羊PLCB3和MMP2基因表达的影响

为了探究N-乙酰半胱氨酸(N-Acetylcysteine,NAC)对山羊繁殖性能相关基因PLCB3与MMP2的影响机制,试验以努比亚山羊为研究对象,将其分为饲喂组(0.07%NAC)和空白组,采用实时荧光定量PCR法检测饲喂组和空白组子宫、输卵管、垂体、下丘脑、卵巢5个器官中PLCB3和MMP2基因表达量的变化。结果表明:空白组和饲喂组PLCB3和MMP2基因在5个器官中均有表达。组内比较,空白组各器官中PLCB3基因的表达量由高到低的顺序为垂体子宫下丘脑输卵管卵巢,饲喂组中的顺序为垂体子宫下丘脑卵巢输卵管;组间比较,空白组垂体中PLCB3基因的表达量显著高于饲喂组(P0.05);总体来看,空白组各器官中PLCB3基因的表达量高于饲喂组。组内比较,空白组各器官中MMP2基因的表达量由高到低的顺序为垂体子宫下丘脑输卵管卵巢,饲喂组中的顺序为垂体子宫下丘脑卵巢输卵管,其中垂体和子宫中的表达量极显著高于输卵管、下丘脑和卵巢(P0.01);组间比较,饲喂组垂体中MMP2基因的表达量极显著高于空白组(P0.01),子宫中的表达量显著高于空白组(P0.05);总体来看,饲喂组各器官中MMP2基因的表达量高于空白组。说明在饲粮中添加0.07%的NAC会使PLCB3基因在性腺器官中的表达量降低,MMP2基因在性腺器官中的表达量升高,推测NAC会通过影响性腺轴中PLCB3和MMP2基因表达量来影响努比亚山羊的繁殖性能。     

小尾寒羊黄体期和卵泡期生殖轴凋亡基因的表达研究及其与发情的关系

旨在分析Bad、Bax、Bcl-2和Bcl-xL基因在小尾寒羊黄体期和卵泡期下丘脑-垂体-性腺轴各组织中的表达差异,并探究这些基因与绵羊常年发情性状的关系。以常年发情小尾寒羊为研究对象,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术,对比分析了Bad、Bax、Bcl-2和Bcl-xL4个基因在不同繁殖状态下(黄体期和卵泡期)小尾寒羊下丘脑-垂体-性腺轴各组织中的表达特征,采用放射免疫法(RIA)检测相应时期血清雌二醇和孕酮含量。结果表明,Bad、Bax、Bcl-2和Bcl-xL4个基因在下丘脑、垂体、卵巢均有表达,Bad和Bcl-2在黄体期的垂体和卵巢中的表达量均显著高于卵泡期(P0.05),在下丘脑中2个时期表达量都没有显著差异(P0.05);Bax和Bcl-xL在黄体期下丘脑、垂体和卵巢中的表达量与卵泡期均无显著差异(P0.05)。黄体期血清中孕酮含量显著高于卵泡期(P0.05),而2个时期血清中雌二醇含量没有显著差异(P0.05)。Bad和Bcl-2基因在小尾寒羊黄体期和卵泡期的垂体和卵巢中差异表达,可能参与调控黄体期到卵泡期的发情状态转换,从而启动小尾寒羊发情。     

NAC饲喂对努比亚山羊LIF和HOXA10基因在性腺轴组织表达的影响

N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）是一种抗氧化剂，对动物的繁殖性能具有重要作用。本研究以努比亚山羊为研究对象，采用实时荧光定量PCR技术检测LIF和HOXA10基因在正常饲喂组（空白对照组）和0.07%NAC饲喂组（实验组）性腺组织卵巢、输卵管、下丘脑、子宫和垂体中的表达变化。结果表明：LIF和HOXA10基因在5个组织中均有表达；LIF基因在对照组下丘脑中表达量最高、输卵管中表达量最少，在实验组卵巢中表达量最高、下丘脑中表达量最少；实验组中卵巢LIF基因的表达量显著高于对照组，而下丘脑中LIF基因的表达量显著低于对照组；HOXA10基因在对照组下丘脑中表达量最高、输卵管和垂体中表达最少，在实验组卵巢中表达最高、垂体中表达最少；实验组中卵巢HOXA10基因的表达量显著高于对照组，垂体中HOXA10基因的表达量显著低于对照组。研究结果揭示0.07%NAC可促进努比亚母山羊妊娠前期LIF和HOXA10基因在卵巢、输卵管和子宫中的表达，下调LIF和HOXA10基因在下丘脑和垂体中的表达。本研究结论为进一步研究NAC对山羊繁殖性能的影响提供基础资料。     

NPY、TSH-β、CaBP-28K基因在鸭繁殖期组织中的表达水平分析

本研究对繁殖期高邮鸭神经肽Y(NPY)、促甲状腺激素β(TSH-β)、钙结合蛋白-D28K(CaBP-28K)基因在中枢神经组织和周围组织表达量进行了实时荧光定量分析。结果表明:NPY基因在下丘脑中表达量显著高于在垂体和在小肠中的表达量(P<0.05),在卵巢、心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胰腺、子宫、胸肌、腿肌等9个部位呈痕量表达;TSH-β基因在垂体、小肠中表达量较高,显著高于其他组织(P<0.05);CaBP-28K基因在小肠表达量最多,其次是卵巢和肾脏,但均显著大于垂体中表达量(P<0.05),在其他测定部位呈痕量表达,就生殖轴而言,CaBP-28KmRNA的表达量表现为卵巢>垂体>下丘脑。本研究为了解高邮鸭繁殖期相关基因的表达特征和内分泌机制,指导高邮鸭选种选育提供了理论依据。     

Association Analysis between Differences of GnRHR-Ⅱ Gene Expression with Reproduction Traits Heterosis in Duck Populations

The objective of this study was to clone the sequence of duck type Ⅱ gonadotropin releasing hormone receptor (GnRHR-Ⅱ) gene, and to analyze the association of its expression levels with reproduction trait heterosis. RT-PCR method was used to clone GnRHR-Ⅱ gene fragments, and the expression levels during early laying days and laying fastigium period in Gaoyou duck, Jinding duck and crossed populations were tested by Real-time PCR method. Sequencing and homology analysis showed that the cloned duck GnRHR cDNA was about 500 bp in length, and it belonged to the avian type Ⅱ GnRHR isoforms. It was 96% identical to the cGnRHR-Ⅱ sequence reported in domestic chicken. From the early laying days to laying fastigium period, expression levels of GnRHR-Ⅱ gene in pituitary increased for Jinding duck, Gaoyou duck and crossed populations, with the highest expression levels in Jinding×Gaoyou hybrid group (P<0.01) . The expression levels of GnRHR-Ⅱ gene in hypothalamus also increased for Jinding duck, Gaoyou duck, however, it decreased in two crossed populations. The expression levels of GnRHR-Ⅱ gene in ovary were significantly higher for Jinding duck and two crossed populations than Gaoyou duck (P<0.01), but it decreased during laying fastigium period. Compared to Jinding duck and Gaoyou duck breeds, the two crossed populations had positive heterosis in 42-week production and 42-week egg fertilization percent, and negative heterosis in the first laying age and 42-week fertilized egg hatching rate traits. It suggested that the short-lived higher expression of ovary GnRHR-Ⅱ gene before early laying days be correlated with heterosis of the first laying age and 42-week production traits, and its higher expression levels in pituitary could aid to keep laying fastigium.     

Molecular cloning and tissue expression of chicken AdipoR1 and AdipoR2 complementary deoxyribonucleic acids

AdipoR1 and AdipoR2 belong to a novel class of transmembrane receptors that mediate the effects of adiponectin. We have cloned the chicken AdipoR1 and AdipoR2 complementary deoxyribonucleic acids (cDNA) and determined their expression in various tissues. We also investigated the effect of feed deprivation on the expression of AdipoR1 or AdipoR2 mRNA in the chicken diencephalon, liver, anterior pituitary gland, and adipose tissue. The chicken AdipoR1 and AdipoR2 cDNA sequences were 76-83% identical to the respective mammalian sequences. A hydrophobicity analysis of the deduced amino acid sequences of chicken AdipoR1/AdipoR2 revealed seven distinct hydrophobic regions representing seven transmembrane domains. By RT-PCR, we detected AdipoR1 and AdipoR2 mRNA in adipose tissue, liver, anterior pituitary gland, diencephalon, skeletal muscle, kidney, spleen, ovary, and blood. AdipoR1 or AdipoR2 mRNA expression in various tissues was quantified by real-time quantitative PCR, and AdipoR1 mRNA expression was the highest in skeletal muscle, adipose tissue and diencephalon, followed by kidney, ovary, liver, anterior pituitary gland, and spleen. AdipoR2 mRNA expression was the highest in adipose tissue followed by skeletal muscle, liver, ovary, diencephalon, anterior pituitary gland, kidney, and spleen. We also found that a 48 h feed deprivation significantly decreased AdipoR1 mRNA quantity in the chicken pituitary gland, while AdipoR2 mRNA quantity was significantly increased in adipose tissue (P<0.05). We conclude that the AdipoR1 and AdipoR2 genes are ubiquitously expressed in chicken tissues and that their expression is altered by feed deprivation in the anterior pituitary gland and adipose tissue.     

小尾寒羊FSHβ和LHβ基因在生殖轴的表达研究

为揭示FSHβ和LHβ基因在小尾寒羊下丘脑-垂体-卵巢轴(HPOA)中的表达规律,深入了解其对小尾寒羊多羔的作用,本研究采用实时荧光定量PCR技术对6只小尾寒羊(FecB++型单、多羔羊各3只)的生殖组织及脑组织中FSHβ和LHβ基因的表达差异进行分析。结果表明:FSHβ和LHβ基因在大脑、小脑、下丘脑、卵巢、子宫、输卵管和垂体7种组织中均有表达,FSHβ主要在小尾寒羊下丘脑和卵巢高表达,LHβ在垂体高表达;FSHβ基因在小尾寒羊多羔群体下丘脑、卵巢、子宫、输卵管、垂体的表达极显著高于单羔群体(P<0.01),LHβ基因在小尾寒羊多羔群体下丘脑、卵巢、子宫、输卵管、垂体、小脑、大脑表达量均极显著高于单羔群体(P<0.01)。研究结果提示,FSHβ和LHβ基因可能参与小尾寒羊多羔性状调控。     

Effects of Oxytropis glabra DC Poisoning on the Reproductive Organs in Hetian Sheep Ewes

The study was aimed to research the effects of Oxytropis glabra DC (O.glabra DC) poisoning on reproductive organs coefficent, reproductive performance and related gene expression in Hetian sheep ewes. The sera, hypothalamus, pituitary and ovary of Hetian sheep ewes cases poisoning of O. glabra DC were collected, the organ exponent and contents of GnRH, FSH, LH, E₂ and P₄ in serum were measured, then the mRNA expression of reproductive genes were measured. The result demonstrated that the index of hypothalamus, pituitary and ovary were extremely significantly higher than normal sheep (P < 0.01),the follicle number on the surface of the ovaries in poisoning groups were significantly lower than normal sheep (P < 0.05). The result of hematoxylin-eosin staining showed that the nuclear of neuronal cells in hypothalamus were pyknosis and hyperchromatic; The nuclear of cells in pituitary deformation and hyperchromatic, cytoplasm decreased; The primary oocyte in ovary dissolved, disappeared, interstitial blood vessel expanded. The content of GnRH, FSH, LH, E₂ and P₄ in serum in poisoned Hetian sheep ewes were extremely significantly lower than normal sheep (P < 0.01). The mRNA expression levels of Kiss-1, GPR54, ERα in hypothalamus, GnRHR in pituitary and FSHR and LHR in ovary were extremely significantly lower than normal sheep (P < 0.01). The result showed that O. glabra DC poisoning could affect Hetian sheep ewes reproductive system by affecting microstructure and ultrastructure of hypothalamus-pituitary-ovarian axis.     

小花棘豆中毒对和田羊母羊繁殖器官的影响

试验旨在探讨小花棘豆（Oxytropis glabra DC）中毒对和田羊母羊繁殖器官指数、性激素水平和相关基因mRNA表达量的影响。以小花棘豆中毒和田羊母羊为研究对象,采集血清后屠宰,采集试验羊的丘脑、垂体和卵巢组织,测定其脏器系数,检测血清中促性腺激素释放激素（GnRH）、促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）、雌二醇（E₂）和孕酮（P₄）含量的变化,并检测各组织中相关繁殖基因的表达。结果显示,小花棘豆中毒和田羊母羊丘脑、垂体和卵巢指数均极显著升高（P < 0.01）,且卵巢表面卵泡数显著下降（P < 0.05）,HE染色表明丘脑神经元细胞固缩、浓染;垂体中细胞核变形、浓染,胞浆减少;卵巢中初级卵母细胞溶解、消失,间质血管扩张。小花棘豆中毒和田羊母羊血清中GnRH、FSH、LH、E₂和P₄含量均极显著下降（P < 0.01）,丘脑中Kiss-1、GPR54、ERα mRNA,垂体中GnRHR mRNA和卵巢中FSHR、LHR mRNA表达量均极显著下降（P < 0.01）。结果表明,小花棘豆毒性成分可通过丘脑-垂体-性腺轴影响和田羊母羊的生殖系统。     

高、低产双黄蛋高邮鸭卵巢组织差异分析

本试验以高邮鸭为研究对象,选择双黄蛋高、低产组高邮鸭各6只,颈动脉放血致死后立即采集下丘脑、垂体、肝脏、输卵管及卵巢组织,将采集的卵巢组织通过组织切片、HE染色观察卵巢形态结构,并对双黄蛋高、低产组高邮鸭卵巢中等级卵泡进行统计对比;进行特异性标记蛋白卵泡刺激素受体（FSHR）免疫组化染色,观察两组高邮鸭卵巢阳性细胞表达情况及卵巢颗粒细胞分布;同时提取下丘脑、垂体、肝脏、输卵管及卵巢组织RNA,采用实时荧光定量PCR技术检测FSHR基因的表达。结果显示,双黄蛋高产和低产组高邮鸭卵巢在组织结构及卵泡发育上存在明显差异,高产组卵巢上的卵泡繁密且发育良好,密布着众多小黄卵泡、大白卵泡及小白卵泡,各级卵泡大小差异明显;而低产组卵巢上的卵泡稀疏且发育较为迟缓,小黄卵泡、大白卵泡及小白卵泡数量较少。实时荧光定量PCR检测结果表明,高产组高邮鸭下丘脑、垂体、肝脏及输卵管中的FSHR基因表达量极显著高于低产组（P<0.01）,而卵巢中FSHR基因表达量在两组中差异不显著（P>0.05）。本试验结果表明,双黄蛋高、低产组高邮鸭的卵巢结构及卵泡发育存在显著差异,卵巢上的微环境可能是影响高邮鸭双黄蛋产蛋性能的影响因素。     

Tissue Expression and Bioinformatics Analysis of HOXC10 Gene in Jinghai Yellow Chicken

HOX genes express in nearly all eukaryotic cells such as yeast and human.To study tissue expression and bioinformatics of HOXC10 gene,the samples of heart,liver,spleen,lung,kidney,chest muscle,leg muscle,hypothalamus and ovary tissues were collected from 6 Jinghai Yellow chicken with 8-week-old to analyze the expression pattern of HOXC10 gene in different tissues by qRT-PCR method,and the different expression level were detected in ovary of 300 days old chickens in high yield group and low yield group.The bioinformatics of HOXC10 gene were analyzed by a variety of online softwares of Gallus gallus.The result showed that the expression level of HOXC10 gene in leg muscle was extremely significantly higher than that in other tissues of Jinghai Yellow chicken (P < 0.01);And it's expression level in low yield group was significantly higher than that in high yield group (P < 0.05);HOXC10 gene of Gallus gallus shared 77.4%,94.8%,98.6%,68.3%,67.9%,66.0%,59.0%,68.1% and 79.4% with Meleagris gallopavo,Columba,Anas platyrhynchos,Homo sapiens,Mus musculus,Bos taurus,Sus scrofa,Capra aegagrus hircus and Xenopus laevis,respectively;HOXC10 gene encoded 354 amino acids in which serine was the most abundant;There were 24 potential phosphorylation sites and a HD in 280 to 342 position of amino acid sequence;The subcellular of the encoding protein was mainly located in the cell nucleus,and it had no cross membrane structure.HOXC10 gene might play an important role in regulation network of growth and reproduction in Jinghai Yellow chicken.     

京海黄鸡中HOXC10基因表达规律及其生物信息学分析

同源异型盒基因（homeobox genes,HOX）是在酵母乃至人类等几乎所有的真核细胞中均表达的一类基因。为了探究HOXC10基因表达规律及其生物信息学,采用qRT-PCR方法研究HOXC10基因在8周龄京海黄鸡心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸肌、腿肌、下丘脑和卵巢组织中的表达规律,检测其在300日龄高、低产组卵巢组织的表达差异,并通过多种在线软件对原鸡HOXC10基因进行生物信息学分析。结果显示,HOXC10基因在京海黄鸡腿肌中表达丰度极显著高于其他组织（P < 0.01）,且300日龄高产组中HOXC10基因表达丰度显著低于低产组（P < 0.05）。原鸡HOXC10基因序列与火鸡、野鸽、绿头鸭、人、小鼠、牛、猪、山羊及非洲爪蟾的同源性分别为77.4%、94.8%、98.6%、68.3%、67.9%、66.0%、59.0%、68.1%和79.4%;HOXC10基因共编码354个氨基酸,其中丝氨酸的含量最高,潜在的磷酸化位点有24个,在280~342的氨基酸序列内存在一个同源结构域,蛋白质亚细胞主要定位在细胞核中,且不包含跨膜结构。HOXC10基因在京海黄鸡生长和繁殖的基因调控网络中发挥了重要作用。     

狼山鸡下丘脑和卵巢组织全基因组DNA甲基化分析

为了获得狼山鸡性腺轴组织基因组DNA甲基化水平和模式等表观遗传信息,试验采用全基因组重亚硫酸盐测序（whole genome bisulfite sequencing,WGBS）技术检测狼山鸡下丘脑和卵巢组织基因组DNA甲基化状态,分析两组织DNA甲基化水平及特异甲基化模式。结果表明,狼山鸡下丘脑和卵巢基因组整体甲基化水平分别为4.35%和3.48%,差异显著（P<0.05）;下丘脑和卵巢中分别检测到6 150 000和10 320 000个甲基化胞嘧啶（mC）位点,其中mCG类型位点分别占69.99%和87.88%,下丘脑中非mCG位点占比约为卵巢中的2.5倍;与各染色体不同,两组织线粒体基因组中mCHH位点占比最高,其次是mCHG位点;卵巢基因组启动子区DNA甲基化水平极显著低于内含子和外显子区（P<0.01）,极显著高于基因间区（P<0.01）;下丘脑基因组启动子区DNA甲基化水平与内含子和外显子区相比差异不显著（P>0.05）,却显著高于基因间区（P<0.05）;下丘脑基因组各功能元件DNA甲基化水平均显著或极显著高于卵巢基因组（P<0.05;P<0.01）。综上,狼山鸡下丘脑和卵巢组织具有不同的DNA甲基化模式和特征,下丘脑中较高的非mCG位点比例可能在中枢神经系统发育中发挥重要作用,本研究结果为进一步分析鸡卵巢和下丘脑基因组DNA甲基化对其繁殖性能调控机制提供参考依据。