皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)微卫星DNA的筛选与引物设计

皱纹盘鲍(H aliotisdiscushannai)隶属腹足纲、前鳃亚纲、原始腹足目。近年来国外学者已相继开发日本盘鲍(H aliotis-discusdiscus)、H.rubra、H.asinina和H.kam tschatkana的微卫星标记并已应用于亲缘关系鉴定、种群多样性研究(Selva-m anietal.,2001;C onod etal.,2002)。国内对鲍鱼基因组的研究甚少,李琪(2000)分离出8个皱纹盘鲍微卫星标记。根据本实验室建立的微卫星克隆方案对皱纹盘鲍微卫星D N A进行筛选和引物设计,为进一步的种群遗传分析和物种多样性鉴定提供基本资料。1材料和方法1.1皱纹盘鲍部分基因组文库的构建实验所用的皱…     

高密度CO2处理对皱纹盘鲍肌肉品质的影响

为了探讨高密度CO2（DPCD）应用于加工皱纹盘鲍的可行性,在压力5～25 MPa、温度30～50℃、处理时间10～50 min下分别处理皱纹盘鲍,研究DPCD对其色泽、pH值、保水性、质量损失、质构等指标的影响规律。结果表明：与未处理的相比,DPCD处理对皱纹盘鲍的外观和pH值无显著影响（P＞0.05）,但对其色泽、基本营养成分、质量损失、保水性和质构有显著影响（P＜0.05）,并且随着处理强度的增加,其影响程度也加强;结合杀菌效果,DPCD处理皱纹盘鲍的适宜条件为：20 MPa、45℃、（40～50）min。研究结果将为DPCD加工技术在贝类肌肉食品中的应用提供参考。     

养殖皱纹盘鲍人工育苗LED光质及光照时期优选

光照是影响水生生物生长发育和存活的重要环境因子之一。该文研究了不同光质(红光、橙光、白光、蓝光、绿光和黑暗环境)和光照起始阶段(分别从受精卵,担轮幼虫,眼点幼虫)对皱纹盘鲍幼虫生长发育和存活的影响。试验结果表明:在蓝、绿光以及黑暗环境下,幼虫的孵化率都超过80%,与红、橙、白光组相比差异显著(P0.05)。红、橙、白光下,幼虫的畸形率则均较高,且与其他光质组相比差异显著(P0.05)。而在红光下,幼虫的畸形率显著高于其他处理组(P0.05),超过10%。蓝光下,从担轮幼虫阶段起始光照,幼虫的变态率显著高于其他光质组。红、橙光和黑暗环境下,不同光照起始阶段幼虫的变态率均较低且没有显著性差异(P0.05)。从受精卵阶段起始光照,蓝光下幼虫的变态率显著高于其他光质组(P0.05),绿光和白光下幼虫的变态率也较高且二者间并没有显著性的差异(P0.05)。从受精卵阶段起始光照,蓝、绿光和黑暗环境下担轮幼虫的规格显著大于白、红光组(P0.05),且3种光质间并没有显著性的差异(P0.05)。蓝、绿光下,从担轮幼虫和面盘幼虫阶段起始光照,幼虫形成次生壳和变态时的规格显著大于从受精卵阶段起始光照组(P0.05),但从眼点幼虫阶段起始光照组,幼虫所需的变态时间显著长于从受精卵和担轮幼虫阶段起始光照组(P0.05)。因此,在皱纹盘鲍的幼虫培育过程中,选择蓝、绿光并且从担轮幼虫期起始光照对提高苗种孵化效率、增加单位水体产量和促进鲍育苗技术发展具有重要意义。     

4种经济鲍遗传多样性与分化的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究盘鲍(Haliotis discus discus)、皱纹盘鲍(H.discus hannai)、九孔鲍(H.diversicolor supertexta)养殖群体和杂色鲍(H.diversicolor diversicolor)自然群体遗传多样性与分化结果表明,4种经济鲍的遗传多样性较低,盘鲍群体平均每位点等位基因数目、多态位点百分数(P0.99%)、观察杂合度和期望杂合度分别为1.2、16.67、0.109和0.061,皱纹盘鲍群体分别为1.10、11.11、0.093和0.056,杂色鲍群体分别为1.44、33.33、0.106和0.118,九孔鲍群体分别为1.50、33.33、0.135和0.128。盘鲍在Mdh-1位点上符合H-W平衡标准(P>0.05),而在位点Est-3(F=-0.753)和Sod-1-1(F=-1.000)上表现出杂合子过量;皱纹盘鲍在位点Est-3符合H-W平衡标准(P>0.05),而在位点Est-3(F=-0.371)和Sod-1(F=-1.000)上表现出杂合子过量;杂色鲍在位点Est-3、Mdh-1和Amy-1上符合H-W平衡标准(P>0.05),而在位点Aat-1(F=-0.486)和Mdh-1(F=-0.210)上表现出杂合子过量,在位点Est-2(F=0.597)、Amy-1(F=0.330)和Me-1(F=1.000)上表现出杂合子缺失,九孔鲍在位点Est-3、Sdh-2、Amy-1和Mdh-1上符合H-W平衡标准(P>0.05),而在位点Aat-1(F=-0.477)和Amy-1(F=-0.149)上表现出杂合子过量,在位点Est-2(F=0.540)上表现出杂合子缺失。盘鲍和皱纹盘鲍的遗传距离为0.055,九孔鲍和杂色鲍的遗传距离为0.016。     

鲍放养密度对循环水养殖水质的影响及生物滤器净化效果

该文以皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)循环水养殖的排放水体为研究对象,以提高水循环系统综合利用率为目标,比较了鲍(壳长为(38.34±1.63)mm,体质量(7.97±0.42)g)在高(500个/m~2)、中(300个/m~2)、低(100个/m~2)密度下养殖水环境的变化特点,并综合评价了移动床曝气生物滤器的水处理效果。研究表明:放养密度对水体中总氨氮(TAN)、亚硝酸盐氮(NO_2~–-N)、总氮(TN)、总磷(TP)、磷酸盐(PO_4~(3–)-P)浓度和可培养异养细菌总数均有显著影响(P0.05),依次表现为高密度组中等密度组低密度组。中、高密度组硝酸盐氮(NO_3~–-N)、化学需氧量(COD)浓度和弧菌总数并没有显著差异(P0.05),但均显著高于低密度组(P0.05)。现行工况下(水循环率、温度、水力负荷等),生物滤器对TAN、NO_2~–-N、NO_3~–-N、TN、PO_4~(3–)-P、TP、COD的平均去除率分别为16.40%、15.81%、2.93%、12.22%、2.91%、6.48%、9.47%。该生物滤器对养殖排放水中能够对鲍产生明显毒害作用的TAN、NO_2~–-N处理效果较好,使其均维持在安全的浓度范围内,满足实际生产需求。但对NO_3~–-N、TN的脱除以及低浓度PO_4~(3–)-P和COD的处理效率相对较低。因此,综合经济和生态效益等多方面因素,在该试验的多层、立体循环水养殖系统内,将皱纹盘鲍的密度设定为500个/m~2时是较为合适的。     

鲮微卫星DNA分子标记的筛选与遗传多样性分析

采用磁珠富集法对已建立的生长较快的西江段野生浅色鲮群体的极大、极小群体各31尾基因组DNA进行了微卫星序列的筛选,128个阳性克隆成功测序93个,其中80个为的微卫星序列,微卫星序列完美型占85％,非完美型占6．25％,混合型占8．75％。利用微卫星序列合成了23对微卫星引物,扩增结果表明,等位基因数为1～10个,扩增片段大小为92～283bp,其中14对引物扩增条带清晰,为中度或高度多态位点,极大、极小群体的平均有效等位基因数和平均多态信息含量分别为3．0784、3．2079和0．5675、0．5974,反映出2个群体遗传多样性均较丰富;高度多态性引物4的位点b,片段大小为119bp,在极大群体中出现频率为61．3％,在极小群体占22．6％,出现频率极大群体高于极小群体近3倍,初步可作为候选差异性分子标记。     

筛选杂交鲤亲子鉴定的微卫星标记(英文)

微卫星的亲子鉴定技术既能减少分池饲养带来的遗传性状的差异又能减少其所占用饲养池的数量和管理强度,在水产养殖和品种选育中得到了广泛的应用。本研究应用21对微卫星标记对鲤(Cyprinus carpio)杂交家系(49-同胞家系:德国镜鲤(C.carpio var.mirror)♀×荷包红鲤(C.carpio var.wuynanensis)♂;24-同胞家系:荷包红鲤♀×德国镜鲤♂)进行遗传多样性及遗传特性的评价,并检测影响微卫星标记鉴定准确性的几个特性。研究结果标明,(1)筛选出的13对标记:在49-同胞家系中,平均有效等位基因数(K)、期望杂合度(He)、观测杂合度(Ho)和多态信息含量(PIC)分别为0.505、0.648、0.791和0.5889;在24-同胞家系中,K、He、Ho和PIC分别为0.548、0.670、0.819和0.6138。(2)筛选出的13对标记:在49-同胞家系和24-同胞家系中的联合排除率(CPE)分别达到0.999997978和0.999999583。(3)在两个杂交家系中,4个核心位点(MFW29,HLJ392,HLJ044,HLJ855)的联合排除率均高于99%。(4)三种情况下(一个亲本已知,NE-1P;另一个亲本已知,NE-2P;双亲都已知,NE-PP;)的联合非父排除率在49全胞家系中分别为1.34E-02、3.91E-04和2.02E-06;在24全胞家系中分别为1.34E-02、3.91E-04和2.02E-06。(5)模拟分析显示(置信度为99%),当使用11个或更多标记时,在49全胞家系中亲本与子代的配对率为100%;当使用9个或更多标记时,在24全胞家系中亲本与子代的配对率大于98%。(6)UPGMA聚类图表明:在混养条件下,筛选出的13对标记可以明显地将子代与无亲缘关系的家系区分开。本研究筛选出13对微卫星标记完全适用于荷包红鲤与德国镜鲤杂交家系的鉴定,为品种选育提供有效的鉴定工具。     

动物传染病研究中PCR引物设计的技巧及相关软件介绍

引物设计是PCR技术中最重要的一环。本文就引物设计前的准备工作、引物设计原则、引物设计软件和方法等相关问题,介绍在动物传染病研究中设计PCR引物的一些应用体会。     

中国拟盘多毛孢属的新组合种(Ⅴ)

首次报道中国拟盘多毛孢属5个不同的新组合种.这5个新组合种是:虾仔花拟盘多毛孢Pestalotiopsis woodfordiae、鳞秕泽米铁拟盘多毛孢P.betazamiae、日本枇杷拟盘多毛孢P.eriobotrya-ejaponicae、黄兰拟盘多毛孢P.micheliae、秋枫拟盘多毛孢P.bischofiae.     

中国拟盘多毛孢属的新组合种(Ⅵ)

首次报道中国拟盘多毛孢属5个不同的新组合种。这5个新组合种是:虾仔花拟盘多毛孢P esta lo-tiop sis w oodf ord iae、鳞秕泽米铁拟盘多毛孢P.betazam iae、日本枇杷拟盘多毛孢P.eriobotryae-jap on icae、黄兰拟盘多毛孢P.m icheliae、秋枫拟盘多毛孢P.bischof iae。     

中国拟盘多毛孢属的新组合种(Ⅰ)

按近代 Steyaert(1949年)和 Sutton(1969,1975,1980年)有关拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)类真菌的分类体系及有关鉴定性状,将原归隶 Guba(1961)广义的盘多毛孢属(Pestalotia)内的17个种,进行重新组合,归入拟盘多毛孢属内,并作了重新描述。这17个新组合种是:1.寄生在芒果上的疏毛拟盘多毛孢(Pestalotiopsis pauciseta(Sacc.)Y.X.Chencomb.nov.);2.寄生在竹节海棠上的地肥拟盘多毛孢(Pestalotiopsis elephants(Car.)Y.X.Chen comb.nov.);3.寄生在咖啡上的咖啡拟盘多毛孢(Pestalotiopsis coffeae(Zimm)Y.X.Chen comb.nov.);4.寄生在紫玉盘和半枫荷叶部上的复红色拟盘多毛孢(Pestalotiopsis fuch-siae(Thuem)Y.X.Chen comb.nov.);5.寄生在毛柿上的萨卡度拟盘多毛孢(Pestalotiopsissaccardens(Guba)Y.X.Chen comb.nov.);6.寄生在人心果上的肿瘤状拟盘多毛孢(Pestalo-tiopsis scirrofaciens(N.A.Brown)Y.X.Chen comb.nov.);7.寄生在海棠果上的海棠拟盘多毛孢(Pestalotiopsis calophylli(P.Henn)Y.X.Chen comb.nov.);8.寄生在菝葜上的近小球状拟盘多毛孢(Pestalotiopsis sphaerelloides(Ell.& Langl)Y.X.Chen comb.nov.);9.寄生在棕榈、海枣及油梨上的鲜红拟盘多毛孢(Pestalotiopsis phoenicis(Vize)Y.X.Chencomb.nov.);10.寄生在龙眼和酸藤果叶部上的巴拉圭拟盘多毛孢(Pestalotiopsis paraguarien-sis(Maubl)Y.X.Chen comb.nov.);11.寄生在紫金牛叶部上的夷兰拟盘多毛孢(Pestalotiop-sis canangae(Koord)Y.X.Chen comb.nov.);12.奇生在杨梅上的爪哇拟盘多毛孢(Pestalo-tiopsis javanica(Guba)Y.X.Chen comb.nov.);13.寄生在石南叶部上的石南拟盘多毛孢(Pestalotiopsis photiniae(Thuem)Y.X.Chen comb.nov.);14.寄生在大化紫薇叶部上的大花紫薇拟盘多毛孢(Pestalotiopsis lagerstromiae(Mahaiskar)Y.X.Chen comb.nov);15.寄生于川挂、广西玉桂和黄樟上的驼背拟盘多毛孢(Pestalotiopsis gibberosa(Sacc.)Y.X.Chencomb.nov.);16.寄生在枇杷叶部上的稠李拟盘多毛孢(Pestalotiopsis laurocerasi(Westd)Y.X.Chen comb.nov.);17.寄生在紫荆叶片上的长角状拟盘多毛孢(Pestalotiopsis siliquastri(Thuem)Y.X.Chen comb.nov.)。     

中国拟盘多毛孢属的新组合种(Ⅲ)

本文为中国拟盘多毛孢属新组合种（Ⅰ）、（Ⅱ）的续篇，报道１１个不同的新组合种。这１１个新组合种是：３６．寄生在柑桔和黄皮树叶部的柑桔拟盘多毛孢（Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓｃｉｔｒｉ（Ｍｕｎｄｋ＆Ｋｈｅｓｗａｌａ）Ｙ．Ｘ．Ｃｈｅｎｃｏｍｂ．ｎｏｖ）；３７．寄生在忍冬科荚艹迷属植物的叶部的双纤毛拟盘多毛孢（Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓｂｉｃｉｌｉａ（Ｄｅａｒｎ＆Ｂｉｓｂｙ）Ｙ．Ｘ．Ｃｈｅｎｃｏｍｂ．ｍｏｖ．）；３８．寄生在腰果树叶部的异角状的拟盘多毛孢（Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓｈｅｔｅｒｏｃｏｒｎｉｓ（Ｇｕｂａ）Ｙ．Ｘ．Ｃｈｅｎｃｏｍｂ．ｎｏｖ．）；３９．寄生在月桂的叶部的孢子器型拟盘多毛孢（Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓｐｙｃｎｏｉｄｅｓ（Ａｌｍ．＆Ｃａｍａｒａ）Ｙ．Ｘ．Ｃｈｅｎｃｏｍｂ．ｎｏｖ．）；４０．寄生在杜鹃花科的白珠树叶部的白珠树拟盘多毛孢（ＰｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓｇａｕｔｈｅｒｉａｅＤｅａｒｎ＆Ｈｏｕｓｅ）Ｙ．Ｘ．Ｃｈｅｎｃｏｍｂ．ｎｏｖ．）；４１．寄生在雀梅藤和鼠李叶部的鼠李拟盘多毛孢（Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓｒｈａｍａｎｉ（Ｃｅｌｏｔｉ）Ｙ．Ｘ．Ｃｈｅｎｃｏｍｂ．ｎｏｖ．）；４２．     

压电型振动气吸式穴盘育苗精量播种机设计与试验

为了适应微小尺寸的作物（林木、花卉及一些蔬菜）种子的穴盘育苗精量播种工作要求,采用压电振动方式驱动与气吸盘相结合的吸排种原理,设计了一种新型的精量播种机。对压电振动工作台进行结构、参数和驱动系统设计,基于逆压电效应,压电驱动器产生的微位移经放大机构放大后驱动种子盘振动,使种子克服相互间摩擦力而产生有利于吸种的“沸腾”运动,种子盘设计成1～2行吸种宽度、轻质材料、窄结构形式,并实现了补吸种,吸种率大大提高。试验结果表明：压电振动台的振幅超过1.3?mm以上,机械系统振动响应频率在13～55?Hz,且频宽可调（共振频率25?Hz）,种子吸种率在振动强度为1.4～1.7时均达到98%以上,满足穴盘育苗精量播种农艺要求,达到预期设计目的。     

三品种小型猪与云南野猪白细胞抗原复合物(SLA)微卫星的遗传多样性

为研究明光小耳猪、滇南小耳猪、巴马香猪遗传多样性以及命名,本研究利用猪白细胞抗原复合物(SLA)区域内18个微卫星,探讨了3品种小型猪和云南野猪(Sus scrofa silvianus)的观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)、多态信息含量(PIC)等遗传参数;且从单倍型分型、聚类分析以及主成分分析进一步研究了其亲缘关系。结果表明,云南野猪多态性最高(PIC=0.694),巴马香猪最低(PIC=0.585),3品种小型猪均具有丰富的遗传多样性。在检测群体中SLAⅠ、Ⅱ区域分别有12种和14种单倍型,其中明光小耳猪、滇南小耳猪和云南野猪共享4个单倍型H1、H3、H4和H03,巴马香猪仅与明光小耳猪共享单倍型H2。通过系统聚类和主成分分析发现,明光小耳猪、滇南小耳猪与云南野猪亲缘关系较近,巴马香猪与之关系较远。研究结果提示,明光小耳猪和滇南小耳猪具有相似的遗传背景,明光小耳猪可能是滇南小耳猪的一个品系,这为解决同种异名问题提供了分子证明。     

气吸滚筒式油菜穴盘育苗精密排种器设计与试验

为满足油菜穴盘育苗移栽作业要求,解决油菜机械化种植茬口紧张难题,该研究设计了一种气吸滚筒式穴盘育苗精密排种器,利用光电传感器和正压投种机构实现同步整排投种。阐述了排种器基本结构与工作原理,对关键部件结构进行设计,应用Fluent软件模拟分析了3种不同正压进气孔间距条件下滚筒内壁和吸种孔与正压气室的流场特征;采用二次旋转正交组合试验方法,对排种器作业性能的主要影响因素(吸种负压、投种正压和吸种孔直径)与播种指标(单粒合格指数、漏播指数和重播指数)的关系进行研究,分析了各因素及其交互作用对各指标的影响规律,并采用多目标优化方法进行参数优化;在优化参数条件下,设定排种器生产率分别为600、700和800盘/h时,对3个品种油菜种子和1个蔬菜种子(茄子)进行排种性能试验。结果表明:当正压进气孔间距为144 mm时,整个正压气室无回流情况,各吸种孔处气流速度相对均匀;影响单粒合格指数的因素主次顺序为投种正压、吸种孔直径和吸种负压,最优参数组合为吸种负压3.73 kPa,投种正压0.23 MPa,吸种孔直径1.28 mm,此时单粒合格指数、漏播指数和重播指数分别为95.13%、2.80%和2.07%。生产率为600~800盘/h时,油菜种子的单粒合格指数均高于93%,漏播指数和重播指数均小于5%;茄子的单粒合格指数高于90%,漏播指数和重播指数均低于5%。该排种器的排种性能适应性较好且精准高效,能够满足油菜及部分蔬菜穴盘育苗播种作业要求。研究结果可为油菜等穴盘育苗播种机研发提供参考。     

对置斜盘高速精密大豆排种器设计与充种机理分析

针对机械式精密排种器在工作速度提高时,充种指数下降较快,从而导致作业质量严重下降的问题,在理论分析的基础上,创新设计了一种对置斜盘大豆排种器。该型排种器充分利用壳体的结构空间布置核心部件,从而提高排种频率、改变充填模式、增加充填力种类,以适应高速作业需求。根据该排种器的工作原理建立数学模型,分析种盘在不同倾斜角度时充填力的变化规律,优化角度为20°;运用工程离散元方法(engineering discrete element method,EDEM)将对置斜盘排种器与一种具有一定高速作业能力的双腔立式复合圆盘排种器进行虚拟仿真及样机试验对比,进一步验证了该种结构形式的优越性,试验结果表明在8~12 km/h高速区段平均合格指数较对照排种器提高约3.6%。研究为高速机械式精密排种器的设计与开发提供了机械形式方面的创新思路以及分析方法方面的借鉴与指导。     

免耕播种机双刀盘有支撑切茬破茬装置的研制与试验

针对小麦收获后玉米免耕播种机作业时工作部件堵塞问题,该文提出了有支撑动力切茬和被动圆盘破土破茬联合作业的切茬方案,并设计了一种双刀盘动力切茬破茬装置,分析和确定了其主要结构参数。田间试验表明,双刀盘动力切茬破茬装置可将播种带地上部分96.2%的秸秆切断,地下的根茬98.7%破开,创造良好的种床条件,有效解决了秸秆堵塞问题,保证了玉米免耕播种机在小麦秸秆覆盖量较大时的通过性。研究结果为免耕播种机设计提供参考。     

合成六倍体小麦与其亲本在合成后小麦A/B染色体组微卫星位点的比较

构建人工合成六倍体小麦是利用小麦近缘材料优异基因的很有效的方法。但是目前在人工合成异源六倍小麦的过程中对微卫星位点的影响研究尚不完善。本研究直接比较了亲本四倍体小麦PS5与4个不同粗山羊草进行远缘杂交并经染色体自然加倍后获得4个人工合成六倍体小麦前后,位于普通小麦A/B染色体组不同染色体臂上的104对引物的变化。结果表明,104对微卫星引物的扩增产物在4个合成六倍体小麦中具有与普通小麦相同的带型;但在22对引物的扩增产物上存在差异,其中Am4与其它3个六倍体小麦Am1,Am2,Am3在15对引物扩增的条带存在差异;另外发现有45对特异与AB染色体的引物能够在粗山羊草中扩增出产物,其中特异于B染色体组的引物47.54%的可以在粗山羊草中扩增出产物,而A染色体组的引物占38.24%。因此,基于普通小麦开发的微卫星引物可以用于合成六倍体小麦的研究,而Am4材料与其它3个合成二倍体小麦的差异尚需进一步研究,另外我们推测普通小麦的B染色体组与A染色体组相比与粗山羊草存在较近的亲缘关系。     

玉米秸秆成型燃料单锅灶的设计与试验(简报)

为了解决农村日益紧张的能源问题和秸秆焚烧问题,根据目前农村的主要生活炊事习惯和玉米秸秆成型燃料的燃烧特性,研制了玉米秸秆成型燃料单锅灶。试验结果表明：该灶达到了国家的相关标准,燃烧比较稳定,利用清洁,有效的利用了玉米秸秆,对于解决玉米秸秆焚烧的问题和改善居民炊事条件具有重要的意义。     

基于无线传感器网络的农田信息采集节点设计与试验(简报)

研究基于ZigBee协议的无线传感器网络技术,结合嵌入式处理器开发了无线传感器网络节点和汇聚节点。网络节点规则分布在被监测区域,负责采集土壤水分信息,并自组成网,将信息发送给汇聚节点,实现对信息的动态显示和大容量存储;节点天线分别在0.5、1.0、1.5和2.0 m 4个高度下,对小麦苗期、拔节期和抽穗期3个典型的生长时期进行试验,得出无线电信号在小麦不同生长时期,最佳天线高度下的有效传输距离,为无线传感器网络在农业中的应用提供技术支持。