EMS诱变处理定向筛选猕猴桃耐盐突变体研究

用EMS(甲基磺酸乙酯)诱变处理海沃德与红阳猕猴桃叶片,进行定向筛选耐盐突变体研究.结果表明,在相同EMS浓度处理下,胚性愈伤组织随着处理时间的增加发生的比率降低;在同一处理时间下,胚性愈伤组织随着EMS浓度增加发生的比率降低.当诱变率达50%致死剂量时,EMS处理浓度为6%、处理时间为2 h时,对海沃德与红阳猕猴桃的处理效果最佳,其后代的分化率可达到70%以上;在含NaCl 1.0 g/L的培养基上通过胚性愈伤组织诱导出海沃德和红阳的组培苗,海沃德11株,红阳组培苗10株,经继代培养筛选鉴定,诱变处理所得植株与正常培养植株相比,其耐盐性明显提高.     

EMS诱变处理定向筛选杨树耐盐突变体研究

应用EMS(甲基磺酸乙酯)处理杨树胚性愈伤组织,通过组织培养方法定向筛选杨树耐盐变异体。对EMS处理"加引"杨树胚性愈伤组织的浓度和时间进行了研究,结果表明:在同一EMS浓度下,随着处理时间的增加,胚性愈伤组织分化芽的比率降低;处理相同时间,随着EMS浓度增加,胚性愈伤组织分化芽的比率降低;不同EMS浓度处理后的胚性愈伤组织分化芽的比率与处理时间呈线性关系。约200万胚性细胞经4‰(V/V)浓度EMS处理36 h,并经逐级耐盐定向筛选,可得在含NaCl 0.5%(m/V)的培养基上生根的组培苗40株。经筛选优系,组培成再生植株,进行植株水平的试管内耐盐性检测,结果表明:诱变处理所得植株与对照相比,其耐盐性明显提高。同时,在未经耐盐定向筛选实验中得到29株叶片颜色发生变异的畸变植株,耐盐定向筛选试验中也得到4株同类型畸变植株。     

花椒愈伤组织EMS诱变及变异研究

用EMS处理花椒韧皮部及叶片来源的愈伤组织,确定愈伤组织的适宜来源和EMS处理花椒愈伤组织LD50,在不同EMS浓度的半致死剂量下处理愈伤组织,组培获得花椒诱变植株。结果表明,EMS诱变花椒愈伤组织的LD50为0.3%EMS处理6h,0.5%EMS处理4h,0.7%EMS处理2h。诱变后愈伤组织经增殖和分化形成完整植株。通过对比再生植株形态学差异,筛选出变异植株340株。     

EMS诱导巴西橡胶树花药次生体细胞胚突变方法初探

以巴西橡胶树热研7-33-97未成熟花药次生体细胞胚为材料,采用化学诱变剂EMS(甲基磺酸乙酯)诱变处理,设置4个浓度(0%、0.1%、0.3%、0.5%)、4个处理时间(2、4、6、8 h)共16个处理组合,以"半致死剂量"为选择标准,确定了巴西橡胶树热研7-33-97未成熟花药次生体细胞胚的适应诱导组合为EMS浓度0.5%,处理时间4 h。     

木薯花药愈伤组织诱导初步研究

为探讨不同激素、低温对木薯花药愈伤组织诱导和分化的效果,以木薯华南5号的花药为外植体,接种于含不同激素组合的MS固体培养基,分别进行愈伤组织诱导、继代培养和分化。结果表明,在MS培养基中,随着2,4-D浓度的增加,木薯花药愈伤组织的诱导率不断升高,但诱导时间延长;在培养基中添加6-BA3．0mg／L＋NAA0．2mg／L,木薯花药愈伤组织诱导率最高,达100％;在0～5d内,低温处理的时间越长,木薯花药愈伤组织诱导率越低,以不进行低温处理的诱导率最高;在分别含6-BA3．0＋NAA0．2的MS培养基中,花药愈伤组织继续增殖,但未分化出不定芽和不定根,而在添加NAA0．2mg／L＋KT0．5mg/L或2,4-D0．5mg／L＋KT0．5mg／L的培养基中,愈伤组织可分化形成2—5条不定根。今后需在材料基因型、绿苗分化培养基、培养条件等方面对木薯花药培养诱导单倍体做进一步的深入研究。     

不同玉米自交系幼胚愈伤组织诱导和分化的研究

[目的]通过对玉米幼胚培养,建立一套稳定性好、再生率高的组织培养体系.[方法]以4个玉米自交系幼胚为外植体,研究不同基因型、幼胚大小、2,4-D浓度、AgN03浓度对愈伤组织诱导的影响,进一步研究6 - BA和蔗糖浓度对愈伤组织分化及IBA和NAA对再生苗的生根影响.[结果]2,4-D浓度为2.0 ～3.0mg/L,幼胚长度为1.0～2.0 mm时,对胚性愈伤组织诱导有良好效果;在诱导期间采用隔代法添加10 mg/LAgNO3能提高胚性愈伤组织的诱导率;当6- BA为0.5 mg/L、蔗糖浓度为50 g/L时,愈伤组织分化率最高且有利于小植株的形成;IBA浓度为0.6 mg/L对植株生根较有利.[结论]对4个玉米自交系幼胚培养研究筛选出适宜玉米幼胚培养的最佳诱导、分化及生根培养基.     

玉米幼胚和成熟胚愈伤组织分化反应性比较

以鲜食玉米为主的13种基因型的成熟胚和幼胚为材料，对它们的愈伤组织诱导．继代培养和分化进行了系统研究。结果表明：玉米的成熟胚和幼胚愈伤诱导率相关，但两种胚诱导出的愈伤组织状态明显不同．幼胚诱导出的愈伤组织状态普遍比成熟胚的好；两种胚的愈伤分化率差异明显，成熟胚愈伤组织最高分化率为2．5％,幼胚愈伤组织最高分化率可达83．3％。     

籼稻材料特性和激素配比对花药培养效率的影响

以5个籼稻杂交组合F。的花药为材料,探讨诱导培养基和分化培养基中不同植物激素配比等因素对花药培养效果的影响。结果表明,诱导培养基中,激素浓度处理对籼稻花药的愈伤诱导率的影响有显著差异,最佳的诱导培养基激素组合为：2,4-D2．0＋KT1．0＋NAA3．0;愈伤诱导率达21．21％;分化培养基中,激素6-BA浓度为0．5mg·L^-1KT浓度为2．0mg·L^-1时,籼稻花药的愈伤平均绿苗分化率达到最大,为28．80％;不同的材料其愈伤诱导率和绿苗分化率存在显著差异。     

(木奈)幼胚胚性愈伤组织诱导的研究

试验以油（木奈）幼胚为材料，研究外植体大小、低温处理、基本培养基类型、碳源、培养基中的2，4-D浓度、AgNO3的添加与否对胚性愈伤组织诱导的影响，结果表明，长轴为5—7．9mm低温处理18h的幼胚，诱导胚性愈伤组织的效果最好；使用山梨醇（浓度为3％）为碳源、含氮量低的WPM培养基，胚性愈伤组织的诱导效果优于蔗糖为碳源、含氮量高的MS培养基；幼胚胚性愈伤组织诱导的最适2，4-D浓度为2．0mg／L，培养基中附加5．0mg／LAgNO3有助于提高胚性愈伤组织的诱导率。     

水稻幼胚和悬浮细胞系遗传转化效果比较

对中花15的幼胚和悬浮细胞的遗传转化研究表明：它们对潮霉素的筛选压有所不同,幼胚愈伤为50mg／L,悬浮细胞的耐受压为30mg/L;采用农杆菌介导法将目的基因gus分别转入这2种不同培养来源的愈伤组织中,通过PCR检测,从91株Tn代再生植株中筛选出26株转基因植株,且筛选后得到的抗性愈伤率和绿苗分化率也有差异,其中幼胚来源的分别为40．87％和1．80％,悬浮细胞的分别为30．4％和1．5％,这可能与悬浮细胞后期培养时间较长导致细胞的活力有所降低有关。     

EMS诱变巨峰葡萄愈伤组织筛选抗寒突变体的研究

用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变处理巨峰葡萄愈伤组织,结合添加L-羟脯氨酸(L-Hyp)培养筛选,定向选择抗寒突变体。试验结果表明:诱变巨峰抗寒突变体的最佳组合为EMS浓度3%～5%,处理时间2h。经检测诱变后的再生苗愈伤组织的游离脯氨酸含量均有增加,丙二醛含量均有下降,酶活性均有增强。试验表明用EMS诱变处理巨峰葡萄愈伤组织可获得抗寒突变体。     

麦冬花药离体培养与再生植株的获得

以麦冬[Ophiopogon japonicus (Thunb.)Ker-Gawl.]花药为材料,将其接种在培养基上诱导愈伤组织,再将愈伤组织在分化培养基上培养,将分化所得的再生植株炼苗后移栽大田.结果表明,各个培养基配方及试验条件适宜,麦冬愈伤组织诱导较为成功,愈伤组织的分化效果也较好,可达41.5％,组培苗移栽后生长良好,成活率达80％以上.     

裸燕麦胚性愈伤组织调控及悬浮细胞系的建立

对裸燕麦成熟胚进行离体培养,结果表明,基因型和不同激素组合对成熟胚愈伤组织诱导具有重要作用;晋燕８号愈伤组织诱导率高达８５．７％;２,４—Ｄ对愈伤组织诱导必不可少。采用循环培养法对愈伤组织进行调控,获得了易分散、颗粒状的胚性愈伤组织,缓减了愈伤组织生活力衰退的速度。将松脆愈伤组织置于液体培养基中进行悬浮培养,得到分散性好、生长快的悬浮细胞系。悬浮系经分化培养,获得了成活率在９５％以上的健壮再生植株。     

小麦成熟胚高频再生基因型筛选及再生体系研究

以目前生产上主栽或主推的、具有优良农艺性状的18个黄淮麦区冬小麦品种(系)和2个西北春麦区春小麦品种为材料,对它们成熟胚再生能力进行比较,从中筛选出再生频率高的基因型,并探讨不同接种方法、麦草畏质量浓度、细胞分裂素和干燥处理等对小麦成熟胚愈伤组织诱导和分化频率的影响。结果表明,小麦成熟胚愈伤组织诱导率普遍较高,为66.7%～100.0%,而分化率普遍较低,为3.6%～35.8%。基因型间差异显著,其中愈伤组织分化率较高的基因型有泛麦8号、周麦27和邢麦6号,绿苗分化率超过30%;采用胚十字形切割法接种小麦成熟胚愈伤组织分化率较高,达到54.5%～73.3%;诱导培养基中麦草畏的诱导效果显著优于2,4-D。在麦草畏质量浓度为2～4mg/L时有利于愈伤组织诱导和分化;成熟胚愈伤组织转入不含激素或含有2mg/L 6-BA或KT的分化培养基中时,分化率分别达到38.5%,45.8%和37.0%,较其他细胞分裂素和质量浓度处理分化率高,而愈伤组织分化前干燥处理6h和未干燥处理的差异不显著,干燥12h分化率明显降低。     

小麦成熟胚高频再生体系的建立

以甘春24成熟胚为外植体,研究消毒方式、浸种时间、接种方式、2,4-D质量浓度等处理对愈伤组织诱导与分化的影响,旨在建立一套有效的小麦高频再生体系。结果表明,不同消毒处理、2,4-D质量浓度和接种方法对成熟胚愈伤组织分化有极显著影响,不同浸种时间对成熟胚愈伤组织分化的影响差异不显著。采用25%NaClO初次消毒25min,浸种后用25%NaClO消毒10min,对愈伤组织的诱导较好,对成熟胚伤害小,且污染率低;浸种15～21h,对成熟胚愈伤组织的诱导无明显差异,但浸种18或21h有利于胚性愈伤组织的分化;成熟胚刮碎处理,有利于愈伤组织的诱导与分化,其诱导率与绿点率分别为98.33%,62.04%;当2,4-D质量浓度为2.5mg/L时,甘春24胚性愈伤组织品质较好。     

EMS诱导黄瓜离体变异及分子标记检测

采用不同浓度的甲基磺酸乙酯(EMS)对黄瓜幼苗茎段进行处理,以茎段存活率和出芽率为指标,筛选到半致死处理组合,即4%EMS处理2 h。RAPD和SRAP分子标记分析发现,经EMS处理获得的再生苗DNA发生了变异,共检测到8个RAPD变异位点和5个SRAP变异位点。     

小麦成熟胚愈伤组织的诱导及分化

以4个基因型不同的小麦品种成熟胚为外植体进行离体培养,研究不同质量浓度2,4-D对愈伤组织诱导的影响;以陕253为外植体研究不同KT与NAA配比对小麦成熟胚愈伤组织分化的影响.愈伤组织培养基中2,4-D质量浓度为2～4 mg/L时,小麦成熟胚愈伤组织出愈率最高,品质最好.小麦对水分敏感程度与成熟胚愈伤组织的出愈率及品质...     

EFFICIENT CALLUS INDUCTION AND PLANT REGENERATION FROM IMMATURE EMBRYO CULTURE OF TRITICUM AESTIVUM L. - THINOPYRUM INTERMEDIUM ALLEN DISOMIC ADDITION LINES

An efficient plant regeneration system was developed from the immature embryos of Triticum aestivum L. Thinopyrum intermedium alien disomic addition lines, which resistant to powdery mildew. The protocol was based on a series of experiments involving the callus induction and differentiation. The experiment studied the effects ofmature embryos. We found that the embryembryo size on callus induction and differentiation of the immature embryos. We found that the embryo size is critical for the establishment of embryogenic callus. Immature embryos (0.8 ~ 1.5 ram) showed high ability to produce embryogenie callus capable of regenerating green plants. The medium Murashige and Skoog‘ s (MS) added with 2mg/L 2, 4-diehlo-rophenoxyacetic acid (2, 4-D) gave the best embryogenic callus induction, maintenance and regeneration. The embryogenic callus maintained high regeneration during six subcultures in the callus induction medium. Suitable time ofpartialdesiccation could effectively improve the regeneration capacity of the callus cultured for 3-4 month. Bud green spot and root green spot were observed during the differentiation of callus and the difference between them was described. Regenerated shoots were rooted on half-strength MS medium containing 0.2 mg/L Naphthalene acetic acid (NAA). Plants were successfully transferred to soil and grew well. This efficient plant regeneration system provides a foundation for the study of somaclonal variation of Triticum aestivum L.- Thinopyrum intermedium alien disomic addition lines.