理化因素对川泽泻凝集素血细胞凝集活性的影响

[目的]明确温度、pH和金属离子等理化因素对川泽泻凝集素血细胞凝集生物学活性的影响。[方法]川泽泻块茎经研磨、浸取、硫酸铵沉淀、离子交换和亲和层析柱分离纯化得到凝集素(Alisma plantago-aquatica Linn.Lectin, APL),然后用系列温度、pH和金属离子等理化因素处理凝集素样品，应用倍比稀释法检测凝集素凝集人类血细胞活性。[结果]APL对家兔、家鸡、鲤鱼等动物血细胞无凝集作用，能使人ABO 4种类型血细胞发生不同程度凝集，对A型血细胞凝集活性明显高于其他3种血型红细胞。用20～100℃以10℃梯度处理后，川泽泻凝集素在20～40℃凝集活性很强，50℃凝集活性开始降低，在70℃仅具42%的凝集活性，80℃加热10 min完全失活；当pH为低于5.4或高于7.6时，凝集活性逐渐降低，当pH≤3.4或pH≥9.0时，川泽泻凝集素失去血细胞凝集活性；用EDTA透析后凝集素凝集活性基本消失，Ca²⁺、Mg²⁺、Mn²⁺、K⁺等离子能使凝集素凝集活性不同程度恢复。[结论]川泽泻凝集...     

理化因素对大蒜凝集素生物活性的影响

大蒜(Alliumsativum L.)鳞茎经浸取、硫酸铵分级沉淀、离子交换柱和凝胶过滤得到凝集素(Alliumsativum L.Lectin,ASL)样品。ASL能凝集兔血红血球和鸡血红血球,使鱼血红血球发生溶血,其中对兔血红血球的凝集活性最强。大蒜凝集素在70℃以上的温度加热10 min才失活,表明大蒜凝集素有较强的热稳定性。凝集活性最适pH为4.5~6.4,其凝集活性部分依赖于金属离子,且大蒜凝集素的凝集活性能被变性剂所抑制。     

26种阿勒泰大型真菌凝集素研究

[目的]调查阿勒泰大型真菌中的凝集素.[方法]使用Tris-HC1缓冲液和Na2 HPO4-NaH2 PO4缓冲液对15科26种阿勒泰大型真菌的子实体进行凝集素的粗提取.采用2;兔红细胞悬液对这些大型真菌的凝集素提取液进行凝血活性的评价.[结果]绝大多数阿勒泰大型真菌的提取液显示出了凝血活性,其中碱竹杯伞(Clitocybe alkaliviolascens)、乳菇(Lactarius deceptivus)、皱皮疣柄牛肝菌(Leccinum duriusculum)和非白红菇(Russula exalbicans)4种大型真菌的凝血活性最高,这些大型真菌的凝血活性与其科属分类无直接相关性.它们的糖特异性和热稳定性也差异显著.[结论]26种阿勒泰大型真菌的凝集类提取液的绝大多数具有凝血活性,因此阿勒泰大型真菌是极具潜力的凝集素来源.     

刀豆凝集素的血凝活性及其性质研究

[目的]为进一步研究刀豆凝集素提供依据。[方法]从豆科植物刀豆属(Canavalia)中Canavalia ensiformis(L.)DC的干燥成熟种子中提取刀豆凝集素(Concanavalin A,简称ConA),进行血凝活性测定,并对其部分性质作了初步研究。[结果]结果表明:采用胰蛋白酶修饰人血(A型)红细胞来检测ConA凝集活性时,发现其活性提高了8倍。ConA对人A、B、O、AB型及供血动物(兔,鸡,鸭,鸽,鲤、鲫鱼)的血红细胞都具有一定程度的凝集活性,无供体细胞专一性或血型专一性;D-葡萄糖和D-甘露糖是ConA的专一性结合糖。ConA是一种对热较稳定的凝集素,40℃以下时ConA很稳定,80℃以上保温20 min后,血凝活性完全丧失。在pH值范围5.8~8.3,ConA的凝集活性较高,在pH>11.9时,凝集活性完全丧失。变性剂脲浓度达到0.4 mol/L以上时,ConA的凝集活性可完全丧失。[结论]该研究对今后系统阐明其生物学作用,扩大应用范围具有重要意义。     

非洲山毛豆种子凝集素性质的研究

以非洲山毛豆种子为材料,通过热稳定性试验、酸碱稳定性试验、糖专一性试验及金属离子试验对其凝集素的性质进行研究。结果表明:当温度大于70℃,凝集素活性全部丧失;凝集素在pH5.8~9.1范围内具有凝集活性;凝集素的抑制糖主要是乳糖、蔗糖,而D-半乳糖、海藻糖和麦芽糖对其完全没有抑制效果;山毛豆种子凝集素凝集兔红细胞的活性依赖于Ca2+和Mg2+,Mn2+对山毛豆种子凝集素凝集兔红细胞的活性无影响。     

莲雾果实过氧化氢酶活性及其影响因素分析

[目的]探讨莲雾果实过氧化氢酶（CAT）活性及其影响因素,为莲雾采后保鲜提供理论依据.[方法]以莲雾果实为试材,利用分光光度法测定莲雾果实CAT活力,同时分析温度、pH、有机溶剂和金属离子等因素对莲雾果实CAT活性的影响.[结果]莲雾果实CAT的最大活力212.395 U/gFW·min,最适温度30℃,最适pH 7.2;甲醇和乙醇对其活性的影响均表现为低浓度具有激活作用,高浓度转为抑制作用;Cu2＋对其活性有一定程度的激活作用,Mn2＋和Na＋贝表现出抑制作用.[结论]莲雾果实CAT活性受温度、pH、有机溶剂和金属离子等因素的影响较明显,通过低温贮藏、合理使用有机溶剂可延长莲雾果实的贮藏寿命.     

草鱼体表粘液凝集素制备及其性质研究

以草鱼体表粘液凝集素为研究对象,经PBS提取粗提物后,通过离子交换层析DEAE-52对该凝集素进行初步纯化,得到一种具有凝集鸡血细胞的凝集素.该凝集素在20～40℃及pH 7～8条件下表现出较好的凝集活性,且凝集活性不依赖Ca2+的存在.依据凝血活性糖抑制试验结果,推测草鱼体表粘液凝集素可能为半乳糖结合凝集素.     

条斑紫菜凝集素的提取及其性质研究

[目的]研究条斑紫菜（Porphyra yezoensis）凝集素的提取及分离纯化条件,并测定凝集素的性质。[方法]以比活力为指标,研究了缓冲体系、固液比、温度及时间等条件对条斑紫菜凝集素提取效果的影响。采用DEAE-Sepharose FF离子交换层析技术进行分离,确定了分离的最佳条件。以血凝集活性为指标,测定了凝集素的糖专一性、2价阳离子依赖性、温度及酸碱稳定性等性质。[结果]固液比为1∶5的Tris-HCl（25 mmol/L,pH值7.5）缓冲液在40℃条件下提取20 h得到的提取液具有最高比活力。条斑紫菜凝集素在50℃条件下加热30 min后活性保持不变,表现出一定的热稳定性,最适作用pH值为7～9。该凝集素能够与麦芽糖、半乳糖、阿拉伯糖及木糖结合,其中与麦芽糖的结合最强,凝集活性依赖Ca2＋、Mg2＋等2价阳离子。[结论]为阐明条斑紫菜的免疫机制及其高效综合利用提供了理论依据。     

长裙竹荪菌丝体凝集素的分离纯化及其理化性质

【目的】凝集素是竹荪的一类生理活性物质,为进一步明确其药用功效,开展了长裙竹荪凝集素理化性质研究。【方法】长裙竹荪菌丝体通过生理盐水抽提、 20%～75%饱和度的硫酸铵沉淀、 DEAE-Sepharose和SephadexG-100柱层析纯化得到长裙竹荪菌丝体凝集素(DIL);并通过血细胞凝集活性、糖抑制试验、酸碱稳定性、热稳定性分析以及金属离子等因素来测定长裙竹荪菌丝体凝集素的理化性质。【结果】经PAGE显示单一条带,测得其亚基相对分子质量为43.6 kDa。该凝集素对供试的鸽、兔、鸭和鸡血红细胞具有凝集作用,对兔红细胞的凝集作用可被D-半乳糖和N-乙酰胺基-葡萄糖所抑制。长裙竹荪凝集素对热不稳定,经50℃处理10 min,活性明显降低;该凝集素在pH 4.0～8.0都保持着较高的凝集活性,其凝血活性依赖于Ca~(2+)和Mg~(2+)二价金属离子,Mn~(2+)和Zn~(2+)则无影响。【结论】长裙竹荪菌丝体凝集素对动物血红细胞具有较好的凝集活性,而且凝集活性需要在一定浓度的Ca~(2+)和Mg~(2+)才会起作用。     

同型巴蜗牛凝集素的凝集活性及影响因素

对同型巴蜗牛（Bradybaena similaris）蛋白腺提取液凝集活性进行测定,初步提取其凝集素并进行部分性质鉴定．结果表明：在同型巴蜗牛的蛋白腺中存在凝集素,具有血球凝集活性,能够凝集9种动物红细胞,其中,对家兔红细胞的凝集活性最高,可达2^8,不过,其对家兔红细胞的凝集活性明显依赖于Ca2＋;在pH值为7．0～8．0的范围内其凝集活性较稳定,保持100％的凝集活力;温度为40℃持续作用10min后就失去活性;向同型巴蜗牛蛋白腺提取液加人45％的固体硫酸铵使凝集素沉淀,再用不同饱和度的硫酸铵溶液依次对沉淀物进行抽提,抽提物的比活力提高了约2．56倍,总活力回收为20．00％．     

海刺猬体腔液凝集素的纯化、性质及其色氨酸的化学修饰

通过DEAE-纤维素52离子交换层析、Sephadex G-200凝胶层析,从海刺猬体腔液中分离纯化海刺猬Glyptocidaris crenularis凝集素(简称为GCL),并对其部分性质和色氨酸的化学修饰进行了研究.结果表明:在还原与非还原SDS - PAGE上,GCL都显示单一蛋白质条带,其相对分子量为94462; GCL对人O型、兔、鸡、狗红细胞均具有血凝活性,对兔和狗红细胞的血凝活性最强,但对人A、B、AB型及鲫红细胞无血凝活性;GCL血凝活性在温度为4～33℃时最高,经36℃热处理10 min后,GCL对兔红细胞的血凝活性保留25％,经48℃加热10 min后,其血凝活性完全丧失;GCL血凝活性在pH为7.5 ～8.5时最高;ca2+对GCL血凝活性无抑制作用,EDTA和Mg2+对其血凝活性有抑制作用;GCL血凝活性不被所测试的α-乳糖、D-果糖、D-半乳糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和γ-球蛋白所抑制,但被蔗糖和麦芽糖所抑制,最小抑制浓度分别为40 mmol/L和20 mmol/L;用N-溴代丁二酰亚胺(NBS)对GCL分子中的色氨酸(Trp)残基进行化学修饰,有5.1个Trp残基被修饰,修饰后其血凝活性丧失75％,表明Trp残基是GCL血凝活性的重要组成部分.     

条斑紫菜凝集素的提取及其性质研究(摘要)(英文)

[目的]研究条斑紫菜(Porphyra yezoensis)凝集素的提取及分离纯化条件,并测定凝集素的性质。[方法]以比活力为指标,研究了缓冲体系、固液比、温度及时间等条件对条斑紫菜凝集素提取效果的影响。采用DEAE-Sepharose FF离子交换层析技术进行分离,确定了分离的最佳条件。以血凝集活性为指标,测定了凝集素的糖专一性、二价阳离子依赖性、温度及酸碱稳定性等性质。[结果]固液比为1∶5的Tris-HCl(25mmol/L,pH值7.5)缓冲液在40℃条件下提取20h得到的提取液具有最高的比活力。条斑紫菜凝集素在50℃条件下加热30min后活性保持不变,表现出一定的热稳定性,最适作用pH值为7～9。该凝集素能够与麦芽糖、半乳糖、阿拉伯糖及木糖结合,其中与麦芽糖的结合最强,凝集活性依赖Ca2+、Mg2+等二价阳离子。[结论]该研究为阐明条斑紫菜的免疫机制及其高效综合利用提供了理论依据。     

EDTA对桑树和任豆幼苗吸收重金属Pb的影响

【目的】研究不同重金属Pb2＋浓度下螯合剂EDTA处理对桑树和任豆幼苗修复土壤中重金属Pb2＋的效果及Pb2＋在植物茎叶及根部积累,以期为重金属污染土壤生态修复及植物资源的合理利用提供理论依据。【方法】用盆栽模拟法,以4L／盆Hoagland营养液作为培养液,培养液中的Pb2＋浓度分别为0、2．5、5．0、10．0、25．0、50．0、100．0、150．0、200．0、250．0mg／L,EDTA的浓度均为0．55mmol／L,以不添加EDTA作对照。分别测定桑苗和任豆幼苗茎叶和根部的Pb2＋浓度。【结果】随着水培液中Pb2＋浓度的增加,桑树和任豆幼苗对Pb2＋的吸收和积累量也逐渐增大;在相同的重金属Pb2＋胁迫背景下,加入EDTA的桑树和任豆幼苗对Pb2＋的吸收量比不添加EDTA的对照组明显增高;桑树和任豆幼苗体内Pb2＋浓度通常为根部〉茎叶,而添加EDTA能加速重金属Pb2＋向茎叶的转运。随着培养液中Pb2＋浓度的增加和时间的延长,Pb2＋在植物根部的积累逐渐增加,而向茎叶的转运则相对减少。【结论】桑树和任豆幼苗具有较强的重金属Pb耐性,而EDTA能促进桑树和任豆幼苗对重金属Pb2＋的吸收,因此,桑树和任豆可作为修复植物应用于重金属污染地区。     

植酸海泡石复合重金属吸附剂对Cd2＋的吸附研究

[目的]探讨植酸海泡石复合重金属吸附剂对Cd2＋的最佳吸附条件.[方法]以植酸与海泡石为原料,制备出植酸海泡石复合重金属吸附剂对Cd2＋进行吸附,分析吸附剂用量、pH、温度、Cd2＋浓度、吸附平衡时间等因素对吸附剂吸附性能的影响.[结果]植酸海泡石复合重金属吸附剂吸附Cd2＋的最佳条件为：吸附剂用量为18 g/L,温度为30 ℃,pH=3.8,Cd2浓度为48 mg/L,吸附时间60 min.[结论]该研究为含镉废水的处理提供了科学依据.     

一株新的短芽孢杆菌低温弹性蛋白酶的发酵优化简

[目的]优化短芽孢杆菌XZE116菌株的培养条件使之产生高活性的胞外弹性蛋白酶.[方法]通过单因子和正交试验对XZE116菌株产胞外弹性蛋白酶的培养基及发酵条件进行优化.[结果]该菌株产酶最佳培养基组成为：葡萄糖0.5％、蔗糖0.1％、干酪素0.5％、酵母膏0.5％,K2HPO40.1％,KH2PO40.5％,MgCl20.01％;最佳发酵条件为：250 ml三角烧瓶中装液量40 ml、接种量5％、摇瓶转速200 r/min、pH 8.4、发酵温度为27℃、发酵时间为72 h.XZE116菌株在最佳培养条件下,该菌株的酶活力提高了1.6倍.[结论]研究可为这株新的短芽孢杆菌进行发酵工业生产提供依据,同时为进一步利用该菌株产生的弹性蛋白酶奠定基础.     

斑点叉尾鮰鱼肠蛋白酶的分离纯化及其酶学性质

以斑点叉尾鮰Ictalurus punctatus鱼肠道为原料提取蛋白酶,对分离条件进行了优化,并对部分酶学性质进行了研究。结果表明：鱼肠内的蛋白酶在硫酸铵饱和度为70%时,所得沉淀中酶活力最高。经过阴离子交换层析分离后,蛋白酶的纯化倍数达到了218倍。该蛋白酶的最适温度为55℃,最适pH为7.5,具有良好的低温稳定性和酸碱稳定性,米氏常数为5.4 g/L。K^＋和Ca^2＋离子对该蛋白酶活性有较弱的激活作用,Mg^2＋则能显著激活蛋白酶活性;Na＋和Zn2＋对蛋白酶的活性有较弱抑制作用,而Cu^2＋和EDTA能显著抑制蛋白酶活性。     

青鱼胰蛋白酶的分离纯化及部分性质研究

[目的]为青鱼的养殖和综合利用提供试验依据。[方法]对青鱼胰蛋白酶进行分离纯化,测定青鱼胰蛋白酶的分子量、热稳定性和酸碱稳定性,探讨pH值、温度、金属离子和EDTA对青鱼胰蛋白酶活力的影响。[结果]经SDS-PAGE和凝胶过滤,测得青鱼胰蛋白酶的分子量分别为44和43.5 kD。青鱼胰蛋白酶具有一定碱性耐受性,在pH值为8～10时活性较高,其最适pH值约为9,最适反应温度为50℃。以酪蛋白为底物,在pH值8.5、37℃时测得该酶Km值为4.6×103 mg/L。Mg2+对该酶有明显促进作用,而Cu2+、Mn2+、Pb2+和EDTA对青鱼胰蛋白酶的抑制作用很大。[结论]EDTA能抑制青鱼胰蛋白酶的作用,说明该酶可能为金属蛋白酶。     

杨桃果实过氧化氢酶活性研究

【目的】探讨杨桃果实过氧化氢酶（CAT）的活性及其特性,为杨桃采后保鲜提供理论依据。【方法】以大果甜杨桃为试材,利用紫外可见分光光度计测定杨桃果实CAT活力,分析温度、pH、有机溶剂、金属离子等不同因素对杨桃果实CAT活性的影响。【结果】杨桃果实的CAT活力为0．14U／g·min,其最适温度30℃,最适pH6．6;甲醇和乙醇在低浓度时对杨桃果实CAT活性表现为激活作用,高浓度时呈抑制作用;金属离子Cu2＋对杨桃果实CAT有激活作用,而Mn^2＋和Na^＋对该酶有一定的抑制作用。【结论】杨桃果实CAT活性受温度、pH、有机溶剂和金属离子等因素的影响较明显,生产中通过低温贮藏、合理使用有机溶剂等,可有效延长其货架期。