猪附红细胞体的形态学观察方法的比较

本文通过鲜血压片镜检、瑞氏染色、姬姆萨氏染色对猪附红细胞体进行形态学方面的观察,并对三种形态学研究方法的优缺点进行评价。结果表明,鲜血压片镜检法易受温度影响,姬姆萨染色易受pH值和染色时间的影响,瑞氏染色法要防止颗粒沉积。     

猪和兔附红细胞体的形态学及生殖方式观察

应用光镜和电镜对猪和兔附红细胞体的显微和超微结构进行了观察。结果表明，猪和兔附红细胞体在光镜和电镜下的形态结构、大小以及在红细胞上的附着方式等均无显著差别，其形态多为球形、卵圆形，直径0．2～2．5pm，在红细胞表面以一根或数根纤丝连接成串珠状或单个寄生。在透射电镜下，首次观察到附红细胞体边缘有一段20～30nm厚的光亮区域，并且在扫描和透射电镜下同时观察到附红细胞体的出芽生殖现象。由此推测，附红细胞体的发育方式为成熟的附红细胞体以出芽的方式产生1个未成熟形态的附红细胞体，随着未成熟形态附红细胞体的发育，逐渐从成熟附红细胞体体内脱离出来，最后以纤丝与成熟附红细胞体相连接；脱离出来的未成熟形态的附红细胞体黏附到同一红细胞或临近红细胞的膜上，最终发育成1个成熟的附红细胞体。     

猪附红细胞体的电镜学观察

对 1 2头不同程度附红细胞体感染猪的血液标本进行电镜学观察结果显示 ;扫描电镜 4 580倍下红细胞膜缺损凹陷 ,表面有大小不一链球状、杆状附红细胞体附着 ,被感染红细胞呈波浪形改变。透射电镜 1 2 0 0 0倍下观察 ,附红细胞体为一近似球形结构物 ,边缘密度较中间密度大 ,附着点有纤丝状物与红细胞相连     

猪附红细胞体的诊治

猪附红细胞体(又名红细胞胞子虫),寄生于血液中,附于红细胞表面或细胞里。是猪的一种热性、溶血性、散发为主的传染病。病原能使红细胞变性、红细胞变形、破坏,从而导致猪自身免疫溶血性贫血,血液凝固障碍,而引起出血、低血糖和酸中毒以及机体免疫抑制。     

猪和兔附红细胞体的体外培养

用RPMI1640和小牛血清按不同比例混合作为体外培养猪和兔附红细胞体的基础培养基，同时以去掉红细胞上自然感染的附红细胞体后的红细胞泥作为培养附红细胞体的寄生载体，进行猪和兔附红细胞体的体外培养。培养结果表明，以RPMI1640与小牛血清按6：4比例混合，同时选用兔红细胞泥作为载体的培养效果最佳，接种感染了附红细胞体的猪、兔阳性红细胞后24h生长达到高峰，感染率分别为40．2％和31．0％，而采用猪红细胞泥作为培养载体时红细胞感染率无明显升高。     

猪附红细胞体形态学研究

通过显微镜观察附红细胞体在血浆中的运动，再结合血液涂片瑞氏、姬氏染色，观察附红细胞体附着在红细胞上的状态；并通过对附红细胞体的透射电镜和扫描电镜观察，发现附红细胞体超微结构的特点，为诊断附红细胞体病和对附红细胞体进一步研究提供基础。     

猪附红细胞体的诊断和治疗

2000年夏天北京某猪场发生以体温升高,可视粘膜苍白,贫血为特征的疾病。经流行病学、临床症状、微生物学检验诊断为猪附红细胞体病。     

猪附红细胞体Dot-ELISA检测方法的建立

本试验建立了一种检测猪附红细胞体抗体的Dot—ELISA方法，并确定了试验程序中最适抗原包被浓度、被检血清最适稀释度等工作条件。特异性和重复性试验结果表明，所建立的Dot—ELISA不与猪瘟等常见猪病阳性血清发生交叉反应，且稳定性高；用所建立的Dot—ELISA与IHA对70头份被检血清进行平行检测，阳性率分别为90％和60％；对20份阳性血清进行检测，Dot—ELISA和IHA平均抗体滴度分别为1：1012和1：160。表明所建立的Dot-ELISA是一种比较敏感、特异和稳定的血清学检测方法，能用于猪附红细胞体的抗体检测和疾病诊断。     

猪附红细胞体的诊治报告

2001年7月我市某猪场发生一种以无名高热贫血、黄疸、鼻流脓性分泌物为特征的疾病,经过流行病学,临床症状,剖检变化,实验室诊断为猪的附红细胞体病。1 流行特点 该猪场4月份从外地引进240头苗猪供育肥用。5天后部分育肥猪发生腹泻和流感病,通过采取紧急防治措施,     

抗附红细胞体有效药物的筛选

以PCR检测附红细胞体呈现阳性，且镜检染虫率达909／5以上的猪血样为研究对象，选择几种附红细胞体敏感的药物(血虫净，附红净，庆大霉素，博士914，土霉素，三毒清，红弓链914，附红120，红弓链克，乌金土霉素)和对支原体敏感的恩诺沙星，对立克次氏体敏感的红霉素，采用两种方法进行体外药效试验。附红净对附红细胞体的作用效果最明显，而庆大霉素对附红细胞体基本无效，其他药物对附红细胞体也有一定杀灭效果。     

猪附红细胞体电镜特点及药物治疗效果的电镜观察

近年来,国内外很多关于猪附红细胞体病诊断与防治的文章,但对猪附红细胞体本身形态学报道的文章却很少.本实验对猪附镜下的各形态、大小以及感染强度作了较详细的描述.球形、环形、圆盘形为E.suis的主要形态,体形较大的E.suis以芽苞生殖进行繁殖,感染强度随着病情的发展而呈现波浪形态变化.对致病机制作了进一步的阐述,在急性阶段,附红细胞体病会引起由一种经冷凝素IgM来介导的或与之相关的自身免疫溶血性贫血.最终结合电镜观察临床药物治疗效果,长效土霉素、贝尼尔在防治猪附红体病有一定的疗效.     

附红细胞体自然感染猪血液流变学

选择临床健康的2月龄附红细胞体自然感染仔猪15头,每周采血1次,连续4次,检测血样的RBC、PCV、ηb10s-1、ηb150 s-1、ηp、ηre10 s、ηre150 s-1、AI、RI、TK.检测结果如下随着猪附红细胞体感染强度的增强,ηb10 s-1、ηre10s-1、ηre150 s-1、AI、RI、TK明显增高,而RBC、PCV、ηb150 s-1、ηp无明显变化,表明猪感染附红细胞体后,血液粘度增高,红细胞聚集性增高,红细胞变形能力降低,进而影响脏器组织的血液灌注和微循环功能.这些血液流变学改变,构成了血栓、炎症、变性、水肿、坏死等的病理学基础.     

猪附红细胞体培养方法及药敏试验研究

为实现抗猪附红细胞体药物的高通量筛选,拟建立稳定可靠的体外培养方法,并应用其进行药敏试验.采用单因素试验法,分别对培养基种类、胎牛血清添加比例、动物红细胞泥种类、换液和传代间隔时间进行考察.应用建立的方法对猪附红细胞体进行体外培养,并以贝尼尔、青蒿素作为阳性对照药物,对咪唑苯脲、四环素、强力霉素等8种药物进行药敏试验....     

猪附红细胞体实验动物模型的建立

为建立一种合适的猪附红细胞体病动物模型，利用摘除脾和／或注射地塞米松的昆明小白鼠，以腹腔注射方式人工感染猪附红细胞体，通过血液涂片镜检、PCR检测、临床症状观察及病理剖检对感染情况进行了鉴定。结果显示，猪附红细胞体能够经腹腔注射感染昆明小白鼠，且感染鼠表现出与猪附红细胞体病相似的临床症状。结果表明，猪附红细胞体实验动物模型已成功建立，并证实啮齿类动物在附红细胞体的传播过程中发挥着重耍作用。     

吉林省延边地区猪附红细胞体病分子流行病学调查

为了解吉林省延边地区近三年猪附红细胞体病感染情况,本试验对不同靶基因建立的PCR方法进行了比较,应用敏感性最好的PCR方法对延边地区5个县市的237头份猪血液样本进行了检测,并对不同地区、年龄段、季节、饲养方式等采集的样本进行了比较。结果显示,延边地区5个县市猪附红细胞体病感染的平均阳性率为23.6%(56/237),统计学分析表明,猪附红细胞体感染率在不同地区、年龄之间差异不显著(P>0.05);而夏秋两季猪附红细胞体感染率显著高于冬春两季(P<0.05);猪附红细胞体病在个体农户饲养方式中的阳性率显著高于规模化养殖方式(P<0.01),说明猪附红细胞体感染受季节、饲养方式等因素的影响较大。本试验为吉林省延边地区猪附红细胞体病的防控提供了科学的理论依据。     

猪附红细胞体PCR诊断方法的建立及应用

根据基因库中已登录的猪附红细胞体新的基因组DNA序列设计引物,从疑似猪附红细胞体(Mycoplasma suis)感染猪全血样品基因组DNA中扩增出了预期长度666 bp的目的DNA片段,通过对24份临床疑似病例样品的PCR扩增及其他病原微生物基因组DNA的特异性扩增试验,建立了E.suis的PCR诊断方法;进一步对PCR产物克隆、测序分析表明,与国外已报道的AJ504999株相关区域核苷酸、氨基酸序列同源性分别为98.19%和96.85%,表明我国分离株与国外株基因组存在差异。     

猪附红细胞体50S核糖体基因PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank上最新发布的猪附红细胞体基因组序列(NC-015155)设计一对引物,并以吉林省延边地区猪附红细胞体基因组DNA为模板,建立猪附红细胞体50 S核糖体基因PCR诊断方法,通过特异性、敏感性及临床应用试验验证,快速准确的检测出猪附红细胞体.试验结果显示,建立的猪附红细胞体PCR诊断方法扩增片段大小为10...     

猪附红细胞体PCR检测方法的建立和初步应用

基于猪附红细胞体广东株16S rRNA基因的序列特点，设计合成种特异性引物，建立了猪附红细胞体PCR检测方法。该方法能特异性扩增523bp的猪附红细胞体16SrRNA基因片段，而对猪丹毒杆菌G4T10株、猪链球菌STl71株、多杀性巴氏杆菌E0630株、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪肺炎支原体、鸡毒支原体和猫血巴尔通氏体CA株的基因组DNA没有扩增带出现。对猪附红细胞体基因组DNA的最小检测量为160pg。通过对38份临床样品的检测，8份为猪附红细胞体感染阳性，其余为阴性。结果表明，建立的PCR检测方法具有极高的敏感性和特异性，可用于急性猪附红细胞体病和临床健康带菌猪的诊断。     

猪附红细胞体巢式PCR诊断方法的建立及初步应用

为建立一种更加准确、敏感的猪附红细胞体检测方法,本试验根据猪附红细胞体特异的DNA序列(AJ504999)设计2对巢式PCR引物,建立了巢式PCR检测方法。筛选该检测方法的最佳反应条件,并进行了特异性、敏感性及临床样本检测试验。结果表明,建立的巢式PCR对猪附红细胞体基因组DNA能扩增出特异性片段,而对弓形虫、链球菌、牛瑟氏泰勒虫、牛附红细胞体基因组DNA扩增反应结果均为阴性;DNA最低检测量为0.124 fg/μL;通过对55份临床样本的检测,该巢式PCR较常规PCR的阳性检出率高23.7%。本试验为猪附红细胞体病的诊断提供了一种更为特异、敏感的检测技术。