金柑组织培养与快速繁殖体系的建立

为了建立金柑(Fortunella japonica (Thunb.) Swingle)组织培养与快速繁殖体系,本研究以金柑胚根、子叶、茎段、叶片等不同外植体为材料,采用器官发生型以及短枝扦插型为主要培养途径,进行金柑的组织培养,研究不同浓度的植物生长调节剂对金柑快速繁殖体系建立的影响以及愈伤组织诱导和分化的最适条件,筛选出诱导愈伤组织形成不定芽的最佳外植体与最适培养基。研究结果表明,金柑诱导愈伤组织形成不定芽的最佳外植体为幼嫩的茎段,诱导金柑子叶形成愈伤组织的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA +1.0 mg/L NAA+3% 蔗糖+0.7% 琼脂,诱导子叶愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+3% 蔗糖+0.7% 琼脂。由此证明上述组织培养途径是可行的。     

矾根‘莱姆里基’愈伤组织诱导及快速繁殖技术

[目的]本文旨在通过组织培养的方法,建立矾根‘莱姆里基’(Heuchera micrantha‘Lemriki’)愈伤组织诱导和快速离体繁殖技术体系。[方法]以矾根‘莱姆里基’的幼嫩茎段、叶柄、叶片为外植体进行组织培养,明确0.1%的升汞溶液不同消毒时长的灭菌效果以及对3个外植体愈伤诱导的影响,研究不同配比的激素对3个外植体愈伤组织诱导,对茎段不定芽及不定根诱导的影响。[结果]结果表明,消毒时长对矾根‘莱姆里基’不同部位外植体的消毒效果影响显著,幼嫩叶柄、茎段和叶片的最佳消毒时长分别为:0.1%升汞6 min,8 min,10 min。叶柄和叶片诱导愈伤的最佳激素配方为:1 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA,愈伤率为91.11%、90.00%。幼嫩茎段诱导愈伤的最佳激素配方为:1 mg·L~(-1)6-BA+0.05 mg·L~(-1)NAA,愈伤率为75%。幼嫩茎段诱导不定芽的最佳激素配方为:0.1 mg·L~(-1)6-BA+0.05 mg·L~(-1)NAA,诱导率为72.2%;茎段不定芽诱导生根的最佳激素配方为:1.0 mg·L~(-1)IBA,生根率为100%,且根系健壮。[结论]本研究通过组织培养的方法初步建立了矾根离体繁殖技术体系,可为矾根资源保护和分子育种提供技术支撑,并且有效解决了矾根传统繁殖方式速度慢的难题,对矾根的标准化、规模化生产和新品种的开发和应用具有重要的现实意义。     

5个芍药品种愈伤组织诱导及分化研究

芍药组织培养是解决其快速繁殖的有效方法,更为其新品种的繁育提供有效途径。本试验分别从5个芍药品种的不同部位取材,研究了影响芍药愈伤组织诱导和再分化的主要因素。结果表明:2,4-D、NAA与TDZ诱导愈伤组织效果较好,KT、IAA和IBA不利于愈伤组织诱导和不定芽分化;在愈伤组织再分化中,NAA效果优于2,4-D,TDZ优于6-BA;在所选外植体中只有胚轴产生的愈伤组织分化出不定芽,平均分化率为7.95%。     

连翘(Forsythia suspensa (Thunb.)Vahl)的试管苗快速繁殖

[目的]连翘是中国常用中草药,也是庭院绿化的常用树种,需求量较大.建立连翘(Forsythia suspensa (Thunb.) Vahl)的试管苗快速繁殖体系,以期为连翘的大规模栽培育种奠定基础.[方法]以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA与NAA诱导连翘幼茎外植体再生芽的发生;以1/2 MS为基本培养基,添加IAA、IBA或NAA等单一激素,诱导再生芽生根.[结果]结果表明,BA与NAA的比例对于新芽发生有重要影响,NAA的存在通常不同程度导致愈伤组织的发生,当NAA与6-BA比例达到2∶1时,茎段外植体完全脱分化形成愈伤组织.而不含有NAA,即仅含有6-BA单一激素情况下,更有利于芽的发生.对于生根诱导,低浓度IAA或NAA (0.1 mg/L)均不能诱导连翘试管苗生根,高浓度(0.5 mg/L)会导致茎基部先发生愈伤化,之后才有根从愈伤组织处长出.IBA在0.1～0.5 mg/L范围内,均可以诱导90％以上的再生小芽生根.[结论]以连翘的幼茎为外植体诱导连翘的试管苗快速繁殖,MS+6-BA 0.5 mg/L为最佳的芽诱导培养基;1/2 MS+IBA 0.2 mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率达到90％以上.     

不同外植体和植物激素对大蒜愈伤组织诱导的影响

以大蒜鳞芽基部、茎尖、根尖和试管苗叶片为外植体,研究不同激素配比对大蒜愈伤组织诱导的影响。结果表明:大蒜根尖和鳞芽基部比茎尖和试管苗叶片易于诱导愈伤组织,根尖愈伤组织诱导率最高。不同激素配比对4种外植体愈伤组织诱导的影响不同,根尖在6-BA和2,4-D不同激素配比下全部诱导出愈伤组织;鳞芽基部愈伤组织诱导的最适激素组合为0.3 mg/L 6-BA+1.5 mg/L 2,4-D或0.5 mg/L6-BA+2.0 mg/L 2,4-D,诱导率为100%;茎尖愈伤组织诱导的最适激素配比为0.7 mg/L 6-BA+1.5mg/L 2,4-D,诱导率为85.83%;试管苗叶片愈伤组织诱导的最适激素配比为0.3 mg/L 6-BA+2.0 mg/L2,4-D,诱导率为71.67%。     

大蒜鳞芽组培再生体系建立方法研究

以山东和新疆白皮大蒜栽培品种为材料,建立了大蒜鳞芽为外植体的愈伤组织诱导再生体系。采用MS培养基,通过激素配比筛选试验,比较快速诱导愈伤组织激素配比与方案,为供试大蒜品种脱病毒苗的快速繁殖奠定了基础。筛选得到愈伤组织快速诱导与生长培养基与激素配比,结果表明:快速诱导愈伤组织最佳激素组合为:NAA 0.5mg/L+2,4-D1.25mg/L+MS,愈伤组织继代生长与幼苗分化激素组合为:6BA 5mg/L+NAA0.3mg/L,环境温度25℃,光照16小时,8小时黑暗条件;所有这些结果为大蒜脱毒再生苗提纯复壮与转基因研究体系的建立都很有帮助。     

黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖

【目的】建立黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖体系。【方法】以黄芩的幼茎、幼叶及叶柄为外植体,在MS培养基上添加不同质量浓度的6-BA、2,4-D与NAA诱导愈伤组织及再生芽;在1/2 MS培养基上添加IAA、IBA或NAA激素,单独或者组合使用,诱导黄芩试管苗生根。【结果】幼叶和叶柄容易褐化死亡,而幼茎显示很好的脱分化和再分化效果;BA与NAA组合可以诱导幼茎外植体脱分化与再分化,而BA与2,4-D组合只能诱导愈伤组织发生。IAA诱导生根率最高,但是茎基部会形成愈伤组织,后期无法驯化成活;IBA及NAA均可以诱导根的发生,但是以IBA效果为佳。【结论】幼茎为最佳外植体,MS+BA0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织诱导及再生芽的分化培养基。1/2MS+IBA 0.1mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率为70.3%。     

甘草的试管苗快速繁殖

以甘草种子萌发的幼苗为材料,进行组织培养快速繁殖研究。结果表明,在幼茎、幼叶、子叶、下胚轴、胚根等5种外植体中,子叶及下胚轴均适合诱导愈伤组织发生;在6-BA、NAA或2,4-D不同激素组合中,以MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 1.5mg/L为最佳的愈伤组织诱导培养基,同时也是以茎尖、腋芽为外植体进行丛生芽诱导的最佳培养基;在IAA、IBA和NAA 3种激素中,以1/2MS+NAA 0.05mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率可达80%。     

甘草的试管苗快速繁殖

以甘草种子萌发的幼苗为材料,进行组织培养快速繁殖研究。结果表明,在幼茎、幼叶、子叶、下胚轴、胚根等5种外植体中,子叶及下胚轴均适合诱导愈伤组织发生;在6-BA、NAA或2,4-D不同激素组合中,以MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 1.5mg/L为最佳的愈伤组织诱导培养基,同时也是以茎尖、腋芽为外植体进行丛生芽诱导的最佳培养基;在IAA、IBA和NAA 3种激素中,以1/2MS+NAA 0.05mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率可达80%。     

水蔓菁组织培养及植株再生研究

采用组织培养方法,设置不同激素配比的培养基对水蔓菁(Veronica linariifoliasubsp.dilatata)不同外植体叶片、茎尖及茎段进了行研究。结果表明MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L诱导愈伤组织效果最佳,其中以茎尖的诱导效果优于其他外植体;MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L诱导愈伤组织丛生芽的分化效果最佳;1/2 MS+IBA 0.5 mg/L诱导丛生芽的生根效果最佳。