应用RAPD技术快速鉴定樱桃番茄杂种纯度

筛选出应用于樱桃番茄种子纯度鉴定的引物,建立了杂交种子的RAPD指纹图谱.从27条引物中筛选出了18条用于樱桃番茄种子纯度鉴定的引物,其中4条偏母型引物、5条偏父型引物、4条互补型引物、2条特异型引物及3条缺失型引物.利用互补型引物S172鉴定21粒樱桃番茄种子纯度,其中有2个其他种子混杂,该种子纯度为90.48%.     

黄皮尖椒秀黄F1种子纯度的RAPD鉴定

使用180条RAPD引物对黄皮尖椒秀黄F1及其亲本模板DNA进行PCR扩增,筛选出8条特异引物,其中2条偏父型(SPS-H2、SPS-H7)、2条互补型(SPS-V10、SPS-Z6)、4条偏母型(SPS-X3、SPS-X4、SPS-Z10、SPS-Z2)。用筛选出的引物SPS-H2对该品种一批商品种进行鉴定,发现其种子纯度为96.6%,与根据果实性状进行的田间鉴定结果(95.8%)吻合,表明RAPD技术用于种子纯度鉴定所获的结果准确可靠,可节省大量的人力、物力及时间。     

甘蓝一代杂种纯度SSR鉴定与田间鉴定的一致性研究

【目的】分析甘蓝杂交种纯度的SSR分子标记鉴定结果与田间形态学鉴定结果的一致性,寻找一种快速、准确鉴定甘蓝杂交种纯度的方法。【方法】选用SSR分子标记,筛选杂交种具有父母本互补带型的引物,用其鉴定“秦甘50”杂交种的纯度,并与田间常规鉴定结果的一致性进行比较。【结果】300对SSR分子标记引物中,有1对引物SQ1019对“秦甘50”杂交种表现为父母本互补带型;利用引物SQ1019标记鉴定“秦甘50”大田杂交种的纯度为96.3%;“秦甘50”大田杂交种经田间鉴定纯度为96.0%,2种鉴定结果的一致性高达99.7%。【结论】SQ1019是SSR分子标记“秦甘50”杂交种的特异引物,SSR分子标记是一种快速、准确鉴定“秦甘50”杂交种纯度的方法,其结果与田间常规鉴定结果相一致。     

利用微卫星标记鉴定金优207杂种纯度技术研究

利用微卫星分子标记,对杂交组合金优207的双亲及F1之间的多态性进行引物筛选和检测技术研究.结果如下：在已筛选的232对引物中,有32对引物显示稳定的多态性,杂种表现为父母本互补的带型.用表现多态性的两对引物分别对人为掺假的金优207进行纯度鉴定,能将掺入组合中的假种子区分开.目前采用的方法,具有准确可靠、多态性高、稳定性好、易于操作等特点.     

杂交玉米品种家佳荣2号种子纯度的InDel分子标记鉴定

为建立一个简捷、经济、准确可靠的室内杂交玉米种子纯度鉴定方法,以玉米杂交种家佳荣2号及其父母本、JR02杂交组合为材料,用InDel(插入-缺失)分子标记技术和田间小区种植鉴定2种方法对家佳荣2号杂交种子进行纯度鉴定。结果显示,InDel分子标记鉴定的纯度为95.6%,田间小区种植鉴定的纯度为97.8%,InDel的结果略低于田间小区种植鉴定的结果。18对InDel引物中能与家佳荣2号双亲基因组稳定结合且具有多态性的引物共有11对,多态性检测率为61%,其中有1对引物带型偏父本,其余10对InDel引物都能与家佳荣2号稳定结合,可用于鉴定家佳荣2号的种子纯度。在10对引物中随机选取2对引物,有1对引物能从家佳荣2号中区分出其相似品种JR02。2种方法鉴定结果高度一致,表明InDel分子标记可作为玉米杂交种室内纯度鉴定的方法。     

SSR分子标记鉴定青花菜杂交种‘津青一号’的纯度

以青花菜新品种‘津青一号’及其亲本为试验材料,用SSR分子标记技术鉴定杂交种种子纯度,从50对SSR引物中,筛选出了1对在杂交种和父、母本之间存在显著差异的引物(L21),该引物扩增片段电泳条带清晰可辨,且杂交种含有父、母本的特异互补带型。利用该引物对108株‘津青一号’杂交种进行纯度鉴定,结果为96.30%,与大田形态鉴定结果 98.15%相比,SSR标记与大田种植鉴定结果基本一致。这表明,引物L21可用于‘津青一号’的纯度鉴定。     

SSR分子标记技术在杂交种丹玉39纯度鉴定上的应用

采用20对SSR基本引物对两个玉米品种组合进行筛选,以选出相应品种的父母本双亲互补带型的特异性引物,用于对应品种的纯度鉴定,为建立玉米品种纯度鉴定的核心引物库奠定基础.     

陆两优996种子纯度的SRAP指纹图谱鉴定

利用270对SRAP引物对陆两优996和2个亲本的DNA指纹图谱,获得能在父、母本间表现出多态性的特异SRAP标记引物有54对,其中差异性条带136个。利用Me3Em8引物,条带在杂交种完全互补,对200株样本进行了纯度鉴定,结果鉴定纯度为97.50%,与田间种植鉴结果97.50%(海南鉴定)一致,表明SRAP标记技术适用于种子纯度鉴定。     

SSR技术鉴定黄瓜新品种津早28的种子纯度试验

种子的纯度鉴定是种业公司在种子生产过程中必不可少的环节，是促进农业生产持续稳产、高产的有效措施，也是提高种子质量、避免品种混杂的必要手段。为鉴定黄瓜新品种种子纯度，本研究以津早28及其父、母本为供试材料，采取SSR技术，利用183对引物，根据杂交种父母本互补带型原则对其进行筛选。结果表明，通过与田间纯度鉴定结果进行对比，共有6对引物出现双亲互补带型，尤其以引物N383、N132和N556表现特异性强，带型最为清晰，这3对引物的SSR鉴定结果与田间鉴定结果的一致度均超过93.5%，说明以上3对引物均可用于津早28的纯度鉴定。     

茄子SSR多态性标记筛选及杂交种纯度鉴定

[目的]建立一套快速、准确、高效的茄子杂交种纯度鉴定方法,为其制种过程中除伪存真及大面积推广应用提供技术支持.[方法]挑选已公布的48对SSR引物对2个茄子杂交种15-16和1-7的亲本进行多态性标记筛选,选取有效引物对茄子杂交种进行纯度鉴定,并结合田间植株纯度鉴定,验证SSR分子标记纯度鉴定的有效性.[结果]在48对SSR引物中,有12对引物在杂交种15-16亲本材料中存在多态性,其多态性引物带型呈互补带型的有8对(SM14、SM15、SM17、SM20、SM29、SM30、SM34和SM45);有5对引物在杂交种1-7亲本材料中存在多态性,其多态性引物带型呈互补带型的有4对(SM15、SM20、SM24和SM29).分别选取2对呈互补带型的SSR引物进行杂交种纯度鉴定,结果显示杂交种15-16和1-7的纯度分别为99%和100%,与田间种植鉴定结果一致.[结论]采用SSR分子标记检测茄子杂交种纯度具有准确、高效的特点,可为茄子杂交制种过程中真假杂种鉴定提供技术支持.     

SSR分子标记技术在汉青一号萝卜种子纯度鉴定中的应用

选用120对引物在汉青一号萝卜(Raphanus sativus L.cv.Han Qing NO.1)亲本间进行PCR扩增,从中筛选出3对引物10、30、63,在双亲本间能够扩增出差异互补的条带,利用3对引物对汉青一号萝卜杂种1代群体进行纯度鉴定。鉴定结果纯度为95.1%,与同批次种子的田间鉴定结果 96.0%相近,说明应用SSR分子标记技术实施萝卜杂种1代种子的纯度鉴定是可行并可靠的。     

辣椒一代杂种广椒6号种子纯度的RAPD鉴定

[目的]为利用RAPD技术进行作物种子的纯度检测奠定基础。[方法]利用RAPD技术对辣椒一代杂种广椒6号的种子纯度进行检测,研究RAPD反应体系中的模板DNA和引物的用量对PCR扩增效果的影响。[结果]在25μl反应体系中,加入10~400 ng模板DNA,均可获得一致产物,而且条带亮度无明显差异。从340个RAPD随机引物中筛选出15个具有良好稳定性的差异引物,其中偏母型引物5个,偏父型6个,互补型4个。利用筛选出的3个多态性引物F05、F15和I05对广椒6号的纯度进行检测,3个引物的检测结果一致,且与田间形态学鉴定结果吻合。[结论]RAPD技术是鉴定辣椒一代杂种纯度的有效方法,具有准确、可靠、快速和经济的特点。     

基于SSR分子标记的普通丝瓜杂交种子纯度鉴定

为了建立一种高效、准确的普通丝瓜品种纯度检测方法,以普通丝瓜丝盛2号及其亲本为试验材料,利用SSR分子标记技术鉴定杂交种种子纯度,从106对SSR引物中筛选出1对引物(SGSSR4),其在杂交种和双亲之间存在显著差异条带,且杂交种含有父、母本的特异互补带型。利用该引物对26株丝盛2号杂交种进行纯度鉴定,鉴定结果为96.15%,与大田种植鉴定结果一致,表明该引物可用于丝盛2号杂交一代种子纯度的快速检测和准确鉴定。     

基于SSR分子标记对西瓜杂交种早佳8424纯度的高通量鉴定

【目的】建立西瓜杂交种早佳8424纯度SSR分子标记鉴定体系,满足制种单位种子真实性和纯度的高通量快速准确鉴定的需求。【方法】以早佳8424及其双亲为材料,筛选条带清晰扩增稳定的多态性SSR标记,优化DNA提取和PCR扩增体系,并与传统田间鉴定结果进行比较,验证其准确性。【结果】从72对SSR引物中筛选获得4对在早佳8424上表现为双亲互补带型的引物,分布于第5、第6和第9条染色体上,片段大小约100~300 bp。将扩增片段大小不同的引物组合进行双重或多重PCR扩增,获得4个双重PCR组合。将SSR分子标记WS27+MCPI-05组合对192株种植于温室中的早佳8424杂交种纯度进行鉴定,同田间传统鉴定结果一致。【结论】筛选获得的SSR标记及其组合结合碱裂解法提取DNA可用于早佳8424西瓜杂交种纯度鉴定,效率高,操作简便且可高通量流水作业。     

大白菜新品种“秋白80”纯度的SSR鉴定

利用分子标记技术鉴定“秋白80”大白菜杂种一代的纯度。用41对SSR引物对“秋白80”正反交及其亲本混合池ＤＮＡ模板进行扩增，从中筛选出1对可将亲本和杂交种有效区分开的引物BrID111757,其对杂交种扩增产生亲本互补的特征带，上述条带均在杂种一代中出现。用这对引物对100个“秋白80”的幼苗进行纯度鉴定，发现分子标记鉴定结果与田间调查结果一致。因此，筛选出的SSR 引物BrID111757可用于大白菜品种“秋白80”的纯度鉴定。     

辣椒杂交种纯度鉴定的SSR核心引物筛选（英文）

[目的]该研究旨在筛选一套适于辣椒杂交种纯度鉴定的核心SSR引物。[方法]利用17对SSR引物对100份已知辣椒杂交种进行DNA指纹分析。[结果]根据多态性和杂合率两个指标,确定Hpms1-214、Es395和Hpms1-5为辣椒杂交种纯度鉴定的首选核心引物。利用这3个引物进行筛选,97个品种(占97%)能够找到具有杂合带型的鉴定引物,确定5个引物Es330、Es363、Epms923、Es120和Es64为辣椒杂交种纯度鉴定的备选核心引物。筛选出14个品种的特异性引物,可进一步筛选每个辣椒杂交种的双亲互补型引物。[结论]该研究为构建辣椒杂交种纯度鉴定标准DNA指纹图谱奠定基础。     

西瓜杂交组合T-1种子纯度鉴定的SSR标记研究

【目的】研究有效的西瓜杂交组合种子纯度的SSR标记鉴定方法,为室内鉴定的实际应用提供理论依据。【方法】以西瓜杂交组合T-1及其亲本自交系P-1、M-13为材料,在子叶展平期采用CTAB法提取DNA,利用优化的西瓜SSR标记方法进行杂交种子的纯度鉴定,并与田间表型鉴定进行比较。【结果】从36对SSR引物中筛选出3对(MCPI-5、MCPI-16、MCPI-17)稳定性强、可重复性好、在杂交种及其母本之间具有多态性的引物。将这3对引物中的MCPI-5和MCPI-16用于267株T-1杂交种群体纯度鉴定,显示种子纯度为97.75%,与田间种植鉴定结果一致。【结论】3对SSR引物MCPI-5、MCPI-16和MCPI-17可用于西瓜杂交组合T-1种子纯度的室内鉴定。     

SSR法鉴定黄瓜品种津优406的种子纯度

黄瓜是我国重要的蔬菜作物之一,可四季栽培,周年供应,同时其品种资源也较为丰富。随着育种进程的加快,黄瓜新品种数量也在不断增加,每年都会有大量新品种产生,均需要进行品种纯度鉴定。在进行品种SSR分子标记纯度鉴定前,首先都要进行该品种的特异性引物筛选。本研究以黄瓜品种"津优406"为例,选用了150对SSR引物在父母本间及津优406 F1杂交种进行筛选,根据杂交带型互补原则,引物N352和N591在杂交种和父母本间表现多态性,杂交种条带为父母本的互补带型,并且特异性强、带型整齐,非常适合做黄瓜品种津优406的纯度鉴定。并且用该两对引物对津优406多批次多粒种子进行了SSR鉴定,鉴定结果与田间鉴定符合率高达97.0%以上,表明该两对标记可以作为津优406的特异分子标记用于纯度检测。     

白杂1号种子纯度的RAPD鉴定技术研究

以白菜型油菜新品种“白杂1号”父母本及F1代种子为研究材料,用238个10-mer随机引物对它们进行了RAPD分析鉴定,结果显示共有68个随机引物出现多态性扩增,DNA片断大小在0.17~1.8 kb之间。经多次重复验证,引物S24、S83和S104条带稳定,并且杂交种条带为双亲互补型;引物S176为偏父型,在母本中扩增出350 bp特征带,而其在父本中呈阴性。选取S104(GGAAGTCGCC)对两个亲本及F1建立指纹图谱,共检测出6条强带,其中380 bp是母本特征带,1 600 bp是父本特征带。人为掺杂构建“白杂1号”F1代测试群体,用S104对其进行了纯度检测,结果与预期结果基本一致。对RAPD方法在鉴定种子纯度中的有关双引物混合扩增和条带判断取舍问题进行了讨论。     

油菜杂交种合油杂2号纯度鉴定的SSR引物筛选

以陕西渭北旱塬最新审定的双低油菜品种合油杂2号以及亲本为试验材料,用SSR标记技术研究杂种与双亲之间的扩增谱带多态性以甄别真假杂种。结果发现,200对SSR引物先用亲本进行预选,有45对引物可以特异区分两亲本,进一步反复筛选,其中引物CB10524分别在杂交种和其双亲之间存在扩增条带的多态性,表现为杂交种条带均为父母本的互补型,很适合做杂交种纯度鉴定。用该引物对合油杂2号杂交种进行SSR纯度鉴定,所测纯度分别为93%,与田间实测纯度94.27%非常接近,表明开发的SSR标记技术在合油杂2号油菜杂交种子纯度室内快速检测中具有广阔的应用前景。