灰葡萄孢对杀菌剂抗性研究进展

灰葡萄孢寄主范围广泛,可引起多种蔬菜、果树及观赏作物发生灰霉病。近年来,灰葡萄孢对杀菌剂产生越来越严
重的抗药性,本文综述了国内外多种寄主植物上的灰葡萄孢对不同杀菌剂产生的抗药性、抗性机制、抗性菌株检测方法等方
面的研究进展,并对未来研究方向进行了展望。     

六十种药用植物提取物对葡萄炭疽病菌抑菌活性的室内筛选

以隶属于44科的60种药用植物为试材,以无水乙醇作为提取溶剂,采用生长速率法和孢子萌发法对选取的药用植物提取物进行抑菌活性的测定,以筛选出对葡萄炭疽病菌具有抑菌活性的药用植物资源。结果表明:在供试质量浓度为100mg/mL时,对葡萄炭疽病菌孢子萌发抑制率和菌丝生长抑制率均在80%以上的有11种植物提取物,抑制率超过90%的药用植物有艾蒿、苍耳、丁香、黄芩、苦参、肉桂和石菖蒲7种,其中丁香、肉桂和石菖蒲的提取物对孢子的萌发抑制率和菌丝生长抑制率均为100%。筛选试验结果表明,药用植物丁香、肉桂和石菖蒲具有开发成防治葡萄炭疽病新型植物源杀菌剂的潜力。     

植物灰葡萄孢菌生物防治与化学防治机理的研究进展

灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea Pers.）是灰霉病的病原菌,能够侵染植物的根茎、叶片、花和果实,导致植物减产,甚至绝收。在作物采摘后的贮藏和运输过程中,灰葡萄孢菌会加速果蔬腐烂变质,导致严重的物流损失。本文综述了现阶段对灰葡萄孢菌引起植物灰霉病的防治手段,阐述防治作用机理及应用现状,分析了生物防治与化学防治的利弊,以期为灰葡萄孢菌的防治提供理论基础和应用依据。     

蔬菜作物灰葡萄孢菌对不同类型杀菌剂的抗性评价

为评价灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)的抗药性发展现状,采用菌丝生长速率法测定了自华北地区蔬菜作物上分离得到的85株灰葡萄孢菌对苯并咪唑类(多菌灵)、二甲酰亚胺类(腐霉利)、N-苯氨基甲酸酯类(乙霉威)、苯胺基嘧啶类(嘧霉胺)、酰胺类(啶酰菌胺)以及苯并吡咯类(咯菌腈)等6种不同类型杀菌剂的敏感性。结果表明:华北地区蔬菜作物上的灰葡萄孢菌对6种不同类型杀菌剂均产生了不同程度的抗药性,其中防治灰霉病的常用杀菌剂嘧霉胺、啶酰菌胺以及新型杀菌剂咯菌腈的抗药性发展迅速。灰葡萄孢菌对传统杀菌剂多菌灵、腐霉利、乙霉威的抗性水平较高,总抗性频数分别为72.94%、51.76%、69.41%;多菌灵-乙霉威双抗频数为51.76%,多菌灵-腐霉利-乙霉威三抗频数为34.12%。灰葡萄孢菌对目前防治灰霉病的主要杀菌剂嘧霉胺及啶酰菌胺也已经产生了较高水平的抗性,其抗性频数分别为64.71%和65.88%。而对于新型杀菌剂咯菌腈的抗性频数为36.47%。共发现了40种多重抗药性的类型,且有32种多抗类型未曾报道;1株灰葡萄孢菌对6类杀菌剂均表现敏感,抗性频数为1.18%;5株灰葡萄孢菌对6类杀菌剂均表现抗性,抗性频数为5.88%。实际生产应用中应尽量避免单一杀菌剂的长期重复使用,建议多种药剂配合使用以延长杀菌剂的使用寿命。     

四种寄主来源的灰葡萄孢对草莓的致病力分化研究初报

 从合肥、蚌埠、长丰、和县等地采集的番茄、辣椒、草莓、葡萄等发病组织上分离鉴定获得23个灰葡萄孢菌株, 采用菌丝块创伤接种法, 分别测定了这些菌株对草莓果实和叶片的致力。结果初步表明, 所有供试菌株接种草莓果实和叶片后均引起发病, 但病斑的平均直径有显著差异, 并在不同草莓品种上表现也有差异, 显示灰葡萄孢菌株间对草莓果实和叶片的致病力存在明显的分化。按照在草莓果实和叶片所致病斑的平均直径大小可将供试菌株划分为致病力较强、中等和较弱3种类型。总体来说, 来自草莓和番茄的菌株对草莓果实和叶片的致病力较强, 来自辣椒的菌株对草莓果实和叶片的致病力较弱, 但来自相同寄主的菌株间致病力也存在差异, 菌株致病力差异与菌株地域来源无明显相关。     

灰葡萄孢菌胞外大分子分泌物的植物毒性及漆酶性质鉴定

采用透析的方法提取灰葡萄孢菌分泌的大于14 kD的胞外大分子物质,将其接种到番茄和菊花叶片组织,检测灰葡萄孢菌胞外大分子分泌物的植物毒性,并以鞣酸和RB亮蓝为指示剂鉴定灰葡萄孢菌胞外大分子分泌物的漆酶性质。结果显示:灰葡萄孢菌胞外大分子分泌物可导致叶片组织坏死,具有植物毒性;接种灰葡萄孢菌后第3天,鞣酸和RB亮蓝平板出现不同程度的显色反应,第6天时平板几乎完全显色,胞外大分子物质具有漆酶性质。     

丝瓜乙醇提取物对几种植物病原真菌抑菌活性的研究

以丝瓜(Luffa)乙醇提取物及各不同溶剂萃取物为试材,采用菌丝生长速率法,研究丝瓜乙醇提取物及各不同溶剂萃取物对10种植物病原真菌的抑菌活性。结果表明:在浓度为5.00×103 mg/L时,丝瓜乙醇提取物对苹果炭疽菌、青霉菌、苹果轮纹菌和棉花枯萎菌的抑菌作用较好,分别为73.5%、72.2%、66.8%和61.1%;丝瓜乙醇提取物不同溶剂萃取物中,石油醚层和乙酸乙酯层对苹果炭疽菌和青霉菌的抑菌活性较高,石油醚萃取层对苹果炭疽菌和青霉菌的EC50值分别为3.2×103 mg/L和3.9×103 mg/L,乙酸乙酯萃取层对苹果炭疽菌和青霉菌的EC50值分别为1.2×103 mg/L和2.1×103 mg/L。     

江苏省蔬菜灰葡萄孢生物学性状及致病力研究初报

灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)所致的灰霉病是多种蔬菜上普遍发生的病害,在许多地区已造成严重损失。据Tortora等研究,灰葡萄孢不同菌株在生物学性状和致病力方面有一定变化。该病菌在自然界分布广泛,菌源复杂,寄主植物繁多。本文对江苏省各地不同蔬菜上灰葡萄孢一般生物学特性和致病力差异进行了初步研究。     

四种植物提取物对烟草赤星病菌抑菌活性研究

以烟草赤星病菌为供试靶标,采用孢子萌发及生长速率测定法,对华山姜、毗黎勒、团花树和金钮扣的95%乙醇粗提物进行了抑菌活性测定。结果表明:在终浓度为200μg/mL下,华山姜对该菌的孢子萌发及菌丝生长的抑制率最高,分别为72%、53%,其次为毗黎勒。团花树和金钮扣只对该菌的孢子萌发有低抑制活性。因此,华山姜对烟草赤星病菌孢子萌发及菌丝生长的抑制效果显著优于另外3种提取物,与75%百菌清WP阳性对照在相同浓度下达到同一显著水平。     

7种植物精油对2种苹果病害病原菌的抑菌活性

选择陈皮精油、松树油、薄荷精油、柠檬精油、青蒿精油、生姜精油、桉叶油等7种来源广且易提取的植物精油,采用抑制菌丝生长法测试了7种植物精油的单剂、复配剂、单剂或复配剂分别与农药混配对苹果黑腐皮壳菌、链格孢苹果专化型菌的毒力,以期为果园专用植物源杀菌剂的开发提供理论基础,用以实现果园化学农药的减量与替代。结果表明：陈皮精油、松树油、薄荷精油、柠檬精油对这2种病原菌均有不同程度的抑菌效果,施用单剂时陈皮精油和松树油对2种菌的抑制作用最强,抑制黑腐皮壳菌时,其EC₅₀分别为123.37、157.12mg/L,抑制链格孢苹果专化型菌时,其EC₅₀分别为148.13、188.02 mg/L;精油复配后,松树油-薄荷精油复配剂和柠檬精油-薄荷精油复配剂对黑腐皮壳菌的抑制作用比各单剂强,其EC₅₀分别为75.04、96.74 mg/L,SR分别为2.30、2.11,均大于1.5,表现为增效作用。同时,松树油-柠檬精油复配剂对链格孢苹果专化型菌的抑制作用也比各单剂强,其EC₅₀为122.02 mg/L,SR为2.10...     

42种药用植物甲醇提取物对番茄灰霉病菌抑菌活性的研究

运用菌丝生长速率抑制法测定了42种植物甲醇提取物对番茄灰霉病的抑菌活性。试验结果表明,心籽绞股蓝、海南五针松、水马桑3种植物提取物对番茄灰霉病菌的抑菌作用较好,在5mg/mL浓度下抑制率分别为83.68%,76.21%,60.88%;并进一步测定心籽绞股蓝、海南五针松及水马桑对番茄灰霉病的毒力,其EC50分别为1.000mg/mL,3.275mg/mL及5.050mg/mL。心籽绞股蓝表现出对番茄灰霉病菌有较好的抑制作用,但其抑菌活性成分还需进一步深入研究。     

几种杀菌剂对葡萄灰霉病的抑制效果研究

研究了依天得、依天得Ⅰ号、依天得Ⅱ号、依天得Ⅲ号、多抗霉素B、多菌灵50%可湿性粉剂对葡萄灰霉菌的抑制效果。结果表明:多抗霉素B 800~2 000倍液、依天得和依天得Ⅲ1 000~2 000倍液、依天得Ⅰ号1 000倍液、依天得Ⅱ号500倍液、50%多菌灵800倍液均能完全抑制灰霉菌的生长;依天得、依天得Ⅰ号和依天得Ⅲ号,随着溶液浓度的降低,对灰霉病的抑制作用逐渐降低;多菌灵和依天得Ⅱ号,随着溶液浓度的降低,对灰霉病的抑制作用无明显变化。     

发酵沼液对黄瓜灰霉病抑制机理研究

进行发酵沼液对黄瓜灰霉病抑制机理研究,试验结果表明,发酵沼液在室内对黄瓜灰霉病菌有很好的抑制作用,且对灰霉病菌孢子形成及萌发有较强的抑制作用,镜检观察到发酵沼液造成灰霉病菌菌丝发生断裂、扭曲、分枝增多,产生的分生孢子数量明显少于对照。结合药前、药后的病情指数分析得出,发酵沼液在田间只减缓了黄瓜灰霉病发病进程,并未起到一定的控制作用。     

番茄灰霉病拮抗细菌的筛选与X-75菌株鉴定

采用琼脂平板扩散法筛选对番茄灰霉菌具有拮抗作用的细菌,经过对200株分离自土壤的细菌菌株进行初筛、复筛后,得到了1株具有较高拮抗活性的菌株X-75。对该菌株进行形态观察和生理生化特征分析,初步将其鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.),将其16SrDNA序列与GenBank中已知标准菌株的16SrDNA序列进行比对,并用Neighbor-joining方法构建X-75菌株进化树,结果表明,X-75与标准菌株AB245422 Bacillus velezensis聚于同一分支,同源性最高,达99.93%;利用番茄离体叶片对X-75菌株的防效进行初步检测,结果表明X-75菌株对番茄灰霉病菌具有明显的拮抗作用。     

辽宁省番茄灰霉病菌对烯肟菌酯的敏感性检测

从辽宁省不同地区尚未使用过甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的保护地采集番茄灰霉病菌,分离获得代表性菌株113株。采用菌丝生长速率法测定各菌株对烯肟菌酯的敏感性。试验结果表明,不同地区的番茄灰霉病菌对烯肟菌酯的敏感性差异不显著;辽宁省番茄灰霉病菌对烯肟菌酯的敏感基线为6.263 4μg·ml~(-1)。     

污水中西葫芦灰霉病拮抗细菌的分离与应用

从污水中分离得到89株细菌,筛选出对西葫芦灰霉病菌(Botrytis cinerea)有拮抗作用的生防菌株50株,占分离菌株的56.2%,其中拮抗菌株6株,占分离菌株的6.7%.同时测试了拮抗菌株及其无菌培养滤液对西葫芦灰霉病菌菌落生长的作用.结果表明:拮抗菌株对西葫芦灰霉病菌菌落生长有很强的抑制作用,抑制率在67.04%～78.51%之间,其中XTB-37的抑菌带高达12.33 mm;拮抗菌株的无菌培养滤液对灰霉菌生长的抑制率在44.94%～67.42%之间,与抑菌带的大小成正比.     

3种植物免疫诱抗剂对番茄灰霉病菌的抑制作用

为明确植物免疫诱抗剂对番茄灰霉菌的抑菌效果,选用3%氨基寡糖素水剂、0.5%几丁聚糖水剂和1%香菇多糖水剂3种常规植物免疫诱抗剂,分别配制高、中、低3个浓度,采用含药培养基的方法开展室内抑菌试验,明确3种植物免疫诱抗剂相应最佳抑菌浓度后,在番茄生育期开展田间诱导抗灰霉病试验。室内抑菌试验结果表明：3种植物免疫诱抗剂均可抑制番茄灰霉菌的生长,其中,1%香菇多糖水剂对番茄灰霉病菌具有较好的速效性和持效性,1%香菇多糖水剂20倍液接菌1d后的抑菌率为36.1%,4d后抑菌率为67.43%;3%氨基寡糖素水剂抑菌效果次之,3%氨基寡糖素水剂100倍液接菌1d后抑菌率为22.1%;0.5%几丁聚糖水剂抑菌效果相对较低,抑菌率维持在0.0%～14.3%。田间诱导抗病试验结果表明：0.5%几丁聚糖水剂200倍液对番茄灰霉病具有较好的诱抗效果,连续施用4次后,番茄灰霉病防效达61.83%。     

氟吡菌酰胺与啶菌噁唑混配对灰葡萄孢的联合毒力

采用菌丝生长速率法测定了氟吡菌酰胺与啶菌噁唑不同配比(质量比2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4)混配对灰葡萄孢XSZH1的联合毒力,以及最佳增效配比对XSHF6、XSHF2、17RC12和XSHF7等4株灰葡萄孢的联合毒力,并在田间验证了最佳组合对番茄灰霉病的防治效果。结果显示,氟吡菌酰胺与啶菌噁唑以质量比2∶1和1∶4混配时,对灰葡萄孢XSZH1具有毒力增效作用,前者的增效作用最明显,增效系数为1.69。氟吡菌酰胺与啶菌噁唑以质量比2∶1混配时对其他4株灰葡萄孢菌株也显示出毒力增效作用,且在田间有效剂量为150～250g·hm-2时,对番茄灰霉病的防治效果为80.50%～90.13%。可见氟吡菌酰胺与啶菌噁唑以质量比2∶1混配可以有效地控制番茄灰霉病,适合在田间应用推广。     

抗番茄灰霉病菌的内生短短芽孢杆菌W4菌株发酵条件优化

为提高内生短短芽孢杆菌（Brevibacillus brevis）W4 菌株发酵液对番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）的抑菌活性,采用单因素试验与正交试验设计相结合,优化发酵培养基及发酵条件。结果表明,最佳发酵培养基为蛋白胨 2.0%、果糖 1.0%、NaCl 0.25%;最佳发酵条件为初始pH 8.0、接种种龄20 h、接种量5%、装液量50 mL（250 mL 三角瓶）、发酵温度35 ℃、摇床转速150 r·min^-1、发酵时间24 h。产生的发酵液稀释25 倍对番茄灰霉病菌的抑制率达92.8%,比未经优化得到的发酵液提高26.9 个百分点。通过培养基和发酵条件优化,显著提高了短短芽孢杆菌W4 发酵液活性,为进一步提取分离抗番茄灰霉病菌的活性成分奠定了基础。