广东省H1和H3亚型猪流感病毒抗体血清学调查

为了解广东省规模化猪场H1和H3亚型猪流感病毒的流行情况,采用ELISA检测方法对采集于广东省14个市的28个规模化猪场的1 015份猪血清进行H1亚型和H3亚型猪流感病毒的抗体检测。结果表明,H1亚型抗体总阳性率为40.9%,猪场阳性率高达92.9%(26/28);H3亚型抗体总阳性率为16.8%,猪场阳性率为78.6%(22/28)。其中粤西和珠三角地区H1亚型抗体阳性率分别为49.6%和45.4%,H3亚型抗体阳性率分别为14%和20.8%;而粤东和粤北地区H1亚型抗体阳性率分别为2.7%和12%,H3亚型抗体阳性率分别为6.3%和0。说明在广东省被调查的猪场中,H1和H3猪流感病毒的感染较为普遍,其中H1型感染率高于H3型。广东省SIV流行情况存在明显的地域性差异。     

部分猪场H1和H3亚型猪流感的血清学调查

为了解中国部分省市规模化猪场H1和H3亚型猪流感病毒的流行情况,采用血凝抑制试验对采集于广东、湖南、河南省12个市县28个规模化猪场的799份血清进行H1和H3亚型猪流感病毒的抗体检测。结果表明,H1亚型抗体阳性率在0~83.33%之间,猪抗体总阳性率为46.18%(369/799),猪场阳性率为89.29%(25/28)。H3亚型抗体阳性率在0~100.00%之间,猪抗体总阳性率为61.33%(490/799),猪场阳性率为85.71%(24/28)。广东、湖南和河南地区H1亚型抗体阳性率分别为48.91%、40.26%和50.67%,H3亚型抗体阳性率分别为58.55%、70.78%和78.67%。在被调查的上述3个地区的猪群中,H1和H3亚型猪流感病毒的感染较为普遍,其中H3亚型感染率高于H1亚型,且各地区猪流感病毒的流行情况存在地域性差异。     

H9N2亚型流感病毒对商品代肉雏鸡免疫系统的影响

对H9N2亚型流感病毒感染商品代肉雏鸡免疫器官的病理组织学变化进行了系统研究。结果显示,感染H9N2后胸腺、法氏囊、脾等均表现不同程度的病理学损伤;人工感染H9N2亚型流感病毒后,用新城疫(ND)疫苗免疫,其ND的HI抗体滴度较对照组有所下降,说明H9N2可对雏鸡造成严重的免疫抑制。     

鸭源H9N2亚型流感病毒NS基因的克隆及表达

根据GenBank中收录的H9N2亚型流感病毒的NS基因序列设计合成了1对引物NSU／NSL，利用RT—PCR扩增出了H9N2株NS基因；将该基因片段克隆到pMD18-T载体上，并对所得到的重组质粒进行酶切分析及序列测定。结果，获得了NS基因片段的阳性重组子，扩增的NS基因包含NS1基因完整的阅读框架和部分NS2基因，其序列与GenBank中收录的其他分离株NS基因比较，同源性达96％～99％。再将克隆的NS基因插入到原核表达载体pET-28a后，转化E．coli BL21(DE3)感受态细胞，在IPTG诱导下获得了预期的蛋白表达，所表达蛋白质的分子质量约为30ku。     

东莞市茶山镇猪群H3亚型猪流感病毒感染的血清学调查

由于猪流感病毒和人流感病毒在猪和人之间可以交叉感染和传播,因此对猪流感进行血清学调查具公共卫生意义。本实验对本镇6个村90份非流感免疫猪血清样本用HI的方法进行检测,结果表明H3亚型SIV的感染率较高,应当进一步加强本地区防疫工作。     

石河子垦区规模猪场H1N1亚型猪流感血清学调查

为了解石河子垦区规模猪场猪流感病毒H1N1亚型(SIV)感染情况,采集石河子垦区6个规模猪场血清,采用血清学方法进行HIN1亚型猪流感病毒抗体检测,同时调查混合感染情况。结果:186份血清样品H1N1亚型SIV抗体阳性率为27.42%(51/186),6个猪场感染阳性率为50%(3/6);51份阳性血清中,82.35%(42/51)感染了猪肺炎支原体(Mhp),80.39%(41/51)感染了猪圆环病毒2型(PCV2),29.41%(15/51)感染了猪胸膜肺炎放线杆菌(APP),50.98%(26/51)感染了副猪嗜血杆菌(HPS),62.74%(32/51)感染了猪链球菌2型(SS2)。说明垦区部分规模猪场存在H1N1亚型SIV感染情况,且混合感染情况比较严重。     

中国猪源HSN1和H9N2亚型流感病毒的分离鉴定

猪是禽流感病毒"禽-猪-人"传播链中重要的中间宿主,了解猪流感的疫情动态将为动物流感及人流感的疾病预测及防制提供重要依据.1999～2001年间进行的血清学和病毒学监测发现我国猪群存在大范围的H1和H3亚型猪流感感染(李海燕等,2002).2002～2003年,我们进一步对来自全国14个省市的1936份血清进行了H9亚型猪流感的检测,同时在广东、福建等省进行了H5亚型猪流感的检测.2002年辽宁、广东、山东及重庆猪血清中出现H9亚型流感抗体,阳性率分别为7.3%、6.8%、5.1%和1.6%.2003年采集的猪血清H9亚型流感抗体均为阴性,同时发现广东、福建两省2003年出现H5亚型流感阳性猪群,阳性率分别为4.7%和8.2%.从2001～2003年收集和送检的样品中分离鉴定了6株H9N2亚型和2株H5N1亚型猪流感病毒,部分序列分析发现H9和H5亚型猪流感病毒均与我国分离的禽流感病毒高度同源.本研究进一步确证了我国猪群中存在H9N2亚型流感病毒,并且首次发现我国猪群已出现H5N1亚型流感病毒,为人类流感及动物流感的防制敲响了警钟.对这两个亚型流感病毒所具有的公共卫生和兽医公共卫生危害性应予以高度重视.     

H9N2亚型A型流感

A型流感病毒能引起各种鸟类、低等哺乳动物和人类的疾病。禽流感(AI)自1878年在意大利首次发现至今，由于候鸟的迁徙和国际间贸易的日益频繁，使得该病呈全球性分布，给养禽业造成巨大的经济损失。1997年“香港禽流感”表明，AI已对人类的健康造成了潜在的威胁。流感病毒(IV)血清亚型繁多，自从1966年Homme等人首次报道从火鸡中分离出H9N2亚型A型IV以来、陆续从鸡、野鸡、鸭、鸽子和鹌鹑中分离到该亚型AIV。除禽和人以外，还从其它动物中分离到。     

H7和N9亚型及A型流感病毒多重荧光定量RT-RCR检测方法的建立

为同时检测H7亚型、N9亚型和A型流感病毒,本研究根据流感病毒H7 HA、N9 NA以及M基因序列分别合成3对引物和3种荧光素标记的探针,建立了多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法.特异性试验结果显示,仅H7亚型和N9亚型病毒分别在FAM和JOE通道监测到荧光信号,而所有A型参考流感病毒株均可获得Cy5荧光信号,此外其他相关的禽源病毒检测结果均为阴性.同时,以H7N9亚型病毒RNA为模板建立了标准曲线,检测H7 HA、N9 NA以及M基因的R2值均为0.999,最低检出量均为35.4 EID50/mL.批内和批间试验的变异系数均小于1.48％.利用该方法对1 072份临床样品(咽喉和泄殖腔拭子)检测,H7N9亚型和A型流感病毒分别检出7份和23份.该方法可以有助于H7N9亚型和A型流感病毒的快速检测及鉴定.     

蛋鸡饲养需防H9亚型禽流感

禽流感是由A型流感病毒引起的一种急性、高度接触性传染病。依照毒力来划分可分为高致病性的禽流感（包括H5亚型和H7亚型）和低致病性的禽流感（主要是H9亚型）。自从2004年初我国首次报道发生地亚型禽流感以来，人们的目光都聚焦在地亚型禽流感对养禽业的危害以及它对人类健康构成威胁方面进行大量的报道。实际上，出亚型禽流感对蛋鸡业的影响也是非常大的。下面就H9亚型禽流感导致鸡发病的流行病学、临床症状、主要病理变化、临床诊断以及所要采取的综合防制措施做一介绍。     

汉中市雏鸡群H9亚型禽流感病毒和新城疫病毒混合感染的血清学诊断

2011年1月至5月陕西省汉中市3个县区20日龄～40日龄的雏鸡群发生了12起疫情,给养殖场(户)造成了很大损失。为明确疫病的分布和流行特点,通过流行病学调查分析、血清学检查,确诊为低致病性H9亚型禽流感和典型新城疫混合感染。     

我国H9N2亚型流感病毒的研究进展

猪流感(SwineInfluenza,SI)是由正粘病毒科流感病毒引起的一种急性,高度接触传染性的群发性猪呼吸道疾病,是猪的主要免疫抑制病之一。临床以突发、高热、咳嗽、呼吸困难、衰竭、高发病率、低死亡率为特征,单纯SI的病理变化主要表现为病毒性肺炎及其他呼吸器官的炎性变化,但有其他病原继发或混合感染时,病理变化会严重而复杂。1918年美国首次报道了SI。1930年Shope首次分离鉴定了经典HlNl亚型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)。SIV具有生态学的特殊性和非常重要的公共卫生意义。每次人流感新变异株出现并引起人流感暴发流行前后…     

两株H9亚型鹅流感病毒的分离和鉴定

禽类流感病毒（Avian influenza viruses）与人类流感病毒都属于正黏病毒科，二者关系密切。一方面，禽流感病毒为20世纪暴发的3次人类流感大流行提供丁所必需的基因。另一方面，禽流感病毒也可以直接感染人。例如：1997年香港和2004年初的泰国、越南H5N1亚型禽流感导致多人死亡。H9亚型流感病毒1966年首次从北美的火鸡分离。H9亚型禽流感虽然尚未有导致人类死亡的报道，但是该亚型病毒对动物和人的威胁正在增加。     

山东猪流感病毒H9N2亚型毒株的分离鉴定

近年来春秋和冬季在山东各地猪场不断出现疑似猪流感的呼吸道疾病 ,2002年10月到2003年2月 ,我们从山东发病猪场采集发病猪的鼻咽棉拭子和死亡猪的肺脏 ,接种SPF鸡胚 ,获得血凝性稳定且血凝价较高的尿囊液样品58份 ,对其中10个样品的亚型进行鉴定 ,并将具有代表性的一株病毒的血凝素全基因及其它基因进行了测序与分析。1检测与鉴定方法1.1SPF鸡胚、小白鼠分别由山东齐鲁制药厂和泰安生物制品厂提供。1.2疑似猪流感病猪样品的采集2002年10月 -2003年2月 ,从山东的济宁、宁阳、莘县、邹城、莱芜、梁山、莒南等地对疑似猪流感病例进行诊断 ,…     

广西猪源H9N2亚型流感病毒的分离与鉴定

用SPF鸡胚从广西地区猪群中分离到1株H9N2型猪流感病毒(SIV),经鸡胚接种3代后出现稳定的鸡血红细胞凝集效价为27,且凝集性能被H9亚型阳性血清抑制,而不被其他亚型流感病毒阳性血清所抑制.分离株的HA基因及NA基因扩增结果显示,该毒株HA基因与流感病毒H9亚型同源性最高,NA基因与流感病毒N2亚型同源性最高,说明...     

禽流感病毒H9亚型灭活油乳剂疫苗的免疫试验

以低致病性禽流感病毒（AIV）H9N2亚型株的鸡胚适应毒经尿囊腔接种10日龄鸡胚，从24h后死亡胚及96h后4℃致冷死亡胚收集尿囊液，尿囊液的血凝价约7log2，每毫长约含10^8.6个ELD50的病毒。将尿囊液经0.1%福马林灭活后，用超滤器将尿囊液浓缩5倍后分别制成双联灭活疫苗。对4周龄SPF鸡肌肉注射0.5ml或0.3ml单联H9亚型AIV灭活苗，在接种后2、3、4、5周后，血清中对H9亚型AIV的血凝抑制（HI）抗体效价分别是5.1、7.2、8.3、10log2或3.8、6.5、6.3、8.31log2。注射0.5ml的H9亚型AIV和NDV二联油乳苗的鸡，在接种后2、3、4、5周对H9亚型AIV及Lasota株NDV的HI滴度分别是4.6、5.6、6.7、8log2及7、7.6、6.7、7log2。显然，二联苗对H9亚型AIV及NDV均产生了理想的免疫效果。     

中国H3亚型流感病毒生态学与分子进化的研究

病毒生态学与分子进化是一门新兴的学科，研究病毒在各种环境中的关系，可以为今后病毒的研究与防治奠定基础。本研究首次详细对我国14株鸭、鸡等禽流感和马、猪等动物的流感病毒的生态学与分子进化进行了分析研究，初步摸清了这些病毒在我国的流行与进化情况，为今后流感病毒疫苗的应用奠定了理论基础，并为今后的H3或其它亚型流感病毒的研究与防制提供了理论基础。     

陕西省榆林市某县规模鸡场H7亚型流感血清学调查与风险因素分析

为了解H7亚型流感在规模鸡场的血清学流行率、分布情况和风险因素,2017年4—5月,以陕西省榆林市某县存栏大于500羽的267个规模鸡场为研究对象,采取两阶段抽样方法,对该县144个规模场开展了血清学检测和问卷调查。结果显示:该县规模鸡场H7亚型流感表观流行率(HPA)为13.89%(95%CI:8.69%～20.63%);阳性区域相对集中,20个血清学阳性场中,有11个分布在2个镇。单因素分析显示:"本场人员到过其他禽场""有外来车辆进入本场"2个因素具有统计学意义。针对上述2个风险因素,建立的多因素回归分析模型的拟合度较好,ROC曲线下面积为0.714(95%CI:0.585～0.843)。结果提示,规模鸡场要严格控制场间的人员流动,外来车辆进入本场时要做好消毒。     

H9N2亚型流感病毒血凝素受体结合区定点突变株拯救及其受体亲和性鉴定

利用重叠PCR技术对H9N2亚型流感病毒Y280亚系毒株A/Chicken/Jilin/DH102/2012(H9N2)的血凝素受体结合区220-loop中相对保守的226位和227位进行了氨基酸置换,并通过反向遗传技术拯救了定点突变病毒。固相酶联试验结果显示:226位为L时,病毒偏嗜结合人型受体;226位为Q时,病毒偏嗜结合禽型受体;226位为M时,病毒同时具有与2种类型受体结合的能力,但偏嗜结合人型受体;227位为Q或M时,病毒均偏嗜结合人型受体。因此,相比于227位,Q226L突变足以改变病毒的受体偏嗜性。由于近年来90%以上的H9N2病毒分离株HA226位氨基酸都是L,推测226L是H9N2病毒感染哺乳动物的重要位点。