猪源肠道优良乳酸杆菌的筛选

1材料与方法 1．1试验材料 1．1．1乳酸杆菌 由实验室从猪肠道分离、鉴定和保存，共10株，分别编号为L01、L02……L10。     

云南猪源乳酸杆菌的分离鉴定

为了进一步挖掘猪源益生菌资源,从屠宰场采集猪小肠样品共分离到15株猪源乳酸菌,分别命名为LP1~LP15。根据培养特性、革兰染色、生理生化特性等鉴定为6个种。16S-rRNA同源性分析表明,LP1~LP8为约氏乳杆菌,与约氏乳杆菌同源性分别为98.1%,98.1%,97.9%,97.5%,98.6%,99.6%,98.7%和97.5%;LP9-LP11为罗伊氏乳杆菌,与罗伊氏乳杆菌同源性分别为98.2%,98.7%和98.0%;LP12-15分别为嗜酸乳杆菌、鼠乳杆菌、敏捷乳杆菌和嗜淀粉乳杆菌,其中LP12与嗜酸乳杆菌同源性为97.4%,LP13与鼠乳杆菌的同源性为97.8%,LP14与敏捷乳杆菌的同源性为98.1%,LP15与嗜淀粉乳杆菌的同源性为100%。     

猪源乳酸杆菌的安全性及抗逆性评价

对本实验室自行分离自猪肠道的3株乳酸杆菌进行安全性和抗逆性检测,采用体外法对分离自不同生理阶段猪(仔猪、生长肥育猪、母猪)肠黏膜和食糜的罗伊乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LA5、植物乳杆菌(L.plantarum)L47和约氏乳杆菌(Ljohnsonii)L63进行生长特性、溶血性、有害代谢产物、...     

鸡源乳酸杆菌优良菌株的筛选

乳酸杆菌是鸡肠道中的最优势菌群之一,对维持机体的健康起着重要的作用。随着人们对抗生素等药物危害的认识和对健康意识的增强,以及适应国际市场的要求,微生物作为活菌制剂添加到饲料中越来越受到专家和学者的认同。而乳酸杆菌是国际上允许添加的研究的最早和最深入的菌种,但大多数乳酸杆菌都存在对外界环境的耐受能力差的缺陷,作为有效的微生物添加剂必须能够通过胃肠中的低pH值和较高浓度的胆盐环境才能发挥其生物学功能。本研究就是根据这些特点对本试验室保存的乳酸杆菌进行筛选,并探讨了它们对致病性大肠杆菌和沙门氏菌的拮抗能力,从…     

猪源乳酸杆菌的分离鉴定及生物学特性分析

乳酸杆菌制剂可以替代抗生素,用于预防和治疗细菌性腹泻。为获取可作为微生态制剂的候选菌株,从健康仔猪肠道分离到5株乳酸杆菌,经抑菌试验、生长曲线测定、耐酸、耐胆盐、耐胰酶试验等,筛选到1株对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌有较好的抑制作用,对低pH值、高胆盐、胰酶均有一定耐受能力的乳酸杆菌,命名为LY7。经PCR鉴定,该菌株为约氏乳杆菌。     

猪源乳酸杆菌的分离鉴定及体外抑菌试验

为了获得用于研制微生态制剂的乳酸杆菌菌株,从健康仔猪小肠中利用MRS固体培养基分离得到一株革兰氏阳性杆菌,通过培养特性、染色特征、菌落形态以及生化鉴定结果,初步判定该菌株为乳酸杆菌,再结合16S rDNA分子鉴定进一步确定该菌株为乳酸杆菌。牛津杯法体外抑菌试验结果显示,该菌对致病性大肠杆菌的抑菌效果较好,可以作为微生态制剂的保存菌种。     

猪源乳酸杆菌的分离及API系统快速鉴定

健康仔猪肠道存在正常微生物群（normal microbiota）,主要是通过产道时获得了母体的微生物,并在生长环境中进一步接触了各种微生物,经过相互适应和选择,一些特定的微生物在肠道内定植。研究显示,新生仔猪出生24h胃肠内已定植了乳酸杆菌、双歧杆菌、肠球菌、大肠杆菌、消化球菌、拟杆菌和酵母等,8～22日龄时形成以乳酸杆菌、双歧杆菌、拟杆菌、大肠杆菌和消化球菌为优势菌的定型菌群。     

猪源乳酸杆菌对仔猪肠道微生物的影响

从猪的新鲜粪便中培养分离获得的三株乳酸杆菌对常见的病原性菌大肠杆菌、猪霍乱沙门氏菌和金黄色葡萄球菌具有一定的抑菌作用。动物接种试验证明,试验分离获得的猪源乳酸杆菌饲喂动物安全,符合益生菌的条件,可以作为益生菌添加到饲料中。在试验中发现,猪源乳酸杆菌和EM菌都有促进仔猪生长发育、提高生产性能、降低发病率和死亡率的作用。在调整仔猪肠道菌群方面:试验各组效果较对照组差异均显著<0.05)。试验二组的效果最好:在增加乳酸杆菌方面,比试验一组高18.5%,比试验四组高12.5%;在减少大肠杆菌方面,比试验二组高6.25%,比试验四组高6.25%;在增加肠道细菌总数方面,比试验一组高37.5%,比试验四组高37.5%。所以,本试验从猪体内获得的乳酸杆菌安全性良好,对改善仔猪肠道环境具有一定的作用。     

猪源乳酸杆菌对永生化猪小肠上皮细胞的黏附性能

以永生化猪小肠上皮细胞ZYM—SIEC02为体外模型,通过革兰染色法、平板计数法等检测发酵乳杆菌Y091231（Lactobacillus fermentation）、乳酸乳杆菌Y091221（Lactobacillus lactis）,嗜酸乳杆菌Y224031（Lactoba-cillusacidophilus）的黏附性能及对大肠杆菌C83921、致病性沙门菌、金黄色葡萄球菌CVCC2258的黏附抑制作用。结果显示,3株菌对永生化猪小肠上皮细胞的黏附性均较强,黏附指数平均为：Y091231（2903．25±83．33）个／100cells、Y091221（2320．37±81．02）个／100ceils、Y224031（I965．43±37．72）个／100cells,菌株之间差异不显著（P〉0．05）。黏附抑制试验结果显示,Y091231对大肠埃希菌C83921和金黄色葡萄球菌CVCC2258的黏附抑菌能力最强（（99．4±3．17）％和（98．0±2．31）％）,Y091221对沙门菌的抑菌能力最强（（97．1±2．04）％）,Y224031对大肠埃希菌C83921比对另外2种致病菌的黏附抑制能力高,但又显著低于Y091231和Y091221（P〈0．05）,表明不同种乳酸菌对致病菌的黏附抑制作用具有菌种特异性。     

猪源乳酸杆菌对仔猪某些疾病的影响研究

从猪的新鲜粪便中培养分离获得的3株乳酸杆菌对常见的病原性大肠杆菌、猪霍乱沙门氏菌和金黄色葡萄球菌具有一定的抑菌作用。，动物接种试验证明，试验分离获得的猪源乳酸杆菌饲喂动物安全，符合益生菌的条件，可以作为益生菌添加到饲料中，在试验中发现，猪源乳酸杆菌和EM菌都有促进仔猪生长发育、提高生产性能、降低发病率和死亡率的作用,试验各组都有不同程度的降低发病率和死亡率的作用，其中试验2组和试验4组与对照组相比差异极显著（P〈0．01）；在降低发病率上分别比对照组高27．5％和22.5％；在降低死亡率上分别比对照组高15％和10％，所以，该试验结果表明：从猪体内获得的乳酸杆菌安全性良好，对减少疾病发生方面具有一定的作用     

一株猪源嗜酸乳酸杆菌生物学特性的研究

<正>1材料与方法1.1生长曲线MRS肉汤培养基:蛋白胨10g,牛肉浸膏10g,酵母浸粉5g,磷酸氢二钾2g,枸椽酸二铵2g,葡萄糖20g,七水硫酸镁0.58g,四水硫酸锰0.25g,乙酸钠5g,蒸馏水1000mL,在500mL的锥形瓶里装     

猪源乳酸杆菌齐市地方株的分离与种属分析

为了分离出可用于研制猪用微生态制剂的乳酸杆菌菌株。选择齐齐哈尔市龙江县,甘南县,富裕县及泰来县等地区相关猪场,采集21～35日龄健康仔猪肠道粪样15份。选用MRS琼脂培养基分离培养乳酸杆菌,通过分离菌株的形态特征和培养特性筛选出革兰氏阳性,厌氧,无芽孢杆菌16株。再通过生理生化鉴定法,确定5株为乳酸杆菌。其中,嗜酸乳杆菌2株,植物乳杆菌2株,干酪乳杆菌1株。     

具有益生潜力的乳酸杆菌筛选

以分离自西藏、新疆、青海地区传统自然发酵样品中的30 株可用于食品中的乳酸杆菌为研究对象,以鼠李糖乳杆菌LGG为对照,经耐酸、耐胆盐、疏水作用、静电作用和自聚能力评价,初步筛选获得16 株乳酸菌,对初筛优良菌株进行模拟胃液和模拟肠液耐受性实验。结果表明：4 株菌在模拟胃液中孵育60 min存活率大于14.44%,4 株菌在模拟胃液中孵育30 min存活率为3.91%～100.00%;16 株菌在模拟肠液中孵育5 h存活率为31.73%～112.83%;菌株Z-1为最佳抗性菌株,在模拟胃液中孵育60 min存活率为93.07%,在模拟肠液中孵育5 h存活率为106.5%,疏水率为97.52%,对氯仿和乙酸乙酯的静电作用率为97.35%和24.67%,自凝聚率为11.26%。     

玉米提取物对4株猪源乳酸杆菌耐酸能力的影响

采用模拟胃酸环境,探讨玉米提取物对4株猪源乳酸杆菌耐酸性能的影响。结果表明:在pH2.5模拟胃酸环境中处理3h,约氏乳酸杆菌(L.johnsonii)JJB3、SNZ10,罗伊氏乳酸杆菌(L.reutert)MNZ8、KNZ4分别经90min、30min、60min、30min完全失活;添加玉米提取物后,4株乳酸杆菌在pH2.5模拟胃酸环境中处理3h后,活菌数均未有显著变化,成活率达97.37%～100%。进一步的单因子分析表明,葡萄糖浓度增加可显著提高乳酸杆菌的耐酸性,游离氨基氮含量对乳酸杆菌成活率几乎无影响。结果证明,玉米提取物对4株乳酸杆菌耐受模拟胃酸环境具有很好的保护作用,可用作提高乳酸杆菌制剂成活率的过胃保护剂。     

筛选乳酸杆菌优良菌株的研究

作为抗生素的可能替代品，益生素日益引起人们的重视。目前我国已有不少益生素饲料添加剂产品投放市场，但无论是产品本身质量，还是使用效果仍不尽如人意，归纳起来主要有以下几方面：１）受环境条件（温度、水分、酸碱度等）的影响，益生素产品中的活菌在生产、运输中易失活，从而降低使用效果；２）加工的高温过程，使大量的活菌有效成分失活；３）饲料中添加的或在治疗过程中使用的抗生素和化学合成抗菌剂，对益生菌同样具有杀灭或抑制作用；４）进入消化道后不能有效抵抗胃酸、胆盐等的作用，无法长时间定植肠道发挥其功效；５）对动物…     

6株猪源乳酸杆菌的分离鉴定与生物学特性研究

本研究从健康乳猪肠道分离筛选出6株乳杆菌,所选菌株均能耐受浓度为0.8%~1.0%的牛胆盐,对pH3.0的酸度有较强的抵抗力,对60℃高温环境有较强的耐受性,其代谢产物对含有K88、987P、F41粘附因子的3株致病性大肠杆菌均有抑制作用,对小白鼠无致病性,具备益生菌的基本条件,为研究与开发微生态制剂奠定了基础。     

猪传染性胃肠炎病毒感染相关猪源miRNA的筛选及表达差异分析

经生物信息学预测发现猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)3′UTR可能是ssc-miR-182的潜在作用位点,本研究以猪传染性胃肠炎病毒为研究对象,构建TGEV 3′UTR双荧光素酶报告基因载体,并将其与合成的ssc-miR-182模拟体瞬时共转染至猪小肠上皮细胞,通过荧光监测仪测定荧光素酶活性;同时通过荧光定量PCR方法检测TGEV感染猪小肠上皮细胞后在不同时间段ssc-miR-182的表达变化情况。研究结果显示,ssc-miR-182对TGEV 3′UTR有一定的抑制作用,并且TGEV在感染小肠上皮细胞以后ssc-miR-182的表达明显上调。结果表明,宿主ssc-miR-182与TGEV的感染和复制增殖相关。     

猪源益生菌的分离筛选及部分生物学特性研究

经形态、染色特性观察,从健康仔猪肠道分离出5株杆菌、1株链球菌及3株芽孢杆菌,初次筛选出产酸及抑菌效果好的杆菌、芽孢杆菌各2株,链球菌1株,经生化鉴定为乳酸杆菌2株,乳酸链球菌1株,地衣芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌各1株,对其进行了耐酸、耐胆汁及动物安全性试验。结果表明,筛选菌株有较强的产酸、耐酸及耐胆汁特性,对常见肠道致病菌抑制作用明显,动物使用安全,可作为猪用益生素制剂的候选菌种。     

猪源性芽孢杆菌的筛选与鉴定

为从滇南小耳猪的粪便中分离筛选到有良好益生特性的芽孢杆菌,笔者首先从猪粪样中高温初筛芽孢杆菌,分离纯化后再进行耐酸、耐胆盐、耐高盐、抑制致病菌等实验,利用生理生化特征和16S rDNA的序列分析技术对菌株进行菌种鉴定。从滇南小耳猪粪便中所分离到的1、6、7号菌株为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌,具有耐酸、耐胆盐、耐高盐、抑制有害菌生长等特性,对当地埃希氏大肠杆菌有一定抑制作用。本实验所筛选到的3种芽孢杆菌具有进一步开发为益生菌的可能性,为进一步研究该类细菌的生物学特性等奠定了基础。