顶体反应的结构变化及影响顶体完整率因素初探

综述了不同动物的精子发生顶体反应时顶体的结构变化,研究者对此不同的观点,影响顶体完整率的四种因素:冷冻,抗精子抗血清,培养液,磁场.     

公牛冻精顶体完整率检测方法比较

本试验采用二种方法进行牛冻精顶体完整率的检测。结果表明,二种方法观察顶体效果均较好;方法１（常规方法）固定和染色时间为１０５ｍｉｎ,而方法２仅为３５ｍｉｎ。     

精子活率与精子完整率和质膜完整率的相关性分析

采用考马斯亮蓝（R250）染色法和低渗膨胀试验（HOST试验）检测精子顶体反应和质膜完整性,以检测和评价这2种方法在猪精液质量检测中的实际应用价值。结果表明,冷冻复苏后,精子活率为37.97%,精子平均速度为55.72μm/s,顶体完整率和质膜完整率分别为51.01%和39.95%。经相关性分析得出,猪精子顶体反应率和质膜完整性与精子活率相关系数为0.904 0和0.817 6,呈显著相关（P〈0.01）,而精子的平均游动速度与顶体反应率和质膜完整性相关系数为-0.056 2和-0.151 8,无明显相关性（P〉0.05）,精子活率与精子平均游动速度间也无明显相关性（P〉0.05）。     

依葡柠解冻液对种公牛精子寿命及完整顶体率的影响

采用复方依葡柠解冻液 (EDTA 葡萄糖 柠檬酸钠 ,试验组 )与常用的单方柠檬酸钠解冻液 (2 .9%柠檬酸钠 ,对照组 )对肉用种公牛颗粒冻精进行解冻对照试验。结果显示 ,解冻后精子的复苏率 ,试验组与对照组相差不大 (P >0 .0 5 ) ;常温 (18～ 2 0℃ )和低温 (5～ 7℃ )下再贮存 ,精子的存活时间和生存指数 ,试验组高于对照组 ,且差异显著 (P<0 .0 5 ) ;解冻后在 (38± 2 )℃水浴中孵育 3h检查精子的完整顶体率 ,试验组极显著高于对照组 (P<0 .0 1)。适用于水牛的良好解冻液依葡柠 ,用做牛 (肉用牛 )的冻精解冻得到了理想效果     

透明质酸对猪精子活率,获能,顶体反应及体外受精穿透率的影响

采用具有高繁殖力的种公猪的新鲜精液及冷冻精液，加入不同获能剂咖啡因及透明质酸，在３９．５℃、５％ＣＯ２培养箱中孵化培养。结果表明，透明质酸能够在体外条件下保持精子的活率，并维持在稳定的水平，鲜精为４２．６％～４７．８％，冻精为２０．４％～２５．６％。荧光剂Ｈｏｅｃｈｓｔ染色表明，透明质酸能够显著增加培养３６０ｍｉｎ后的活精子率。在无蛋白来源的ｍＢＯ培养液中，培养０～６０ｍｉｎ，精子发生自发的获能和顶体反应，而受获能剂影响，精子发生获能的时间带在各处理组之间显著不同：咖啡因处理组的获能时间带是６０～３６０ｍｉｎ，透明质酸处理组则是６０～１８０ｍｉｎ。体外受精试验表明，去除卵母细胞周围卵丘细胞时，透明质酸和咖啡因对精子穿透率的影响没有区别；而在卵丘细胞存在的前提下，咖啡因处理组的穿透率显著高于透明质酸处理组。     

牛冻精顶体快速染色法初探

牛冻精顶体快速染色法初探郝爱玲刘彩兰姜水义阿淑艳（黑龙江省家畜冷冻精液监测中心１５００６０）韩登桥（省人才交流中心精子顶体的完整情况直接影响着受胎率的高低，甚至能造成遗传障碍。因此在进行家畜精液品质鉴定时，常把精子顶体的完整率作为重要指标之一。多年来...     

猪精液冷冻技术的研究

以解冻后的精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和人工授精结果为判定指标 ,比较了几种冷冻稀释液、解冻液及冷冻 -解冻程序对猪精液冷冻的效果 ,并对所筛选出的最佳稀释液和冷冻程序做了改进。结果如下 :(1) 号稀释液冷冻解冻后的精子活力 (32 .4± 7.3) %、活率 (4 2 .2± 3.2 ) %、顶体完整率 (6 2 .3± 0 .8) %和弯尾率 (4 2 .6± 7.5 ) %均显著高于 、 、 号稀释液 (P<0 .0 5 )。 (2 )在 号稀释液中添加 0 .5 %、1%和 2 %的 O.E.P(氨基 -钠 -十二烷硫酸酯 )使精子活率提高 5 %、弯尾率提高 6 %、顶体完整率提高近 10 % ,与对照组相比差异显著 (P<0 .0 5 )。 (3)应用改进的稀释液 ( 液加 1% O.E.P) ,细管法比颗粒法冷冻精子活率提高近 7个百分点 ,活力提高 6个百分点 (P<0 .0 5 )。(4 )室温预平衡 4h的精子活力和活率都比对照组 (0 h)有显著提高 (P<0 .0 5 ) ,而预平衡 2、6 h的精子活力和活率与对照组差异不显著 (P>0 .0 5 )。 (5 ) 号解冻液解冻后精子活力 (4 2 .9± 2 .6 ) %显著高于 、 、 号解冻液 (P<0 .0 5 )。 (6 )用 5 0℃水浴解冻精子的活力 (4 6 .3± 2 .6 ) %显著高于 39℃ (4 2 .9± 2 .6 ) %和 70℃水浴 (4 1.1± 5 .7) %解冻的精子活力 (P<0 .0 5 )。 (7)精清和 号解冻液     

用TG染色检测德国牧羊犬冷冻精子顶体形态的研究

本文用TG染色检测德国牧羊犬冷冻精子顶体的形态。根据染色结果可将精子分为四类:a.有正常顶体活精子;b.无正常顶体活精子;c.有正常顶体死精子;d.无正常顶体死精子。冷冻精液效果存在着个体差异。顶体损伤率过高是导致犬冷冻精液受胎率低的主要原因。     

磁场对低温保存牛精液的影响

将５ｍＬ稀释后的新鲜精液分为５组,每组１ｍＬ。取其中１组作为对照组,不经磁场处理,其余４组分别放入磁化杯磁化２ｈ、５ｈ、２４ｈ和一直磁化,５组均放在冰箱０－５℃的环境中保存。对其精子活率、顶体完整率和精子存活时间进行分析,试验重复１５次。结果表明,精液经过磁化可以提高活率,并且延长了存活时间,尤以磁化５ｈ效果最明显,其存活指数比对照组提高了２３．７％,差异显著。磁场能使精液的顶体完善率下降,且随着     

绵羊精液平衡过程中降温速率对精子品质的影响

本试验研究了河南大尾寒羊精液冷冻颗粒制作过程中,100、150、200和250 mL 4种不同体积水浴平衡降温速率对冻精精子品质的影响。结果表明：①4种水浴平衡处理的降温时间在2.2～3.9 h,以100 mL水浴降温速率最大,250 mL水浴降温速率最小,200和250 mL水浴处理降温速率较为接近。②精液冷冻水浴平衡降温速率前30 min,降温速率应控制在0.73～0.74 ℃/min之间;30～90 min降温速率应控制在0.11～0.12 ℃/min之间。③水浴平衡时的降温时间3 h较为适宜,250 mL水浴平衡降温的处理对精子造成的冷打击最小,制作的冻精解冻后的精子品质最高。④精子活率：250 和200 mL处理间差异不显著(P＞0.05);250、200 mL处理与150、100 mL处理间差异显著(P＜0.05)。⑤畸形率：250 mL水浴平衡条件下最低,100 mL水浴平衡条件下最高。250与200 mL处理间精子畸形率差异不显著(P＞0.05);250与150、100 mL处理间精子畸形率差异显著(P＜0.05)。⑥顶体完整率：250和200 mL较高,两处理间差异不显著(P＞0.05);250和200 mL处理与150及100 mL处理间精子顶体完整率差异显著(P＜0.05)。     

不同浓度大豆卵磷脂替代蛋黄对东佛里生奶绵羊精液冷冻保存效果的影响

本试验皆在研究添加不同浓度大豆卵磷脂（SL）冷冻保存东佛里生奶绵羊精液的效果。我们在Tris基础稀释液中,添加18%蛋黄为对照组,添加0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%SL设为试验组,检测冷冻精液解冻后的精子活率和顶体完整率。结果显示,添加0.5%、2.5% SL冷冻稀释液稀释的精液,解冻后精子活率和顶体完整率与其他组之间存在显著差异（P<0.05）;添加18%蛋黄和1%～2% SL冷冻稀释液稀释的精液,冷冻解冻后精子活率和顶体完整率之间无显著差异（P>0.05）;添加18%蛋黄和1.0%～1.5% SL冷冻稀释液稀释后的精液,进行人工授精后母羊的妊娠率与对照组无显著差异（P>0.05）。因此,大豆卵磷脂可以作为冷冻保护剂用于东佛里生奶绵羊精液的冷冻保存,其最佳添加浓度为1～2%（g／L）。     

不同处理对猪精子活率、顶体完整率、DNA含量及精清酶活性的影响

对猪全精进行稀释、保存、冷冻、冷休克处理,测定相关指标.结果表明,精液1:1稀释后,在室温(25℃)保存过程中,精子活率、顶体完整率逐渐下降,精清中GOT活性持续升高,ALP活性变化不明显,LDH活性首先于保存的第24h升高,以后下降.精液1:10稀释后,精子活率急剧降低,顶体完整率没有显著性变化;随室温保存时间的延长,两者呈下降趋势,到室温保存的第24h,除GOT活性升高外,其它两种酶活性变化不明显.精液经冷冻解冻、冷休克处理后,精子活率、顶体完整率大幅度下降,精清中GOT、LDII、ALP活性升高,并随冷休克处理时间的延长而加剧;稀释后再进行冷休克处理,各指标变化幅度减小.本试验结果还表明,猪精液DNA含量为3.14mg/10~9精子,其与精子密度呈正相关(r=0.893),试验中各种处理均未引起精子DNA含量明显变化.     

不同解冻方法对猪冷冻精液品质的影响

为优化猪冷冻精液解冻方法、提高精液利用效率,试验采用两种不同的解冻方法解冻0.5 mL猪细管冷冻精液,一种在38℃水浴直接解冻30 s(1组),另一种在50℃水浴解冻16 s后再放到30℃水浴中静置40 s(2组)。对解冻后的精液分别进行精子活力、生存时间、顶体完整率的测定和顶体形态观察。结果表明：2组解冻精液的精子活力、顶体完整率极显著高于1组(P<0.01),但两组的生存时间差异不显著(P>0.05);精子顶体形态学观察发现,两组冻精的精子顶体膨胀、缺损情况都较严重。说明与38℃慢速解冻冷冻精液相比,50℃快速解冻的猪细管冷冻精液的精子活力好而且顶体完整率高。     

微量元素对乳用公牛精液品质的影响

在原日粮的基础上，每头公牛每1d添加微量元素锌、碘和硒，可显著提高精子活力和精子顶体完整率，特别是原精活力提高了10．99％，营养剂对降低原精畸形率和提高精量也有一定的益处，但对原精密度反而有所下降。还需要进一步研究改进。     

抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响

目前,猪的人工授精以鲜精和常温保存的液态精液为主,冷冻精液在人工授精中所占的比例不足1%,由于解冻后精子复苏率较低、异常精子多、受胎率低等原因,在生产上猪的精液冷冻与牛的精液冷冻相比尚未得到普遍推广、应用。精子的冷冻处理在畜牧业上是一个重要且具有特殊优势的操作过程。提高精子冷冻技术水平,需要对配子的生理学知识和精子收集、处理过程的生化改变有更深入的了解,这些     

猪精子获能、顶体反应及冷休克对顶体酶抑制剂的影响

为了探究猪精子在获能、顶体反应及冷休克处理后对精子顶体酶抑制剂表达量的影响,以及顶体酶抑制剂在精子中何时被降解,低温是否会损伤顶体酶抑制剂,利用SDS-PAGE、Western blot分析射精精子、获能精子、顶体反应精子和冷休克精子组的总蛋白种类及猪精子顶体酶抑制剂表达量的变化。结果显示:射精精子处理组与获能精子、顶体反应精子处理组的顶体酶抑制剂表达量差异显著(P<0.05),且获能和顶体反应处理组间的差异不明显(P>0.05);射精精子与冷休克精子处理组的顶体酶抑制剂表达量差异极显著(P<0.01),且冷休克处理组的顶体酶抑制剂出现异常表达。推测:精子在获能或顶体反应期间,顶体酶抑制剂可能通过泛素-蛋白酶体途径被降解,释放出有活性的顶体酶;低温可能导致顶体酶抑制剂蛋白结构的改变或损坏,导致其表达量异常。