高效液相色谱法测定鹅肉中磺胺类药物的残留

建立了一种快速、准确测定鹅肉中磺胺类药物残留量的检测方法。采用高效液相色谱法测定鹅肉中磺胺类药物的残留,以Cloversil C18色谱柱,甲醇-1%乙酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱。柱温30℃,进样量5μL,流速0.6 mL/min,240-280nm波长紫外检测。经测定,鹅肉中含有磺胺嘧啶、磺胺甲基异噁唑、磺胺噻唑、磺胺二甲嘧啶和磺胺喹噁啉等磺胺类物质。     

高效液相色谱—紫外法对13种磺胺类药物的同步检测

本研究旨在建立同步测定多种磺胺类药物残留的高效液相色谱—紫外法。通过对磺胺嘧啶(SD)、磺胺醋酰(SA)、磺胺喹噁啉(SQ)、磺胺氯丙嗪(SUL)、磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺对甲氧嘧啶(SMD)、磺胺二甲氧嘧啶(SDM')、磺胺异噁唑(SIZ)、磺胺噻唑(ST)、磺胺噻唑钠(ST-Na)、酞磺胺噻唑(PST)、磺胺甲噁唑(SMZ)、琥珀酰磺胺噻唑(SST)等13种磺胺类药物进行紫外波长扫描分析,选择色谱检测的波长为270 nm。由于磺胺类药物的酸碱度不同及结构差异,在经过多种组合比较后,选择乙腈和乙酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱,建立的条件可将这些药物分开,13种药物可以分离得到10个色谱峰,ST-Na、PST和ST 3种成分重叠,SDM'和SMZ重叠。用乙腈—氯仿作样品提取并抽提,杂质干扰较少,回收率80%以上,分析用时相对较短。     

林芝市市售牛乳中氯霉素及磺胺类药物残留情况调查研究

通过对西藏林芝市市售牛乳中氯霉素药物残留以及市售牛乳中磺胺类药物残留情况进行调研,为提高林芝市畜产品质量并为畜产品中抗生素添加提供参考依据。对林芝市市售牛乳中药物残留用快速诊断试剂盒进行了胶体金方法检测。结果显示:林芝市市售牛乳中氯霉素以及磺胺药物残留检测结果均为阴性。上述结果说明林芝市牛奶中氯霉素及磺胺药物添加量未超标或者未添加这两种抗生素,但林芝市还是要根据各地实际情况,需要加强监测常见抗生素的添加情况,建立监测预警机制并合理在食品中添加抗生素。     

检测磺胺类7种药物ELISA试剂盒的研制

以SAs-BSA的偶联物作为抗原免疫Balb/c小鼠,制备磺胺类药物单克隆抗体。与7种磺胺药(SD、SMM、SMZ、ST、PST、SMT、SPD)有很高的交叉反应性,并建立一种可检测样品中的SAs类药物的间接竞争ELISA法。试剂盒灵敏度为2.14μg/L,对SAs类药物的回收率在56.2%～72.1%之间,变异系数均20%,研制的ELISA试剂盒可进行磺胺类药物多残留快速检测。     

不同养殖模式中禽产品药物残留情况研究

正当前,食用农产品质量安全问题已经成为社会各界关注的焦点,为了更好地指导养鸡产业,本文通过采集散养户和规模场的鸡肉和鸡肝两种禽产品,进行药物残留检测,为规范用药提供参考依据。一、材料与方法1.试验材料。河北省秦皇岛市2个肉鸡散养户收购点和3个肉鸡规模养殖场的鸡肉、鸡肝各200份。2.试验方法。(1)磺胺类检测。本实验共检测了磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲噻二唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲基异恶唑、磺胺喹恶啉7种磺胺类药物。按照GB29694–2013《动物性食品中     

HPLC法测定猪肉中磺胺类药物残留

采用HPLC测定猪肉中磺胺类药物的残留,以Cloversil C18色谱柱、甲醇-1％乙酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱,柱温30℃,进样量5μL,流速0.6 mL/min,240-280 nm波长紫外检测.测定结果表明,猪肉中含有磺胺嘧啶、磺胺甲基异噁唑、磺胺噻唑、磺胺二甲嘧啶和磺胺喹噁啉等磺胺类药物.利用HPLC法检测猪肉中磺胺类药物残留快速、准确.     

饲料中九种磺胺药物的高效液相色谱测定

本研究建立了高效液相色谱法检测饲料中9种磺胺药物的方法.将样品经乙腈提取,碱性氧化铝柱净化后,用HPLC法测定其中磺胺类药物.方法检测限在0.3～0.5 mg/kg之间;回收率在87.6%～108.7%之间,变异系数为0.3%～8.7%.本方法对饲料中磺胺类药物的检测分析准确可靠.     

酶联免疫法测定猪肉中磺胺类药物的残留

利用酶联免疫法对猪肉中的磺胺类药物残留进行检测,结果表明:该方法的灵敏度为1μg/L,最低检测限为1.5μg/kg;向空白样本中添加浓度为100、200μg/kg磺胺标准品时,平均回收率范围为76.1%～101.7%,变异系数为4.6%～11.9%;利用该方法与液相色谱-串联质谱法检测实际样本,其阴、阳性判断结果一致。该法灵敏准确、重复性好、特异性高,适用于对猪肉中15种磺胺类药物进行多残留检测。     

液相色谱法测定水产饲料中15种磺胺类药物

建立一种高效快速检测水产饲料中15种磺胺组分多残留高效液相色谱的检测方法.用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm),乙腈-甲醇-1 %乙酸梯度洗脱,检测波长285 nm.结果表明,在0.5～10 mg/L 时浓度与峰面积线性良好,r≥0.999 9;在1～10 mg/kg加标浓度时,15种磺胺组分的平均回收率为75.7 %～100.3 %,RSD为2.26 %～7.45 %,方法检出限为0.5 mg/kg.试验结果说明,该方法可同时检测水产饲料中15种磺胺组分,方法回收率高、灵敏、准确且可靠,可用作水产饲料中磺胺类药物含量的质量监控.     

牛奶中磺胺类抗生素的快速检测分析

建立牛奶中磺胺类抗生素残留检测的放射免疫方法。通过对磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺甲基异恶唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶和磺胺喹恶啉8种磺胺类药物在空白牛奶样品中的加标试验,确定该方法的筛选水平。结果发现,采用放射免疫法检测牛奶中的磺胺类抗生素,筛选水平可达到10μg/L,变异系数在1.79%￣5.56%之间;对8种磺胺类药物的混合标准溶液进行检测,100%可以被检测出,检测限达5μg/L。放射免疫法检测牛奶样品中的磺胺类抗生素,方法简便、快速,灵敏度和精确度能够达到检测要求。     

猪肉和牛奶中10种磺胺类药物残留检测超高效液相色谱法研究

建立了猪肉和牛奶中磺胺嘧啶（SD）、磺胺噻唑（ST）、磺胺二甲嘧啶（SM2）、磺胺甲氧嗪（SMP）、磺胺氯哒嗪（SPD）、磺胺间甲氧嘧啶（SMM）、磺胺甲基异嗯唑（SM2）、磺胺氯吡嗪（Esb3）、磺胺地索辛（SDM）和磺胺喹嗯啉（SQ）共10种磺胺类药物残留检测的超高效液相色谱（UPLC）法。色谱条件：色谱柱为Acquity UPLC BEH C18柱（2．1mm×50mm,1．7μm）;流动相为50％甲醇乙腈溶液-2％乙酸水溶液,梯度洗脱;紫外检测波长270nm;柱温30℃;进样量4μL;外标法定量。结果表明：10种组分在20～1000ng／mL浓度范围内,呈良好线性关系,相关系数R^2均大于0．998;方法检出限为20ng／g,定量限为50ng／g;在猪肉和牛奶中添加浓度分别为50、100、200ng／g时,平均回收率为75．1％～99．8％,批内、批间平均RSD均小于13．2％。     

UPLC—MS／MS法测定奶粉中烟酸醮含量

建立一种专属、灵敏、快速的超高效液相色谱串联质谱（UPLC—MS／MS）测定奶粉中烟酸含量的方法。烟酸提取后经强阳离子交换（SCX）固相萃取柱净化,采用BEH—C18超高效液相色谱柱、20mmol／L乙酸水溶液-乙腈（体积比为20：80）流动相分离,以电喷雾离子源正离子方式进行多反应监测（MRM）。试验结果表明,1～500ng／L浓度范围内,烟酸呈良好的线性关系,相关系数R=O．9995。低、中、高3个烟酸浓度添加水平的回收率为78．2％～904％,相对标准偏差小于7％。奶粉中烟酸的检出限为0．25ug／g,定量限为O．75ug／g。采用所建方法对市售6批奶粉进行测定,烟酸含量均符合规定。所建方法适合奶粉中烟酸的含量测定。     

牛奶中粘菌素和杆菌肽残留的固相萃取超高效液相色谱-串联质谱法测定

建立了牛奶中粘菌素和杆菌肽药物残留的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱测定方法,样品用4%三氯乙酸乙腈溶液提取,经乙醚除脂,HLB固相萃取柱净化,相色谱-串联质谱法分析,外标法定量。结果表明：粘菌素和杆菌肽在20~2 000μg/L浓度范围内呈现良好线性,R2均大于0.998;方法检出限为5μg/kg,定量限为10μg/kg;粘菌素和杆菌肽分别在10~100μg/kg和10~1 000μg/kg浓度添加范围内的平均回收率为84%~110%,批内、批间RSD均小于20%。该方法具有简便快捷、灵敏度高、定性准确等优点,能够满足牛奶中其残留检测有关法规的要求。     

荷斯坦牛抗热应激候选基因S441的检测

本试验以S441为奶牛假定抗热应激候选基因。在核心母牛场湖南省奶牛原种场测定不同世代的种母牛213头,在核心公牛场湖南省种公牛站,以及北京、上海、南京、安徽等地测定种公牛46头,共检测出具有S441基因的母牛27头,检出率为12．7％（27／213）,公牛15头,检出率为32．6％（15／46）。在湖南省奶牛原种场,有、无抗热应激候选基因的母牛在热应激期间的产奶量分别为1736．75kg和1528．63kg,产奶量下降率分别为3．51％和22．56％,产奶量差异不显著（P〉0．05）,但产奶量下降率差异显著（P〈0．05）,基本肯定该基因为抗热应激候选基因。     

生鲜牛乳中β-内酰胺酶快速检测报告

[目的]为快速、准确检测出生鲜牛乳中β-内酰胺酶,保证牛奶卫生安全。[方法]采用Snap法(酶联免疫法)检测生鲜牛乳中β-内酰胺酶,对新疆巴州辖区内17个奶站进行抽样检测。[结果]17份样品结果全部为阴性。[结论]对巴州辖区内17个奶站的生鲜牛乳进行了抽样检测β-内酰胺酶项目,17份样品结果全部为阴性,合格数17份,合格率为100%。     

我国市售液态纯牛奶黄曲霉毒素M1含量调查分析

本研究采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测了采集自我国29个省、市、自治区以当地所产原料奶为原料生产的不同品牌市售超高温灭菌液态全脂纯牛奶（UHT奶）及巴氏灭菌液态全脂纯牛奶（巴氏奶）共计112种样本的黄曲霉毒素M１含量。结果表明：（1）112种牛奶样本的黄曲霉毒素M,含量介于0～130．32ng／kg之间,均低于GB2761—2005规定的≤500ng／kg的最高限量和NY／T657—2007、NY5140—2005中规定的≤200ng／kg的最高限量,说明我IN市售液态纯牛奶黄曲霉毒素M1含量安全;（2）我国液态纯牛奶黄曲霉毒素M1含量呈明显的地域性分布,南方明显高于北方。     

ELISA一步法快速检测牛奶中三聚氰胺的研究

在制备三聚氰胺单克隆抗体的基础上建立了一种用于检测牛奶中三聚氰胺含量的间接竞争酶联免疫检测方法,采用一步法操作,评估了方法的回收率、准确度、精密度和特异性,并利用液相色谱―串联质谱法进行了盲样确证试验。结果显示,该方法的线性检测范围为10~810 ng/mL,灵敏度为10 ng/mL,回收率为84.0%~90.0%,同类似物交叉反应率均小于0.1%。本试验建立的ELISA一步法能满足牛奶中三聚氰胺的检测要求。     

离子色谱法检测乳制品中硫氰酸根离子

通过采用乙腈沉淀乳粉和牛乳中的蛋白质后,移取上清液经过微孔滤膜过滤、LC-C18 SPE柱提纯去除干扰的有机物质后,滤液经离子色谱检测仪检测分析,从而得到样品中硫氰酸根离子含量.淋洗液经过优化后选用1.7 mmol/L碳酸氢钠+ 1.8 mmol/L碳酸钠+10％丙酮水溶液进行洗脱,抑制剂使用0.2％硫酸进行抑制器活化再生.该方法的硫氰酸根离子定量检出限为2.0 mg/kg,标准曲线线性相关系数R2可达到0.99以上,检测范围为0.1～20 mg/kg (mg/L),回收率在93％～97％之间,重复性实验得出相对标准偏差在0.8％～1.34％.对标准乳粉进行准确度检测,准确度可达到98％.该方法操作简便、结果准确,重复性良好,检测限低,适用于乳制品中硫氰酸根离子的检测.     

一个高体细胞数牧场奶牛隐性乳腺炎病原菌的调查

对安徽某规模牧场随机采集的314份奶样进行细菌分离鉴定、牛奶体细胞计数(SCC),并对分离比例较高的凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)进行亚种鉴定及药敏试验。结果显示120个低体细胞数奶样(SCC25×104/mL)的细菌检出率只有8.3%,分离细菌为CNS;而194个高体细胞数奶样(SCC≥25×104/mL)细菌检出率高达72.2%,分离出的细菌主要为金黄色葡萄球菌、CNS、大肠杆菌、停乳链球菌等。其中CNS感染比例最高、为28.8%,主要包括松鼠葡萄球菌、表皮葡萄球菌、人型葡萄球菌等。乳腺内细菌感染可引起患病乳区SCC显著升高(P0.05),松鼠葡萄球菌和表皮葡萄球菌感染也可引起SCC显著升高(P0.05),不同亚种的CNS对临床常用抗菌药物青霉素、庆大霉素、红霉素有较高的耐药率,分别为71.2%、53.8%和82.7%。     

Development and Evaluation of an Indirect ELISA for Detection of Porcine Epidemic Diarrhea Virus IgA in Pig Serum and Milk Captured by Monoclonal Antibody

For the rapid and accurate evaluation of the IgA antibody level of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) in pig serum and milk,a specific PEDV IgG monoclonal antibody (MAb) 8A3 was screened from four strains of PEDV MAb,which could capture all virus particles (inactivated virus cell culture medium) of PEDV efficiently.In this method,the coating concentration of 6.0 μg/mL showed the optimal performance of MAb 8A3,the cut-off value (D_{450 nm}) was settled as 0.34,it had no cross-reactivity with the positive serums of common porcine viruses.Compared with immune-peroxidase monolayer assay (IPMA),the concordance rates of established ELISA for positive and negative serum detection were 98.7% (152/154) and 98.0% (145/148),respectively.For positive and negative samples of colostrum and milk,the concordance rates of the established ELISA compared with IPMA were 100% (60/60) and 95.8% (23/24),respectively.IgA levels in colostrum and milk samples during lactation detected by established ELISA were highly correlated with trends in neutralizing titers (kappa=0.835).Collectively,the indirect ELISA in this study had high sensitivity and specificity,it was a rapid and objective method suitable for large-scale detection of PEDV IgA in clinical samples.