静电场处理对樱桃远缘杂交亲和性及杂种胚萌发生长的影响

以甜樱桃为母本、中国樱桃为父本进行了种间远缘杂交,研究了静电场对远缘亲和性及杂种胚萌发生长的影响,并用流式细胞仪对杂种的真实性进行了鉴定。结果表明,1)用强度为333~434 kV.m-1的静电场处理花粉对提高樱桃远缘杂交坐果率、克服杂交不亲和性具有明显作用;2)用场强为333~474 kV.m-1的静电场处理后的花粉进行樱桃远缘杂交,在胚抢救过程中,其杂种胚的萌发生长率、生长状况及多丛芽诱导与增殖能力等均明显高于对照,表明适宜场强的静电场处理确实对杂种胚萌发生长以及多丛芽的诱导与增殖具有积极作用;3)研究发现,MS+6-BA 0.6 mg.L-1有利于减少胚芽梢继代增殖过程中的玻璃化现象,是樱桃远缘杂种胚多丛芽诱导与增殖的适宜培养基;4)通过流式细胞仪进行的倍性鉴定结果表明,所测杂种1号和杂种2号均是倍性为三倍体的真杂种。研究进一步优化了樱桃远缘杂交的胚抢救体系。     

‘玛瑙红’樱桃胚败育观察及胚抢救技术体系的建立

【目的】建立高效稳定的‘玛瑙红’樱桃胚抢救成苗技术。【方法】以‘玛瑙红’樱桃幼胚为材料,对不同发育时期的种胚进行解剖学观察和萌发实验,确定种胚败育时期和最佳胚抢救时间,设置不同植物生长调节剂配比研究其对种胚萌发及幼苗增殖的影响,确定最佳培养基配方。【结果】幼胚大规模败育发生在盛花期后30 d,最佳胚抢救时间为盛花期后25 d。胚萌发最佳培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)TDZ+0.5 mg·L~(-1)6-BA+1.0 mg·L~(-1)IBA,萌发率达70%。幼苗增殖最佳培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)TDZ+0.1 mg·L~(-1)6-BA+1.5 mg·L~(-1)IBA+0.5 mg·L~(-1)GA_3,增殖系数为5.45。幼苗经诱导生根后移栽至营养土中,成活率达90%。【结论】建立了‘玛瑙红’樱桃胚抢救技术体系,为‘玛瑙红’樱桃及其他核果类果树有效利用胚抢救技术解决杂交育种问题提供参考。     

百合子房培养胚培养及杂种鉴定

栽培的百合,除新太保品种外,个体和百合片繁殖得到的个体1年不开花.用球根切花栽培,虽然球根费比率大,但高沙五、新太保百合的实生个体播种1年后具有开花性状.把这一性状导入其他百合,能够降低切花栽培的球根费比率.由于以往的杂交法难以获得杂种个体,因此以高沙五、新太保百合作母本,其他百合作父本,通过节间杂交培育个体,开发了包括培养技术的胚培养法,研究了有关组合杂交个体的早期确认法.(一)胚培养1、胚培始期:把园沙迈、中仙姬和新太保3种百合的种内受精胚每隔7日摘出培养,无论哪种百合,授粉35日后胚培养都能得到植物体,授粉40日后,胚的长度约0.8mm.通过胚培养培植的胚约20 %—30%成为植物体,授粉50日后,胚的长度1mm以上,中仙姬、新太保培养的胚大部分生育,而园沙迈培养的胚,有30%—40%不能生育.     

桃远缘杂种的获得及杂种胚抢救技术

以桃为母本, 与经过处理的李、杏花粉进行远缘杂交, 成功地对杂种幼胚进行了胚抢救, 并对部分杂种进行了分子鉴定。研究表明, 在以‘雨花露’为母本的杂交组合中, 杂种胚的败育发生于授粉后第7周, 而以‘中华寿桃’为母本的杂交组合中, 杂种胚的败育开始于授粉后第8周; 以早熟桃品种‘雨花露’为母本的杂种胚PF (胚长/种子长) 值为0.5时幼胚萌发率仅为6.7% , 而以晚熟品种‘中华寿桃’为母本的杂种胚PF值为0.5时幼胚萌发率却大于50%; 适宜场强的静电场处理父本花粉后可显著提高杂种胚培苗多丛芽诱导增殖效率, 而父本花粉经过⁶⁰Coγ射线照射后得到的胚培苗, 多丛芽诱导效果较差, 组培苗长势较弱; 在胚抢救技术体系中, 杂种胚最佳萌发及生长培养基为1 /2MS + 6-BA 4 mg·L^-1 +IBA 0.5 mg·L^-1 , 胚萌发及分化率达90%; 最佳多丛芽诱导及增殖培养基为MS + 6-BA 1.0mg·L^-1 + IBA1.0 mg·L^-1 , 最佳生根培养基为MS + IAA 0.5 mg·L^-1 +NAA 0.2 mg·L^-1 ; SSR技术对杂种鉴定结果表明, 所获杂种为真杂种。     

基于胚抢救技术的枳雀×枳杂交群体创建及鉴定

【目的】新资源获得是开展育种的前提和基础,通过两种砧木杂交,创造出聚合两种砧木优良性状的新型砧木资源材料。【方法】以枳雀为母本、枳为父本进行杂交实验,结合胚抢救技术获得子一代植株,利用形态学观察及SSR分子标记技术对子一代进行鉴定。【结果】三年胚抢救实验共接种3 146粒种子,获得胚抢救幼苗1250株,成苗率为39.73%。其中通过形态学鉴定出41株杂种苗,共筛选出8对SSR引物来对父本母本进行区分,其中的CS014RCS014F、CS065R-CS065F引物组合可以准确地鉴定出杂种后代,通过SSR分子标记鉴定出20株有性杂种植株。所获得的61株杂种资源为将来深入开展柑橘砧木育种研究工作奠定了材料基础。【结论】以多胚性柑橘为母本的杂交组合获得的成熟种子,难以通过直接播种的方式获得杂种苗。将胚拯救与分子鉴定相结合,通过SSR分析,找到可靠的SSR引物对鉴定杂交后代,为柑橘砧木育种的进一步研究奠定了物质基础。     

樱桃种内、种间杂种胚离体培养研究

以樱桃杂种胚为外植体进行离体培养,初步建立起了樱桃杂种胚离体培养体系,将部分杂种苗移栽田间,并鉴定了部分杂种。结果表明:适宜"红花"×GX3杂种胚萌发的培养基配方为1/2MS+BA 2.0mg/L+NAA1.0mg/L+CH1.0 g/L+GA30.2mg/L,适宜"白花"×GX2杂种胚萌发的培养基配方为1/2MS+BA 2.0mg/L+IBA 1.0mg/L+CH1.0g/L+GA30.2mg/L,TL1×GX2、‘红灯’×GX5杂种胚萌发适宜的培养基配方均为1/2MS+BA 2.0mg/L+IBA 1.0mg/L+GA30.2mg/L;1/2MS+BA 0.5mg/L+IBA 0.3mg/L+GA31.0mg/L+CH 1.0g/L为最适宜增殖培养基配方;最适宜生根培养基配方为1/2MS+IBA0.3mg/L;ISSR鉴定结果证实了杂种的真实性。     

亲本品种对樱桃远缘杂交亲和性及胚抢救的影响

以3个甜樱桃品种为母本,3个中国樱桃品种为父本进行了种间远缘杂交,并对所得到的杂种成功地进行了胚抢救,探讨了不同亲本品种对大樱桃远缘杂交亲和性及其胚抢救的影响。结果表明,(1)不同杂交组合的坐果率差异显著,在同一母本的杂交组合中,均以五莲红樱桃作父本的杂交组合坐果率最高(≥4.14%);而以红灯为母本与3个父本品种杂交的平均坐果率高于那翁和先锋为母本的相同杂交组合的平均坐果率;(2)不同亲本品种的杂种胚萌发生长率与多丛芽增殖系数存在显著差异,其中在参试的3个父本品种中,以五莲红樱桃表现最好;(3)经过生根培养,已经成功地将一批杂种胚培苗移栽到大田。     

阿月浑子与黄连木的杂种果实发育及幼胚培养研究

 以阿月浑子与黄连木的杂种果实和杂种幼胚为试材,对果实生长发育规律及幼胚培养进行了研究,探讨了胚龄、培养基类型和6-BA浓度等对杂种胚培苗再生的影响。结果表明：（1）杂种果实的纵、横径生长呈“S”型曲线变化,果实鲜质量生长呈双“S”型曲线变化。（2）杂种胚的发育始于授粉后80 d,80 ~ 100 d是杂种胚败育的关键时期。（3）授粉后80 d的杂种幼胚难以成苗,授粉后100和120 d的杂种幼胚成苗率分别为37.04%和83.33%。（4）适宜杂种胚培苗增殖的培养基为：DKW + 2.0 mg · L^-1 6-BA + 0.05 g · L^-1 IBA + 0.3 g · L^-1 LH + 1.5 g · L^-1 PVP,增殖系数为3.47,苗高为3.32 cm。（5）适宜杂种胚培苗生根的培养基为：1/2WPM + 2.0 mg · L^-1 IBA + 0.05 mg · L^-1 NAA,生根率为80%。     

离体培养条件下打破中国樱桃胚休眠的方法

离体培养条件下打破中国樱桃胚休眠的方法刘用生１周琳２李秀菊３（１河南职业技术师范学院园艺系，新乡４５３００３；２四川农业大学林园院，雅安６２５０００；３山东农业大学园艺系，泰安２７１０１８）关键词樱桃；胚培养；打破休眠ＡＭｅｔｈｏｄｆｏｒＢｒｅａｋｉ...     

樱桃种间杂交种胚培养及子叶植株再生

20 0 2年 4月 3日 ,在北京市农林科学院林业果树研究所樱桃资源圃进行种间远缘杂交 ,设两个杂交组合 ,即‘先锋 (Prunusavium)×对樱 (P .pseudocerasus)’、‘CAB (P .cerasus)×对樱 (P .pseudocerasus)’。杂交亲本生长健壮 ,先锋为 8年生 ,对樱和CAB为 4年生。两个组合分别杂交 2 93朵和 16 3朵花 ,分别获得杂交果 9个和 6个 ,杂交结实率为 3 1%和 3 7%。成熟时采摘果实 ,取出果核 ,破除掉外壳 ,分别得到 8枚和 6枚杂种种子。种子经表面消毒后去皮取胚接种于胚培养基 ,置 4℃冰箱中冷藏 6 0～ 90d ,当子叶逐渐转绿萌发时 ,移入室内…     

葡萄不同倍性品种的杂种胚挽救及鉴定

以二倍体葡萄为母本,与四倍体葡萄杂交,杂种进行胚珠培养,获得三倍体植株.胚珠培养胚萌发率最高可达39.21%,成苗率最高可达35.32%.先用细胞倍性测定仪初选,再用卡宝品红染色法根尖计数染色体为57条.不同组合取样时期可确定为:早熟母本为花后40～50 d内,中熟品种为50～60 d,晚熟品种则为60～80 d.     

影响早熟油桃胚培养的几个因子

通过对几种培养基比较试验,筛选出WPM是早熟油桃胚培养的最适培养基,其最高萌发率为95.56％;不同熟期成熟的早熟油桃品种对低温处理的要求时间不同,愈是早熟的品种对低温要求时间愈长,晚熟品种相对较短;1mg／L 6-BA+0.2mg／LIBA+0.1 mg/L GA。能有效破除早熟油桃的休眠,而且幼苗生长良好。早熟油桃胚培养培养基的pH值要求范围为5.7-6.2,其中愈是早熟对培养基pH值的要求相对较高;对试管苗的移栽采用白天口杯罩住,夜间揭开,持续5-7 d,3 d多菌灵灌根1次,15 d后发现腐烂子叶及时清除,能有效提高试管苗的成活率。     

无核葡萄与中国野生葡萄杂种的胚挽救技术研究

 通过无核葡萄与中国野生葡萄杂交, 获得了4个杂交组合的后代植株, 确定了各杂交组合取胚珠培养的最佳时期。1Flame ×山葡萄; 2红宝石×爱莫无核; 3红宝石×北醇; 4爱莫无核×山葡萄在授粉后45 d取样培养效果较佳; 5长穗无核白×山葡萄授粉后30 d; 6无核白自交在授粉后35 d培养效果较佳。以NitSchs为基本培养基, 附加0.5 mg·L ^{- 1} 6-BA + 0.5 mg·L^-1 GA₃ + 2.5 mg·L ^{- 1} IBA + 0.1 mg·L^-1ZT, 适合于1、3、5号杂交组合; 而0.5 mg·L^-1 6-BA + 0.5 mg·L^-1 GA₃ + 2.0 mg·L^-1 IBA + 0.1 mg·L^-1ZT适合2、4、6号杂交组合; 胚萌发培养基为2.0 mg·L^-1 IBA + 1.0 mg·L^-1 6-BA +0.2 mg·L^-1 GA₃ , 适合1、2、3、5、6号杂交组合, 而爱莫×山葡萄在1.5 mg·L ^{- 1} IBA + 1.0 mg·L^-1 6-BA + 0.2 mg·L^-1 GA₃培养基上表现较佳, 生根培养基为1 /2MS基本培养基添加0.15 mg·L^-1 IBA + 0.02 mg·L^-1 6-BA, 它适合1号与5号组合, 0.10 mg·L^-1 IBA + 0.02 mg·L^-1 6-BA适合4号与6号组合。     

甜樱桃种间杂交胚培养及快繁研究

以樱桃杂交果实为试材,对樱桃的杂交种胚进行了培养研究。结果表明:适合樱桃胚培养的最佳培养基为MS+BA 1 mg/L+IAA 1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L;适合甜樱桃继代增殖的培养基为MS+BA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L;适合樱桃生根的培养基为1/2MS+IBA 0.4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L。     

接种时期和培养基对无核葡萄胚挽救的影响

以4个组合康能无核×金星无核、雷明无核×金星无核、金星无核自交、雷蒙无核自交为试材, 采用L25 (55 ) 正交设计, 研究了接种时间和培养基种类对无核葡萄胚挽救的影响。结果表明, 影响无核葡萄胚挽救最重要的因素是接种时期, 其他因素影响程度因组合而不同, 最佳接种时期在花后45～60 d,最高出苗率13.64%～75.23%。对胚珠进行一定处理有助于促进胚珠的萌发出苗, 其中横切处理与低温处理可以显著提高胚珠萌发出苗率。     

胚抢救在果树育种上的研究及应用

 本文综述了胚抢救在培育早熟桃、杏新品种, 无核葡萄以及柑橘三倍体等果树新种质, 克服果树远缘杂种不育、枣胚败育等方面所取得的成绩。同时对影响胚培养成功的因素如外植体、胚龄、培养基、培养及移栽条件等进行了探讨, 最后初步提出了今后的研究方向。     

采用胚挽救获得Ogura CMS甘蓝与甘蓝型油菜的种间杂种

为将甘蓝型油菜细胞质雄性不育系(Ogura CMS)的恢复基因转至甘蓝Ogura CMS材料上,以6份甘蓝Ogura CMS材料为母本,以含恢复基因的甘蓝型油菜为父本,人工杂交结合胚挽救培养,研究取材时期、培养基成分和杂交组合对胚珠成苗的影响,同时对胚挽救培养获得的植株是否为真实F1杂种进行鉴定。结果发现,胚珠培养以剥蕾授粉后16d取材时胚珠成苗数最多,成苗率为4.56%;培养基以MS+GA 0.1 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+0.5%水解酪蛋白(CH)+0.5%活性炭(AC)成苗效果最好,成苗率高达6.24%;M09CMS×RFO-46组合成苗数最多,成苗率为5.96%。67株胚挽救培养得到的植株经流式细胞仪、SSR分子标记和形态学鉴定,得出65株为真杂种,真杂种率高达97%。     

砧木对甜樱桃幼树生长量及光合特性的影响

 以2年生‘吉塞拉5号’ (G5) 和‘Colt’为砧木的‘红灯’樱桃为试材, 比较了其部分生物学特性及光合效率。结果表明, 以吉塞拉5号为砧木的红灯幼树, 树体矮化, 比叶重高, 气孔密度大。吉塞拉5号砧红灯樱桃在光响应过程中表现出较高的光合速率, 对CO₂ 的利用效率高于Colt砧木红灯。红灯以吉塞拉5号作砧木比以Colt作砧木更适于矮化、密植栽培。     

无核葡萄与中国野生葡萄杂种胚败育的某些生理生化变化

 通过对无核葡萄、有核葡萄以及无核葡萄与中国野生葡萄杂种的胚珠进行离体培养, 并结合生理生化指标测定发现: 不同的无核葡萄及其杂种胚败育的时间不同, 胚败育时, 保护酶活性下降, 反应膜脂过氧化水平的MDA 含量上升, 可溶性糖与可溶性蛋白质含量降低, 可溶性淀粉含量变化不大。进行胚挽救时, 应根据不同的杂交组合, 在最佳时间, 即胚发育程度最高、MDA 含量较低时取胚进行培养。