绵羊精液不同处理方法对体外受精效果的影响

试验通过开展绵羊低温保存精液和冷冻精液制备精子对体外受精效果影响的研究,旨在探讨制备绵羊IVF优质精液的新方法。结果表明:利用低温保存精液和冷冻精液,分别采用Percoll离心法和上游法制备精子进行体外受精,低温保存精液上游法的卵裂率78.6%显著高于低温保存精液和冷冻精液Percoll离心法和60.2%、62.3%,(P<0.05),极显著高于冷冻精液上游法21.1%,P<0.01;低温保存精液和冷冻精液Percoll离心法组间无显著(P>0.05)差异,但均显著(P<0.05)高于冷冻精液上游法。低温保存绵羊精液可用于制备IVF精子,上游法优于Percoll离心法,可显著提高体外受精效果。     

CTC法结合体外受精比较不同方法对绵羊精子体外获能的影响

为比较不同获能方法对绵羊精子的获能效果，新鲜绵羊精液分别经肝素上游法(swim-up)、钙离子载体(IA，A23187)诱导法、Percoll离心法和Percoll离心后肝素孵育法进行精子获能的诱导后与体外成熟的绵羊卵母细胞进行体外受精，并利用金霉素荧光染色（chlortetracycline，CTC）法结合各自相应的体外受精结果对其获能效果进行检验。结果显示上游法处理后精子的获能比例和受精后的卵裂率均高于其它组, 说明肝素上游法可以较好的诱导绵羊精子获能。     

精子不同处理方法对牛卵泡卵母细胞体外受精的影响

本研究探讨了不同精子处理方法对南阳黄牛卵泡卵母细胞体外受精效果的影响。试验一,研究三种不同的精子洗涤方法对卵母细胞体外受精的影响,结果表明:上浮法和Percoll密度梯度离心法所得的卵裂率(58.3%,60.6%)均显著高于直接离心洗涤法(47.2%,P<0.05);上浮法所得囊胚发育率(25.9%)显著高于直接离心法(13.3%,P<0.05);上浮法和Percoll法相比,卵裂率和囊胚率均无显著差异。试验二,研究三种受精液对卵母细胞体外受精的影响,结果表明:BO液组和mTyrode’s液组所得的卵裂率(60.1%,59.3%)均显著高于TCM199液组(48.5%,P<0.05);但三组囊胚率(17.8%、19.6%、14.1%)差异不显著(P>0.05)。     

多种因素对小鼠卵母细胞体外受精效果影响的分析

为了探讨不同精子获能时间,精卵孵育时间,精子密度以及颗粒细胞对小鼠卵母细胞体外受精的影响,从而达到对卵母细胞体外受精体系优化的目的。比较了精子获能时间分别为40 min、60 min、80 min试验组的受精卵卵裂率。结果表明,带颗粒细胞卵母细胞(COCs)在三个试验组中卵裂率无显著差异,不带颗粒细胞卵母细胞(NO)在精子获能时间为60 min时卵裂率最高;比较了精卵孵育时间分别为2 h、4 h、6 h、8 h试验组的受精卵卵裂率,结果显示COCs精卵孵育时间2 h试验组的效果最好,NO孵育时间为6 h试验组的效果最好;比较了精子密度分别为3×10⁵/mL,3×10⁶/mL,3×10⁷/mL试验组受精卵卵裂率,结果显示COCs和NO均为3×10⁶/mL试验组卵裂效果最好;比较COCs和NO的受精卵卵裂率,结果显示COCs与NO之间存在显著差异(P<0.05),裸卵卵裂效果显著优于颗粒细胞卵裂效果。试验结果表明,在卵母细胞体外受精过程中,精子获能时间60 min,精子密度为3×10⁶/mL,精卵孵育6 h,培养24 h后卵裂率最高。     

影响猪卵母细胞体外受精效率因素的研究

通过比较参与受精的卵母细胞颗粒细胞存在与否、精子上浮时间、精卵共孵育时间、不同受精液等4个方面的因素,研究这些因素对猪卵母细胞体外受精后胚胎发育能力的影响,以求找到最佳的猪卵母细胞体外受精体系。将选择带有不同颗粒细胞的卵丘卵母细胞复合体分为3组：含全部颗粒细胞、2~3层颗粒细胞和裸卵;调整精子在受精液里的上浮时间为0、30、60、120min研究其受精能力;比较3、6、20h精卵共孵育时间对体外受精的影响;结果表明：在本试验体系下,在mTBM受精液中,将精子上浮处理60min,与含2~3层颗粒细胞的卵丘-卵母细胞复合体共孵育6h的IVF体系最为有效,其卵裂率为（77.6±2.3）%,囊胚率为（25.7±2.6）%。     

受精液和精子处理方法对水牛卵母细胞体外受精的影响

研究了不同受精液和精子处理方法对沼泽型水牛卵母细胞体外受精卵裂率的影响。结果表明,使用BO液和TALP液对卵裂率没有显著影响（P〉0.05）。Percoll离心法和离心洗涤法对卵母细胞受精卵裂率也没有显著影响（P〉0.05）。     

精卵因素对母牛卵胞质内精子显微注射效果的影响

实验探讨了精卵因素对母牛卵母细胞质内精子显微注射效果的影响.结果表明:新鲜精液组和性控冻精组ICSI对卵母细胞存活率、卵裂率和囊胚率均无显著差异(P>0.05);采用A、B、C级精子穿刺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级卵母细胞时,穿刺卵受精率、卵裂率和囊胚率在三者之间无显著差异(P>0.05),总体效果A>B>C、Ⅰ>Ⅱ>Ⅲ;D级精子穿刺Ⅱ级卵母细胞后的穿刺卵受精率显著低于Ⅰ级卵母细胞(P<0.05),卵裂率和囊胚率与Ⅰ级卵母细胞相比无显著差异(P>0.05),穿刺Ⅲ级卵母细胞后的穿刺受精率和囊胚率均显著低于Ⅰ级卵母细胞(P<0.05),受精卵的卵裂率与Ⅰ级卵母细胞相比则无显著差异(P>0.05).由此可见:采用流式细胞仪分离的性控冻精与新鲜精液相比,对ICSI后的受精率和囊胚率无显著影响;精子活动力和卵子质量对ICSI的效果均有一定程度影响,且随精子活动力的降低和卵母细胞质量的下降而逐渐显著.     

猪卵泡卵母细胞的体外成熟与体外受精

本试验对猪卵泡卵母细胞不同体外成熟培养时间、不同精子获能时间、不同精卵共孵育时间对体外受精的影响进行了研究。结果表明,体外成熟培养44 h左右,精子获能时间在1～2 h之间,精卵共孵育时间在6～8 h之间,受精后卵裂率最高。     

两种不同方法处理牛分离精子对体外受精效果的影响

本试验旨在探讨采用2种不同方法处理牛分离精子对精子活力、浓度及体外受精（IVF）效果的影响。将体外培养成熟卵母细胞随机分为2组,与分别用洗涤法和Percoll法处理牛分离精子进行IVF,并观察处理后各组的精子活率、浓度和IVF后囊胚发育率。结果显示,洗涤法和Percoll法处理后精子活力和IVF后的囊胚发育率均无显著差异,但采用洗涤法处理后分离精子浓度极显著高于Percoll法,可显著提高分离精子利用效率,且方法简便、经济,应优先选择使用。     

猪冷冻精液体外受精研究

为简化猪体外受精过程中精液的来源,避免不同公猪精液和不同采精时间对猪体外受精的影响,本研究采用5mL大管冷冻精液进行体外受精（IVF）,研究IVF过程中的各项参数。结果表明：精卵共孵2～8h对多精人卵率影响不大（P〉0．05）,2-细胞率随着共孵时间的延长而增加,8h时达到72．8％,显著高于2h组（60．5％,P〈0．05）,桑椹胚和囊胚发育率以6h组最高,分别达46．1％和3．48％。多精人卵率随精子浓度的增加而增加,且各组之间差异显著（P〈0．05）,2-细胞率也以10^8组（81．2％）最高,且显著高于10^5组（63．7％）（P〈0．05）,同时10^7组和10^8组分别获得了8．11％和3．13％的囊胚发育率。以NCSU-23作为成熟培养液,并部分去除卵丘细胞的IVF卵裂率和囊胚率最高,达77．1％和7．33％。冻精和新鲜精液的IVF,无论是在卵裂率,还是桑椹胚或囊胚率上均无显著差异（P〉0．05）。     

In vitro production of porcine embryos: current status,future perspectives and alternative applications

The pig is considered to be a suitable source of cells and organs for xenotransplants, as well as a transgenic animal to produce specific proteins, given the biological similarities it shares with human beings. However, the in vitro embryo production system in pigs is inefficient compared with those in other mammals, such as cattle or mice. Although numerous modifications have been applied to improve the efficiency of in vitro embryo production systems in pigs, not much progress has been made to overcome the problem of polyspermy, and low developmental ability due to insufficient cytoplasmic abilities of in vitro matured oocytes and improper culture conditions for the in vitro produced embryos. Recent achievements, such as the establishment of chemically defined medium and utilization of ‘zona hardening’ technique, have gained some success. However, further research for the reduction of polyspermy and detrimental effects of the culture systems in pigs is still needed.     

山羊体外受精技术的研究进展

本文主要阐述了山羊体外受精技术,特别是山羊卵母细胞的采集和体外成熟,体外受精以及胚胎培养过程中的一些研究进展,及其山羊体外受精技术的非常广阔的前景。     

鹿类体外受精技术研究现状

鹿类体外受精技术研究方面已有新西兰和法国的技术体系,但培养系统尚未建立,还处在起始阶段。作者阐述了鹿卵巢的采集、运输和卵母细胞的采集;卵母细胞的体外成熟培养;精子的体外获能和体外受精及受精卵的体外培养等方面研究报道的一些试验技术和方法。     

牛卵母细胞体外受精和体外成熟技术

文章从卵母细胞的来源、精子体外获能、卵母细胞体外成熟、体外受精和体外受精早期胚胎培养五个方面综述了牛卵母细胞体外受精和体外成熟技术的研究进展.同时指出了影响精子体外获能的因素、影响卵母细胞成熟培养的因素、体外受精存在的问题及解决办法等.并且对影响该技术的主要因素进行了系统分析.     

牛的体外受精技术研究进展

本文阐述了体外受精技术在牛胚胎工程和育种研究中的意义,介绍了牛体外受精技术的研究历史和目前的研究进展,对牛IVF技术的技术指标现状及经济效益进行了评估,并就牛的体外受精技术当前研究存在的问题作了评述,对其前景做了展望。     

白牦牛卵母细胞体外成熟的研究

研究了不同激素配比、性周期阶段对白牦牛卵母细胞体外成熟的影响，同时研究了不同培养基对早期胚胎体外发育的影响。结果表明：M199＋0．2mmol／L丙酮酸钠＋10％NBs＋5．0mg／L LH＋0．5mg／LFSH＋1＞g／ml 17β-E2是白牦牛卵母细胞体外成熟较为理想的培养系统（成熟率79．4％、卵裂率42．5％）。采集白牦牛卵母细胞时卵巢所处性周期阶段（卵泡期、黄体期）影响卵母细胞的体外成熟（成熟率分别为77．6％、69．5％，卵裂率分别为45．7％、35．6％）。输卵管上皮细胞和颗粒细胞是理想的共培养细胞，能有效克服白牦牛早期胚胎发育阻滞（桑囊胚发育率分别为10．6％、7．7％）。     

牛的体外受精技术研究进展

本文阐述了体外受精技术在牛胚胎工程和育种研究中的意义，介绍了牛体外受精技术的研究历史和目前的研究进展，对牛体外受精技术的技术指标现状及经济效益进行了评估，并就牛的体外受精技术当前研究存在的问题作了评述，对其前景做了展望。     

影响牛精子体外获能的因素

本文针对牛胚胎体外生产的关键技术环节体外受精，从温度、卵母细胞、公牛个体、培养液组成、渗透压及pH值等方面阐述了影响牛精子体外获能的因素。     

牛早期胚胎体外发育条件的研究

本试验研究了精卵共育时间和培养液等因素对牛早期胚胎体外发育的影响。精卵共育6～12h能显著提高受精卵的囊胚发育率,受精卵的囊胚发育率为23．2％～25．3％,共育时间为24h时,囊胚发育率降低,但精卵共育6h时卵裂率较低;TCM199、mBECMaa、mSOFaa均能支持体外受精卵的发育,其囊胚发育率分别为18％、30．7％和29．2％。试验结果表明：精卵于BM受精液中共育9h后,将其置于添加5％OCS的mBECMaa或mSOFaa中培养,能得到较高的体外生产胚胎的囊胚发育率。