Bar基因的玉米花粉管通道法转化

通过花粉管通道法利用抗除草剂基因（bar）转化3个玉米自交系,D0代获得35株GUS阳性植株．其中17株PCR阳性植株,除草剂筛选获得抗性植株13株。研究发现DNA溶液浓度影响转化率,当浓度为100μg／ml时,转化率最高,为2．61％。DNA导入时间距人工授粉时间的延长,结实率升高,但转化率显著下降,人工授粉后1d导入DNA产生的转化株最多,为19株,平均转化率为1．35％。     

2-氨基苯并咪唑改性苯乙烯马来酸酐共聚物(SMA)的研究

2－氨基苯并咪唑与苯乙烯马来酸酐共聚物（SMA）反应，经脱水闭环制得聚苯乙烯马来酰亚胺聚合物（SMI）。通过对聚合物（SMI）红外、紫外、荧光光谱、GPC和热性能测试，表明其在保持了SMA原有性能的同时，热稳定性有所改善，且具有荧光性能。研究了溶剂、pH、猝灭剂等对聚合物SMI荧光性能的影响。     

用花粉管通道法将慈姑蛋白酶抑制剂基因(API)导入水稻获得转基因植株

采用花粉管通道法遗传转化技术,将慈姑蛋白酶抑制剂基因(API)导入水稻品系9311中,获得了转基因植株。抗虫性鉴定结果表明:部分转基因植株对水稻螟虫的抗性比对照明显提高;PCR扩增获得了与引物扩增片段长度相同的DNA片段,证实API基因已整合到受体植株的基因组中。遗传分析表明,API基因能在有性生殖过程中传递给后代,并于T4代分离出抗性纯合的株系。     

SCI收录的农学(农艺学)期刊

为了给农学(农艺学)的科研工作者检索文献和投稿时选择期刊提供参考,介绍了农学类期刊被SCI数据库的收录情况。汇总介绍了SCI-E收录的80种农学期刊的刊名、国际标准连续出版物编号(ISSN)、出版国/地和最新影响因子,同时详细介绍了其中SCI收录的前20种农学期刊的出版周期、出版者、联系地址、期刊资源描述等有关的期刊信息。     

茶叶通过海路传入东南亚地区的历史梳理

一直以来,东南亚地区因其独特的地理位置成为了海上丝路的重要站点,在中国茶对外贸易与传播过程中起到了举足轻重的作用。而与此同时,东南亚地区也在与中国的不断交往中,形成了自身独特的茶文化习俗,并传承至今。本文通过梳理茶叶传入东南亚的历史进程,探索东南亚饮茶之根源,再现了茶在东南亚普及的过程,以期为茶叶在"21世纪海上丝绸之路"上进一步发展,提供借鉴。     

通过花粉管途径将抗虫基因(CpTI)导入小麦的研究

利用带有ＣｐＴＩ基因的ｐＡＰＣｐＴＩ－１－Ｄ质粒通过花粉管途径的不同方法导入冬小麦９２（８）８０２,种子发芽经４０ｍｇ／Ｌ卡那霉素液筛选,得到１８株绿苗,移栽后成活１０株。提取这１０株小麦植株叶片的ＤＮＡ,经ＰＣＲ检测和ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交两次鉴定分析,证明去柱头滴加法中的５株小麦ＣｐＴＩ基因已整合到其基因组中,获得５株转基因９２（８）８０２小麦植株,长势良好,并得到饱满的种子。     

农杆菌介导的抗菌肽基因SPCEMA对马铃薯的遗传转化

为了得到马铃薯抗病材料,本研究利用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)LBA4404转化马铃薯栽培品种“台湾红”,建立了优良的遗传转化系统:根癌农杆菌浓度以D600nm=0.5￣0.8为宜,感染时间以5min为宜;茎段和叶盘的预培养时间分别以4d和8d为宜,共培养时间皆以3d为宜。通过PCR和Sourhernblotting检测证明抗菌肽基因SPCEMA已成功导入其中。其茎段和叶片为的转化频率分别为10%和5.79%。     

农杆菌介导甜高梁转Bt cry1Ah的研究

[目的]建立一套高效、稳定的甜高梁农杆菌遗传转化体系,并在甜高梁中验证来源于苏云金芽胞杆菌新型杀虫基因cry1Ah表达产物的杀虫活性.[方法]以甜高粱幼穗愈伤组织为转化受体,通过农杆菌介导法将密码子优化过的Bt cry1Ah导入2个甜高梁品种"BABUSH"和"MN-3025"中.对获得的再生植株进行 PCR检测、RT-PCR分析及除草剂抗性、目的蛋白表达水平和抗虫性鉴定分析.[结果]对336块幼穗愈伤组织块进行了农杆菌侵染,经双丙氨膦(Bialaphos)梯度筛选后共获得66株再生植株,PCR鉴定在8个转化事件中有22株为阳性植株,平均转化率为2.38%.RT-PCR检测结果表明,cry1Ah在T.甜高梁转基因植株中能够正常转录.Western blotting分析和ELISA定量测定显示,有5株可检测到Bt蛋白,但Bt蛋白含量差异较大,最高可达165.69ng·g-1叶片鲜重(FW),最低的仅为1.93 ng·g,-1叶片鲜重(FW),平均为87.50 ng·g-1FW.饲虫试验表明,有2株转基因甜高粱植株对亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)表现为抗性.[结论]利用建立的以甜高粱幼穗为外植体的农杆菌遗传转化体系,可获得具有玉米螟抗性的转基因甜高粱植株,其后代遗传稳定性还有待于进一步的研究.     

农杆菌介导甜高粱转Bt cry1Ah的研究

 【目的】建立一套高效、稳定的甜高粱农杆菌遗传转化体系,并在甜高粱中验证来源于苏云金芽胞杆菌新型杀虫基因cry1Ah表达产物的杀虫活性。【方法】以甜高粱幼穗愈伤组织为转化受体,通过农杆菌介导法将密码子优化过的Bt cry1Ah导入2个甜高粱品种“BABUSH”和“MN-3025”中。对获得的再生植株进行PCR检测、RT-PCR分析及除草剂抗性、目的蛋白表达水平和抗虫性鉴定分析。【结果】对336块幼穗愈伤组织块进行了农杆菌侵染,经双丙氨膦（Bialaphos）梯度筛选后共获得66株再生植株,PCR鉴定在8个转化事件中有22株为阳性植株,平均转化率为2.38%。RT-PCR检测结果表明,cry1Ah在T0甜高粱转基因植株中能够正常转录。Western blotting分析和ELISA定量测定显示,有5株可检测到Bt蛋白,但Bt蛋白含量差异较大,最高可达165.69 ng•g-1叶片鲜重（FW）,最低的仅为1.93 ng•g-1叶片鲜重（FW）,平均为87.50 ng•g-1 FW。饲虫试验表明,有2株转基因甜高粱植株对亚洲玉米螟（Ostrinia furnacalis）表现为抗性。【结论】利用建立的以甜高粱幼穗为外植体的农杆菌遗传转化体系,可获得具有玉米螟抗性的转基因甜高粱植株,其后代遗传稳定性还有待于进一步的研究。     

慈姑蛋白酶抑制剂(API)基因导入棉花获得转基因植株

通过花粉管通道技术将慈姑蛋白酶抑制剂API(ArrowheadProteinaseInhibitor)基因转入棉花 ,获得了转基因植株。经对棉铃虫抗虫性鉴定和PCR、RT PCR、Southernblotting分析 ,证明获得了表达API基因的抗虫棉     

稻瘿蚊多抗性材料的聚合与创新(英文)

[Objective] This study was to breed rice cultivars with multi-resistance to Orseolia oryzae (Wood-Mason). [Method] The Guangxi local cultivar GX-M001(Jiangchao) with high resistance to Orseolia oryzae (Wood-Mason) was used to hybrid with the known resistance cultivars "Kangwenqingzhan" (harboring GM6 gene), OB677(harboring GM3 gene) from Sri Lanka, HT1350 and high yield and quality cultivar "Guiruanzhan". [Result] Through pyramiding the multi-resistant genes via routine hybridization, the general resistances of the hybrids were remarkably enhanced. The grades of resistance were also improved, many of the combinations were endowed with a resistance at immune level(grade 0); and interestingly, the respective hybridization of GX-M001(high resistance) with OB677(medium resistance) and HT1350(susceptible) also generate two lines at immune level, which is probably the effects of additive effects of genes. [Conclusion] By routine hybridization, multiple genes were successfully pyramided, thus generating novel rice lines with multiple resistances. For the rice breeding scientists at the grass-roots level, the resistance-resistance pyramiding is an effective approach to breed high resistance cultivars.     

稻瘿蚊多抗性材料的聚合与创新

抗源的发掘和利用是创新抗稻瘿蚊育种材料的有效途径,笔者在广西品种资源中发现了新的抗性品种GX—M001,经与抗蚊青占等位性测定,初步认为其与抗蚊青占基因（GM6）不等位,可能是一个新的抗性基因。为此,笔者选用GX—M001抗源与抗蚊青占等抗性品种杂交,培育出新的多抗创新材料。     

Introduction of herbicide resistant gene （bar） into maize （Zea mays L.） via pollen tube pathway

The pollen tube pathway method of transformation has been reported to be successful in most crops,but less successfu in maize.DNA can be transferred by cutting the stigma following pollination and applying the DNA solution in a suitable period DNA presumably reaches the ovary by flowing down the pollen tube and then integrates into the just fertilized but undivided zygotic cells.To provide the molecular evidence for this procedure,the plasmids pGBIRC carrying a CaMV35S promoter-PPT acetyle transferase(bar)gene-nos terminator gene fusion construct were used.Total 3 276 seeds were produced from the ears treated with DNA.It was found that 35 seedlings were GUS assay positive,but less intense than that of the positive controls,of which 17 were PCR amplification positive.But,only 13 of the seeds from the plants treated with DNA containing the bar gene were found to be resistant compared with the negative control.Less than 1.07% of progeny seedlings tested expressed a herbicide positive reaction and polymerase chain reaction(PCR)with seedling DNA did detect the bar gene.Morphological variation was observed in six plants.We succeed in obtain PPT-resistant maize inbred lines via pollen tube pathway.     

用农杆菌介导法将大豆球蛋白基因导入水稻

在克隆水稻谷蛋白基因Gt1启动子的基础上,以农杆菌双元载体pCAMBIA1301为起点,构建出以该启动子带动大豆球蛋白A1aB1b亚基基因表达的双元载体,并用农杆菌介导法转化水稻获得转基因植株.经PCR检测和后代分析,大豆球蛋白基因已整合入水稻基因组,并在后代中稳定遗传.     

湖南草莓引种研究

以引进的１２个国内外良种草莓为试材，观察研究其物候期、生长结果特性、单果重、单株产量与抗逆性，并测定果实硬度、可溶性固形物、含糖量与Ｖ－Ｃ含量，以筛选出适合湖南栽培的优良品种。结果表明：丰香、硕露、硕蜜、梯旦、长丰、硕丰、索菲亚等品种适合于湖南生产发展。     

农杆菌介导草酸氧化酶基因转入油菜

以甘蓝型油菜带柄子叶为转化受体材料,运用农杆菌介导法进行草酸氧化酶(oxalate oxidase, germin)基因的转化,卡那霉素抗性筛选和PCR测定结果表明,其中3株germin1、germin2及germin6呈阳性.T1代卡那霉素抗性筛选显示,germin1呈现3 ∶1典型的孟德尔单基因显性遗传,且在T2代获得纯合株系.T1代盛花期茎秆菌核病活体接种结果证实,转基因植株后代菌核病抗性得到明显提高.证实germin基因已转入油菜植株中并得到有效表达.     

电穿孔作用将外源基因导入中华蜜蜂卵的研究

将中华蜜蜂卵与带有绿色荧光蛋白基因的质粒DNA混合,经电穿孔作用后,人工孵化蜜蜂卵,并对孵化的幼虫进行检测.结果筛选出一组较理想的中华蜜蜂卵电穿孔参数(750 V·cm-1,100 μs,1);通过荧光检测,电击卵孵化的幼虫体内可以表达EGFP基因,阳性表达率最高可达1.05%,且外源DNA转染早期卵的效率显著高于晚期卵.结果表明电穿孔作用成功地将外源基因引入中华蜜蜂卵内,质粒DNA转染中华蜜蜂卵的效率与卵的生长时期有关.     

气动生物反应器油松胚性愈伤增殖体系的建立研究

目的大量具有活性的胚性愈伤组织的增殖可为油松体细胞胚胎发生研究和植株再生提供充足的材料,锥形瓶悬浮培养体系下胚性愈伤组织的增殖率低且易酸化坏死,建立气动生物反应器油松胚性愈伤增殖体系可促进油松胚性愈伤组织的增殖。方法本研究以油松愈伤组织为材料,利用L₉（34）正交试验设计,探究了生物反应器中愈伤接种量、新旧培养基的配比和激素浓度3个因素对愈伤组织增殖的影响,建立了增殖体系。而后在相同条件下与锥形瓶悬浮培养进行对比。结果结果表明:气动生物反应器中每100 mL液体培养基内接种胚性愈伤10 g,2,4-D 0.2 mg/L,保留20%的旧培养基时能使胚性愈伤增殖率达到最高,可达216.18%;结论与锥形瓶悬浮培养体系相比,ALB系统在一周内胚性愈伤生长速度更快,为锥形瓶悬浮培养体系的3.15倍;显微观察显示增殖的胚性愈伤组织稳定且优质。该研究为基于油松体胚体系的大规模扩繁提供技术支持。      

岱海移殖大银鱼十年总结——第9年才成功第10年突然绝迹原因分析

岱海渔场１９８７年从太湖引进大银鱼受精卵,当年未见成效。１９８８年再度引进,秋冬开始捕到少量个体。１９８９年仍能捕到大银鱼,并且个体均匀、生长良好,表明已在岱海自行繁殖。此后,开始清野和保护幼鱼,进行人工增殖。１９９５年终于获得渔业生产效益,总计捕捞大银鱼３１０ｔ,创利税１５５０余万元。但１９９６年大银鱼在岱海突然绝迹了,主要原因是拖网生产时间长,船只多,使沉积湖底多年的有机物质大量翻浮起来,底层形成了一个缺氧层,在缺氧的情况下Ｈ２Ｓ、ＮＨ３－Ｎ等有害物质大量产生,致使没有回避能力的大银鱼受精卵在湖底未能发育成活。