桦褐孔菌多糖的提取及对肝癌细胞SMMC7721的抗增殖的研究

探讨用超声提取法提取桦褐孔菌中桦褐孔菌多糖的工艺条件及桦褐孔菌多糖时肝癌SMMC7721细胞株的抗增殖作用。设计正变实验．时桦褐孔菌的超声提取工艺进行研究．并用MTT比色法研究桦褐孔菌多糖时肝癌SMMC7721细胞株的抗增殖作用。桦褐孔菌多糖超声提取的最佳工艺条件为95℃、15倍水、20kHz、超声60min，桦褐孔菌多糖在1．0-16．0wg／mL范围内时肝癌SMMC7721细胞株的增殖均有抑制作用．且表现出浓度相关性。     

桦褐孔菌菌丝体水溶性多糖提取条件试验

采用正交试验法，对影响桦褐孔菌菌丝体粗多糖提取的浸提时间、浸提温度、乙醇沉淀浓度等因素进行了试验。结果表明桦褐孔菌菌丝体多糖的最佳提取条件为：80℃浸提温度，2．5h浸提时间，85％乙醇沉淀浓度。     

桦褐孔菌多糖的体外抗氧化作用研究

Inonotus obliquusis placed in theBasidiomycotina, Hymenomycetes , Aphyllophoralesand Polyporaceae[1]. The mushroomis a wood-decaying fungus that grows under the bark oflive standing trees such as birch, el m andJapanese alder , or on the dry trunks of thesetrees after felling . In Russian folklore ,I .obliquusis considered a medicinal fungus andhas been widely used to prevent and treatdiseases and tumors affecting the digestivesystem ( e . g . gastric , intestinal and livercancers ) , cardio…     

桦褐孔菌多糖的提取工艺、结构及功能活性研究进展

桦褐孔菌(Inonotus obliquus)是主要生长在白桦树、榆树等树皮上的木腐真菌。桦褐孔菌多糖是重要的活性成分,具有抗糖尿病、调节肠道菌群、治疗炎症、抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤等多种功能活性,在近年的研究中备受关注。综述目前桦褐孔菌多糖提取工艺、结构及功能活性的研究现状,讨论了桦褐孔菌多糖在今后可能的发展趋势及研究方向,旨在为桦褐孔菌多糖的进一步研究、工业化生产及相关产品的开发提供一定的理论基础。     

桦褐孔菌多糖诱导人卵巢癌细胞凋亡的研究

探讨Bcl-xl、p53基因在桦褐孔菌多糖诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡中的作用。不同浓度桦褐孔菌多糖作用于人卵巢癌SKOV3细胞,荧光显微镜观察人卵巢癌SKOV3细胞凋亡作用,RT-PCR法检测Bcl-xl、p53基因表达量的变化。桦褐孔菌多糖能诱导人卵巢癌细胞凋亡,并且上调p53和降低Bcl-xl表达。桦褐孔菌多糖促进SKOV3凋亡,其机制可能与激活p53、抑制Bcl-xl表达有关。     

桦褐孔菌多糖的药理活性与化学结构研究进展

桦褐孔菌(Inonotus obliquus=Fuscoporia oblique)是一种著名的民间药用真菌,多糖是其重要的活性成分之一。就近年来桦褐孔菌多糖的化学结构和药理活性的研究进展进行综述,旨在为桦褐孔菌多糖的进一步研究提供参考。     

紫外线诱变筛选桦褐孔菌多糖高产菌株初报

试验采用不同时间、不同次数对桦褐孔菌菌丝进行紫外线照射处理。结果表明紫外线照射3次、照射时间20min处理的桦褐孔菌菌丝多糖含量显著高于出发菌株;并显著高于其它处理,菌丝多糖含量达5.17%。     

桦褐孔菌菌丝体过氧化物酶同工酶提取剂筛选试验

采用Tris-HCl（pH6．9）、TBE、Tris-甘氨酸（pH8．3）、磷酸缓冲液（pH6．4）、Tris-HCl（pH8．0）、Tris-HCl（pH8．8）为提取剂，在同一条件下提取桦褐孔菌过氧化物酶。通过采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，对桦褐孔菌菌丝体的过氧化物酶同工酶进行研究。结果表明：采用Tris-HCl（pH6．9）做为提取剂制备的样品液经电泳后，在图谱中条带丰富，带形清晰，提取效果最好。Tris-甘氨酸（pH8、3）提取效果最差。     

桦褐孔菌人工培养菌丝体、菌核与野生菌核多糖的降血糖比较试验研究

目的是探讨桦褐孔苗人工培养菌丝体、菌核与野生菌核多糖的降血糖作用。方法：采用四氧嘧啶（200mg／kg体重）腹腔注射复制小鼠高血糖模型。分别给予小鼠应用桦褐孔菌人工培养菌丝体、菌核与野生菌核多糖提取物按不同剂量灌胃，葡萄糖氧化酶法测定各组的血糖水平。结果：桦褐孔菌菌丝体多糖提取物不同剂量组对四氧嘧啶型高血糖模型小鼠的血糖均有抑制作用，对正常小鼠无明显降血糖作用。桦褐孔菌人工培养菌丝体、菌核与野生菌核多糖三者的降血糖作用无显著性差异。结论：桦褐孔菌人工培养菌丝体、菌核与野生菌核多糖提取物对四氧嘧啶型高血糖模型小鼠均有降血糖作用。对正常小鼠无明显降血糖作用。     

桦褐孔菌对肺癌细胞抗增殖和诱导凋亡观察

用MTT法测定桦褐孔菌抗突变活性成分Inotodiol,对人肺癌A549细胞株的增殖抑制作用,20mg.L-1～80mg·L^-1桦褐孔菌的抗突变活性成分Inotodiol对人肺癌A549细胞株有抑制增殖作用,且表现出浓度和时间依赖关系。在倒置显微镜下、HE染色光学显微镜下、AO/EB双染色荧光显微镜下、透射电子显微镜下观察,肿瘤细胞均有体积变小、有凋亡小体。桦褐孔菌的抗突变活性成分Inotodiol可抑制人肺癌A549细胞株的增殖和诱导肿瘤细胞凋亡。     

桦褐孔菌菌丝体与子实体蛋白质营养价值评价

采用国际上通用的营养价值评价方法,对桦褐孔菌菌丝体与子实体蛋白质的营养价值进行全面评价。结果表明,桦褐孔菌子实体中蛋白质的氨基酸含量分别比菌丝体和鸡蛋模式高45．9％和49．1％,其菌丝体的氨基酸评分、化学评分、必需氨基酸指数、生物价、营养指数和氨基酸比值系数分分别为75．0,44．5,92．2,88．8,24．7和52．0,营养价值比子实体高。     

桦褐孔菌菌核提取物对细菌抑菌活性研究

采用纸片法研究了桦褐孔菌的水、甲醇、丙酮、氯仿、石油醚提取物对大肠杆菌ERcat、EnR￡、ATCC25923和金黄色葡萄球菌ATCC25923、O41ermc的抑制作用。结果表明:桦褐孔菌各提取物对大肠杆菌ERcat、ATCC25923和金黄色葡萄球菌O41ermc均有不同程度的抑制作用。其中甲醇提取物在10mg·mL-1浓度下对大肠杆菌ERcat的抑菌效果最好,抑制率高达84.1%;石油醚提取物对除大肠杆菌EnR￡以外的其它供试菌株均表现出显著的抑菌活性。另外,浓度为10mg·mL-1的丙酮提取物对大肠杆菌EnR￡的生长有一定的抑制作用;浓度2.5mg·mL-1的甲醇提取物和浓度10mg·mL-1的石油醚提取物对金黄色葡萄球菌ATCC25923的抑菌作用较为明显。     

桦褐孔菌纤维素酶基因的克隆与原核表达

成功获得了桦褐孔菌(Inonotus obliquus)JL 01菌株的内切葡聚糖酶(IO-EG)和β-葡萄糖苷酶(IO-BGL)的cDNA全长序列.eg2基因cDNA序列全长(ORF)为1149 bp,编码382个氨基酸,bgl2基因cDNA序列全长(ORF)为2583 bp,编码860个氨基酸;成功构建了30a-eg2和30a-bgl2大肠杆菌表达菌株,诱导培养后,SDS-PAGE电泳分析表明两个菌株均表达蛋白,且蛋白以包涵体形式存在,为桦褐孔菌高效外源基因表达系统的建立提供了基础.     

野生桦褐孔菌菌株JS-1驯化栽培研究

采用以棉籽皮或阔叶木屑为主料的混合培养基实现桦褐孔菌菌株JS-1的人工栽培.预结实试验证明了人工栽培桦褐孔菌具有可行性;研究了菌丝体由营养生长转为生殖生长的条件选择与控制,证明采用V配方,在温差10℃条件下,经过菌丝体后熟期和转色可形成菌核;且菌核在20～25℃范围内生长良好;发现控制通气是关键技术环节,菌株JS-1菌核形成和生长具有"限氧"的特性,氧气充足反不利于菌核生长.上述条件下,以棉籽皮为主料,一茬菇生物学效率可达到47%左右,干品得率8%.     

香菇子实体多糖分步酶解法提取研究

首先采用正交试验优化纤维素酶﹑果胶酶和木瓜蛋白酶对香菇(Lentinula edodes)子实体多糖酶解提取的工艺参数,然后在优化酶解条件下,依次采用纤维素酶﹑果胶酶和木瓜蛋白酶分步处理香菇子实体以提取香菇多糖,并与单一酶解提取法和传统热水浸提法进行对比.结果表明,纤维素酶﹑果胶酶﹑木瓜蛋白酶的最佳提取工艺参数依次为加酶量0.8%、温度45 ℃、pH 4.5、提取时间1 h,加酶量1.0%、温度45 ℃、pH 3.5、提取时间2.0 h和加酶量1.0%、温度45 ℃、pH 4.0、提取时间1.5 h;在优化提取条件下,分步酶解法提取香菇粗多糖的提取率可达14.17%,比传统热水浸提法提高128.2%,比单独采用纤维素酶﹑果胶酶﹑木瓜蛋白酶酶解提取分别提高了43.71%、46.99%和23.11%.紫外光谱分析表明,分步酶解法提取的香菇多糖纯度明显高于热水浸提法提取的香菇多糖.-     

竹荪多糖的分离纯化和鉴定

中国福建古田人工栽培的竹荪（Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａｉｎｄｕｓｉａｔａ）子实休干品经热水提取，乙醇沉淀，蛋白法和Ｓｅｖａｇ法相结合去蛋白，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱纯化，得到竹荪多糖，命名为ＤＩ，用聚丙烯酰胺凝胶电泳和葡聚糖凝胶柱层析分析表明：该多糖为均一物质。竹荪多糖的分子量为１４４，０００，经紫外扫描，元核酸和蛋白质的特征吸收峰，红外扫描表明有典型的多糖吸收峰。该多糖经纸层析和气相色谱分析表明：其单糖组成为Ｌ—岩藻糖、Ｄ—木糖、Ｄ—甘露糖、Ｄ—葡萄糖，摩尔比为０．１６：０．２４：１．００：１．０８。