鸡减蛋综合征（EDS76）病毒的研究：Ⅱ.GC^2株蛋白性质的研究

ＧＣ２株提纯后经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析得到１３条多肽，分子量范围从１１２０００￣１８０００道尔顿，ＧＣ２株抗原与标准株比较为同一抗原性。     

鹅源腺病毒Y81G4株基因组末端倒置重复序列（ITR）的核酸鉴定 …

对鹅源腺病毒株Ｙ８１Ｇ４基因组两则末端序列测定和比较，鉴定其其ＩＴＲ区。Ｙ８１Ｇ４株ＩＴＲ全长为１２５ｂｐ，远长于其它禽１、２、３群腺病毒ＩＴＲ长度。在Ｙ１８Ｇ４株ＩＴＲ中有一些腺病毒ＩＴＲ序列特征：（１）Ｓ’－Ｃ（Ａ／Ｔ）（Ａ／Ｔ）ＮＴＣＡＴ－现毒典型起始序列；（２）９～１３ｂｐ存在腺病毒科共的（Ａ／Ｔ）Ｔ（Ａ／Ｔ）ＡＴＡ保守序列；（３）在ＩＴＲ区３７～４２ｂｐ出现的ＧＮＧＧＣＧ保守序列；（４）     

分泌抗细粒棘球蚴原头节可溶性抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＳＰ２／０骨髓瘤细胞与以羊源细粒棘球蚴原头节可溶性抗原免疫的Ｂａｌｌ／ｃ鼠脾细胞融合，经克隆和筛选后获得８株分泌抗ＳＰＡ的杂交瘤细胞株，即３Ａ４，１ＩＣ２，２Ｂ３，２Ｃ２，２Ｅ３，３Ｅ６，３Ｆ１０和２Ｃ２。亚类鉴定为ＩｇＧ１（３Ａ４，３Ｅ６，１Ｃ２，３Ｆ１０和３Ｃ２），ＩｇＧ２ｂ（２Ｃ２），ＩｇＧ３（２Ｅ３），ＩｇＧ总（２Ｂ３）。免疫双扩散法显示２Ｃ２腹水及２Ｂ３，２Ｃ２，２Ｅ３培养上清粗提物与     

抗牛IgGFc受体单克隆抗体的生产与鉴定

利用阳性表达细胞和荧光激发流式细胞分类器建立了一个单克隆抗体的制备与快速鉴定系统。用克隆于表达性质粒载体ｐＣＤＭ８的牛ＩｇＧ＿１Ｆｃ受体（ｂｏＦｃγＲⅡ）ｃＤＮＡ转染ＣＯＳ７细胞并用被转染细胞作抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取免疫鼠脾细胞与ＮＳＯ浆细胞瘤细胞株融合，筛选克隆出３株分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤，即ＣＣ－Ｇ３６、ＣＣ－Ｇ３７和ＣＣ－Ｇ３９。经使用荧光激发流式细胞分类器检测，３个单克隆抗体均识别经ｂｏＦｃγＲⅡ转染的ＣＯＳ７细胞而不识别未经转染的ＣＯＳ７细胞和经牛ＩｇＧ＿２Ｆｃ受体（ｂｏＦｃγ２Ｒ）转染的ＣＯＳ７细胞。３个单克隆抗体分别为ＩｇＧ＿１（ＣＣ－Ｇ３６）、ＩｇＧ＿２ａ（ＣＣ－Ｇ３７）和ＩｇＧ＿３（ＣＣ－Ｇ３９）。本研究还用同样方法验证了单克隆抗体ＣＣ－Ｇ２４抗ｂｏＦｃγ２Ｒ的特异性。     

桑种质资源（Morus.L）染色体Giemasa—C带型研究

采用ＢＳＧ法对新一之濑和育２号优质种质资源的Ｇｉｅｍｓａ－Ｃ带的诱导及带型分析表明，新一之濑的带型公式为２ｎ＝２８＝２ＣＩＴ＋１Ｔ＾＋＋１ＣＩＴ＋Ｔ＾－＋１ＩＴ＋３ＣＴ＾＋Ｔ＋２ＣＩ＋２Ｃ＋Ｉ，育２号为２ｎ＝２８＝２ＣＩＴ＋１ＣＴ＋１Ｔ＋２ＣＩＴ＋１Ｔ＋４ＣＴ＾＋－＋ｉ＋２ｃｉ＋２ｃ＋Ｉ，２品种特征以着丝粒带（Ｃ）为主，其次为端带和中间带，２个桑品种未发现无带现象。断一之濑第４、８、１０、１４带纹     

进口鸽的禽结核病及其分离株的致病性

一只２岁龄公鸽在其泄殖腔后部皮肤上发现一结核病灶（直径１５ｍｍ），从皮肤结构病灶和粪便中分离出血清２型禽分枝杆菌，分离的光滑圆形（ＳｍＤ）变异株（４．９×１０＾６ＣＦＵ）和粗糙粒状（ＲＧ）变异株（３．７×１０＾７ＣＦＵ）静脉接种鸡，用ＲＧ变异株接种的鸡在接种后第３９天死亡，用ＳｍＤ变异株脾肿大，用ＳｍＤ变异株接种鸡的肝，脾和肺中，观察到许多白色结构病变，而用ＲＧ变异株接种的鸡没有观察到大体病变，从     

抗EDS—76病毒单克隆抗体的研究：Ⅰ.分泌抗ESD—76病毒单克隆抗体细…

建立了５株分泌抗ＥＤＳ－７６病毒的单克隆抗体细胞株，分别是Ｃ４＾１３，Ｃ１１＾１３，Ｃ１１＾１５，Ｅ７＾１５和Ｆ９＾１３，各株分泌抗体的能力均稳定，且者是抗ＥＤＳ－７６病毒的特异性抗体，不与其它多种禽病毒发生交叉反应。其中Ｃ４＾１３，Ｃ１１＾１５分泌的抗体是ＩｇＧ２ａ，Ｃ１１＾１３分泌的抗体是ＩｇＧ１。这５株细胞株所分泌的抗体都有较强的中和活性。     

牛轮状病毒重组株的血清学和基因型特性

从母牛接种过Ａ组ＢＲＶ株ＮＣＤＶ－Ｌｉｎｃｏｌｎ（Ｐ１：Ｇ６）苗的两个吡邻牛场分离到两株牛轮状病毒（ＢＲＶ），编号为ＮＳ－１和ＮＳ－２，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ试验表明，ＮＳ－１和ＮＳ－２有相的的Ａ组ＲＮＡ电泳模式，而且全部基因片段同源，体外中和试验表明，ＮＳ－１株病毒能被Ｇ６特异性单克隆抗体（ＭｃＡｓ）和抗ＢＲＶＢ６４１株（Ｐ５：Ｇ６）豚鼠高免血清（ＧＰＡＳ）中和，但不被Ｇ１０特异性Ｍ     

鸭霉形体模式株与国内分离株细胞蛋白SDS—PAGE图谱比较

本实验以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ技术，对鸭霉形体模式株和国内分离的ＳＱＪ－５Ｃ３株进行了电泳图谱分析。结果表明，模式株与分离株电泳图谱总体上相差不大，但也存在２～３条蛋白带的差异，这说明ＳＤＳ－ＰＡＧＥ技术在霉形体种的鉴定中有一定意义。     

猪生殖—呼吸道综合征病毒（PRRSV）分离鉴定及其与欧,美PRRSV …

在我国吉林省某地猪生殖呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）抗体阳性猪群的４头２日龄弱仔猪实质脏器中分离到２株ＰＲＲＳＶ,间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）结果表明,ＰＲＲＳＶ（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）抗血清与２个分离株呈阳性反应;分离到病毒的弱仔猪血清与参考株（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）也呈阳性反应,而分离株与ＨＣＶ,ＰｒＶ,ＰＰＶ,ＴＧＥＶ,ＰＥＤＶ和ＨＥＶ无交叉抗原,以上试验证明,我们已成功地分离到２株地方性ＰＲ     

分泌抗禽呼肠孤病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立与鉴定

采用腹腔的接种１次脾内注射禽呼肠孤病毒（ＡＲＶ）蛋白免疫小鼠，经３次融合后，共筛选８株分泌抗禽呼肠孤病毒（单克隆抗体杂交瘤细胞株，这８株ＭｃＡｂ均可与ＡＲＶＳ１１３３株，ＦＤＯ株发生反应，而与ＩＢＤＶ，ＭＤＶ，ＥＤＳ－７６病毒不发生反应，经亚类鉴定，ＡＥ７，ＡＦ８，ＢＤ１，ＤＨ１０，ＥＥ５为ＩｇＧ１；ＡＤ６，ＣＧ４为ＩｇＣ２ａ，ＡＧ７为ＩｇＧ２ｂ。腹水效价在１０＾３～１０＾５之间。     

伊氏锥虫谷胱甘酰亚精胺还原酶（TR）的研究（二）

用ＣＥＡＥ ＤＥ－５２分离纯化的锥虫，经超声波粉碎后离心，上清经硫酸铵沉淀，再经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２００分子筛层析，ＤＥＡＥ Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ ＥＤ－５２离子交换层析，２’，‘ＡＤＰ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ层析得到纯化。筛选到抗蠕虫药奥芬哒唑（Ｏｘｆｅｎｄａｚｏｌｅ）对ＴＲ有抑制作用。但对治疗锥虫病没有作用；兔抗ＴＲ抗体与安锥赛共同注射人工感染锥虫病的小白鼠，可增加安锥赛对锥虫病的疗效。     

抗鼠隐孢子虫单克隆抗体的研究

利用鼠隐孢子虫卵囊脱囊物免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞融合，经过３￣４次有限稀释法克隆化，获得５株持续分泌抗体的杂交瘤细胞株。所获抗体均属ＩｇＧ１。ＩＦＡ检测结果表明：２Ｇ７株单抗作用于卵囊壁抗原，而ＩＡ４、２Ｅ７、３Ｇ３、４Ａ７株单抗作用于子孢子表面抗原。诱生腹水经过反复冻融、冻干及硫酸铵沉淀后，抗体活性无明显变化。５株单抗均不与贝氏隐孢子虫及柔嫩艾美尔球虫产生交叉反应，与小孢隐     

抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体中和株的建立

将纯化的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）组织毒免疫的ＢＡＬＢ／ｃ鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，用ＥＬＩＳＡ，病毒中和试验检测分泌抗体，获得了６株稳定分泌抗ＩＢＤＶ单隆抗体的杂交瘤细胞，命名为ＮＩＢ－１，ＮＩＢ－２，ＮＩＢ－３，ＮＩＢ－４，ＮＩＢ－５，ＮＩＢ－６；６株ＭＣＡｂ均具ＥＬＩＳＡ特性和免疫沉淀特性，亚类鉴定表明，前４株属于ＩｇＧ２ａ，后２株属于ＩｇＧ１。杂交瘤细胞冻存６个月后复苏，均     

超排山羊卵巢卵母细胞体外成熟和体外受精的研究

以ＴＣＭ１９９＋１０ｍｍｏｌ／ＬＨＥＰＥＳ＋青霉素（６ｍｇ／Ｌ）＋链霉素（５ｍｇ／Ｌ）为基础培养液（ＢＭ），再分别加入不同成分，配成５种卵母细胞成熟液：（Ａ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ；（Ｂ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ（２．５ｍｇ／Ｌ）；（Ｃ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２（１ｍｇ／Ｌ）；（Ｄ）ＢＭ＋１０％ＦＣＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２；（Ｅ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２＋颗粒细胞（１．５×１０６～３．０×１０６个／ｍＬ）。在３８．５℃、５％ＣＯ２下培养２６ｈ，排卵后第１天卵巢卵母细胞体外成熟率分别为６７．６７％（２０／３０），６０．４２％（２９／４８），８３．６７％（４１／４９）和８０．８２％（５９／７３），排卵后第５天卵巢卵母细胞，在培液Ｄ中体外成熟率为７１．４３％（４５／６３）。排卵后第１天的９８枚卵巢卵母细胞，体外成熟体外受精卵裂率为２１．４３％，２１枚２细胞胚移植５头受体获２头羔羊。研究表明，超排山羊卵巢卵母细胞经体外成熟可获得大量廉价的成熟卵母细胞，并可通过体外受精获得试管山羊     

传染性支气管炎病毒中国地方分离株RFLP基因分型的研究

为初步确定我国不同地区流行的传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）的基因分型，对分离自国内８个不同地域疫区的ＩＢＶＱＤ、ＧＺ、ＺＺ、ＴＪ、ＤＬ、ＹＣ、ＪＳ１和ＪＳ２及参考株Ｍ４１、Ｈ５２和Ｔ的Ｓ１基因ＲＴ－ＰＣＲ扩增ｃＤＮＡ进行ＨａｅⅢ的ＲＦＬＰ分析。结果，ＱＤ与ＭＤ４１、Ｈ５２同属Ｍａｓｓａｃｈｕｓｓｅｔｅ基因型，ＧＺ、ＺＺ、ＹＣ与Ｔ的基因型相同，ＤＬ、ＪＳ１和ＪＳ２则表现为各自独立的基因型，而ＴＪ则为ＤＬ和Ｔ２种基因型毒株的混合感染，表明我国的广大地域内存在着Ｍａｓｓ基因型、Ｔ基因型和可能的变异株ＩＢＶ的流行。     

大蒜油中大蒜素等含硫化合物的气相色谱-质谱法测定

三硫醚化合物ＣＨ２＝ＣＨ－ＣＨ２－Ｓ－Ｓ－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ＝ＣＨ２（二丙烯基三硫醚，俗称大蒜素或大蒜新素）、ＣＨ３－Ｓ－Ｓ－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ＝ＣＨ２（甲基丙烯基三硫醚）和ＣＨ３－Ｓ－Ｓ－Ｓ－ＣＨ３（二甲基三硫醚），除了对各种病菌具有很强的杀灭和抑制作用外，还可以提高饲料适口性，增加采食量，提高饲料报酬。本研究利用气相色谱－质谱（ＧＣ－ＭＳ）联用仪对大蒜油中的大蒜素等部分组分进行了测定，方法简便快速、准确可靠。１　方法　１．１　仪器与试剂　ＧＣ－ＭＳ　ＱＰ－５０００气相色谱－质谱联用仪（日本岛津公…     

RT-PCR法分离伊氏锥虫VSG基因的研究

应用异硫氰酸胍一酚一氯仿一步法分离伊锥虫安微株克隆虫体ＳｈＴａｔｌ的二信抗原变异体ＳｈＴａｔ１．３和ＳｈＴａｔ１．５总ＲＮＡ，在含有甲醛物琼脂糖凝胶电泳后，转印到硝酸纤维膜上。根据布氏锥虫ＶＳＧｍＲＮＡ３’端保守序列，设计合成了一个互补于它的含十八个碱基的寡核苷酸５’－－ＧＧＴＧＴＴＡＡＡＡＴＡＴＣＡＧ－３’，经＾３２Ｐ标记，Ｎｏｔｒｈｅｒｎ杂交，首次证明２伊氏锥虫含有同样的保守序列。利用合成的十     

产蛋减少综合症病毒的研究：I.GC2株的提纯及形态观察

本文通过差速离心，连续蔗糖梯度离心分离纯化了ＥＤＳ７６病毒ＧＣ２株，提纯的病毒经电镜观察测定该病毒直径范围为６０￣７５ｎｍ，平均直径为７１ｎｍ，病毒为二十面体球形对称结构。     

“三三法”快速检测沙门氏菌的研究

将ＤＨＬ平板上产Ｈ２Ｓ和不产Ｈ２Ｓ的菌落分别用ＴＳＩ，ＬＭＡ，甘露醇或ＴＳＩ，ＬＭＡ，ＯＮＰＧ三管判定，辅以肠杆菌科诊断噬菌体０－１，Ｃ多价，Ｅ多价三滴法快速检测沙门氏菌的方法简称“三三法”。近两年来我们用此法检测了１２５批，３４１份样品中２３６株可凝菌株，检出沙门菌２７株，１１个血清型，经系统生化验证符合率１００％。表明该法具有快速，简便，准确，实用的优点。