鸭胸腺内Ghrelin免疫组织化学的定位分布及发育性变化

【目的】研究Ghrelin在鸭胸腺发育过程中的定位分布及变化规律,以期为进一步探讨Ghrelin对胸腺生理功能的影响提供形态学资料.【方法】选用不同发育阶段的天府肉鸭,胚胎期分7个组,即:14、16、18、20、22、24和26 d胚龄组;胚后期分12个组,即:新生雏、1、3、5、8、11、14、17、20、26、29和32周龄组.运用免疫组织化学技术及形态计量方法研究Ghrelin在鸭胸腺发育过程中的定位分布及变化规律.【结果和结论】Ghrelin免疫阳性细胞弥散分布于20 d胚龄至胚后32周龄的胸腺小叶皮质和髓质;阳性细胞呈圆形、卵圆形、星形或不规则形,主要为胸腺上皮细胞和巨噬细胞.阳性细胞数量在胚胎期无明显差异,在胚后胸腺继续发育期(新生雏~8周龄)和成熟期(11~17周龄)呈波浪状变化,在退化期(20~32周龄)呈下降趋势.说明在天府肉鸭胸腺个体发育中存在Ghrelin免疫阳性细胞,其数量表现出明显增龄变化特性,与胸腺退化密切相关.     

营养条件对大鼠胃及小肠内Ghrelin表达的影响

【目的】探讨营养水平对胃肠道Ghrelin表达的影响。【方法】运用免疫组织化学SP法,在高、低和标准3个不同营养条件下,对健康成年雄性SD大鼠胃肠道内Ghrelin阳性细胞的分布和数量变化进行研究。【结果】Ghrelin阳性细胞在大鼠胃及小肠内均有表达,各营养组胃中Ghrelin阳性细胞数量均明显多于十二指肠、空肠和回肠,且主要分布于胃底腺的体部和底部;低营养条件下,Ghrelin阳性细胞表达量较标准营养条件下多(P0.05),恢复到标准状态下后其表达量减少(P0.01);高营养条件下,Ghrelin阳性细胞数量与标准组无明显差异,当其恢复到标准营养条件下时,Ghrelin阳性细胞表达量减少,但单细胞着色面积增大,颜色加深。【结论】营养条件可影响胃肠道内Ghrelin的分泌,并可能通过胃肠道内Ghrelin的分泌间接调节胃肠功能。     

不同生理时期小鼠卵巢的Ghrelin定位研究

研究生长素(Ghrelin)在青春期、妊娠期、哺乳期和泌乳后期小鼠卵巢上的定位,采用免疫组化PV-9000二步法观察Ghrelin在卵巢上的分布。Ghrelin阳性细胞主要分布于4个生理时期小鼠卵巢的卵母细胞、间质细胞、髓质和黄体细胞上。但表达强度和分布范围不同,妊娠期8d黄体与哺乳期18d的卵巢髓质呈强阳性表达。妊娠8d的小鼠卵巢的生殖上皮细胞出现阳性表达。Ghrelin在小鼠卵巢青春期、妊娠期、哺乳期和泌乳后期时期均有表达,妊娠期黄体呈强表达,揭示Ghrelin可能对小鼠不同生理时期尤其是妊娠有一定的调节作用。     

不同日龄猪小肠黏膜5-HT分布特征的研究

 【目的】研究猪小肠黏膜中5-HT分布与小肠发育之间的关系,为阐明5-HT在发育过程中对小肠调节作用机理提供形态学依据。【方法】选用0、5、15和100日龄英系大白猪,采用免疫组织化学染色结合显微镜观察计数对猪小肠各段5-HT的分布进行定性和定量研究。【结果】5-HT免疫反应阳性细胞广泛分布于0、5、15和100日龄猪小肠各段的绒毛中段和底端以及肠腺上皮细胞之间。由0日龄至100日龄,小肠5-HT免疫反应阳性细胞密度呈先增加后递减的趋势,小肠各段5-HT免疫反应阳性细胞密度呈现由十二指肠至回肠显著递减的趋势;各日龄各肠段肠腺5-HT免疫反应阳性细胞数量均显著高于绒毛。【结论】猪小肠黏膜5-HT主要分布于肠腺上皮细胞间,5-HT免疫反应阳性细胞密度随日龄改变而发生变化,且各肠段分布规律不尽相同。     

鳜胸腺组织学结构及抗体分泌细胞的免疫组织化学

使用常规组织学和免疫组织化学方法对鳜胸腺进行研究。观察到鳜胸腺位于鳃盖与背的联合处,呈三角形,对称分布;胸腺实质随年龄增长分叶逐渐明显,大体可分三个区,外区、中区和内区,中区和内区分别相当于哺乳动物的皮质区和髓质区。外区主要由扁平上皮细胞和粘液细胞组成,中区可观察到大量网状纤维和淋巴细胞,内区主要由排列较疏松的淋巴细胞组成。此外,光镜下还观察到哈氏小体和髓质上皮囊的存在。免疫组织化学结果显示胸腺中抗体分泌细胞主要分布在外区和中区,胸腺分叶部位尤为明显。阳性细胞胞膜着色明显,呈清晰棕黄色。     

鳜胸腺组织学结构及抗体分泌细胞的免疫组织化学

使用常规组织学和免疫组织化学方法对鳜胸腺进行研究。观察到鳜胸腺位于鳃盖与背的联合处,呈三角形,对称分布;胸腺实质随年龄增长分叶逐渐明显,大体可分三个区,外区、中区和内区,中区和内区分别相当于哺乳动物的皮质区和髓质区。外区主要由扁平上皮细胞和粘液细胞组成,中区可观察到大量网状纤维和淋巴细胞,内区主要由排列较疏松的淋巴细胞组成。此外,光镜下还观察到哈氏小体和髓质上皮囊的存在。免疫组织化学结果显示胸腺中抗体分泌细胞主要分布在外区和中区,胸腺分叶部位尤为明显。阳性细胞胞膜着色明显,呈清晰棕黄色。     

Ghrelin在不同生理期小鼠卵巢的表达

采用免疫组化PV-9000法和DAB显色技术,研究Ghrelin在不同生理时期小鼠卵巢上的定位。结果表明:在青春期45 d小鼠卵巢原始卵泡上有Ghrelin免疫阳性细胞表达;在妊娠2 d的小鼠卵巢的初级卵泡上有阳性细胞表达;在青春期45 d,妊娠2 d和8 d的小鼠卵巢的次级卵泡和间质细胞上均出现Ghrelin免疫阳性细胞表达;青春期45 d小鼠卵巢黄体出现阳性表达;妊娠8 d的小鼠卵巢的生殖上皮出现阳性表达。表明Ghrelin可能对小鼠生理周期有一定的调节作用。     

雌雄小鼠胸腺和脾脏的免疫比较

[目的]探讨雌雄小鼠之间存在的免疫差异。[方法]以8周龄的雌雄小鼠为研究对象,测量雌雄小鼠的胸腺和脾脏质量及其脏器指数的大小;通过HE染色观察雌雄小鼠胸腺和脾脏的组织形态学变化;利用流式细胞术分析胸腺和脾脏中CD3、CD4、CD8和CD19各淋巴细胞的百分含量。[结果]雌性小鼠的胸腺质量和胸腺指数均大于雄性小鼠（P〈0.05）;雌性小鼠的脾小体的形态结构比雄性小鼠更完整;雌性小鼠胸腺的CD4＋CD8＋双阳性细胞百分含量高于雄性小鼠（P〈0.01）,CD4-CD8-双阴性细胞百分含量低于雄性小鼠（P〈0.05）,CD4＋和CD8＋单阳性细胞百分含量明显低于雄性小鼠（P〈0.01）。[结论]雌雄小鼠之间存在着免疫差异,特别是胸腺方面差异更明显。     

Ghrelin在鸵鸟小肠中的随龄性表达特点

为了探讨Ghrelin在鸵鸟小肠发育过程的表达特点及其调节食欲的细胞学基础,采用免疫组化SP法分别检测了3日龄、3周龄和9～11月龄鸵鸟小肠内Ghrelin阳性产物的分布及变化特点. 结果显示:Ghrelin免疫阳性产物在鸵鸟3个年龄组各段小肠内均有分布,主要分布在小肠的黏膜层,其中固有层的小肠腺和肠绒毛上皮分布较多,包括柱状细胞,内分泌细胞和淋巴细胞等;阳性产物的表达量随年龄增加呈递增趋势,3日龄鸵鸟阳性细胞相对表达量最少,3周龄鸵鸟次之,9～11月龄最多,且差异显著(P<0.05);不同肠段Ghrelin表达量亦有不同,但各年龄段均表现为自十二指肠、空肠、回肠阳性产物相对表达量依次降低,其中3日龄和3周龄鸵鸟各肠段阳性细胞相对表达量变化差异不显著(P>0.05);9～11月龄鸵鸟各肠段阳性细胞相对表达量变化差异显著(P<0.05).表明小肠中Ghrelin的表达随年龄的增长而增多,并通过自分泌兼或旁分泌的形式调节小肠消化功能的发育和完善.     

C-erbB2蛋白在小鼠围着床期子宫中的表达和定位

为研究C-erbB2蛋白在小鼠围着床期子宫中的蛋白定位,通过免疫组化方法检测C-erbB2蛋白在围者床期小鼠子宫中定位情况.研究结果表明:在未孕子宫和空白对照组子宫中未见C-erbB2蛋白的表达,第1～3 d子宫中C-erbB2蛋白主要分布在子宫内膜腔上皮和腺上皮细胞胞膜上,子宫内膜基质细胞中未见表达,第4～5 d子宫中C-erbB2蛋白除了表达在子宫内膜腔上皮和腺上皮细胞胞膜上,上皮下基质细胞膜上可见弱阳性表达,第6～8 d的子宫中C-erbB2蛋白主要分布在子宫内膜腔上皮和腺上皮细胞以及围绕着床位点的蜕膜细胞胞膜上,各组肌层均未见阳性表达,C-erbB2蛋白在围着床期小鼠子宫组织中的表达呈规律性变化.     

骨髓间充质干细胞对放射性胸腺损伤的修复作用

目的观察骨髓间充质干细胞（MSCs）对放射性胸腺损伤的修复作用.方法 C57BL/6小鼠行1.75 Gy X线全身照射,每周1次,连续4周.实验设正常对照组、照射组及照射＋MSCs组,于末次照射后30、60、90 d称量各组小鼠体质量.取胸腺组织,计算胸腺质量指数,并通过组织学观察MSCs对胸腺组织损伤的修复作用.结果辐射组和MSCs组在照射期间体质量下降,在观察期间内,小鼠体质量随时间逐渐增加,并且MSCs组小鼠体质量略高于辐射组.对照组小鼠胸腺指数随周龄增大而逐渐减小,辐射组和MSCs组小鼠随照射后时间的延长胸腺指数逐渐增加,MSCs组90 d时胸腺指数与对照组小鼠接近.通过观察病理结果可知,正常对照组小鼠胸腺组织皮、髓质结构清楚.辐射组小鼠30 d时胸腺组织淋巴细胞可见变性、坏死,细胞数量减少;60 d时辐射组可见胸腺淋巴细胞出现修复性再生与增生;90 d时辐射组可见胸腺瘤癌前病变.MSCs移植30 d时胸腺组织皮质高度增生,髓质缩小,皮髓质内可见新生的淋巴组织;60 d时胸腺结构趋于正常.结论 MSCs可促进损伤胸腺再生与修复.     

恒河猴胸腺的显微与超微结构观察

应用组织学、组织化学和透射电镜技术观察表明，恒河猴胸腺外包被膜，被膜结缔组织伸入其内部形成许多小隔，将胸腺实质分成许多小叶，小叶又由皮质和髓质组成，大部分的髓质彼此相连，被膜和小叶间隔内含有较多的肥大细胞。皮质主要由幼稚T细胞和皮皮细胞构成，另有少量的巨噬细胞和肥大细胞等；皮人还可见典型的血－胸腺屏障。髓质主要由成熟T细胞和上皮细胞组成，另有较多的肥大细胞和少量的巨噬细胞、交错突细胞、B淋巴细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞、肌样细胞以及一些胸腺小体和胸腺小囊。     

雏番鸭胸腺显微与亚微结构

雏番鸭胸腺实质由许多小叶构成,每个小叶可分为皮质和髓质,皮质主要由大量密集排列的淋巴细胞组成,髓质淋巴细胞数量较少,排列也较疏松,上皮性网状细胞清晰可见,髓质部常见弥散型胸腺小体,偶见象哺乳动物那样典型的胸腺小体,电镜观察表明:(1)胸腺淋巴细胞根据其大小和超微结构分为大、中、小3型;(2)上皮性网状细胞形态多样,有突起,核较大,呈圆彤或椭圆形,核仁大而圆,胞质内含各种细胞器,核周和细长突起中存在张力丝柬,相邻细胞藉桥粒连接在一起;(3)巨噬细胞多位于内皮质、皮髓交界区和髓质,细胞大而外形多样,常有粗钝的伪足伸出,胞质丰富,细胞器发达,含有各级溶酶体,溶酶体内常见有吞噬衰老的红细胞和细胞器,细胞核外形不规则,异染色质很少,有明显核仁。     

Thymic requirement for clonal deletion during T cell development

During T cell differentiation, self tolerance is established in part by the deletion of self-reactive T cells within the thymus (negative selection). The presence of T cell receptor (TCR)-alpha beta + T cells in older athymic (nu/nu) mice indicates that some T cells can also mature without thymic influence. Therefore, to determine whether the thymus is required for negative selection, TCR V beta expression was compared in athymic nu/nu mice and their congenic normal littermates. T cells expressing V beta 3 proteins are specific for minor lymphocyte stimulatory (Mlsc) determinants and are deleted intrathymically due to self tolerance in Mlsc+ mouse strains. Here it is shown that V beta 3+ T cells are deleted in Mlsc+ BALB/c nu/+ mice, but not in their BALB/c nu/nu littermates. Thus, the thymus is required for clonal deletion during T cell development.     

固始鸡免疫器官内细胞凋亡基因Fas和FasL的动态表达

 【目的】探讨固始鸡免疫器官内细胞凋亡基因Fas和FasL的动态表达。【方法】应用免疫组织化学技术和Leica 显微图像处理系统,对细胞凋亡基因Fas和FasL在固始鸡免疫器官内的动态表达进行研究。【结果】Fas在不同发育阶段固始鸡免疫器官内均有表达,但表达量均不相同,呈波浪样动态变化;Fas表达于固始鸡免疫器官内淋巴细胞细胞膜和细胞质,不表达于细胞核;Fas表达阳性细胞在固始鸡不同免疫器官内分布位置不同,呈散在或簇团状分布：法氏囊内阳性细胞主要分布于黏膜靠近上皮细胞的固有膜层内、淋巴小结与淋巴小结之间区域、淋巴小结边缘,淋巴小结内少量淋巴细胞也有Fas表达;胸腺内主要分布于胸腺小叶髓质,极少出现在皮质内;脾脏内主要分布于红髓和边缘区、淋巴小结周围和动脉周围淋巴鞘周围的区域,动脉周围淋巴鞘极少有Fas表达,淋巴小结无Fas表达。FasL在固始鸡免疫器官内的表达与Fas相似,但表达量与Fas相比较少。【结论】细胞凋亡基因Fas和FasL参与了固始鸡免疫器官内淋巴细胞发育分化过程中的凋亡调控,并对免疫器官的稳定发挥重要作用。     

雏鸡感染法氏囊病毒后免疫器官中浆细胞的变化

本项研究对人工感染传染性法氏囊病毒(IBDV)的1日龄雏鸡和未感染 IBDV的相应对照雏鸡的免疫器官组织——法氏囊、胸腺、脾脏、盲肠扁桃体和哈德尔腺中的浆细胞总数、成熟浆细胞和前浆细胞数量及其分布的动态变化进行了检测。结果表明,1日龄雏鸡感染 IBDV 后,免疫器官组织中浆细胞总数和成熟浆细胞数明显低于对照雏鸡;前浆细胞数在感染初期也呈现一定的减少。浆细胞的上述变化在法氏囊的淋巴小结皮质、脾脏的红髓和鞘动脉外周、盲肠扁桃体的弥散区、哈德尔腺的集合小管和排泄管周围、胸腺的髓质等区域最明显。表明1日龄雏鸡感染IBDV 后,免疫器官的体液免疫反应呈现明显抑制。     

A thymic precursor to the NK T cell lineage

CD1d-restricted autoreactive natural killer (NK1.1+) T cells function as regulatory cells in various disease conditions. Using improved tetramer tracking methodology, we identified a NK1.1- thymic precursor and followed its differentiation and emigration to tissues by direct cell transfer and in situ cell labeling studies. A major lineage expansion occurred within the thymus after positive selection and before NK receptor expression. Surprisingly, cytokine analysis of the developmental intermediates between NK and NK+ stages showed a T helper cell TH2 to TH1 conversion, suggesting that the regulatory functions of NK T cells may be developmentally controlled. These findings characterize novel thymic and postthymic developmental pathways that expand autoreactive cells and differentiate them into regulatory cells.     

Influence of the major histocompatibility complex on positive thymic selection of V beta 17a+ T cells

A monoclonal antibody was used to show directly positive thymic selection of the T cell repertoire in mouse strains expressing the 17a beta-chain variable domain (V beta 17a) of the T cell receptor. In the absence of the potent tolerizing class II major histocompatibility complex (MHC) molecule, I-E, peripheral expression of V beta 17a+ T cell receptors varied with the MHC haplotype of the mouse strain. In the most extreme case, H-2q mice expressed high peripheral levels of CD4+ V beta 17a+ T cells (14 to 19 percent), whereas H-2b mice expressed low levels (3 to 4 percent). Analysis of (b x q)F1 mice and chimeric mice showed that these differences were determined by positive thymic selection and implicated the thymic epithelium as the controlling cell type.