正交试验法在龙眼和荔枝组织培养中的应用

利用正交设计试验法研究了椰乳（ＣＭ）、２，４－Ｄ、赤霉素（ＧＡ３）和蔗糖等四个因素及其组合对石硖龙眼和桂味荔枝的幼胚愈伤组织产生的影响，并讨论了正交设计试验法应用于龙眼和荔枝组织培养培养基筛选的可能性。结果表明：１）对龙眼，诱导愈伤组织的最优组合是 ＣＭ １０％、２，４－Ｄ１．０ｍｇ·１－１、ＧＡ３０ｍｇ·１－１和蔗糖３％；对荔枝，最优组合是ＣＭ０％，２，４－Ｄ１．０ｍｇ·１－１，ＧＡ３０ｍｇ·１－１和蔗糖 ５％。 ２）适当的 ２，４－Ｄ浓度（１．０ ｍｇ·１－１）可提高愈伤组织的产量；３）ＧＡ３抑制了龙眼和荔枝的愈伤组织的产生；４）不同树种的胚需要不同的糖浓度；５）适当ＣＭ浓度（１０％）可提高龙眼愈伤组织的产量，而荔枝愈伤组织的产生并不需要ＣＭ。     

银杏成熟胚乳培养的细胞组织学观察

诱导银杏成熟胚乳产生愈伤组织时无需胚的存在，单独使用生长素或在细胞分裂素／生长素为０．５－０．９的范围内均能诱导部分胚乳切块产生愈伤组织。并且在Ｗｈｉｔｅ ＋Ｋｔ２．７ｍｇ．１＾＿１＋２．４－Ｄ１．０ｍｇ．ｌ＾－１＋ＮＡＡ２．０ｍｇ．ｌ＾－１的培养基上，愈伤组织的诱导率最高，达到８３．３％。胚乳细胞脱分化进行有丝分裂和无丝分裂，其中无丝分裂可以观察到劈裂和缢裂两种类型。愈伤组织起源于胚乳表皮及其下     

苹果砧木M26离体叶片愈伤组织发生及分类研究

对苹果砧木Ｍ２６ 离体叶片愈伤组织的发生研究表明,取继代后３０ ～３５ ｄ 的试管苗顶部１～４ 叶位的叶片,沿与主脉垂直方向横切后,以叶背面朝上方式置于愈伤组织诱导培养基上,经观察在叶片近柄端切口处愈伤组织发生较早,产生量较多。最适的愈伤组织诱导培养基为：ＭＳ＋２ ,４ － Ｄ０ ．２ ～２ ．０ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ＩＡＡ０ ．２ ～２．０ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ ＢＡ０ ．５ ～１．０ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ 蔗糖３ ％ ＋ 琼脂０．６％ 。将诱导产生的愈伤组织按外部形态、细胞特点及生理生化指标等分为三类,其中表面干燥致密、细胞内含物丰富、淀粉、蛋白质及干物质含量均较高的Ⅲ类愈伤组织的芽再生频率最高,可达８３ ．３３ ％ ,是能利用的愈伤组织类型。     

离体葡萄未成熟胚成苗途径研究

以巨峰葡萄剥离幼胚及红井川品种切喙胚球为外植体接种至含不同浓度２,４－Ｄ、ＮＡＡ与６－ＢＡ配比的ＮＮ－１９６９培养基中,诱导葡萄未成熟胚产生胚状体及实现胚萌发。两品种均是在含２,４－Ｄ０．５ｍｇ．ｌ＾－１、６－ＢＡ１．０ｍｇ．ｌ＾－１的培养基中诱导胚进入胚状体发生途径的;而在含ＮＡＡ（１．０、２．０ｍｇ．ｌ＾－１）与６－ＢＡ（０．２、１．０）或２．０ｍｇ．ｌ＾－１ＺＴ配比的培养基上幼胚进入胚萌发途     

酸枣叶片不定植株的诱导

从酸枣实生苗叶片获得再生不定植株,在ＷＰＭ附加ＴＤＺ２．０ｍｇ．ｌ＾－１和ＩＡＡ０．５ｍｇ．ｌ＾－１的培养基上获得了４７．６％的不定梢再生率。不定梢转移到培养基ＭＳ＋ＢＡ０．５ｍｇ．ｌ＾－１上增殖,在１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．３ｍｇ．ｌ＾－１＋蔗糖２％培养基上诱导生根,仅获得１３．１％的生根经。     

酿酒葡萄原生质体再生植株

将酿酒葡萄品种白诗南、梅郁的花丝接种在含６ＢＡ２．０ｍｇ·１－１、２,４－Ｄ０．５ｍｇ·１－１的Ｂ５诱导培养基上,诱导产生胚性愈伤组织。胚性愈伤组织经液体悬浮培养形成含大量胚性细胞团的悬浮培养物。用Ｃｅｌｌｕｌａｓｅ　　Ｒｓ２％、Ｐｅｃｔｏｌｙａｓｅ　Ｙ２３０．３％,５ｍｍｏｌ·１－１ＣａＣｌ２·２Ｈ２Ｏ、０．６ｍｏｌ·１－１甘露醇、０．３％葡聚糖硫酸钾、ｐＨ５．６～５．８的酶混合液从胚性细胞团分离得到原生质体。原生质体培养到第５天出现第一次分裂,４０ｄ形成上百个细胞的大细胞团,５０ｄ形成０．５～１．０ｍｍ大小的小愈伤组织。这些小愈伤组织在含６ＢＡ０．５ｍｇ·１－１的Ｂ５分化培养基上分化出胚状体进而形成幼苗,在生根培养基上生根形成再生植株。     

甜菜基因型的筛选及胚性细胞系建立的研究

通过以甜菜未成熟胚为外植体诱导愈伤组织，再将产生的愈伤组织转移至分化培养基（ＭＳＢ培养基附加１．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ，３％蔗糖，８％琼脂）进行分化力测试实验，筛选出两个再生能力强的基因型－８９３０，ＧＤ２。通过挑选淡黄色或灰白色，呈颗粒状的愈组织继代培养，经调节培养基的ＩＡＡ和ＮＡＡ的浓度，得到再生能力强的胚性愈伤组织，建立了胚性细胞无性系。     

钙和萘乙酸对猕猴桃果实贮藏的影响

室温条件下，１０ｍｇ．ｌ＾－１ＮＡＡ、０．５％ＣａＣｌ２、５％ＣａＣｌ２和５％ＣａＣｌ２与１０ｍｇ．ｌ＾－１ＮＡＡ混合使用均缩短猕猴桃果实贮藏期，而０．５％ＣａＣｌ２与１０ｍｇ．ｌ＾－１ＮＡＡ混合处理能延长果实贮藏期。     

脱毒大蒜花原始体培养增殖技术的研究

以黑龙江省阿城脱毒紫皮种蒜为试材，应用植物组织培养技术，探讨利用花原始体进行培养增殖的技术，结果表明：以ＭＳ为基本培养基，诱导花原始体愈伤组织形成的最佳激素组合为：２，４－Ｄ０．０５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ，转移至ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ３．０ｍｇ／Ｌ组合的培养基后，每块花原始体愈伤组织平均分化９．２个幼芽，经切割，继代于ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ３．０ｍｇ／Ｌ组合的培养基后又可增殖２９．３个幼芽，其繁殖系数为３．１８４８。因此脱毒种蒜ｌ个总苞内的全部花原始体经愈伤组织诱导，幼苗分化，增殖３个阶段１５０天的培养，可得１３０９．５株试管苗，并且经幼苗根尖染色体压片、镜检，未发现有任何染色体变异。     

分葱组织培养体细胞胚胎发生的研究

利用分葱茎尖培养成功地诱导了体细胞胚胎发生。具体步骤如下：Ⅰ．在ＭＳ＋２，４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ培养基上诱导愈伤组织；Ⅱ．在ＭＳ＋２，４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ培养基上进行愈伤组织的继代培养，继代培养３次以后，转变为胚性愈伤组织；Ⅲ．在ＭＳ＋２，４－Ｄ０．２５ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ培养基上进行胚状体的诱导；Ⅳ．在无任何激素的ＭＳ培养基上使胚状体再生植株。切片观察表明，胚状体大多数起源于愈伤组织表层及其以下细胞。     

GA和CPPU对枇杷无核果品质的影响

以６－１０年生的几个枇杷品种为试材,进行ＧＡ＋ＣＰＰＵ不同的浓度,使用时期和时期组合试验,结果表明;用ＧＡ１０００ｍｇ．ｌ＾－１处理花蕾,再用ＧＡ１０００ｍｇ．ｌ＾－１＋ＣＰＰＵ２０ｍｇ．ｌ＾－１在花后１月下旬,２月下旬,３月下旬分期喷果３次,是增大无核果和防止无核果落果的重要措施;无核果率１００％,无核果单果重与对照正常果单果重差异不显著,其果肉厚,可食率均极显著高于对照,生理病果较少。     

石竹花芽发生与内源多胺含量的关系

以石竹叶片为外植体,诱导愈伤组织、营养芽、花芽的培养基分别为ＭＳ＋ＺＴ２．５ｍｇ／Ｌ＋２,４－Ｄ０．３ｍｇ／Ｌ;ＭＳ＋ＺＴ１ｍｇ／Ｌ＋ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ;ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ。在石竹离体叶花芽形成过程中,内源多胺含量呈不同的变化趋势,腐胺、亚精胺含量上升,而二丙胺、精胺含量下降,表明多胺与石竹离体叶花芽分化有明显的内在联系。     

酿酒葡萄原生质体再生植株

将酿酒葡萄品种诗南,梅郁的花丝接种在含６ＢＡ２．０ｍｇ．１＾－１,２,４－Ｄ０．５ｍｇ．１＾－１的Ｂ５诱导培养荐,诱导产生胚性愈伤组织。胚性愈伤组织经液体悬浮培养形含大量胚性细胞团的悬浮培养物。     

培养基及培养条件对银杏愈伤组织黄酮产量的影响

在固体培养条件下，研究了不同外植体来源、培养基、抗褐变剂及培养时间等因子对银杏愈伤组织黄酮产量的影响。结果表明：①不同外植体来源的愈伤组织黄酮含量为叶片＞茎段＞子叶；②光照培养的愈伤组织黄酮含量显著高于暗培养愈伤组织黄酮含量；③愈伤组织培养４０～４５ｄ，黄酮含量接近最大值；④Ｗｈｉｔｅ培养基上的愈伤组织黄酮含量显著高于ＭＴ培养基，但黄酮生物产量却相反；⑤不同激素组合中，以ＢＡ与ＮＡＡ组合效果最好；⑥在ＰＡ（植酸）、ＰＶＰ（聚乙烯吡咯烷酮）、ＰＭ（ＰＶＰ＋ＭＥＳ）、ＡＣ（活性炭）和维生素Ｃ等５种抗褐变剂中，以ＰＭ效果最好。黄酮生产最佳培养条件为：叶片愈伤组织在ＭＴ＋ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ３．０ｍｇ／Ｌ＋糖５％＋ＰＭ（ＰＶＰ２．０％＋ＭＥＳ０．０５％）培养基上光照培养４０～４５ｄ。     

油梨种质的离体低温保存

以哈斯油梨（ＰｅｒｓｅａａｍｅｒｉｃａｎａＭｉｌｌｃｖ．Ｈａｓｓ）为试材，从试管苗下胚轴诱导产生愈伤组织，研究了愈伤组织的离体低温保存技术。结果表明，采用８℃低温，愈伤组织能在ＭＳ＋１．０ｍｇ·１~(-１)２，４一Ｄ＋３％椰乳＋３％蔗糖固体培养基中保存６个月；在培养基中添加０．４ｍｇ·１~(-１)多效唑能减少继代次数，使保存期延长至８个月。     

酸枣叶片不定植株的诱导

从酸枣实生苗叶片获得再生不定植株,在 ＷＰＭ附加 ＴＤＺ ２．０ ｍｇ· ｌ~(－１)和 ＩＡＡ０．５ ｍｇ· ｌ~(－１)的培养基上获得了４７.６％的不定梢再生率。不定梢转移到培养基ＭＳ＋ＢＡ ０．５ ｍｇ·１~(－１)上增殖,在１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．３ｍｇ·１~(－１)＋蔗糖２％培养基上诱导生根,仅获得１３．１％的生根率。     

植物生长调节剂对梨试管苗培育及移栽的影响

ＢＡＰ、ＩＢＡ和ＧＡ３对梨砧木ＢＰ１００３０茎尖外殖体的成活率没有明显影响，但０．１ｍｇ．１＾－１ＧＡ３明显促进外殖体的初期生长。外殖体建立阶段以１ｍｇ．１＾－１ＢＡＰ＋０．１ｍｇ．１＾－１ＩＢＡ＋０．１ｍｇ．１＾－１ＧＡ３的处理为宜。ＢＡＰ与ＩＢＡ明显影响茎的增殖。茎数量随ＢＡＰ浓度（１－４ｍｇ．１＾－１）的增加而增加，但茎长度明显下降。在ＢＡＰ存在条件下，增加０．１ｍｇ．１＾－１ＩＢＡ对茎数量     

植物生长调节剂对银杏悬浮细胞生长和黄酮糖苷含量的影响

试验表明：Ｎ_２（ＭＳ＋１ｍｇ ．１~（－１）ＮＡＡ＋２ ｍｇ·１~（－１）ＫＴ）和Ｂ３（ＭＳ＋１ｍｇ ．１~（－１）ＮＡＡ＋２ ｍｇ ．１~（－１）６－ＢＡ）培养基最有利于银杏悬浮细胞干重的积累。 Ｎ_２和 Ｂ_２（ＭＳ＋ １ｍｇ．１~（－１）ＮＡＡ＋ １ｍｇ·１~（－１）６－ＢＡ）培养基有利于黄酮糖苷积累,而ＧＡ_３、２,４－Ｄ、ＺＴ处理均不利于黄酮糖苷积累。     

用8—羟基喹啉硫酸盐防止梨,苹果外植体褐变

以金花梨、金冠和富士,苹果２－３ｍｍ茎尖为外植体,和８－羟基喹啉硫酸盐进行处理后,接种在ＭＳ＋２．０ｍｇ．ｌ＾－１ＢＡ＋０．２ｍｇ．ｌ＾－１ＩＢＡ培养基上,结果表明,外植体接种后用０．１％的８－ＨＱＳ淹没２４ｈ,然后再将外植体转移至新鲜培养基上,能有效地防止金花梨和金冠苹果外植体褐变;     

赤霉素对甜樱桃黄玉果实生长发育及品质的影响

对甜樱桃黄玉于盛花后７ｄ采用４０、６０、８０ｍｇ．１＾－１的赤霉素（ＧＡ）涂抹幼果，结果表明，上述ＧＡ各浓度处理使黄玉果实成熟依次提早３、５、９ｄ其中以６０ｍｇ．ｌ＾－１ＧＡ的处理效果较好。在一定浓度范围内，随ＧＡ浓度提高有使果形指数增大，果肉硬度减小的趋势，ＧＡ处理对增大果实，果重的效果不明显，而且８０ｍｇ．ｌ＾－１ＧＡ处理的单果重还明显减小，仅为对照的８３．２％。