圣女樱桃番茄再生体系的研究

以圣女樱桃番茄为试材,通过对其子叶和下胚轴的离体培养,研究不同培养基和激素浓度及配比对愈伤组织诱导、不定芽分化及生根诱导的影响,以筛选最佳再生体系,并研究VC对番茄组培过程中褐化现象的影响。结果表明:诱导圣女樱桃番茄愈伤组织的最适培养基为MS+(0.2~0.4)mg/L IAA+2.0mg/L6-BA,不定芽分化的最适培养基为MS+0.1mg/L IAA+(1.0~3.0)mg/L 6-BA,诱导生根的最适培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA;子叶为最佳外植体,其不定芽的分化速度、分化率及生长情况均优于下胚轴;在愈伤组织诱导培养基中添加10mg/L VC,能有效抑制褐化的发生。     

番茄宝大906高频再生系统的建立及其潮霉素选择压的测定

以番茄宝大906品种为试材,通过对其子叶、下胚轴的离体培养,研究了不同6-BA/NAA植物生长物质浓度配比对愈伤组织诱导、不定芽再生及生根的影响.另外,还测定了潮霉素选择压.结果表明:以子叶和下胚轴为外植体诱导愈伤组织的最适培养基分别是MS+ 2.0 mg,/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA和MS+ 2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA;诱导芽分化的最适培养基均为:MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA,子叶的芽分化率高达93.5％;不定芽适宜的生根培养基为MS+0.1 m g/L NAA;子叶、下胚轴的潮霉素选择压分别以20、40 mg/L为宜.     

结球甘蓝的组织培养与快繁研究

[目的]研究适合结球甘蓝组织培养与快速繁殖的最佳方法与培养基种类。[方法]以结球甘蓝无菌苗的胚轴和子叶为材料,以MS为诱导和增殖的基本培养基,以1/2MS为生根基本培养基,比较不同浓度及配比的生长调节物质对增殖及防止玻璃化苗的影响。[结果]接种于诱导培养基MS＋6-BA 3.00 mg/L＋NAA 0.10 mg/L中的子叶可长出愈伤组织,胚轴可直接分化不定芽;在增殖培养基MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 0.10 mg/L上生长的组培苗生长势强,玻璃化苗数最少,增殖率最高,平均增殖系数为3.8;接种于生根培养基1/2MS＋NAA 0.10 mg/L和1/2MS＋IBA 0.20 mg/L上的组培苗生根率最高,达100%。[结论]最佳诱导培养基为MS＋6-BA3.00 mg/L＋NAA 0.10 mg/L;最佳增殖培养基为MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 0.10 mg/L;最佳生根培养基为1/2MS＋NAA 0.10 mg/L和1/2MS＋IBA 0.20 mg/L。     

荷花顶芽初代组织培养

以荷花顶芽为外植体进行组织培养取材、消毒、诱导与增殖的研究.结果显示,荷花组织培养最佳外植体为1未展叶带1芽;外植体氯化汞消毒最佳时间为20 min;最佳诱导培养基为MS+ NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L;最佳增殖培养基为MS+ NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,均为固体培养.     

优质番茄快繁技术初探

以不同的浸种、消毒等方法处理优质番茄百利种子,对其子叶进行培养研究。结果表明:温水浸泡及切口处理种子能获得优质的番茄种子芽苗;以子叶为外植体,在MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L培养基上能较好地诱导愈伤组织:愈伤组织在MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA0.03 mg/L培养基上分化出芽最多,成苗状况较好;在MS、MS+NAA0.1 mg/L培养基上生根培养无明显差别。     

绿萝组培快繁技术研究

以绿萝带节茎段为外植体,探讨不同消毒方法、不同培养基配方对绿萝的腋芽诱导、继代增殖、生根的影响。结果表明,用75%酒精消毒30 s,再用0.1%HgCl_2消毒30 min效果最好;腋芽诱导的最佳培养为添加6-BA 2.0 mg/L,腋芽萌芽率高达100%;丛芽增殖最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖20 g/L;而生根的最佳培养基为1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.2 mg/L。     

豌豆再生体系的建立

【目的】建立用于豌豆组织培养与转基因的再生体系.【方法】利用植物组织培养的外植体的消毒、接种、脱分化、再分化和生根等方法进行豌豆再生体系的建立.【结果】以‘陇豌1号’为试验材料,其胚轴为豌豆愈伤组织诱导最佳外植体;适宜诱导培养基为MS+1.0mg/L 2,4-D+0.2mg/L 6-BA;最佳增殖培养基为:MS+1.0mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA;胚轴在MS+0.2mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA培养基中分化率最高,达26.21%,MS+B5+0.5mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA条件下最适宜子叶的分化(14.80%);不定芽在1/2 MS+0.5mg/L NAA下生根率最高,达66%.【结论】‘陇豌1号’的这一再生体系可用于其转基因受体系统的建立和种苗的组培快繁.     

蝶豆的组织培养与快繁技术研究

通过蝶豆种子无菌萌发,筛选出各培养阶段的适宜培养基,为建立蝶豆的组织培养与快繁技术提供参考。结果表明:采用75%酒精表面灭菌30 s结合0.1%的HgCl2表面灭菌10 min的方法,蝶豆的种子无菌萌发时污染率为0,发芽率为36.67%;下胚轴、上胚轴、子叶的愈伤诱导率为100.00%,愈伤分化率分别为82.11%、20.00%、0;愈伤分化的最佳培养基为MS+6-BA0.10mg/L+NAA 0.02 mg/L;上胚轴和下胚轴不能直接诱导出不定芽,子叶可以直接诱导出不定芽;不定芽增殖的适宜培养基为MS+6-BA 1.00 mg/L+IBA 0.50 mg/L;生根适宜培养基为MS+IBA 0.30 mg/L或者1/2 MS+IBA 0.30 mg/L。     

野生卷丹试管鳞茎的组织培养研究

以野生卷丹珠芽为材料,研究了不同浓度激素配比对试管苗和小鳞茎诱导、增殖的影响。结果表明,试管苗诱导的最佳培养基为MS 1.0 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA,增殖的最佳培养基为MS 1.0 mg/L 6-BA 0.2 mg/L NAA;试管小鳞茎诱导、增殖的最佳培养基为MS 1.0 mg/L 6-BA 2.0 mg/L NAA。     

库伦大三棱荞麦愈伤组织诱导的研究

以库伦大三棱荞麦为研究对象,以子叶、下胚轴为外植体诱导愈伤组织,为建立荞麦的遗传转化体系奠定基础。研究结果表明:去皮荞麦种子的最适消毒条件是0.1%升汞消毒1.5min;以子叶为外植体诱导愈伤组织的最适培养基为MS+30g/L蔗糖+7g/L琼脂粉+1.2mg/L6-BA+0.05mg/L NAA+0.1mg/L2,4-D;以下胚轴为外植体诱导愈伤组织的最适培养基为MS+30g/蔗糖+7g/L琼脂粉+0.5mg/L6-BA+0.05mg/LNAA+0.05mg/L2,4-D;下胚轴比子叶更适合作为外植体诱导愈伤组织。     

灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。     

辣椒子叶和下胚轴的离体培养及高效再生体系的建立

采用 9 个辣椒品种(Capsicum annuum L.)的子叶和下胚轴,分别离体培养在附加不同激素及化合物的MB5培养基上,对苗龄、基因型、不同外植体、激素组合和 AgNO3等对外植体不定芽诱导分化和芽伸长的影响进行研究。结果表明,苗龄对外植体不定芽分化的方式有直接影响;AgNO3的加入可使芽分化率平均提高 20 %～30 %,并缩短外植体再生时间;子叶的不定芽分化率高于下胚轴;B5维生素有利于芽的生长和芽伸长率的提高。通过结果比较,筛选出了辣椒子叶和下胚轴离体再生的较好芽分化培养基为 MB5+5 mg/L、6-BA+0.5 mg/L、IAA+4 mg/L、AgNO3+30 g/L、蔗糖+5 g/L 琼脂;芽伸长培养基为 MB5+3 mg/L、6-BA+1 mg/L、IAA+2 mg/L、GA3+4 mg/L、AgNO3+30 g/L、蔗糖+5 g/L 琼脂;生根培养基为 1/2 MS+0.2 mg/L、IAA+0.1 mg/L NAA。     

NAA、6 BA对不同熟性甘蓝子叶期愈伤组织诱导的影响及其丛生芽发生

采用正交试验研究了NAA、6-BA对不同熟性甘蓝品种子叶期不同部位培养过程中愈伤组织诱导率的影响,同时以MS+NAA(0.4~0.7 mg/L),6-BA(2.0~4.0 mg/L)为丛生芽诱导培养基,研究了愈伤组织形态特征与丛生芽发生之间的关系。结果表明,晚丰和中甘十一的带柄子叶、不带柄子叶、下胚轴易诱导出愈伤组织;京丰甘蓝的下胚轴易诱导出愈伤组织,早熟品种下胚轴诱导的愈伤组织丛生芽发生率高于其他品种的愈伤组织。在3种甘蓝子叶期外植体培养中选下胚轴作为培养材料诱导获得的愈伤组织易发生丛生芽,京丰的下胚轴在NAA0.45 mg/L,6-BA 3.0 mg/L时诱导出中间绿色周围半透明松脆柔软团状生长快的愈伤组织丛生芽发生率达到79%;晚丰下胚轴在NAA0.6 mg/L,6-BA 6.0 mg/L时诱导出淡黄色至淡黄绿色松脆柔软团状生长快的愈伤组织丛生芽发生率可达94%;中甘十一的下胚轴在NAA0.45 mg/L,6-BA3.0mg/L时诱导出的中间为绿色周围为半透明松脆柔软团状生长快的愈伤组织丛生芽发生率可达95%。     

白玉龙火龙果不同外植体的离体培养

【目的】研究白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节的不定芽诱导及茎段增殖技术,为白玉龙火龙果的品种改良及快繁育苗提供技术支持。【方法】以白玉龙火龙果种子培育的无菌苗为材料,采用正交试验设计分析不同培养基、不同植物生长调节剂与浓度及其组合对白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节不定芽诱导及茎段增殖与生根的影响。【结果】白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节均能直接诱导不定芽发生。其中,16个正交处理均能诱导子叶节不定芽发生,其最优诱导培养基为WPM+0.50 mg/L TDZ+0.50 mg/L CPPU+0.05 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,诱导率为87.1%~100.0%;子叶仅1个处理未能诱导出不定芽,最高诱导率为36.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.50 mg/L TDZ+0.05mg/L CPPU+2.00 mg/L 6-BA+0 mg/L NAA;下胚轴仅5个处理能诱导出不定芽,最高诱导率仅3.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.05 mg/L TDZ+2.00 mg/L CPPU+1.00 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA。茎段去顶处理有利于腋芽的诱导萌发,去顶处理的最大增殖系数为4.2,不去顶处理的最大增殖系数为3.1,其最优增殖培养基为WPM+0.50 mg/L 6-BA+0.05 mg/L IBA。NAA处理能促进茎段生根,适宜的生根培养基为1/2MS+0.1~0.5 mg/L NAA,生根率达100.0%。【结论】不同基本培养基、植物生长调节剂与浓度及其组合均能诱导白玉龙火龙果子叶、下胚轴和子叶节不定芽发生及茎段芽增殖和不定根产生。其中,不定芽诱导以子叶节最易诱导发生,其次为子叶,下胚轴较难;茎段芽增殖和不定根诱导均较容易。     

无患子优选树茎段离体培养体系的建立

【目的】筛选无患子茎段离体快繁最佳培养基,建立无患子优良种苗快速繁育体系。【方法】以野外选优获得的无患子树带腋芽茎段为外植体,采用L9(33)正交试验对影响外植体灭菌的HgCl2浓度、HgCl2与酒精的作用时间,不定芽诱导萌发中的6-BA、NAA及蔗糖用量,继代增殖中6-BA与KT用量和芽苗生根中的MS培养基无机盐水平、6-BA和2,4-D用量进行优化。【结果】75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2处理7 min是无患子茎段灭菌的最佳方法,其外植体成活率高达83.33%;MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖是无患子茎段腋芽萌发的适宜培养基,诱导率高达96.67%;MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT是无患子茎段腋芽增殖的适宜培养基,30 d可增殖4.13倍;1/3 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D是诱导芽苗生根的适宜培养基,平均生根率为41.50%。【结论】建立的无患子离体培养体系为:外植体茎段用75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2灭菌7 min,在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖培养基中诱导腋芽萌发,在MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT培养基中进行增殖培养,在1/3MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D培养基中进行生根培养。     

克克万年青组织培养和快速繁殖技术研究

以克克万年青带侧芽的茎段为外植体,进行组织培养及诱导植株再生研究,结果表明:适宜的芽启动培养基为MS 6-BA 1.5 mg/L NAA 0.05 mg/L;最适增殖培养基为1/2MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.1 mg/L,增殖系数达3.6倍;适宜的生根培养基为1/2MS IBA 0.2 mg/L,生根率达88.5%;生根试管苗移栽到Klasmann泥炭422 Klasmann泥炭413(2︰1)混合基质中,成活率高达94.3%。     

落葵的组织培养与植株再生

以落葵子叶和下胚轴为外植体，在MS基本培养基中添加不同浓度激素培养。结果表明，下胚轴经1－4mg/l6-BA，2mg/l6－BA＋0．1－2．0mg/l2，4－D激素处理，可产生愈伤组织，而子叶却不能。下胚轴愈伤组织在2mg/l6－BA＋0．1mg/lNAA处理下芽分化最好。在芽的继代培养中，4．0mg/l6－BA＋0．1mg/lNAA处理最佳，平均每个外植体可分化4个芽。在1／2MS＋0．3mg/lNAA培养基中生根质量高。再生小植株成活率达90％左右。     

芝麻菜愈伤组织诱导及植株再生*

 以芝麻菜(Eruca sativa Mill)无菌苗的下胚轴、子叶和子叶柄作为外植体,研究了不同的激素浓度和组合对其愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果表明,分别以MS+0.8mg／L 2,4-D,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.1mg／L 6-BA,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.2mg／L 6-BA为下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织诱导培养基时,效果较好,出愈率依次为86.3%,78.2%,97.6%;将下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织分别转移到分化培养基MS+3.0mg／L 6-BA+0.1mg／L　NAA,MS+3.0 mg／L 6-BA+0.2mg／L NAA上再生不定芽,效果最佳,不定芽再生频率分别为72.7%,63.6%,69.2%。将不定芽切下转移至1／2 MS+0.5mg／L IBA培养基上诱导生根,生根率达81％以上。     

彩色辣椒愈伤组织的诱导与植株再生

分别以彩色辣椒茎尖、子叶、上胚轴、下胚轴为外植体进行离体培养,结果发现,子叶较易诱导愈伤组织。在MS附加不同浓度配比的6-BA和NAA培养基上,对子叶进行分化及生根诱导研究的结果表明,彩色辣椒子叶芽的分化受6-BA和NAA浓度的影响,最适合芽分化的培养基为MS 6-BA 3.0 mg/L NAA 0.5 mg/L,最适生根培养基为1/2MS NAA 1.0 mg/L。     

生姜茎尖脱毒培养研究

以生姜茎尖为外植体进行培养,筛选诱导愈伤组织和芽分化的最佳培养基。结果表明,消毒时间对茎尖成活率影响很大,以0.1%HgCl2消毒10 min最为有效。不同的激素配比对生姜试管苗再生诱导有明显影响,诱导茎尖愈伤组织生长及分化的最适培养基为1/2MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,丛生芽继代培养增殖效果较好的培养基为1/2MS+BA2.5mg/L+NAA0.1 mg/L+KT1.0 mg/L。