甘蓝夜蛾核型多角体病毒的大量增殖

对影响甘蓝夜蛾核型多角体病毒活体内产量的增殖条件研究表明．饲毒龄期是影响病毒产量的主要因子，其次是饲毒剂量，龄期与饲毒剂量的组合也影响病毒产量．以４．３２×１０５ＰＩＢ／幼虫的剂量饲喂４龄初幼虫，在２５℃条件下，可获得最高的病毒产量．幼虫死亡率达８８．１％，病毒产量平均为４．７１×１０９ＰＩＢ／幼虫．以实际接种量为基准．ＰＩＢ增加１００００倍以上．     

甘蓝夜蛾核型多角体病毒连续传统代的研究

对甘蓝夜蛾核型多角体病毒（ＭｂＮＰＶ）在同源寄坟细胞系ＮＥＡＵ－Ｍｂ－９３１１０４（Ｍｂ９３１１０４）中的生长特性进行了研究。结果表明,无包涵体游离病毒（ＭｂＮＰＶ－ＮＯＶ）在接种后１４ｈ达到吸收高峰,病毒滴度降到最低值５．７９＊１０＾３２ＴＣＩＤ５０／ｍＬ,接种病毒９６ｈ,病毒滴度达到最高值２．１３＊１０＾５ＴＣＩＤ５０／ｍＬ在ＮＯＶ（ｎｏｖｏｃ－ｃｌｕｄｅｄｖｉｒｕｓ）连续传递２０代的过程中,     

甘蓝夜蛾核型多角体病毒连续传代的研究

对甘蓝夜蛾核型多角体病毒（ ＭｂＮＰＶ） 在同源寄主细胞系ＮＥＡＵＭｂ９３１１０４（ Ｍｂ９３１１０４） 中的生长特性进行了研究。结果表明,无包涵体游离病毒（ ＭｂＮＰＶ＿ＮＯＶ） 在接种后１４ ｈ 达到吸收高峰,病毒滴度降到最低值５－７９ ×１０２ＴＣＩＤ５０／ｍ Ｌ,接种病毒９６ ｈ,病毒滴度达到最高值２－１３ ×１０５ＴＣＩＤ５０／ｍＬ,在ＮＯＶ（ｎｏｎｏｃｃｌｕｄｅｄ ｖｉｒｕｓ） 连续传递２０ 代的过程中,ＭｂＮＰＶ＿ＮＯＶ 毒力随传递代数的增加而减低,并且多角体的毒力也发生了显著的变化,前几代能使甘蓝夜蛾幼虫死亡率在９０ ％ 以上,传递到１５ 代以后产生的多角体对甘蓝夜蛾的幼虫几乎没有毒力。     

甘蓝夜蛾核型多角体病毒光保护剂的筛选

以2龄初的甘蓝夜蛾幼虫为供试虫,通过生物测定确定荧光素钠、活性碳、黑色素3种物质对MbNPV的光保护作用。结果表明：0.1%的黑色素对MbNPV的光保护作用最强,紫外光照20、40、60 min后幼虫的校正死亡率显著高于其它处理。     

甘蓝夜蛾核型多角体病毒(M_bNPV)的生物测定

从甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae L.)自然罹病死亡幼虫体分离出的多株核型多角体病毒(M_bNPV),选出毒力较强的 M_bNPV-80株,于1984年在哈尔滨进行生物活性测定。方差分析表明:1.2×10~2～1.2×10~8 PIB(多角体)/虫间,7种剂量感染3龄幼虫,不同剂量间的校正死亡率差异极显著。而各处理死亡均数差异显著性测定中,1.2×10~5～1.2×10~8 PIB/虫4个剂量差异不显著。剂量与死亡率回归方程为 y=2.819+0.416x;致死中剂量(LD_(50))为1.77×10~5 PIB/虫。每虫以1.2×10~4和1.2×10~5 PIB/虫分别处理3龄幼虫所得的致死中时(LT_(50))分别为6.59和4.31天。     

甘蓝夜蛾核型多角体病毒防治莲藕斜纹夜蛾的效果

进行甘蓝夜蛾核型多角体病毒防治莲藕斜纹夜蛾的田间药效试验,结果表明,从防治效果和施用成本综合考虑,20亿PIB·g^-1 甘蓝夜蛾核型多角体病毒 450 mL·hm^-2较好,药后 14 d 总防效为97.9%。     

某些培养条件对甘蓝夜蛾核型多角体病毒离体增殖的影响

不同培养条件对甘蓝夜蛾核型多角体病毒 （ Ｍｂ Ｎ Ｐ Ｖ） 在同源寄主细胞系 Ｍｂ９３１１０４ 中增殖的研究。结果表明, 培养基种类、细胞密度和细胞龄期影响 Ｍ ｂ Ｎ Ｐ Ｖ 在细胞系中的增殖, 引起细胞感染率和多角体产量显著的差异。使用 Ｔ Ｃ—１００ 昆虫组织培养基, 细胞密度为３×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍ Ｌ的对数生长期的细胞接毒最适于 Ｍ ｂ Ｎ Ｐ Ｖ 的增殖, 条件培养基对该病毒在细胞系中的增殖没有显著影响。     

复合型甘蓝夜蛾核型多角体病毒对三种夜蛾的室内毒杀试验

复合型甘蓝夜蛾核型多角体病毒是由甘蓝夜蛾核型多角体病毒(MbNPV)与苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(ACNPV)按0.5∶1复合而成的。为了掌握其对甘蓝夜蛾的毒杀效果,用蒸馏水将其稀释成2.0×10~3、2.0×10~4、2.0×10~5、2.0×10~6、2.0×10~7PIB·mL~(-1)五个所需的浓度进行测试,并用方差分析和新复极差法测验。结果表明:复合型甘蓝夜蛾核型多角体病毒对斜纹夜蛾、甜菜夜蛾、甘蓝夜蛾毒杀效果差异显著。饲毒后第2天,甘蓝夜蛾对复合剂较敏感;饲毒后第3天对复合剂敏感性均增强;饲毒后第4天,甘蓝夜蛾、甜菜夜蛾死亡率均在80%以上,斜纹夜蛾死亡率在60%以上。     

甘蓝夜蛾核型多角体病毒防治娃娃菜小菜蛾试验报告

甘蓝夜蛾核型多角体病毒是一种昆虫杆状病毒,它是甘蓝夜蛾最重要的病原微生物,对甘蓝夜蛾、小菜蛾等食叶害虫有很好的防治作用。在该次研究中主要是测试甘蓝夜蛾核型多角体病毒药剂对娃娃菜小菜蛾的防治效果,也为将来进一步推广20亿PIB/m L甘蓝夜蛾核型多角体病毒悬浮剂奠定基础。     

甘蓝夜蛾核型多角体病毒(MbNPV)侵染宿主细胞的电镜观察

本文介绍了用电子显微镜观察甘蓝夜蛾核型多角体病毒(Mamestra brassicae L.NPV)感染宿主幼虫的组织病变和病毒复制过程.发现脂肪、体壁、气管组织对MbNPV最敏感.核仁膨大,染色质单个或多个在其中产生并在核膜附近获得囊膜,装配成病毒粒子和病毒束.具有囊膜的核衣壳随机地嵌入多角体蛋白中,形成完整的多角体.细胞核膨大,核膜内陷,核解体,整个细胞充满多角体.而中肠、神经节、马氏管和肌肉组织对MbNPV敏感性差,于感病后期形成小而不规则的多角体.     

甘藍夜蛾成虫期生物学特性的研究

甘藍夜蛾成虫需要取食糖类物质作为补充营养后,才能进行正常的生殖活动。成虫寿命一般8～10天,产卵期約4～7天。雌雄蛾均在夜晚一定时间内进行飞翔、取食、交配、产卵等活动。本试验观察到雌蛾产卵量一般为800～1500粒,最高达2822粒。卵的孵化率超过90%。雌雄蛾均有多次交配现象。雌蛾经人为地与雄蛾完全隔离后,能产下不受精的卵,产卵量低,卵粒不孵化。成虫取食糖类物质,比以清水或非糖类物质作为补充营养产卵高3～5倍。田间观察到成虫在多种蜜源植物上取食。     

甘蓝夜蛾高毒力Bt菌株的筛选

东北农业大学昆虫教研室从黑龙江地区病死鳞翅目昆虫体内分离出苏云金杆菌（Bacillusthuringiensis,Bt）菌株74株,随后以甘蓝夜蛾为供试昆虫对这些菌株的毒力进行了测定,结果表明,很多菌株对甘蓝夜蛾的初孵幼虫均具有一定的毒力,经过初筛、复筛,试验选出了毒力相对较高的5个菌株,当菌液浓度在8×10~7个芽孢·mL(－1)时,甘蓝夜饿死亡率分别达到80％～95％,Lc50分别为43,63,68,710,1778倍液。     

甘蓝夜蛾几丁质合成酶基因片段的克隆与序列分析

以甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae(L.))4龄取食期幼虫为材料提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增得到部分几丁质合成酶基因的cDNA片段,该基因片段包括2295bp,编码一个含765个氨基酸残基的蛋白,分子量约为87.6ku。在765个氨基酸组成的片段中存在9个跨膜螺旋,几丁质合成酶的催化区在该序列的401～765位。序列比对表明,克隆得到昆虫几丁质合成酶基因是比较保守的,与埃及伊蚊、四斑按蚊、冈比亚按蚊、铜绿蝇、黑腹果蝇、赤拟谷盗、小菜蛾、烟草天蛾、甜菜夜蛾等其他昆虫几丁质合成酶基因相应的cDNA序列同源性为65.4%～87.8%,相应氨基酸的序列同源性达到68.0%￣96.5%。该cDNA序列已经登录GenBank并获得登录号为EU160598。     

甘蓝夜蛾生物学特性观察

对甘蓝夜蛾的成虫、卵、幼虫、蛹分期饲养并进行观察,明确了越冬蛹羽化要经过6~7个月的时间,第一代和第二代蛹期为10~20 d。羽化后成虫寿命,雌虫为5.5 d,雄虫为3.7 d,交尾1~3次,每头雌蛾产卵1~6块,产卵3~5 d,卵孵化期为4~5 d。幼虫一年发生3代,幼虫发育期32 d左右,脱皮6次,最适温度为18~25℃。     

Molecular Cloning and Sequence Analysis of Chitin Synthase cDNA from Mamestra brassicae （L.） （Lepidoptera： Noctuidae） Cuticle

Chitin is the most widespread amino polysaccharide in nature. Chitin synthase （CHS） plays an important role in chitin formation in the cuticle and the peritrophic membrane （PM） lining the midgut. Total RNA was isolated from the cuticle of Mamestra brassicae （L.） fourth instar larva, cDNA sequence was cloned by RT-PCR and Rapid Amplification of cDNA Ends （RACE）. cDNA 5 220 bp in length, contained an open reading frame of 4 704 bp coding for a polypeptide of 1 567 amino acid residues with a predicted molecular weight of 178.3 ku and its pI was 6.42. The deduced amino acid sequence from Mi brassicae （L.） shared the high level of identity with chitin synthase sequences from other insects, especially lepidopteran insects, cDNA sequence has been deposited with GenBank under accession No. GQ281761     

甘蓝夜蛾人工饲料的研制

本文研究了利用灰菜(ChenopodiumalbumL.)叶粉为主要原料配制的简易人工饲料,连续数代饲养甘蓝夜蛾(MamestrabrassicaeL.),于第四代同天然饲料对照,成虫的生殖力差异不显著。同时饲养了草地螟(Loxosiegeslicticalis),红棕灰夜蛾(Sarcopoliailloba),苜蓿夜蛾(Heliothisdip-sacea),银纹夜蛾(Autographaamuria)和粘虫(Leucaniaseparta)。除粘虫外,其它几种害虫均成功地饲养了二代以上。此配方简单、价廉、易于配制,具有一定的通用性。对昆虫人工饲料的商品化有实用价值。     

大豆叶毒蛾核型多角体病毒(Oa NPV)的超微结构及形态发生

1987年,在哈尔滨从大豆叶毒蛾Orgyia antiqua(L.)感病致死幼体中分离出核型多角体病毒OaNPV一株。该病毒多角体近圆形,大小约0.4～2.1μm。多角体表面不光滑,有厚约9.0nm的多角体膜。多角体蛋白晶格为线型,晶格均宽约2.66 nm,晶格间距约1.66 nm,两个方向的平行线交角分别为53°和90°。病毒粒子为杆状,大小约62 nm×352 nm。大部分病毒粒子为单粒包埋,但观察到包含2粒和3粒核衣壳的病毒束,病毒粒子外膜为两层膜结构,厚约8.3 nm,内膜厚约2.2 nm。髓核呈螺旋形外观。病毒感染的脂肪体细胞的早期病理变化表现为:核仁消失,染色质凝集,随后细胞核中出现病毒发生基质和核衣壳。核衣壳获得外膜后,被封闭在多角体内。先形成的多角体多在细胞核的外围,多角体数量不断增加,最后充满整个细胞核。     

八字地老虎核型多角体病毒的形态发生

电镜观察结果表明，脂肪体细胞受八字地老虎核型多角体病毒感染后首先表现为细胞核膨大、染色质凝聚，随后细胞核内形成电子致密的病毒发生基质，在发生基质内及外周产生许多杆状的核衣壳，核衣壳在病毒发生基质与核膜间获得囊膜形成病毒束，病毒束从不同方向进入多角体蛋白，多角体形状趋于完善，最后充满整个细胞核．