杂交榛子体细胞胚发生研究

不同培养基、激素种类及浓度和外植体对杂交榛子体细胞胚直接和间接诱导的影响的结果表明,MS培养基为杂交榛子体细胞胚发生最佳培养基;激素对杂交榛子体细胞胚直接诱导无显著影响,均可诱导成熟植株;筛选出杂交榛子愈伤组织培养最佳培养为:MS+6-BA2.0 mg/L+NAA1.5 mg/L;再生植株分化最佳培养基为:MS+6-BA2.0mg/L+N AA1.5 mg/L转入MS+6-BA 5.0 mg/L+N AA 0.01+GA3 0.5 mg/L;杂交榛子体细胞胚发生以子叶诱导率最高,以龙榛胚性愈伤组织诱导率最高。     

白刺花胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生

【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究提供参考。【方法】以白刺花叶片为外植体,研究生长调节剂2,4-D(1.0、2.0、3.0、4.0 mg ·L -1 )、NAA(0、0.5、0.8、1.0 mg ·L -1 )、6-BA(0.2、0.5、1.0、2.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5、1.0 mg ·L -1 )组合对胚性愈伤组织诱导,及NAA(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )、6-BA(0、0.5、1.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )组合对体细胞胚发生的调控作用,筛选最优生长调节剂组合;并研究培养基中KNO 3和NH 4NO 3比例对体细胞胚发生的作用,及MS培养基中无机盐浓度(1/5MS 、1/4MS、1/3MS、1/2MS)对体细胞胚萌发的影响,筛选最佳的体细胞胚发育及成熟萌发条件。【结果】白刺花叶片外植体胚性愈伤组织诱导适宜培养基为MS + 2,4-D 3.0 mg ·L -1 + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 0.2 mg ·L -1 + TDZ 1.0 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,诱导率为42.0%。采用MS基本培养基时,最佳的体细胞胚发生培养基为MS + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 1.0 mg ·L -1 + TDZ 0.5 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +谷氨酰胺100 mg ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,体细胞胚发生率为78.46%,总胚数为对照的3.6倍;MS培养基中,KNO 3浓度提高1倍、NH 4NO 3降至1/2时,体细胞胚发生率可提高至91.33%,总胚数为采用MS基本培养基时的1.4倍;1/3MS培养基有利于体细胞胚的萌发,萌发率为82.75%,幼苗长势良好,单株平均鲜质量为76 mg,幼苗驯化移栽1个月后成活率达90%以上。【结论】白刺花叶片接种于添加2,4-D、NAA、6-BA和TDZ不同组合的诱导培养基上,可脱分化形成愈伤组织或胚性愈伤组织,2,4-D浓度对愈伤组织形态和质地有较大影响。TDZ有利于体细胞胚的形成,适宜浓度的生长素与细胞分裂素组合及硝态氮和铵态氮的比例对体细胞胚的形成和发育具有调控作用,降低MS无机盐浓度可提高体细胞胚萌发率,本试验体系的再生植株移栽成活率达90%以上。     

‘绿岭’核桃种胚无叶腋芽萌发快繁途径的初步研究

以早实薄皮核桃‘绿岭’成熟种胚诱导出的无叶腋芽为外植体,MS为基本培养基,通过调节激素种类和浓度配比,初步研究了‘绿岭’核桃种胚无叶腋芽快繁体系。比较试验结果表明:最佳种胚萌发诱导培养基为MS+IBA 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L;种胚无叶腋芽伸长培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+IAA 1.0mg/L+GA31.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L。生根采用两步生根法:离叶柄基部2 mm切的茎段先在DKW+IBA 8.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.0g/L暗培养20d,然后转入DKW+蔗糖30g/L+琼脂6g/L培养基中进行光照培养,生根率为50%。诱导生根的组培苗移栽到大田后成活率为33.3%。     

文冠果成熟胚不定芽诱导和增殖分化培养初步研究

以文冠果成熟胚为外植体,研究了以MS为基本培养基,6-BA、NAA和TDZ 3种激素不同浓度组合配比对文冠果成熟胚分化不定芽的影响和继代增殖效果。结果表明:最适合文冠果成熟胚分化出不定芽的培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+TDZ 0.05 mg/L+NAA 0.1 mg/L、MS+6-BA 0.5 mg/L+TDZ 0.04 mg/L+NAA 0.01 mg/L和MS+6-BA 0.5 mg/L+TDZ 0.03 mg/L+NAA 0.01 mg/L,其分化率可达85.7%、82.9%和80.0%;最适合文冠果不定芽继代增殖的培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.4 mg/L和MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,这2种培养基能促进成熟胚继续分化出不定芽,也能促进已分化出的不定芽良好生长,继代培养30 d不出现叶片枯落的现象。     

红松成熟合子胚愈伤组织诱导的适宜培养条件

为了探索以红松成熟合子胚为外植体诱导愈伤组织的适宜培养条件,以GD、DCR、LM、MS等为基本培养基,以2,4-D和6-BA组成不同浓度激素组合,进行愈伤组织诱导试验。结果表明,1供试培养基均可诱导红松成熟合子胚产生愈伤组织,但DCR培养基上诱导的愈伤组织出现最早,出愈率显著高于其他培养基,达93.3%;2在DCR培养基中添加2,4-D与6-BA的各种组合均获得了较好的愈伤组织发生,但以2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和2,4-D6 mg/L+6-BA 1 mg/L的出愈率最高,达96.7%。综上所述,红松成熟合子胚外植体诱导愈伤组织时,适宜基本培养基为DCR,适宜激素组合为2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。     

3种牡丹的胚培养及植株再生研究

以牡丹胚为外植体,研究了不同牡丹的胚在不同培养条件下,愈伤组织和丛生芽的诱导、芽的生长及生根情况。结果表明:适合牡丹无性系建立的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+Vc100mg/L;适合3种牡丹胚生长的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.5mg/L+CH100mg/L;适合3种牡丹丛生芽产生的培养基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+CH100mg/L;适合3种牡丹生根的最佳培养基为1/2MS+IAA1.0mg/L+IBA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,其中,朝霞生根效果最佳,生根率可达82.35%。     

无核葡萄胚挽救培养污染防治的初步研究

无核葡萄是当今国际葡萄消费和生产的重要方向之一,胚挽救技术是无核葡萄育种的重要手段;无核葡萄胚珠离体培养中,污染现象时有发生,严重阻碍了无核葡萄胚挽救育种的效率。以"皇家秋天"、"红宝石无核"、"无核翠宝"等种子败育型无核葡萄品种自然授粉幼果为材料,进行的无核葡萄胚挽救培养过程中胚珠内胚培养阶段污染影响因素及抑菌培养试验结果表明,75%乙醇浸泡30s+1%HgCl2溶液浸泡6min的消毒处理对无核葡萄胚珠内培养的效果较好;胚珠培养的接种密度对污染有一定的影响;胚形成培养基MM4+香蕉泥500mg·L-1添加0.1g·L-1高锰酸钾的抑菌效果较好。     

大花蕙兰组织培养的研究

对大花蕙兰茎尖进行了组织培养研究。试验结果表明:原球茎诱导、增殖和生根培养基分别是MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L 香蕉汁100 g/L 活性炭0.5 g/L,MS 6-BA 1.5 mg/L NAA 0.5 mg/L 香蕉汁130 g/L 活性炭1.0 g/L,1/2 MS 6-BA 0.1 mg/LAA 0.5 mg/L 香蕉汁150 g/L 活性炭1.5 g/L。     

齿叶白鹃梅成熟胚再生体系的研究

采用齿叶白鹃梅成熟胚为外植体,筛选出齿叶白鹃梅最适诱导培养基MS+1. 0 mg/L 6-BA+0. 5mg/L IBA和MS+0. 5 mg/L 6-BA+0. 5 mg/L IBA+1. 5 mg/L KT,最优分化培养基MS+0. 5 mg/L 6-BA+0. 2 mg/L IBA+1. 0 mg/L GA3+1. 0 mg/L聚乙烯醇(P),增殖率80%,生根培养基以1/2MS+0. 5 mg/L IBA的效果最好,生根率达70%,获得了齿叶白鹃梅的成熟胚的再生体系。     

四数九里香种子自然萌发和离体萌发条件筛选

为提高四数九里香种子萌发率,研究了最佳浓硫酸处理种子的时间及不同激素处理对四数九里香种子自然萌发的影响,以完整种子和带胚子叶作为外植体,研究不同质量浓度的6-BA、NAA、IBA、GA3对外植体生长的影响,及不同质量浓度活性炭对外植体褐化的影响。结果表明,浓硫酸最佳处理时间为1 min;用200×10-6的IBA处理过的种子发芽率最高,达50%;其次是50×10~(-6)和150×10~(-6)的NAA,其萌发率均为45%;外植体在添加2.5 mg/L 6-BA、0.2 mg/L IBA、0.1 mg/L GA3或0.2 mg/L NAA的培养基上诱导率较高,活性炭为1.5 g/L时外植体褐化程度最低;四数九里香胚培养的最佳培养基为添加2.5 mg/L 6-BA、0.1 mg/L GA3、0.2mg/L NAA和1.5 g/L活性炭的MS培养基。     

牡丹“虞姬艳妆”的茎尖培养

以牡丹"虞姬艳妆"(Paeonia suffruticosa cv.YuJi YanZhuang)茎尖和单芽茎段为材料,研究不同植物激素配比对其芽的诱导、增殖,愈伤组织诱导、分化及生根的影响。结果表明:适合牡丹"虞姬艳妆"腋芽诱导的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+活性炭1.00g/L,萌芽率为66.67%;适合芽增殖的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L,增殖系数为2.80;适合茎段愈伤组织诱导的培养基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+活性炭1.00g/L,诱导率为62.5%;适合愈伤组织分化的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L,分化率为80%。     

灌木柳无性系茎段组织培养快速繁殖试验

以灌木柳无性系2345、2367的嫩枝为外植体,进行组织培养快速繁殖技术的研究。结果表明:2种灌木柳芽苗诱导最适培养基为WPM+6-BA 0.4 mg/L+GA30.1 mg/L+CH 500 mg/L+活性炭1 g/L+蔗糖30 g/L+卡拉胶6.3 g/L;最适增殖及生根培养基为WPM+6-BA 0.6 mg/L+NAA 0.05 mg/L+CH 500 mg/L+活性炭1 g/L+蔗糖30 g/L+卡拉胶6.3 g/L。将健壮生根苗移栽到含有泥炭和黄心土的基质中,其中泥炭与黄心土的体积比为1∶1,成活率大于98%。     

杉木愈伤组织诱导及植株再生

以杉木成熟合子胚为起始外植体,研究了基本培养基、植物激素、凝固剂种类、有机附加物等因素对杉木愈伤组织的诱导、愈伤组织的继代培养及不定芽分化的影响。结果表明:1/2MS+2,4D2mg/L+6-BA1mg/L+KT1mg/L+糖30g/L是成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基;1/2MS+2,4-D1mg/L+6-BA0.5mg/L+KT0.5mg/L+糖30g/L适于杉木愈伤组织继代增殖;改良MS+6-BA0.5mg/L+KT1.5mg/L+蔗糖30g/L是诱导不定芽发生的最佳培养基。     

构树胚性愈伤组织及体胚诱导研究

以野生构树组织培养无菌苗茎段为外植体,探讨不同种类、质量浓度的植物生长调节剂对胚性愈伤组织诱导及体胚发生的影响,初步建立愈伤组织诱导及体胚发生技术途径。结果表明,TDZ是影响构树茎段胚性愈伤组织诱导的主要因素,NAA和2,4-D是次要因素,构树胚性愈伤组织最佳培养基为MS+0. 05 mg/LTDZ+1. 0 mg/L NAA+0. 1 mg/L 2,4-D。最佳体胚诱导培养基为MS+0. 1 mg/L NAA+1. 0 mg/L 6-BA,体胚诱导率达到41. 33%。     

花叶玉簪组织培养技术的研究

以花叶玉簪‘France’,‘So Sweet’2个品种嫩芽为外植体进行的组织培养技术研究结果表明,以培养基MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA诱导不定芽萌发较为适宜;在培养基MS+3.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA上进行不定芽增殖,诱导效果最好,增殖系数分别达3.5和3.4,且植株生长健壮。最适宜的生根培养基为1/2MS+0.5mg/L NAA+1 g/L活性炭。     

木鳖子茎蔓无菌培养及植株再生研究

以木鳖子幼嫩茎蔓为外植体进行组织培养研究,结果表明,最适宜的诱导培养基为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖30 g/L,诱导率为66.7%;继代增殖培养基为MS+6-BA 0.6 mg/L+NAA 0.2 mg/L+马铃薯泥2%+活性炭1 g/L+蔗糖30 g/L,增殖倍数为5.6倍;生根培养基为MS+NAA 0.4 mg/L+香蕉泥5%+活性炭2 g/L+蔗糖20 g/L,生根率100%,平均生根数4.8条,平均根长3.9 cm。炼苗10 d后移栽腐殖土∶火烧土∶腐熟艾蒿(体积比5∶3∶2)混合基质的成活率最高达93.3%。     

山杏体细胞胚胎发生及其组织学观察

为了建立山杏体细胞胚胎发生再生体系,以山杏茎尖为外植体,研究山杏体细胞胚胎发生及其主要影响因子。结果表明:山杏茎尖在MS+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L)培养基中愈伤组织诱导率达100%,胚性愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+6-BA(0.5 mg/L)+2,4-D(0.2 mg/L)+水解酪蛋白(0.5 g/L)。山杏体细胞胚胎发生过程中能明显看出球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚等阶段。     

“小仙女”观音莲工厂化组织培养技术研究

为提高"小仙女"观音莲的组培工厂化水平,以其顶芽为试材,对丛生芽诱导、丛生芽增殖及状态调整、生根等因素进行了研究。结果表明:最适宜单芽诱导丛生芽培养基为MS+6-BA2.5mg/L+NAA0.1mg/L,最适丛生芽增殖培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L,最适丛生芽增殖培养基为改良MS+6-BA1.5mg/L+NAA 0.1mg/L,最适生根培养基为MS+NAA0.4mg/L+IBA0.2 mg/L+活性炭0.5g/L+糖30g/L。     

几种影响库拉索芦荟器官增殖和根形成的因素

以MS为基本培养基，以库拉索芦荟嫩芽或侧芽为外植体，研究了激素、糖、活性炭等因素对芽增殖及根形成的影响。结果表明：库拉索芦荟芽增殖最佳培养条件为：MS 6-BA5mg/L NAAO.1mg/L 食用白糖30g/L 活性炭0.2%，经20-25d培养，其繁殖系数达51-54；根形成最佳培养基为MS NAAO.8mg/L 食用白糖30g/L 活性炭0.3%，经15d培养，可生根4-5条，苗高达5-6cm。     

离体培养条件下核桃器官发生和体细胞胚胎发生

采自幼树、成年树及成年树伐根萌条的嫩梢腋芽,在改良DKW培养基+6-BA1.0mg/L中可伸长生长;在加有6-BA1.0mg/L+IBA 0.01mg/L的继代培养基中,可保持腋芽的生长并形成不定芽。芽增殖率为每月600％左右。芽苗经5.0mg/L IBA处理7天,然后在含活性炭的无激素培养基中培养20天,有54％可生根成苗。5月中旬至6月上旬的幼胚,在改良DKW培养基+6-BA1.0 mg/L中,黑暗培养30天左右可产生体细胞胚,并可连续多代保持胚性分生能力。体胚在无激素的发芽培养基中黑暗培养7天左右可发芽成苗。胚性愈伤组织在悬浮振荡培养中可保持分生能力。