烟草赤星病菌致病力测定方法的研究

用烟草赤星病菌(Alternaria alternata)和其它植物来源的分离物(Alternaria sp.)共39个菌株分别接种烟草品种G80和G140的幼苗,并用其中24个菌株接种此二品种的离体叶片。结果表明,不同菌株对离体叶片的穿透生长能力与致病力以及对幼苗的致病力(病叶率与病情指数),明显地表现为从低到高的组群关系。其中,烟草赤星病菌5个菌株,TBA6、TBA8、TBA12、TBA19和TBA28,为表现一致的高致病力,而TBA20和TBA27表现一致的低致病力。比较发现,病菌对离体叶片的致病力(等级)与其对幼苗的致病力,在烟草赤星病菌的24个菌株间以及在两个烟草品种间的趋势相一致,而病菌对离体叶的穿透生长能力与其对幼苗的致病力之间无一致趋势。讨论认为,离体叶片法用于测定病菌的致病力不失为一种准确快速而又易于控制的方法。     

贵州省烟草赤星病菌生物学特性研究

烟草赤星病是发生较严重的一种常见烟草病害,为了模拟室外不同的气象条件下烟草赤星病的最适发生环境,对贵州省烟草赤星病菌的生物学特性进行研究。结果表明,温度为25℃、湿度达到100%、黑暗的条件最适合烟草赤星病菌生存;ZA培养基最适宜赤星菌菌丝生长,而OA培养基最适宜赤星菌产孢。赤星病菌的生长随温度、湿度的增加而增加,在到达一定数值后逐渐下降。利用SPSS软件建立了温度和湿度对烟草赤星病菌落平均直径增长量的的回归方程,分别为:y=0.015x2+0.0158x-0.04,y=-0.001x2+0.213x-4.666。     

烟草赤星病菌的生长和孢子产生条件及寄主范围的研究

本文研究了烟草赤星病菌的生长条件，在主要营养条件中木糖、葡萄糖和蔗糖为最适碳源；蛋白胨为最适氮源；ＰＤＡ和Ｃｚａｐｅｋ为最适培养基。环境条件中温度２０～２５℃、ｐＨ７和黑暗对生长最好。该菌分生孢子产生的最适宜条件和生长条件基本相同，即病菌生长好孢子成量亦多，反之则少。经接种在１５科３０种植物中茄科植物中的马铃薯、蕃茄、茄子、龙葵、蔓陀萝和蓼科中的本氏蓼可以被侵害而其他作物和杂草则不能侵害。     

烟草赤星病菌拮抗菌发酵液的防病作用

以拮抗烟草赤星病菌的两株放线菌SZF2和SZF7为材料,对其发酵液防赤星病菌的效果及机理进行了初步研究.结果表明,SZF2和SZF7的无菌发酵液能抑制烟草赤星病原菌孢子萌发,同时还能激发烟草产生过量过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO),从而提高烟草对赤星病菌的抗性.离体和盆栽试验结果表明,SZF2和SZF7的发酵液可明显降低烟草赤星病的病情指数,其盆栽试验相对防效分别为48.94%和50.13%.     

云南烟草赤星病菌遗传多样性的RAPD分析

 运用RAPD分子标记技术分析了来自云南各地24个烟草赤星病菌株的遗传多样性。结果表明，12个随机引物共扩增出了145条DNA条带，所扩增出的DNA条带均为多态带，表明云南烟草赤星病菌存在丰富的遗传多样性。不同地点赤星病菌的遗传结构之间都有一定的差异，生态环境相似性越大的地点，赤星病菌的遗传结构相似程度就越高。赤星病菌的遗传结构也随寄主品种(基因型)的不同而表现出一定的差异，寄主品种的遗传背景影响着赤星病菌的遗传结构。     

云南烟草赤星病菌及近似种rDNA ITS序列分析

 为了进一步研究云南省烟草赤星病病原的系统发育关系,提取28份供试菌株的菌丝基因组DNA,进行rDNA ITS序列及两侧ITS序列扩增。28个供试菌株与GenBank中登录的链格孢属7个种（包括5个小孢子种Alternaria citri,A．alternata,A．longipes,A．mali,A．gaisen和2个大孢子种A．porri,A．solani）14个菌株的序列进行聚类分析：42个菌株明显地分成两支,供试菌株与5个小孢子种聚为一个分支,序列同源性高达99％～100％,没有明显的地域性差异;但另2个大孢子种聚为单独的一支,明显地与供试菌株和其他5个小孢子种区分开。rDNA ITSl 58S ITS2序列在相对保守的基础上又存在一定变异,在一些菌物属的研究中可作为分类鉴定、分子标记、系统发育的重要依据,但通过对世界各地Alternaria菌株序列的分析发现,rDNA ITS1 58S ITS2仅能将大孢子种和小孢子种分开,还不能作为区分不同地域不同来源菌株的标准。     

贵州省不同气候区烟草赤星病菌孢子分布研究

为了明确烟草赤星病菌孢子产生与病害发生的关系,对贵州省主要气候区烟草赤星病菌孢子的分布情况进行了研究。结果表明,贵州省主要气候区烟草成熟期赤星病菌日均孢子密度介于0.136 9～0.389 2个/(cm2.d),不同气候区内孢子密度分布由密到疏依次为道真、开阳、兴义、天柱,孢子数的分布在贵州呈现西低、中北高的局面。各气候区田间孢子数随观察高度的增加呈指数关系减少,利用SPSS软件建立孢子数与观察高度的回归方程为:Y=0.02 X2-6.43 X+572.5。     

8种杀菌剂对烟草赤星病菌的室内毒力测定

采用生长速率法测定了8种杀菌剂对烟草赤星病的室内毒力,结果表明:8种药剂在试验浓度下对烟草赤星病菌菌丝的生长具有不同程度的抑制作用,其中以10%苯醚甲环唑WP的效果最好,其EC50为7.45 μg/mL;15%嗯霉灵WP和25%咪鲜胺EC次之,EC50分别为16.26 μg/mL及23.57μg/mL;80%百菌清WP效果最差,其EC50为111.71μg/mL.     

8种杀菌剂对烟草赤星病菌的室内毒力测定

采用生长速率法测定了8种杀菌剂对烟草赤星病的室内毒力,结果表明：8种药剂在试验浓度下对烟草赤星病菌菌丝的生长具有不同程度的抑制作用,其中以10%苯醚甲环唑WP的效果最好,其EC50为7.45μg/mL;15%噁霉灵WP和25%咪鲜胺EC次之,EC50分别为16.26μg/mL及23.57μg/mL;80%百菌清WP效果最差,其EC50为111.71μg/mL。     

烟草赤星病研究现状及存在问题

烟草赤星病是烟草生产上危害最大的病害之一 ,迄今对病菌生物学特性 ,寄主抗病性 ,病害消长规律以及综合防治等方面进行了广泛的研究。本文综述了烟草赤星病的研究成果 ,分析了赤星病研究工作中存在的问题 ,提出了加强病害预测预报 ,病菌生理分化 ,寄主—病原物互作机制以及利用生物技术获得抗源材料研究的未来烟草赤星病研究新领域     

烟草赤星病菌糖蛋白激发子诱导烟草抗病防卫反应

用来自赤星病菌弱毒株的糖蛋白激发子处理烟草，能明显抑制烟煤草体内过氧化氢酶（CAT）的活性，增加组织中H2O2的含量，诱导后1dCAT活性就已开始下降，至第6天下降到最低，以后又逐渐恢复，而H2O2含量的变化趋势与CAT活性的变化相反，随CAT活性的降低，组织中H2O2含量逐渐增加，在诱导后第10天达到最大值，激发子处理烟草还可以诱导碱性PR蛋白基因PR1b的表达；同时，烟草对赤星病强毒株的抗性逐渐增强，以诱导后第10天接种抗性最强，且这种抗性是系统性的，水杨酸（SA）处理后CAT及H2O2的变化与上述趋势类似。     

温度和保湿时间对烟草赤星病叶斑扩展的影响

在人工气候箱内控制条件下研究测定烟草赤星病叶斑扩展规律,结果表明,温度(T)和保湿时间(H)是影响赤星病叶斑扩展的2个主要因素。在温度恒定的条件下,保湿时间延长赤星病病斑面积增大,病斑面积增长一般可持续60h。在12～40℃的温度范围内,烟草赤星病叶斑均可扩展,在同一保湿时间内,12～36℃的温度范围内,随温度升高,病斑扩展率(IP)增大,36℃以后则开始下降。2个品种的病斑面积扩展百分率与温度、保湿时间及其互作具有线性关系NC89SQRT(SQRT(IP))=0.4971-0.00003128×T2×H+0.006659×T×H-0.00006694×T×H2;中烟99SQRT(IP)=0.08099+0.02003×T×H-0.0001078×T×H2-0.002005×H2     

湖南烟草赤星病发生测报技术研究

通过在湖南主产烟区5点16年次以上系统调查,发现赤星病季节流行呈逻辑斯蒂曲线增长,发病程度年间波动大,分析了发病轻重与环境因子的关系,提出用发生型法及积温法预测赤星病发生期,用孢子捕捉法及多元相关法预测发生程度。     

一种新型银纳米颗粒的制备及其抑制烟草赤星病菌的机制

【目的】利用生物多糖合成银纳米颗粒,并解析其对烟草赤星病菌（Alternaria alternata）的抑制活性及机理,探索生物多糖合成银纳米颗粒的农业应用前景,为开发安全、高效的抗菌剂提供理论依据。【方法】采用海藻酸钠作为还原剂与表面活性剂在水浴锅中（65℃）一步合成银纳米颗粒（S-AgNPs）。利用透射电镜（TEM）、扫描电镜（SEM）、原子力显微镜（AFM）、紫外分光光度计（UV-vis）、Zeta电位-粒径仪和X射线光电子能谱分析（XPS）分别对S-AgNPs粒径、分散性、稳定性及化学组成进行表征分析。应用Nano Measure软件统计TEM与AFM图像中S-AgNPs的平均粒径。采用平板生长速率法探究S-AgNPs在PDA培养基中浓度为0.0625、0.125、0.25、0.5、1.0 μg·mL^-1时对赤星病菌菌丝生长的影响。赤星病菌在S-AgNPs浓度为1.0 μg·mL^-1的液态PDA培养基（PDB）中培养后,分别通过测定菌丝的鲜重与干重、SEM观察、电导率测定和考马斯亮蓝G250染色,分析S-AgNPs对菌丝生长量、形态、细胞膜通透性和菌丝可溶性蛋白含量的影响。用孢子悬浮液注射接种法测试S-AgNPs在离体烟草叶片上对赤星病的防治效果。最后通过测定S-AgNPs对鲫鱼生长的影响分析海藻酸钠合成的银纳米颗粒的安全性。【结果】S-AgNPs的TEM、SEM、AFM图像分析表明该方法所合成的S-AgNPs具有分散性好,粒径统一,稳定性强等特点,平均粒径为9.83 nm。生测结果显示S-AgNPs在1.0 μg·mL^-1时对烟草赤星病菌菌丝生长抑制率为83.9%。S-AgNPs处理组的菌丝鲜重与菌丝干重明显低于清水对照组,S-AgNPs可以明显破坏菌丝表面结构。进一步抑菌机制研究表明S-AgNPs主要通过抑制赤星病菌可溶性总蛋白合成而破坏其生物膜结构,降低生物膜保水能力,快速破坏菌丝细胞膜通透性,造成大量细胞质渗漏而抑制菌丝生长发育。最终,离体试验证实S-AgNPs能够有效地抑制烟草赤星病菌侵染烟草叶片,且S-AgNPs在有效浓度（1.0 μg·mL^-1）内对鲫鱼无明显毒害作用,不影响其正常生命活动。【结论】建立的方法能够稳定合成分散性好,粒径统一,稳定性强的银纳米颗粒。该银纳米颗粒对烟草赤星病菌具有较强的抑制作用,可有效防治烟草赤星病,具有潜在的田间应用前景。     

林业技术促进林业育苗技术及苗期管理研究

育苗时林业造林工程中保证林木存活率基础的工作,同时也是一项十分重要的工作。 育苗技术关系到苗木阶段的苗木质量和苗木后续的成长状况。确保苗木健康生长,并且能够在 有利的生存条件下生长需要更高的育苗技术,本文详细分析了育苗的情况,利用容器育苗的技 术方法和采用合理有效的育苗管理方法,从苗木质量上提高林木存活率,从而存进林业顺利的 可持续的发展。     

苗期接种不同丛枝菌根真菌对烟草青枯病防治效果的影响

【目的】研究漂浮育苗条件下,探讨接种不同丛枝菌根真菌及其结合生防制剂对烟株不同生育时期农艺性状、青枯病抗病效果及烤后烟叶品质的影响。【方法】采用漂浮育苗技术培育烟苗,于播种期分别接种摩西球囊霉、聚丛球囊霉和生防制剂进行烟苗农艺性状、烟叶化学成分及抗病性等比较试验。【结果】与对照相比,各处理均可不同程度改良烟株农艺性状,优化总糖与烟碱、总氮与烟碱的比例,改善烟叶品质;接种摩西球囊霉的菌根苗＋生防制剂20mL对于改良烟株农艺性状和改善烟叶品质具有更好的效果,而接种聚丛球囊霉的菌根苗＋生防制剂20mL对青枯病的防治效果最好,接种摩西球囊霉的菌根苗＋生防制剂20mL次之。【结论】漂浮育苗时接种摩西球囊霉＋生防制剂（20mL）处理可更好的改善烟株综合素质。     

不同烟草赤星病抗性烤烟品种成熟期叶片氮代谢的差异

以抗赤星病的净叶黄和感赤星病的NC89、长脖黄的不同烤烟品种为材料,采用盆栽试验分析成熟期不同抗性烤烟品种叶片的氮转运差异．结果表明：随着叶片的成熟,3个品种质外体NH^＋ 4的浓度均逐步增大,长脖黄、NC89质外体NH_4^＋ 的浓度显著大于净叶黄;3个品种的谷氨酰胺合成酶（Gs）活性均急剧下降,净叶黄的Gs活性极显著大于NC89和长脖黄;3个品种的总氮含量和叶片组织NH;浓度明显下降,长脖黄、NC89具有较高的氨气补偿点,极显著高于净叶黄．可见：不同赤星病抗性烤烟品种成熟期叶片的氮运转能力具有明显差异,抗病品种叶片的氮素再利用能力大于感病品种;感病品种以叶片质外体氨挥发形式损失的氮素多于抗病品种.