椰子果肉蛋白亚基的组成及品种间的差异分析

采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法对香水椰子、红矮、黄矮、海南本地高种、马哇、文椰78F16个椰子品种的果肉蛋白主要亚基的组成、分子量、含量、分类和命名等进行研究.结果表明,在椰子果肉蛋白中含有11～18条亚基,分子量范围为12～115 kDa,主要是中、小分子量亚基.其中,主要亚基有CSα、CSβ、CSA1、CSA2、CSB1、CSB2、CSδ和CS△.CSA1、CSA2为酸性亚基,CSB1和CSB2为碱性亚基;CSα的含量最高,其次,CSδ和CS△的含量也较高.方差分析表明,除CSB1外,其余7种亚基的含量在不同品种之间呈极显著性差异.Native-PAGE分析表明,在自然条件下,椰子果肉蛋白质是由5个分子大小不一、带有不同电荷的组分构成的.不同品种椰子果肉蛋白亚基组成的差别可能是不同品种椰子间口感和风味不同的原因之一.     

不同SDS-PAGE分离胶浓度条件下大豆贮藏蛋白亚基的分辨效果

采用SDS-PAGE浓缩胶浓度为5%,分离胶浓度分别为9%、10%、11%、12%、13%的凝胶系统,探讨不同分离胶浓度条件下大豆籽粒主要贮藏蛋白(7S和11S组分)亚基的分辨效果.结果表明,分离胶浓度大小对大豆贮藏蛋白(7S和11S组分)亚基电泳图谱分辨率的影响非常明显.分离胶浓度为9%和10%时,7S组分亚基(α'、α和β)分辨效果较好;分离胶浓度为13%时,11S组分各亚基(A3、A4A2、A1aA1b、A5、B3、B1aB1bB2和B4)分辨效果较好.如需获得较好的7S和11组分亚基综合分辨效果,以分离胶浓度为12%的凝胶系统为佳.     

圆锥小麦（Triticum turgidumL．）贮藏蛋白的遗传多样性研究

为发掘可供利用的优异基因资源,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳（APAGE）对来自17个国家和地区的95份圆锥小麦的贮藏蛋白进行了分析。结果表明,圆锥小麦贮藏蛋白位点存在丰富的遗传多样性。供试材料中共检测到17种高分子量麦谷蛋白亚基和34种亚基组合类型,其中亚基1和7＋8分别为Glu-A1和Glu-B1位点优势亚基,也检测到优质亚基14＋15和17＋18。亚基组合1／7＋8和null／7＋8虽为优势组合,但所占频率低;醇溶蛋白检测共分离出29条多态性带纹,其中每份材料可分离出5～20条,平均12条,平均遗传相似系数为0．471。供试材料在0．402水平上可分为五类,其聚类结果与材料来源地并不完全一致。试验结果表明,中国圆锥小麦地方品种在高分子量麦谷蛋白亚基表现上具有独特性。     

国内外小麦种质材料高分子量谷蛋白亚基组成分析

为了给小麦品质遗传改良中亲本的选配提供参考依据,利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对108个国内育成小麦品种（系）、40份国外引进小麦种质系和34个地方小麦品种的高分子量谷蛋白亚基组成（HMW—GS）进行了分析。结果表明,在分析的182份小麦材料中,共检测到Glu-A1位点编码的HMw—GS有三种类型,分别是Null、1和2#,其中Null出现频率较高（58．80％）;Glu-B1位点编码的HMw—GS有7＋8、7＋9、14＋15、6＋8、8、7、17＋18、13＋16、6、21共10种类型,其中7＋8和7＋9出现的频率较高,分别为38．47％和34．62％;Glu-D1位点编码的HMw—GS有2＋12、5＋10、5＋12、4＋12、2＋10和10共6种类型,其中2＋12出现的频率最高（70．33％）。共检测到41种HMW-GS组合变异类型,其中“NuU,7＋8,2＋12”、“NuU,7＋9,2＋12”、“1,7＋8,2＋12”和“1,7＋9．2＋12”出现频率较高,分别为20．33％、18．69％、9．34％和7．70％;且检测到多种优质亚基的聚合体。在分析的我国小麦材料中5＋10和2#亚基较少,但含有13＋16亚基;国外材料中的5＋10和2#亚基相对较多,且含有稀有的亚基组合类型。     

黑麦和小麦高Mr亚基的比较研究──Ⅰ.两类亚基的分离、生化特性鉴定及其对面筋延伸性的影响

对小麦高Mr谷蛋白亚基与来自黑麦的类似蛋白质的结构特性进行了比较研究。用2个黑麦品种（Danko和Halo）和1个小麦品种（Rektor）的脱脂面粉分离高Mr亚基，分离方法是，先在60℃还原条件下用50％（v／v）的丙醇溶液提取，然后用60％（v／v）的丙醇溶液使之沉淀。层析出来并冻干的亚基的含量，Danko、Halo和Rekter分别为0．33％、0．32％和0．91％（占脱脂面粉的重量百分数）。SDS-PAGE分析表明，2个黑麦品种均至少含有5个亚基，它们的迁移率相当于小麦的x型亚基。RP-HPLC分离结果表明，2个黑麦品种在亚基的定性组成上无差异，但亚基的数量比例不同。黑麦亚基的表面疏水性明显地比小麦亚基的低。黑麦各亚基和小麦各亚基的氨基酸组份密切相关，二者中的Glx、甘氨酸（Gly）和脯氨酸（Pro）含量均很高，但与小麦亚基相比，黑麦亚基中的Glx含量要低一些，百胱氨酸（Cys）含量较高。黑麦和小麦工基对面筋强度的贡献差异很大，将用溴化钾再氧化后的小麦亚基加入标准小麦面粉，面筋强度明显提高，而将再氧化后的黑麦亚基加入同样的小麦面粉，效果则正好相反。     

不同冬小麦品种高分子量谷蛋白亚基的动态表达

为了解我国黄淮麦区主栽品种的主体HMW-GS基因的动态表达规律,以该麦区的35个主栽小麦品种（系）为材料,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）技术对参试材料高分子量麦谷蛋白亚基（HMW-GS）进行分离和鉴定,并对HMW-GS的积累动态进行了研究。结果表明,籽粒灌浆过程中,7亚基大约在花后10 d开始表达,25 d左右所有亚基均已表达,但不同亚基开始表达的时期略有差异。20 d之后,各亚基表达量开始快速增加,约在35 d左右表达量达最高,之后略有下降,在40 d左右趋于稳定。就其相对表达量而言,5亚基和10亚基明显高于其他亚基类型。     

黄淮麦区小麦品种高分子量谷蛋白亚基组成及遗传多样性分析

为给小麦育种和面粉的深加工提供参考依据，利用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）方法对黄淮五省区50份主推小麦品种的高分子量谷蛋白亚基（HMW-GS）组成进行了研究，并按照Payne等的评分方法计算其Glu-1位点的品质得分。结果表明，黄淮麦区小麦品种中HMW-GS变异较为丰富，在参试材料中共检测到12种不同的亚基类型和17种HMW-GS组合类型，品质平均得分在5．5～7．5分之间。根据HMW-GS组成，可将其聚为3大类，第一大类包括7个品种，其Glu-1品质评分最高，为8～10分；第三大类有4个品种，该类品种品质评分很低，为5分；其它小麦品种被聚于第二大类，其品质评分变化幅度较大，为4～8分。     

18个优质小麦品种(系)Glu-1、Glu-3和Gli-1位点的基因变异特点

为给小麦品质育种提供参考信息,选用我国18份有影响的优质面条和面包小麦品种或种质资源，通过分步法SDS-PAGE和改良A-PAGE分析了其Glu-1、Glu-3、Gli-1位点的基因变异特点。结果表明，由Glu-1住点控制的高分子量谷蛋白亚基共14种图谱，其中，Glu-A1位点上优质亚基1和2^＊分别占61．1％和11．1％，Glu—B1位点上优质亚基14＋15、7＋8、17＋18、13＋16分别占27．8％、27．8％、22．2％、5．6％．Glu_D1位点上优质亚基5＋10占55．6％。Glu—A1、Glu—B1、Glu-D1位点上均为优质亚基的品种（系）有陕451（1，7＋8，5＋10）、95鉴5104（1,14＋15，5＋10）、陕优412（2^＊，7＋8，5＋10）、绵阳89-47（2^＊，13＋16，5＋10）以及中优16、冀5099、绵优1号、绵优2号（1，17＋18,5＋10），占参试品种的44．4％。由Glu-3位点控制的低分子量谷蛋白亚基共12种图谱，小偃6号、PH82-2、陕253、80356、95鉴5104、郑农33等6个品种皆为“a，d，c”；由G1i-1位点控制的醇溶蛋白共12种图谱，小偃6号、PH82-2、陕优225、陕253、80356、中优16、95鉴5104等7个品种皆为“O，new，i”，即发现在Gli-B1位点是一个新等位基因。     

部分CIMMYT小麦种质材料的高分子量谷蛋白亚基分析

为了有效利用多年来引自CIMMYT的小麦种质材料,采用SDS-PAGE技术对63份CIMMYT小麦材料的高分子量谷蛋白亚基（HMW—GS）组成进行了分析。结果表明,参试材料中共有8种HMW—GS类型,Glu—A1位点上有Null、1、2#,以2#亚基为主要类型（占52．4％）;Glu—B1位点上有7＋9、7＋8、17＋18,以7＋9为主要类型（占74．6％）;Glu—D1位点上只有5＋10和2＋12两种类型,其中5＋10亚基的频率高达77．8％,是山东近期育成小麦品种的5．85倍。CIMMYT小麦品种的亚基组合类型共有12种,其中主要亚基组合为“2#,7＋9,5＋10”,占39．68％。     

小麦HMW GS检测方法的优化及应用

为了准确快速鉴定小麦品种的HMW-GS组成,以18个已知HMW-GS组成的品种为对照,将4种不同浓度分离胶的SDS-PAGE与分子标记(Bx7、Bx7OE和By 8)相结合,构建一套适于检测HMW-GS组成的方法,并用该方法检测214份陕西小麦品种(系)的HMW-GS组成。4种分离胶浓度中,除了亚基7、7*与7OE和8与8*外,9%的分离胶可以很清楚地分离Glu1-位点的其他常见亚基,结合分子标记(Bx7、Bx7OE和By 8)检测对照品种,结果与已知亚基(基因)一致。用分离胶浓度为9%的SDS-PAGE结合分子标记(Bx7、Bx7OE和By 8)方法对陕西品种(系)检测结果表明,Glu-A1、Glu-B1和Glu-D1分别有3、8和3个亚基种类,共28种亚基组合类型。以1、Null、7+9、7+8、7+8*、14+15、2+12和5+10为主要亚基类型,频率分别为55.6%、41.6%、43.9%、26.2%、10.3%、15.4%、79.0%和12.6%;同时在Glu-B1位点发现7+8*和6+8*亚基。该方法可以快速准确地评价小麦HMW-GS组成,有效区分Glu-B1位点的亚基7与7OE,8与8*,鉴定结果稳定可靠。