全人工繁殖西伯利亚鲟的早期胚胎发育

西伯利亚鲟是重要的经济鱼类和进化发育研究材料。对全人工繁殖西伯利亚鲟的早期胚胎发育进行了观察和研究,成熟西伯利亚鲟卵呈球形、黑色、不透明、平均卵径为2.9mm;在水温15.5～18.0℃下,受精卵历时133h开始孵出,所需总积温为2173～2369℃·h;根据对西伯利亚鲟胚胎发育外部形态及典型特征的观察与分析,将其胚胎发育过程划分为合子、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、器官形成和出膜7个阶段,共34个发育时期,并对胚胎发育各期的主要形态特征进行描述。     

施氏鲟Acipenser schrenckii ♀×西伯利亚鲟A.baeri ♂杂交子代胚胎发育的观察

对施氏鲟Acipenser schrenckii♀×西伯利亚鲟A.baeri♂进行人工繁殖,观察杂交子代的胚胎发育过程。结果表明,在水温15~22℃时,杂交鲟胚胎发育历时141~151 h,所需总积温为2 608.5~2 793.5℃·h。施氏鲟成熟卵为多黄卵,卵裂呈特殊的辐射裂,受精后胚盘隆起不明显。根据对施氏鲟♀×西伯利亚鲟♂杂交子代胚胎发育外部形态及典型特征的观察,将胚胎发育分为受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、大小卵黄栓塞期、神经胚期、眼囊形成期、心脏形成博动期和孵出期9个时期。     

小体鲟和俄罗斯鲟苗培育技术初步研究

本文主要对小体鲟、俄罗斯鲟的苗种培育技术进行了初步研究，摸索了此阶段适宜养殖的环境因子，并对其生长情况进行了测定。结果表明：在同一饲养条件下，小体鲟全长、体重均超过俄罗斯鲟。苗种阶段成活率小体鲟为56％，俄罗斯鲟为49．6％。     

小体鲟在静水池塘中生长观察

本试验利用西泉眼水库岸边静水池塘养殖开口进食已两周的小体鲟幼鱼,其体质量和体长分别为0.125±0.95g、2.98±1.72 cm;经过4周饲喂,其育成率达到70%以上;体长为6±2.98cm、体质量1.78±1.25g;体长、体质量增长分别为0.115cm/d、0.0595g/d.试验结果证实如配合采用调整养殖密度、配套养殖设施、清理天敌并在池塘周围建围栏、调节水质、越冬并搭配不同食性、不同水层的鱼种等措施,小体鲟是适于在北方静水池塘生长的.     

人工养殖施氏鲟和小体鲟精浆微量元素分析

采用原子吸收分光光度法测定了施氏鲟(Acipenserschrenckii)和小体鲟(Acipenserruthenus)的精浆中7种微量元素(K、Na、Mg、Zn、Cu、Fe、Mn)的含量。施氏鲟分别取自宜昌和荆州,小体鲟取自宜昌。分析结果显示,不同种类和产地的鲟精浆中微量元素含量有差异,其中2条不同产地施氏鲟精浆Zn含量有显著性差异(P<0.05);施氏鲟和小体鲟精浆Na、K含量与我国主要淡水养殖鱼类有很大差异,在2种鲟精浆中Na与K浓度之比为10～14。     

史氏鲟及小体鲟不同组织中溶菌酶水平的比较

对史氏鲟及小体鲟血清和几种主要组织的溶菌酶含量进行了测定和比较后发现,同小体鲟相比,史氏鲟的血清、鳃、肝、胃、前肠及后肠的溶菌酶量均较高,血清之间有极显著的差异,鳃、肝及后肠均有显著性的差别,胃及前肠之间无差异;小体鲟的粘液、幽门垂及脾中的溶菌酶含量较史氏鲟高,但无显著性差异,由此可见,虽然同为鲟科鲟属,溶菌酶在两种鱼之间的差别还是很显著的。     

MS-222对俄罗斯鲟幼鱼的麻醉效果

通过观测不同浓度下MS-222处理后俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedtii)幼鱼的麻醉深度、入麻时间和复苏时间,初步确定了适宜麻醉浓度,并通过测定呼吸频率、耗氧率、排氨率和露空苏醒弹动时间等指标分析麻醉对鱼体造成的影响,综合评估了MS-222的适宜麻醉浓度范围。试验结果表明,随着MS-222浓度的增加,血液中药物浓度达到动态平衡时俄罗斯鲟幼鱼的麻醉程度逐渐加深,达到相同麻醉程度所需的时间逐渐缩短,且复苏时间出现上升趋势。麻醉剂浓度在200～300 mg/L时,试验鱼20 min内即可进入较为稳定的麻醉状态。MS-222对试验鱼的呼吸频率有极显著影响,也能有效降低鱼体的耗氧率和排氨率。根据试验结果,可认为最适于俄罗斯鲟幼鱼麻醉运输的MS-222浓度范围为50～60 mg/L,适于俄罗斯鲟幼鱼人工操作的MS-222浓度范围为150～200 mg/L。     

彭泽鲫胚胎发育观察

通过干法人工授精获得彭泽鲫受精卵,在水温为(28±0.5)℃条件下连续观察彭泽鲫胚胎发育过程。结果显示,彭泽鲫卵子呈浅黄色,卵膜透明,近似圆形,黏性、沉性卵,卵径为(1.65±0.15)mm。发育过程中,受精后53 min进入卵裂期,受精后3 h 16 min进入囊胚期,受精后5 h 41 min进入原肠期,受精后8 h 55 min进入神经胚期,受精后12 h 03 min进入器官形成期,受精后37 h 26 min仔鱼孵化出膜,从受精到孵化出膜总积温1050.90℃·h。     

水温对施氏鲟、小体鲟和西伯利亚鲟幼鱼生长的影响

在电子控温循环水系统中,研究不同水温(15℃、18℃、21℃、24℃和27℃)对56日龄的施氏鲟Acipenser schrenckii、小体鲟A.ruthenus和西伯利亚鲟A.baerii幼鱼生长的影响。结果表明,24℃组施氏鲟幼鱼的体长特定生长率(SGRL)显著高于其它温度组(P<0.05),而体质量特定生长率(SGRW)差异不显著(P>0.05);在18~27℃范围内,体长绝对增长率(AGRL)随温度的升高而降低,且显著高于15℃组(P<0.05)。18~24℃组的体质量绝对增长率(AGRW)显著高于15℃和27℃组(P<0.05)。在18~24℃范围内,施氏鲟幼鱼的体长相对增长率随温度的升高而增加,显著高于15℃和27℃组(P<0.05),最适生长温度为24℃。18℃组小体鲟幼鱼的SGRL显著高于其他温度(P<0.05),SGRW则差异不显著(P>0.05)。在15~27℃温度范围内,小体鲟幼鱼的AGRW升高后降低,其中18℃和24℃的SGRW分别为0.61g/d和0.64g/d,显著高于其他组。15℃组AGRL最低(1.6mm/d),显著低于其他组(P<0.05)。小体鲟幼鱼的最适生长水温范围为18~24℃,最适生长温度为18℃。在15~27℃范围内,21℃组西伯利亚鲟幼鱼的SGRL、AGRL和体长相对生长率均显著高于其他温度组(P<0.05),但27℃组存活率最低。西伯利亚鲟幼鱼的最适生长范围为15~24℃,最适生长水温为21℃。不同温度下,3种鲟幼鱼的肥满度变化不同,施氏鲟幼鱼的生长类型为强异速度生长,不同于小体鲟幼鱼与西伯利亚鲟幼鱼。在15~27℃范围内,3种鲟幼鱼的最适生长温度不同,在早期生长培育时应选用不同的培育温度。     

超低温冷冻对俄罗斯鲟精浆和精子酶活性的影响

研究了超低温冷冻保存(-196℃)对俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedti)精浆和精子中总三磷酸腺苷酶(AT-Pase)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)等酶活性的影响,并分别测定了冷冻前后俄罗斯鲟精浆和精子中酶的活性。结果显示,经过超低温冷冻保存后,俄罗斯鲟精子活力下降,精子内各酶活性均显著降低,添加冷冻保护液组精子中总ATPase、SDH、LDH和CK的活性分别从(198.47±14.43)U/mL、(30.00±2.65)U/mL、(6 982.29±24.32)U/L和(1.94±0.05)U/mL下降至(110.19±2.32)U/mL、(16.33±2.08)U/mL、(5 122.93±195.07)U/L和(1.49±0.14)U/mL。未添加抗冻剂组则分别下降至(2.25±0.33)U/mL、(11.67±0.58)U/mL、(4 488.04±78.33)U/L和(1.16±0.02)U/mL;精浆中酶的活性均显著升高,添加冷冻保护液组精浆总ATPase、SDH、LDH和CK活性分别从(12.70±0.57)U/mL、(7.50±0.71)U/mL、(2017.26±116.81)U/L和(2.93±0.59)U/mL升高至(92.49±5.18)U/mL、(13.33±0.58)U/mL、(3 688.97±172.67)U/L和(4.39±0.24)U/mL,未添加抗冻剂组则分别上升至(200.27±12.97)U/mL、(24.67±3.06)U/mL、(6 124.40±329.14)U/L和(5.20±0.16)U/mL。结果表明,超低温冷冻对俄罗斯鲟精浆和精子中酶活性及精子活力均有较大影响。     

Studies on the semen biology and sperm cryopreservation in the sterlet, Acipenser ruthenus L.

The present study investigated motility, acrosome reaction, fertility and cryobiological parameters of the semen of the sterlet, Acipenser ruthenus L. Sperm motility persisted for about 4 min in water, and the main swimming type was the linear motion. Motility was prolonged at osmolalities of 12.5 mosmol kg^?1 and in the presence of magnesium ions, while calcium had no effect. Also a pH in the range of 7.0–9.0 had no effect on ` motility. At osmolalities of 25–50 mosmol kg^?1 the sperm motility was partly inhibited, at osmolalities of 100 mosmol kg^?1, completely and irreversibly. In 50 mosmol kg^?1 solutions with 2.5–5 mM L^?1 KCl the motility inhibition was total, but reversible. The acrosome reaction was not induced by one of the described solutions, but the percentage of spermatozoa with reacted acrosomes was low (<20%) and highly variable in all experiments. The optimal extender base for cryopreservation was a solution consisting of 50 mM L^?1 NaCl, 5 mM L^?1 KCl, 10 mM L^?1 Tris (pH 8.5). From the tested cryoprotectants only dimethylsulphoxide (DMSO) and methanol provided sufficient cryoprotection. After freezing and thawing, the motility rates and swimming velocities were higher with DMSO than with methanol. However, the fertility was very significantly reduced with DMSO (10.3±0.5%) while with methanol fertilization rates in a similar range (32.7±4.4%) as with fresh semen (33.90±0.8%) could be obtained. Optimal freezing conditions for sterlet semen were in the vapour of liquid nitrogen 3–5 cm (?95°C to ?85°C) above its surface, the optimal thawing conditions at 25°C for 30 s. The acrosome reaction was not induced by these cryopreservation protocols.     

温度对白斑狗鱼胚胎发育的影响

研究了不同梯度的孵化温度对白斑狗鱼(Esox lucius)胚胎发育的影响,并对其孵化率和畸形率等指标进行了统计分析。结果显示:在各温度梯度组中,16℃温度组的孵化率和正常仔鱼孵出率均最高,分别为61.5%和59.75%,其次为14℃温度组,其孵化率和正常仔鱼孵出率分别为59.75%和56.25%;白斑狗鱼胚胎发育的适温范围为14~16℃;水温和发育时间呈显著负线性相关,其相关方程为:Y=-20.133X+469.8,R2=0.9678;在8~18℃范围,总积温为2130.19~2825.96℃.h。     

Induced spermiation in 3-year-old sterlet, Acipenser ruthenus L.

Spermiation in 3‐year‐old sterlet, Acipenser ruthenus (L.), males maintained under warm water conditions was induced by intramuscular injection of either (i) (D‐Ala⁶)‐GnRH‐ProNHEt (Kobarelin); (ii) mammalian GnRH analogue+metoclopramide (Ovopel); or (iii) human chorionic gonadotropin (Biogonadyl). The volume of milt, sperm concentration and motility were measured. A higher percentage of spermiating males was obtained after Kobarelin or Ovopel treatment (81.8% and 77.7% respectively) in comparison with fish treated with Biogonadyl (40.0%). However, only stimulation with Ovopel guaranteed motile spermatozoa in all spermiating males. Moreover, treatment with Ovopel resulted in the highest average milt volume, sperm concentration and motility. The average total number of motile spermatozoa (milt volume×sperm concentration×sperm motility) per individual was 0.99×10⁹, 5.31×10⁹ and 0.02×10⁹ after stimulation with Kobarelin, Ovopel or Biogonadyl respectively. Our data indicate that Ovopel is a good stimulator of spermation in sturgeons. Moreover, the time of sexual maturation could be significantly reduced in sturgeons maintained in cages under warm water conditions.     

温度对中华倒刺鲃胚胎与仔鱼发育的影响

研究了温度对中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis)胚胎与仔鱼发育的影响。结果显示:在21~29℃温度范围内,胚胎均能孵化出膜,孵化时间y与温度x成极显著的负相关关系,y=993017x-3.0318,R2=0.9614(P<0.01);孵化积温y与温度x的关系式为y=993017x-2.0318,R2=0.9179(P<0.05)。胚胎发育的适宜温度范围为21~29℃,最适温度范围为23~27℃。仔鱼生长发育随温度的升高而加快,仔鱼生长发育的适宜温度范围为23~31℃,最适温度范围为25~31℃。结果表明,在适宜温度范围内,适当升温可以加快中华倒刺鲃胚胎与仔鱼发育的进程。     

温度、盐度对似刺鳊鮈胚胎发育过程的影响

设置10℃、15℃、20℃、24℃、27℃、30℃6个温度组和0‰、2.5‰、5‰、10‰、15‰、太湖湖水组6个盐度组,探讨了温度和盐度对似刺鳊鮈(Paracanthobrama guichenoti)胚胎发育的影响。温度实验结果表明:似刺鳊鮈胚胎发育的起始温度(生物学零度)为9.5℃,适宜的发育水温为20～24℃。水温10℃时胚胎卵裂异常,未能进入原肠期;水温升至30℃时胚胎在发育至原肠期前后死亡。水温度为24℃时孵化时间仅为73.5 h,孵化率高达80%,畸形率为0,为最适孵化水温;水温对胚胎发育速率的影响后期较前期大。盐度实验表明:似刺鳊鮈胚胎对盐度有一定的耐受力,各盐度梯度下的胚胎发育速率差异不大,但孵化率的差异极显著。在水温18℃、盐度为2.5‰的水体中胚胎的孵化率为81.67%,高于太湖湖水组的孵化率,此盐度应为似刺鳊鮈胚胎发育较适盐度。     

倒刺鲃的胚胎发育及水温对胚胎发育的影响

对倒刺鲃的胚胎发育进行连续跟踪观察,并探讨了水温对其胚胎发育的影响。结果表明:水温(25±0.5)℃时,孵化时间为53.43 h;胚胎发育过程中出现克氏囊。水温21～33℃条件下,倒刺鲃的胚胎均能孵化,水温(x)与孵化时间(y)成极显著的负相关关系:y=235.72 e-0.056 6x,P<0.01;水温与积温的关系为:y=7 519.4x-0.519 2,P<0.01。孵化率(y)与水温(x)相关关系式为:y=-1.665 5x2+88.621x-1 091.5,由曲线方程可以推算出胚胎发育的适宜水温范围为23.4～29.8℃,通过曲线求导数推算极值的方法,求得胚胎发育的最适水温为26.6℃。     

牙鲆的胚胎发育

在牙鲆胚胎玻璃化冷冻中,为了准确选择胚胎的冷冻时期,掌握胚胎发育进程,同时为牙鲆苗种培育提供一定的依据,对海水工厂化养殖牙鲆的胚胎发育进行了研究。牙鲆受精卵培养在14-16℃、盐度29．9的海水中,利用Olympus显微镜对牙鲆胚胎发育过程连续观察,对各个胚胎时期的发育时间进行了记录,并对每一时期的特征用Olympus照像机进行了拍摄。实验记录了从受精卵到出膜后5d的29个具体发育时期的特征和发育时间,拍摄了30张具有代表性的胚胎和鱼苗图片,将牙鲆胚胎发育划分为卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、肌节期、尾芽期、心跳期、胚体转动期、出膜前期、出膜期10个连续的典型时期。在此培养条件下牙鲆胚胎历时93h完成整个胚胎发育,孵化出膜,再经96h的胚后发育卵黄囊完全吸收,之后进入变态期,向成鱼转化。     

温度和盐度对宝石鲈胚胎发育的影响

宝石鲈(Scortum barcoo)是原产于澳大利亚的一种杂食性、中型经济淡水鱼类,对饵料要求不高,生长速度较快,肌肉的Omega-3不饱和脂肪酸含量很高,具有较高的食用价值。2001年首次被引进中国,2004年人工繁殖获得成功。为了让人们充分了解该物种的繁殖生物学特性,同时为宝石鲈的开发利用提供基本数据,本研究对宝石鲈的胚胎发育时序及不同水温和盐度对胚胎发育的影响做了较为祥细的观察与研究。采用人工催产、授精获得受精卵,在水温(27.0±0.5)℃孵化,观察胚胎发育情况。成熟卵圆形、透明、漂浮性,卵径0.87~0.92 mm,吸水后卵膜膨胀直径为2.10 mm左右;胚胎明显特征是有一个直径为0.50 mm左右的大油球。出膜仔鱼全长2.00 mm左右,出膜4 d后卵黄完全吸收,并开始摄食,此时仔鱼全长3.5~3.7 mm。胚胎发育的最低和最高临界水温分别是21℃和31℃,最适水温范围是24~27℃,胚胎发育所需时间与水温成负相关关系。胚胎发育的最适盐度范围为0~8,盐度8时,各个发育时期的胚胎和仔鱼的存活率最高,12为临界盐度。因此在生产实践中要掌握好温度和盐度,以获得最佳的种苗生产效果。